Summary
Burada, biz standart bir ekipman olarak hayvan imkanları ile yapılabilir ve fizyolojik veya farmakolojik uygulanmış olan deneysel sıçanlarda elektrokardiyografi ve intra arteryel kan basıncı (tansiyon) aynı anda kayıt için bir kurulum tarif patojen veya tedavi mekanizmaları kardiyovasküler tıpta araştırmak için çalışmalar.
Abstract
Kardiyovasküler Fizyoloji veya patofizyolojisi ilgili çalışmalar için kan basıncı (tansiyon) ve elektrokardiyografi temel gözlemsel parametreleridir. Kardiyovasküler hastalık modelleri, potansiyel kardiyovasküler tedavi hedefleri veya ilaç aracıları üzerinde odaklanan araştırma sistemik arteriyel basıncı ve kalp ritmi değişikliklerin değerlendirilmesi gerekir. Nerede radyo Telemetri sistemleri kullanılabilir veya uygun olmayan durumlarda, intra arteriyel basınç dalga kayıtlarından ve sistemik kan basıncı ölçümleri elde etmek için alternatif bir yol femoral arter cannulation tekniktir. Bu teknik daha ekonomiktir ve standart bir ekipman olarak hayvan imkanları ile yapılabilir. Ancak, invaziv arter basıncı kayıt cannulation zorlu bir cerrahi beceri olabilir küçük arterlerin gerektirir. Burada, cannulation yordamları adım adım femoral arter protokollerde mevcut. Veri toplama sistemi, doku diseksiyon ve femoral arter cannulation ve basınç kayıt için arteryel cannulation sistem kurulumu kalibrasyonu anahtar yordamlar içerir. Yüzey elektrokardiyografi kayıt işlemleri de yer almaktadır. Normotansif ve hipertansif sıçanlarından emir da BP kayıtları örnekleri mevcut. Bu iletişim kuralı ile aynı anda elektrokardiyografi sistemik kan basıncı güvenilir doğrudan kayıtları verir.
Introduction
Kan basıncı (tansiyon) ve elektrokardiyografi (EKG) kardiyovasküler Fizyoloji ve tıp temel parametreleridir. Deneysel hayvan modelleri yaygın hipertansif kalp yetmezliği1 gibi çeşitli kardiyovasküler hastalıklar için Biyomedikal araştırma ve yordamlar ECG kayıt için uygulamış olan ve kan basıncı ölçüm deneysel Rat gerçekleştirilebilir.
Sıçanlarda kan basıncı ölçümü için üç yöntem vardır: içi arteryel cannulation (invaziv)2, kuyruk manşet pletismografisi (invaziv)3ve radyo telemetri (invaziv). Kayıt sırasında işleme hayvan kan basıncı ölçüm kuyruk manşet pletismografisi tarafından güvenilirliğini etkileyebilir. Örneğin, aynı anda kısıtlama ve ölçüm aşama4sırasında oluşan çekirdek kan basıncı değişiklikleri kuyruk manşet hafife. İzleme kan basıncı ve kalp hızı uyanık ve serbestçe hareket hayvan5için radyo telemetri iyi "altın standart" tekniği olarak kabul edilir. Ancak, radyo telemetri donanım ve yazılım pahalı olduğundan, intra arteryel cannulation da yaygın ekonomik alternatif olarak kullanılır.
İntra arteryel cannulation mikrocerrahi dikkate değer bir yetenek gerektirir ancak gerçek dalga biçimleri arteriyel basınç verir. BP radyal, femur, veya brakiyal arter eklenen tuz dolu bir kateter aracılığıyla kaydedilir. Bu yöntem doğrudan invaziv kan basıncı ölçüm gerektirir önceden cerrahi hayvan hazırlık, anestezi, immobilizasyon cerrahi beceri doku diseksiyon ve arteriyel cannulation ve ölçüm almadan önce uygun kalibrasyon Laboratuvarı hayvanların .
