Summary
כאן, אנו מתארים הכנה הקלטה בו זמנית של אלקטרוקרדיוגרם ואת לחץ הדם התוך עורקי (BP) בחולדות ניסיוני, אשר ניתן לעשות עם ציוד סטנדרטי במתקנים בעלי חיים, ניתן להחיל על פיזיולוגית או תרופתי מחקרים לחקור מנגנונים פתוגניים או טיפולית ברפואה לב וכלי דם.
Abstract
ללימודים הקשורים פתופסיולוגיה לפיזיולוגיה לב וכלי דם, לחץ דם (BP) אלקטרוקרדיוגרם הם פרמטרים בסיסיים תצפיתית. מחקר התמקדות מודלים למחלות לב וכלי דם, מטרות טיפוליות אפשריות לב וכלי דם או סוכנים התרופות דורש הערכה של עורקי הלב ולחץ קצב לשינויים. במצבים איפה מערכות טלמטריה רדיו אינם זמינים או במחיר סביר, הטכניקה של תעלות עורק הירך הוא דרך חלופית להשיג הקלטות גל הלחץ התוך עורקי ומדידות לחץ דם סיסטמי. טכניקה זו היא חסכונית, ניתן לבצע באמצעות ציוד סטנדרטי במתקנים בעלי חיים. עם זאת, ההקלטה לחץ הדם בעורק פולשנית דורש תעלות של עורקים קטנים, אשר יכול להיות מיומנות כירורגית מאתגר. כאן, אנו מציגים שלב אחר שלב פרוטוקולים עבור עורק הירך תעלות הליכים. תהליכי מפתח כוללים את הכיול של מערכת רכישת הנתונים, תעלות לנתיחה, עורק הירך רקמות, התקנה של מערכת תעלות עורקי להקלטה לחץ. אלקטרוקרדיוגרם משטח הקלטה הליכים הינם כלולים גם. אנו מציגים גם דוגמאות של BP הקלטות של חולדות normotensive, יתר לחץ דם. פרוטוקול זה מאפשר אמין ישיר הקלטות של BP מערכתית עם אלקטרוקרדיוגרם בו זמנית.
Introduction
לחץ דם (BP) אלקטרוקרדיוגרם (א) פרמטרים בסיסיים של פיזיולוגיה של הלב וכלי הדם, תרופות בקרב אנשי עסקים ותיירים כאחד. מודלים ניסיוניים הוחלו נרחב המחקר הביו-רפואי של מחלות לב וכלי דם שונות כגון אי ספיקת לב לחץ דם גבוה1 ונהלים להקלטה אק ג לפני ואחרי ניתן לבצע מדידת לחץ דם בחולדות ניסיוני.
קיימות שלוש שיטות למדידה BP בחולדות: תעלות התוך עורקי (פולשנית)2, הזנב השרוול plethysmography (לא פולשנית)3ורדיו טלמטריה (פולשנית). האמינות של BP מדידה על ידי הזנב השרוול plethysmography עשויה להיות מושפעת לטיפול במהלך ההקלטה בבעלי חיים. לדוגמה, שהקפל הזנב מעריך הליבה BP השינויים המתרחשים בו זמנית במהלך איפוק ומדידה שלבים4. רדיו טלמטריה נחשב הטכניקה "gold standard" הטוב ביותר עבור ניטור לחץ הדם ואת קצב הלב ב ער לנוע בחופשיות חיות5. עם זאת, מאז רדיו טלמטריה חומרה ותוכנה יקרות, תעלות התוך עורקי גם משמש בתור חלופה חסכונית.
תעלות התוך עורקי דורש מיומנות רבה. השתלה, אך היא מפיקה את ואת האמיתי של לחץ הדם. BP ניתן לצרוב דרך קטטר מלא מי מלח רדיאלי, הירך, או עורק הזרוע. שיטה זו של מדידה ישירה של BP פולשנית דורש הכנה בעלי חיים טרום הניתוח, ההרדמה, קיבעון של חיות מעבדה, מיומנות כירורגית רקמות לנתיחה תעלות עורקי, ואת כיול נכונה לפני רכישת המדידה .
מכרסמים אק ג משטח דומה א האנושי. חולדה אק ג יש רצפים של גלי P, מתחמי QRS, גלי T ו- QT מרווחי6. גל P, הפסקות, קומפלקס QRS, גלי T לשקף דפולריזציה פרפור, הולכה הדחף מן פרפור אל צומת AV, דפולריזציה חדרית, רה-פולריזציה, בהתאמה. מרווח QT מוגדרת תקופת מן הקבלה של גל Q כדי מובילים של גל T שבו הוא חוזר iso-חשמלית בסיסית1.