Kemirgen yüzey ECG insan EKG için benzer. Bir sıçan ECG P dalgaları, QRS kompleksleri, T dalgaları ve QT aralığı6dizileri vardır. Atriyal depolarizasyon, atriyal üzerinden impuls iletim AV düğümü, ventrikül depolarizasyon ve repolarization, sırasıyla P dalgası, PR aralığı, QRS kompleksi ve T dalgaları yansıtır. QT aralığı Q dalgası başlatılması için ISO-elektrik temel1döndüğü T dalgasının dönemi için son olarak tanımlanır.
EKG'nin kardiyak Sistol ve diastole aşamaları gösterir; Bu nedenle, aynı anda kayıt yüzey EKG invaziv kan basıncı ölçümü ile karşılıklı olarak ilişkilendirir. Yöntemleri bir arada kullanarak, bir hastalık modeli veya bir ilacın farmakolojik etkileri patofizyolojik değişiklikler veya kardiyovasküler tıpta tedavisi aydınlatmak mümkündür.
Bir spontan hipertansif fare (SHR) yük Wistar sıçan Japonya'da yüksek kan basıncı ile akraba evliliği tarafından elde vardı. Kan basıncı 5 yükselir için 10 hafta-in yaş ve 30'dan itibaren sabit için 35 hafta-in yaş7olur. Wistar-Kyoto fareler (WKY) 130 mmHg7 hakkında sistolik kan basıncı var ve normo tensive denetimi olarak yaygın olarak kullanılır. SHR ve WKY intraarterial cannulation BP ve ECG kayıt sonucu göstermek için kullanılır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Açıklanan tüm hayvan deneyleri kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi Kaohsiung Tıp Üniversitesi tarafından onaylanmıştır.
1. hayvan bakımı
- Küçük atardamar büyüklüğü nedeniyle zor cannulation önlemek için vücut ağırlığı 200 g üzerinden ile fareler kullanın.
- Chow kafes ve hızlı fare gecede çıkarın.
- Özel bir deneysel tasarım değilse su reklam libidum sunuyoruz.
2. deneysel hazırlık
- Aşağıdaki belgeleri elde etmek: diş (Şekil 1A), cerrahi makas (Şekil 1B), ince ipuçları (Şekil 1 c, 1 D), açılı ipuçları (Şekil 1E) ile forseps ile forseps ile forseps bulldog damar kıskacı (Şekil 1F ), ipek dize yaklaşık 20 cm uzunluk (Şekil 1G), mikro makas (Şekil 1 H), intra arteryel kanül, bir iç çapı 0,5 mm ve 0.9 mm, 25-30 cm uzunluğunda, bir dış çapı ile steril polietilen (PE) tüp bağlı 26 G x 1/2 '' iğne (Şekil 1I), için içi arteryel kanül ve basınç detektörler (Şekil 1 K) ve 1 mL şırınga bağlamak için iki üç yönlü Kesme muslukları (Şekil 1J) heparinized serum fizyolojik (100 IU/mL) ile dolu.
-
Hayvan hazırlık
- Fare (fareler bir 25 cm x 25 cm x 14 cm indüksiyon odası ile % 3 isoflurane nosecone kullanmak ve ardından % 4 isoflurane ile doymuş yerleştirerek) isoflurane Solunduğunda anestezi.
Not: Hayvan yeterince anestezi değil, isoflurane akış hızı kadar açın. - Ağrı refleks ayak parmak pinching tarafından sınayın.
- Fareyi bir önceden kesilmiş Strafor pano (veya Kartonpiyer) sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Dört bacaklı vücut (Şekil 2A) hareketsiz için lastik bantlar ile düzeltmek.
Not: Potansiyel sesini ECG kayıt sırasında önlemek için yerleşim yüzey elektriksel olarak iletken olmamalıdır.
- Fare (fareler bir 25 cm x 25 cm x 14 cm indüksiyon odası ile % 3 isoflurane nosecone kullanmak ve ardından % 4 isoflurane ile doymuş yerleştirerek) isoflurane Solunduğunda anestezi.
- Aletleri, kan basıncı ve ECG kayıt için hazırlayın. Sinyalleri, uyumlu bir hub ile basınç detektörler, üç bipolar iğne uçlu elektrokardiyogram müşteri adayları ve uygun yazılım ile bir bilgisayar elde etmek için bir analog giriş birimi içerir.
3. basınç detektörler kalibrasyonu
- BP kayıt başlatma önce bir standart Merkür tansiyon aleti (Şekil 1 L) ile kalibre.
- Basınç kol tansiyon aleti kaldır ve üç yollu stopcock enflasyon tüp basınç detektörler veri toplama sistemi için (resim 1 K) bağlanın.
- Vidalı Hava yayın Vana saat yönünde. Ölçer üzerinde gözlerini tutmak ve enflasyon ampul pompalama tutun. Ölçüm 100 mmHg gösterir, basınç detektörler bağlamak için üç yollu stopcock geçiş. 100 mmHg basınç kalibrasyon için kullanın. Kan basıncı hesaplamak için dönüştürme faktörü otomatik olarak belirlenecektir.
- Basınç Tansiyon aleti basınç sıfıra geri gelene kadar air-ürün Vana saat yönünün tersine vidalama ile serbest bırakın.
- 3.2 200 mmHg baskısı ile arasındaki adımları yineleyin.
- Basınç detektörler Merkür tansiyon aleti üzerinden bağlantısını kesin.
- Basınç detektörler PE kateter (Şekil 1I) üç yollu stopcock bağlayın.
4. Mini ameliyata Cannulation Femoral arter
-
Yüzey Simgesel Yapı kimliği ve eksizyon deri (Şekil 2)
- Kasık giderilmesi (karın ve kalça arasındaki kavşakta girinti) konumunu tanımlamak ( Şekil 2Akesik çizgi).
- Ortada bulunan kasık kırışık derinin tam katmanı çimdik. Kürk traş ya da elektrik makası veya kesi önce depilatory bir krem kullanarak kesi sitesinden kaldırıldı.
- Cilt kaldırın ve yönlendirme, cerrahi makas ile yaklaşık Ipsilateral uyluk (Şekil 2B) paralel kes. Femoral sinir ve damarları maruz subkutan doku (Şekil 2C) altında bulunur.
-
Femoral arter ortaya çıkarmak için doku diseksiyon
- İyi ipuçları, katman katman forseps kullanarak doku incelemek. Femur damarlarının düzeyinde diseksiyon durdurmak. Diseksiyon altında damarlara zarar değil emin olun.
- Dikkatli forseps (Şekil 1 c ya da 1 D) femoral sinir ve damarları boyunca yumuşak doku temizlemek için iyi bir gözlem elde etmek için kullanın. Elyaf benzeri sinir doku. Ven koyu mor ve arter pulsatil (Şekil 3A).
- Forseps ile açılı ipuçları (Şekil 1E) femoral arter ve ven (Şekil 3B) maruz kalan uzunluğu genişletmek için kullanın.
-
Femoral arter (Şekil 3) cannulation
- Forseps femoral ven arterin ayrı ve femoral arter, bulldog kelepçe (Şekil 3 c) olabildiğince cranially uygulamak için kullanın.
- İki ipek dizeleri, bir buldozer kelepçe ve diğer altında gevşek bir kravat maruz femoral arter (3D şekil) kaudal olarak terminalin içinde olun.
- Femoral arter ventral yan tarafa küçük bir delik açmak (şekil 3E) mikro makas (Şekil 1 H) kullanarak.
- Küçük delikten PE kateter ucu yerleştirin ve kateter cranially ilerlemek.
Not: Burulma PE kateter ilerleyen süre geçerli değildir. Burulma kuvvetleri femoral arter büküm ve luminal darlığına neden. - PE kateter femoral arter lümen güvenli bir şekilde gelişmiş sonra bulldog kelepçe kaldırın.
Not: Femoral arterin bulldog kelepçe kaldırılırken PE kateter gözünü. Bir backflush kan gözlem gözlem için darbe ile ilişkili PE kateter içine arteryel lumen olarak onaylar. - PE kateter konumunu korumak için üst ipek dize sıkın.