א מציינת את הלב סיסטולה ואת שלבי diastole; לכן, ההקלטה סימולטני של משטח א בקורלציה עם מדידת לחץ דם פולשנית. באמצעות שילוב של מתודולוגיות, זה אפשרי להבהיר שינויים הקשורים pathophysiological מודל המחלה או את ההשפעות תרופתי של תרופה או טיפול ברפואה לב וכלי דם.
זן עכברים (שומר) ספונטנית עם יתר לחץ דם היה הושגו על ידי הרבעה של חולדות Wistar עם לחץ דם גבוה ביפן. לחץ דם עולה מ 5 בגיל 10 שבועות והופך נייח מ-30 עד 35 שבועות של גיל7. חולדות Wistar-קיוטו (WKY) יש לחץ דם סיסטולי על 130 מ מ כספית7 , משמשים בדרך כלל כפקד normo-tensive. השתמשנו על זה ו- WKY כדי להדגים התוצאה של תעלות intraarterial הקלטה BP וחברת א.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
כל הניסויים בבעלי חיים תיאר אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה של המשחקים העולמיים האוניברסיטה הרפואית.
1. טיפול בבעלי חיים
- כדי להימנע תעלות קשה עקב גודל עורקים קטנים, השתמש חולדות עם משקל גוף מעל 200 גרם.
- הסר צ'או מן הכלוב חולדות מהיר בין לילה.
- מציעים מים ad libidum אלא אם כן יש תוכנית ניסויית מיוחד.
2. ניסיוני הכנה
- להשיג את החומרים הבאים: מלקחיים עם שיניים (איור 1 א'), מספריים כירורגיים (איור 1B), מלקחיים עם טיפים בסדר (איור 1C, ד 1), מלקחיים עם טיפים זוויתי (איור 1E), בולדוג קלאמפ כלי הדם (איור 1F ), מחרוזת משי כ 20 ס"מ אורך (איור 1 ג'י), מספריים מיקרו (איור 1 H), בצינורית התוך עורקי. צינור סטרילי פוליאתילן (PE) עם קוטר פנימי של 0.5 מ מ וקוטר החיצונית של 0.9 מ מ, 25-30 ס"מ אורך, מעורב כדי 26 G x 1/2 '' מחט (איור 1I), שני stopcocks-כיוונית (איור 1J) לחיבור את הצינורית התוך עורקי ומזרקים את הלחץ מתמר (איור 1 K), ו- 1 מ"ל מלא heparinized מלוחים (100 IU/mL).
-
הכנת בעלי חיים
- עזים ומתנגד העכברוש על ידי שאיפה של איזופלוריין (הצבת העכברושים 25 ס"מ על 25 ס"מ x 14 ס מ אינדוקציה קאמרית רווי איזופלוריין 4%, ואחריה nosecone לשימוש עם 3% איזופלוריין).
הערה: אם החיה לא מרדימים מספיק, תגביר את קצב הזרימה של איזופלוריין. - מבחן את רפלקס כאב על ידי צובט את הבהונות.
- מקם את החולדה במצב פרקדן על לוח קלקר חתוכות מראש (או קרטון עבה). לתקן את ארבע רגליים עם גומיות כדי לשתק את הגוף (איור 2 א).
הערה: כדי למנוע רעש פוטנציאלי במהלך ההקלטה אק ג, פני השמה אינו יכול להיות מוליך חשמלי.
- עזים ומתנגד העכברוש על ידי שאיפה של איזופלוריין (הצבת העכברושים 25 ס"מ על 25 ס"מ x 14 ס מ אינדוקציה קאמרית רווי איזופלוריין 4%, ואחריה nosecone לשימוש עם 3% איזופלוריין).
- להכין את מכשירי ההקלטה BP וחברת א. כוללים יחידת קלט אנלוגי לרכוש אותות, מתמר לחץ עם מרכזי תואם, שלושה הפניות רל שקצהו המחט הפרעה דו קוטבית, מחשב עם תוכנה מתאימה.
3. כיול מתמר לחץ
- לפני תחילתן של BP הקלטה, לכייל עם מד לחץ דם כספית רגילה (L איור 1).
- להסיר מד לחץ דם שהקפל לחץ וחבר של צימוד-כיוונית ברכבת התחתית האינפלציה מתמר לחץ (איור 1 K) של מערכת רכישת נתונים.