Not: Herhangi bir kaza sonucu çekme veya PE kateterin yerinden çıkması büyük kanama neden olabilir. - Femoral arter kaudal taraftan kanama önlemek için daha düşük ipek dize sıkın.
-
Femoral arter cannulation başarısını teyit
- 0,1-0,2 enjekte için 1 mL şırınga kullanın femoral arter içine heparinized tuz mL. Direnci enjeksiyon üzerinde önemsiz olması gerekir. Enjeksiyon üzerine açık herhangi bir direnç fark varsa, tüm cannulation tekrar kontrol edin.
Not: Üç yönlü Kesme muslukları uygun şekilde herhangi bir negatif basınç veya femoral arter kanül içine tuz enjeksiyon uygulamadan önce açık emin olun. Zaman bu noktada, herhangi bir enjeksiyon basınç detektörler içine yeniden kalibrasyon gerekir. - Eğer herhangi bir cannulation sitenin etrafına sızmaya kontrol. Eğer değilse, bir ıslak pamuk ile cerrahi sitesi kapak.
- 0,1-0,2 enjekte için 1 mL şırınga kullanın femoral arter içine heparinized tuz mL. Direnci enjeksiyon üzerinde önemsiz olması gerekir. Enjeksiyon üzerine açık herhangi bir direnç fark varsa, tüm cannulation tekrar kontrol edin.
5. kayıt kan basıncı
- PE kateter için pürüzsüz floş sonra basınç detektörler (Şekil 4) üzerinde bir PE kateter Üçlü stopcock iliştirin.
- Cannulation sistemdeki hava hava kabarcığı yok olduğundan emin olun. Da üçe stopcock bağlantı kavşak kontrol.
- Verileri başlatmak koordinat belirleme sistemi 1000 Hz örnekleme frekans BP. arter basınç dalgaları-ecek var olmak kaydı ile gösterilmiştir (Şekil 6).
- Tüm kurulum için en az 3-5 dk stabilize etmek izin verir. Kararsız sinyallerle durumlarda sabitleme saat 15dk için genişletilebilir.
- Cannulation sitesini düzenli olarak kanama yok emin olmak için kontrol edin.
Not: basınç detektörler verileri alınıyor, dönüştürücü hayvan kalbi düzeyinde yerleştirin önemli olmasıdır.
6. yüzey EKG
- Üç iki kutuplu EKG'nin pozitif, negatif, emin olmak için yol açar ve başvuru platin elektrotlar bir arada kontrol edin.
- Müşteri adaylarını subkutan sol ümmetlerle, doğru ineklerde ve doğru hindleg (Şekil 5) takın.
- Elektrot hub'ları için özel olarak oluşturulmuş bir ECG amplifikatör ile örnekleme frekansı 1000 Hz ve filtre frekans 3-500 Hz. EKG tutmak neden yükseliyor, kayıt sırasında iliştirin. Hareket ECG neden kararsız taban ve eserler üretebilir.
7. deneme tamamladıktan sonra Hayvan ötenazi
- BP ve kayıt ECG tamamladıktan sonra koordinat belirleme sistemi durdurmak. Elektrotlar kaldırın. Femoral arter şu PE kateter çekilmesi sonra daha önce yerleştirilmiş ipek dize kadar sıkma tarafından ligate.
- Tek tek görünür ötenazi odasında fareler bağlı yer karbondioksit (CO2) benzin bidonları sıkıştırılmış. Üst güvenli bir şekilde kapatın.
- % 100 CO2 dolgu oranı, yaklaşık %10 30 dakikada Odası hacmi ile tanıtmak.
- Fareyi üzerinde gözlerini; solunum ve soluk göz rengi eksikliği 2−3 min içinde görünmelidir.
Not: Solunum hareketi kesilmesi 3 dk sonra oluşmazsa, sistem odası dolgu oranı, CO2 kaynağı veya sızıntı için incelenmesi gerekir. - Koru CO2 akışı daha fazla 1 dakika sonra solunum için odasına vazgeçti.
- Kalp ve solunum tutuklama tespit ve ölüm onaylamak için sabit ve genişlemiş öğrencilere not edin.
Not: Fare ölmedi, ancak CO2 narkoz, ötenazi ikili torakotomi gibi ikincil bir yöntemini kullanın.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Biz SHR ve normotansif Wistar-Kyoto WKY sıçanlar Milli laboratuvar hayvan Merkezi (Taipei, Tayvan) satın aldı. Bütün hayvanlar bir ısı kontrollü tesisi (20−22 ° C) su ve standart chow ücretsiz erişim, bir 12 h açık/koyu döngüsünde yer.
Biz altı 47-hafta-yaşlı fareler ve onlar daha önce kan basıncı ve ECG ölçüm tartıldı. EKG ve kan basıncı SHR ve WKY aynı anda kayıt üzerinden temsilcisi tracings Şekil 6' da gösterilmiştir. Tablo 1 , kan basıncı ve kalp hızı için parametreleri gösterir. İstatistik (t) testleri ortaya anlamlı olarak daha yüksek sistolik kan basıncı ve SHR (124.5 mmHg ± 15,1 mmHg ve 84.3 mmHg ± 5.0 mmHg) ortalama kan basıncı daha WKY (90.0 mmHg ± 7.5 mmHg ve 67,5 mmHg ± 5.0 mmHg) (P < 0,05) (Tablo 1).
P dalgası, PR aralıkları, QRS genişlik ve QT aralığı parametrelerini ECG kayıtları (Tablo 2) ölçülebilir. Seçimi sağ sol femur cannulation ECG elektrot yerleştirme (, sağ arka bacak) ile ilgili olarak vs BP ve ECG sinyallerini etkilemedi.
Şekil 1: malzemeler. (A)forseps ile dişler, (B) cerrahi makas, (C) doku forseps, (D) doku forseps ile iyi ipuçları, (E) açı ucu forseps, (F) bulldog damar kıskacı, (G) ipek dize, (H) mikro makas, bir 26 G x 1/2 '' ile iğne ve üç yollu stopcock (J), (K) bağlama (ben) Polietilen kateter ile bir üçlü stopcock, (L) cıva tansiyon aleti ile bir stopcock (bağlantı dönüştürücü basınç yeşil ok) ve enflasyon ampul bir hava sızıntısı vanalı (beyaz ok). Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 2: femoral arter diseksiyonu için yüzey dönüm noktası. (A)sırtüstü fare ile sol kasık kırışık tirelerden oluşan bir çizgiyle vurgulanır. (B) kasık deri cerrahi makas ile kesmeye forseps ile diş tarafından aldı. (C) femoral arter diseksiyonu cerrahi bölgenin. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3: doku diseksiyon ve femoral arter cannulation. (A)maruz femoral sinir (sarı ok), femoral ven (mavi ok) ve femoral arter (kırmızı ok) doku diseksiyon sonra. (B) Femoral ven ve arter sinir kesme sonra. (C) bir bulldog vasküler kelepçe disseke femoral arter kafatası terminal üzerinde uygulanması. (D) Femoral arter bulldog kelepçe ve gevşek bağları olan iki ipek dizeleri ile. (E) A femoral arter, mikro makas kullanılarak oluşturulan ventral tarafta küçük delik. Femoral arter içine polietilen kateter (F) ekleme. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 4: basınç kayıt için Femoral arter cannulation. (Yeşil kesikli bir çizgi tarafından vurgulanan) intra arteryel kanül heparinized serum dolu şırınga ile iki üç yönlü Kesme muslukları (mavi oklar) ile bağlanır. Basınç detektörler (kırmızı ok) cannulation üç yönlü Kesme muslukları aracılığıyla bağlanır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 5: invaziv femoral arter basıncı ve elektrokardiyografi bütün deneysel kurulumundaki. Elektrokardiyografik üç platin iğne elektrotları subkutan üzerinde ikili ön plana eklenen (kırmızı oklar) önde bacaklar ve sağ bacak (sarı ok). Cannulation (mavi ok) ile sağ maruz femoral arter. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 6: temsilcisi tracings. EKG ve kan basıncı WKY (solda) ve EKG (üst) ve arteriyel basınç dalgaları (alt) için (sağ) SHR eşzamanlı kayıtları. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