- בורג אוויר-השסתום עם כיוון השעון. לשמור את העיניים על מד, תמשיך להזרים את הנורה האינפלציה. כאשר מד מראה 100 מ מ כספית, לעבור את צימוד-כיוונית להתחבר מתמר לחץ. השתמש 100 מ מ כספית בלחץ הכיול. הגורם ההמרה לחישוב BP ייקבעו באופן אוטומטי.
- לשחרר את הלחץ על ידי דופק אוויר-השסתום נגד כיוון השעון עד לחץ מד לחץ דם חזרה לאפס.
- חזור על שלב 3.2 עם הלחץ של 200 מ מ כספית.
- ניתוק רגשי לחץ על מ מד לחץ דם כספית.
- להתחבר מתמר לחץ צימוד-כיוונית של הקטטר PE (איור 1I).
4. ניתוח מיני עבור תעלות של עורק הירך
-
ציון דרך משטח וזיהוי כריתה של העור (איור 2)
- לזהות את המיקום של הקמט במפשעה (כניסה בצומת בין הבטן והירכיים) (קווי מקווקווים באיור2 א).
- לצבוט את השכבה מלאה של העור במרכז הקמט במפשעה. הפרווה עשוי להיות מגולח או מהאתר החתך בעזרת קוצץ חשמלי או קרם depilatory לפני החיתוך.
- הרם את העור, לחתוך אותו עם המספריים כירורגי-אוריינטציה במקביל כ חולשת הירך (איור 2B). העצבים הירך ואת כלי םינפבמ הרקמה התת עורית חשוף (איור 2C).
-
חיתוך של הרקמה לחשוף את עורק הירך
- לנתח את הרקמה באמצעות מלקחיים עם טיפים בסדר, שכבה אחרי שכבה. עוצרים את הקרע ברמה של כלי הירך. ודא שהקרע הוא לא לפצוע את כלי מתחת.
- השתמש בזהירות מלקחיים (איור 1C או 1 D) לפנות את הרקמות הרכות לאורך הירך העצב, כלי כדי לקבל תצפית טובה. העצב הוא כמו סיבים במרקם. הווריד הוא סגול כהה והוא העורק פועמת (איור 3 א).
- להשתמש מלקחיים עם טיפים זוויתי (איור 1E) כדי להאריך את אורך חשוף עורק הירך ואת וריד (איור 3B).
-
תעלות של עורק הירך (איור 3)
- להשתמש מלקחיים כדי להפריד את וריד הירך העורק ולהחיל מלחציים בולדוג-עורק הירך cranially ככל האפשר (איור 3C).
- הפוך עניבה רופף של שתי המחרוזות משי, אחד מתחת את המלחציים בולדוג והשני בתחנת האוטובוסים סימטרית של עורק הירך חשוף (איור תלת-ממד).
- תעשה חור קטן בצד הגחוני של עורק הירך (איור 3E) באמצעות מיקרו המספריים (איור 1 H).
- הוסף את קצה הקטטר PE דרך החור קטן, לקדם הקטטר cranially.
הערה: אל תחיל פיתול תוך קידום הקטטר PE. כוח פיתול עשוי לעוות את עורק הירך וגוררים היצרות luminal. - להסיר את המלחציים בולדוג לאחר הקטטר PE בצורה מאובטחת מתקדמת לתוך לומן בעורק הירך.
הערה: תשאיר את העיניים על הצנתר PE בעת הסרת את המלחציים בולדוג עורק הירך. ההתבוננות backflush של דם לתוך הצנתר PE הקשורים עם השגחה על הדופק מאשרת את מיקומו של לומן עורקי. - להדק את המחרוזת משי העליון כדי לאבטח את המיקום של הקטטר PE.
הערה: כל משיכה בשוגג או פריקה של הקטטר PE יכול לגרום דימום העיקריים. - להדק את המחרוזת משי נמוך יותר כדי למנוע דימום מהצד סימטרית של עורק הירך.
-
אישור על ההצלחה של תעלות בעורק הירך
- השתמש מזרק 1 מ"ל להזריק 0.1-0.2 מ"ל של תמיסת מלח heparinized לתוך עורק הירך. ההתנגדות על הזרקת חייב להיות טריוויאלי. אם התנגדות ברורה בעת ההזרקה הוא הבחין, בדוק את כל תעלות שוב.
הערה: ודא ש-stopcocks-כיוונית מוחלפות כראוי לפני החלת כל לחץ שלילי או הזרקת מלוחים לתוך הצינורית בעורק הירך. בנקודת זמן זו, תצטרך כל זריקה לתוך מתמר לחץ כיול מחדש. - בדוק אם אין שום נזילה סביב הצנרור. אם לא, מכסים באתר כירורגית עם כדור צמר גפן רטוב.