| WKY | SHR | P değeri | |
| (n = 3) | (n = 3) | ||
| Ağırlığı, g | 407.7 ± 6.4 | 353.7 ± 10.3 | < 0,01 |
| Kalp hızı, /min | 241,3 ± 15,0 | 262.0 ± 15,7 | 0.18 |
| Sistolik kan basıncı, mmHg | 90.0 ± 7.5 | 124.5 ± 15,1 | < 0,05 |
| Diyastolik kan basıncı, mmHg | 56.3 ± 4.0 | 64.2 ± 0,6 | 0,08 |
| BP, mmHg demek | 67,5 ± 5.0 | 84.3 ± 5.0 | < 0,05 |
| Nabız basıncı, mmHg | 33.6 ± 4.4 | 60,4 ± 15,1 | 0,08 |
Tablo 1: kan basıncı düzeyleri ölçüldü tarafından invaziv femoral arter cannulation. Verileri ortalama ± standart sapma sunulur; SHR kendiliğinden hipertansif fareler; = WKY Wistar-Kyoto fareler; = Kan basıncı kan basıncı =.
| WKY | SHR | P değeri | |
| (n = 3) | (n = 3) | ||
| Kalp hızı, /min | 241,3 ± 15,0 | 262.0 ± 15,7 | 0.18 |
| P dalgası, msn | 38.7 ± 9,3 | 43.0 ± 4.6 | 0,52 |
| PR aralığı, msn | 59,0 ± 7,8 | 61.3 ± 4.7 | 0,69 |
| QRS genişlik, msn | 43.0 ± 11,3 | 50.0 ± 2.6 | 0,4 |
| QT aralığı, msn | 112.0 ± 12,8 | 116.7 ± 9.5 | 0,15 |
Tablo 2: elektrokardiyografik parametrelerinin ölçümleri. Verileri ortalama ± standart sapma sunulur; SHR kendiliğinden hipertansif fareler; = WKY = Wistar-Kyoto fareler.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
İnvaziv arter cannulation BP son derece hassas ölçüm sağlar. Bu bir PE boru pahalı bir kateter gerek kalmadan yapılabilir. İnvaziv kan basıncı ölçüm da aynı anda yüzey EKG kaydı ile gerçekleştirilebilir.
Bu yöntem için büyük öğrenme eğrisi küçük kan damarlarının cannulate için gerekli deneysel yetenektir. Deneyimli ellerde, femoral arter cannulation için başarılı oranı % 100 yaklaşım olabilir. Pratik gerçek deneyler gerçekleştirmeden önce tavsiye edilir. İşlemi sırasında bazı önemli noktaları: (1) yapmak emin hayvanlar tamamen anestezi ameliyat; başlamadan önce (2) bir bulldog kelepçe maruz arter yüksek konumda arteryel duvardaki kesmeden önce geniş kanamayı engellemek için kullanın; (3) yapmak belgili tanımlık kesme ventral arter duvardan ve dorsal duvar zarar vermemek; ve (4) cannulation sistemi ve elektrokardiyografi ilan sabit yerleşimini yardımcı olur hareket eserler kayıt sırasında kaçının.
Bu yordamla potansiyel komplikasyonlar cerrahi disseksiyon gelen kanama içerir. Başarılı ve sorunsuz cannulation bir arter kanaması çok saçmadır. Büyük kanama sonucu hasar femoral arter veya ven veya büyük dalları doku diseksiyon sırasında neden olabilir. Temiz bir pamuk ile odak sıkıştırma tarafından kanama durdurulabilir. Başka bir büyük kanama femur cannulation çıkık nedenidir. Bu durumda, kan kaybı genellikle sistemik kan basıncı önemli bir düşüş sonucu için yeterince büyük. Bu noktada, BP kayıt erken sonlandırılabilir.
Telemetre implantasyon Ayrıca invazif BP kayıt8için kurulan bir tekniktir. Telemetri yeteneği yüksek sadakat sürekli kayıt hayvanlar kısıtlama veya anestezi sınırlamaları olmadan serbestçe hareket bilinçli, nispeten uzun süreler boyunca elde etmek için avantajdır. Doğrudan BP kayıtlar radyo vericileri ve karotis arter cannulation9başarılı subkutan implantasyon ile yapılabilir. Ancak, telemetre başarıyla implant zor olabilir ve donanım ve yazılım radyo telemetri için yüksek maliyetlidir.
Femoral arter cannulation tarafından invaziv kan basıncı ölçümü için bazı sınırlamalar vardır. İlk olarak, kontrolsüz ve bilinçli Rat gerçekleştirilemez. İkinci olarak, femoral arter kan basıncı daha yüksek veya orta aort kan basıncı daha düşük olabilir. Üçüncüsü, arteryel cannulation nerede femoral arterler PE boru eklemek için çok küçük olabilir küçük kemirgen için zor olabilir. Dördüncü olarak, takımlar BP kayıt ve femoral arter ligasyonu arka bacak iskemi neden olur sonra cannulated arter bakmaksızın. Bu sınırlama nedeniyle, hayvanlar genelde invaziv BP kayıt takip are euthanized.
İnvaziv femoral arter cannulation hangi potansiyel stres tanıtır ve BP ve elektrokardiyografi veri10etkiler frenleyici ve hayvanlar, anesthetizing gerektirir. Stres tarafından uygun anestezi hafifletti. Anestezi enjeksiyon veya inhalasyon protokollerini içerir. Geçmiş deneyim, yüksek yüksek kan basıncı I.P. WKY anestezi fareler öneriyor hayvanlar hala stres altında ya da ağrı vardı. Bilinçli WKY sıçanlarda normal kan basıncı 130/80 mmHg olduğunu; Bu sıçanlarda bizim inhalasyon anestezi WKY (Tablo 1) 100 mmHg altında düştü. İnhalational anestezi (isoflurane) enjekte edilebilir ajanları birçok avantajı vardır: hızlı başlangıçlı, çok az hayvan işleme, denetim kolaylığı, kontrollü kullanmamalı ve hızlı bir iyileşme. Ekipman, önemli gaz kaçağı çalışma ortamına durumda insan maruz kalma tehlikesi maliyeti dezavantajları nelerdir ve BP. Isoflurane kaynaklı kan basıncı azaltma üzerinde önemli bir baskılayıcı etkisi seçerken olduğu kabul anestezi rejimi.
Daha fazla uygulamaları invaziv kan basıncı ölçümü için mümkündür. Nabız dalga hızı (PWV) için akışkanlar dinamiği ilkelerine göre daha sert arter nabız dalga daha hızlı11yayar. Çift Kişilik cannulations karotid arter ve femoral arter üzerinde uygularken, aortik PWV belirlenebilir. Aortik nabız yayma uzunluğu kanül (proksimal) karotis, uçları arasındaki mesafe olarak ölçülebilir ve distal (femur) damar. PWV aort uzunluğu ve proksimal ve distal arteriyel nabız12minimum değerlerini zaman arasındaki farkı arasındaki orandır.
Belgili tanımlık tertibat için eşzamanlı elektrokardiyografi yukarıda açıklanan ve intra arteryel kan basıncı kayıt deneysel sıçanlarda bir ucuz ve yüksek oranda erişilebilir patojen veya tedavi soruşturma fizyolojik veya farmakolojik araştırmalar tekniktir kardiyovasküler tıpta mekanizmaları.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa gerek yok.
Acknowledgments
Bu çalışmada Tayvan Bilim Bakanlığı tarafından desteklenen ve teknoloji en 104-2314-B-037-080-MY3 verir ve en 107-2314-B-037-110 HCL ve Tayvan Ulusal Sağlık araştırma enstitüleri vermek NHRI-EX107-10724SC.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Polyethylene tube | BECTON DICKINSON | 427401 | internal diameter of 0.5 mm, outer diameter of 0.9 mm |
| 26 G x 1/2"" needle | TERUMO | 160426D | |
| Adson Forceps | TOP Line | 12-540 | 12 cm (4.75") Long, Straight, 1 x 2 Teeth |
| Bulldog vascular clamp | Teleflex | 357581 | 8 mm |
| Computer | AUSUS | X453M | |
| Exernal analog signal recording device | iWorx | T5141538 | This allows the recording of up to three channels of ECG, EMG or EEG as well as GSR (skin conductance) from a single iWire input on the recording Module. |
| Graefe Forceps | AESCULAP Surgical Instruments | BD312R | MICRO DRESSING FORCEPS, CURVED, SERRATED, 105 mm, 4 1/8 |
| Mecury sphygmomanometer | Spirit | CK-101 | |
| Pressure transducer | iWorx | IworxBP100 | |
| Semken Forceps | MEDE TECHNIK | 10-104 | 100 mm |
| Software | LabScribe3 | ||
| Surgical scissors | HEBU | 1714 | 14.5 cm long |
| Syringe (1 mL) | TERUMO | 160426D | |
| Three-way stopcocks | Cole-Parmer | EW-30600-23 | |
| Tipped forceps | World Precision Instruments | 504506 | 11 cm long, 0.1 x 0.06 mm Tips |
| Vannas Scissors | World Precision Instruments | 500086 | 8.5 cm long, Straight, 0.025 x 0.015 mm Tips, 7mm super fine Blades |
References
- Shiou, Y. -L., Huang, I. C., Lin, H. -T., Lee, H. -C. High fat diet aggravates atrial and ventricular remodeling of hypertensive heart disease in aging rats. Journal of the Formosan Medical Association. , (2017).
- Parasuraman, S., Raveendran, R. Measurement of invasive blood pressure in rats. Journal of Pharmacology, Pharmacotherapeutics. 3 (2), 172-177 (2012).
- Fink, G. D. Does Tail-Cuff Plethysmography Provide a Reliable Estimate of Central Blood Pressure in Mice? Journal of the American Heart Association: Cardiovascular and Cerebrovascular Disease. 6 (6), e006554 (2017).
- Wilde, E., et al. Tail-Cuff Technique and Its Influence on Central Blood Pressure in the Mouse. Journal of the American Heart Association: Cardiovascular and Cerebrovascular Disease. 6 (6), (2017).
- Braga, V. A., Prabhakar, N. R. Refinement of Telemetry for Measuring Blood Pressure in Conscious Rats. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science : JAALAS. 48 (3), 268-271 (2009).
- Kaese, S., Verheule, S. Cardiac electrophysiology in mice: a matter of size. Frontiers in Physiology. 3 (345), (2012).
- Okamoto, K., Aoki, K. Development of a strain of spontaneously hypertensive rats. Japanese Circulation Journal. 27, 282-293 (1963).
- Van Vliet, B. N., Chafe, L. L., Antic, V., Schnyder-Candrian, S., Montani, J. P. Direct and indirect methods used to study arterial blood pressure. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 44 (2), 361-373 (2000).
- Alam, M. A., Parks, C., Mancarella, S. Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry. Journal of Visualized Experiments. (111), e53991 (2016).
- Irvine, R. J., White, J., Chan, R. The influence of restraint on blood pressure in the rat. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (3), 157-162 (1997).
- Nvd Vosse, F., Stergiopulos, N. Pulse Wave Propagation in the Arterial Tree. Annual Review of Fluid Mechanics. 43 (1), 467-499 (2011).
- Cosson, E., et al. Aortic stiffness and pulse pressure amplification in Wistar-Kyoto and spontaneously hypertensive rats. The American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 292 (5), H2506-H2512 (2007).