- השתמש מזרק 1 מ"ל להזריק 0.1-0.2 מ"ל של תמיסת מלח heparinized לתוך עורק הירך. ההתנגדות על הזרקת חייב להיות טריוויאלי. אם התנגדות ברורה בעת ההזרקה הוא הבחין, בדוק את כל תעלות שוב.
5. הקלטה של לחץ דם
- לאחר רצף חלקה עבור הצנתר PE, לצרף את צימוד-כיוונית של קטטר PE האחד על מתמר לחץ (איור 4).
- ודא כי ישנם אין בועות אוויר במערכת תעלות. לבדוק גם את צמתי חיבור של צימוד-כיוונית.
- להתחיל את הנתונים רכישת מערכת עם תדר הדגימה של 1,000 הרץ לרשומה הגלים לחץ עורקי BP. יהיה הפגינו (איור 6).
- אפשר את כל ההתארגנות לייצב למשך לפחות 3-5 דקות. במקרים עם אותות לא יציב, ייצוב זמן ניתן להרחיב עד 15 דקות.
- בדוק את הצנרור מעת לעת כדי לוודא כי אין דימום.
הערה: בעת רכישת נתונים מתמר לחץ, חשוב למקם המתמר ברמה של הלב של החיה.
6. השטח אק ג
- בדוק שלושת מוביל של הפרעה דו קוטבית א כדי לוודא את החיובי, שלילי, אלקטרודות ייחוס פלטינה לא ניזוקו.
- הכנס את הלידים subcutaneously וריסקה השמאלי, וריסקה נכון, ו hindleg הנכון (איור 5).
- לצרף הרכזות אלקטרודה מגבר אק ג לפי הזמנה עם תדירות הדגימות של 1,000 הרץ ו מסנן בתדירות של 3 – 500 הרץ. א להשאיר הפניות יציב במהלך ההקלטה. תנועת ללידים אק ג יכול לייצר תוכניות בסיסיות לא יציב, חפצים.
7. חיה המתת חסד לאחר השלמת הניסוי
- לאחר השלמת של לחץ דם, אק ג הקלטה, לעצור את מערכת רכישה. הסר את האלקטרודות. מאתרים ומפסיקים את עורק הירך מאת הידקה את המחרוזת משי הקודם שמוקם ממש לאחר נסיגתה הקטטר PE.
- המקום שהעכברושים בנפרד בבית הבליעה המתת חסד גלוי מחובר דחוס בלוני גז פחמן דו-חמצני (CO2). חותם העליון בצורה מאובטחת.
- מציגים 100% CO2 עם קצב המילוי של 10% כדי 30% נפח החדר לדקה.
- תשאיר את העיניים על העכברוש; חוסר נשימה וצבע דהוי העין אמור להופיע בתוך דקות 2−3.
הערה: אם הפסקת תנועת הנשימה אינה מתרחשת לאחר 3 דקות, המערכת צריך להיבדק על קצב מילוי קאמרית, אספקת2 CO או דליפות. - שמור על CO2 זרימה לתא 1 דקה יותר לאחר נשימה מפסיק.
- לברר את הלב ואת הנשימה מעצר ורשום האישונים מורחבים תועקשה לאשר מוות.
הערה: אם החולדה לא מת אבל ב- CO2 הרדמה, להשתמש בשיטה המשני של המתת חסד כגון ניקור חזה דו צדדיים.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
רכשנו על זה וחולדות Wistar-קיוטו WKY normotensive מהמרכז הלאומי מעבדה חיה (טאיפיי, טייוואן). כל החיות שוכנו במתקן מבוקרי טמפרטורה (20−22 ° C) עם גישה חופשית תקן האוכל והמים על מחזור/כהה 12 שעות.
השתמשנו חולדות 47 בת שש, הם נשקלו לפני המדידה BP וחברת א. תצלומי מעקב נציג של הקלטה בו זמנית של אק ג ולחץ הדם על זה, WKY מוצגים באיור 6. טבלה 1 מציגה פרמטרים עבור לחץ דם וקצב הלב. בדיקות סטטיסטיות (t) חשף. לחץ דם סיסטולי גבוה משמעותית ולחץ הדם רע על זה (124.5 מ מ כספית ± 15.1 מ מ כספית, מ מ כספית 84.3 ± 5.0 מ מ כספית) מאשר ב- WKY (90.0 מ מ כספית ± 7.5 מ מ כספית, 67.5 מ מ כספית ± 5.0 מ מ כספית) (P < 0.05) (טבלה 1).
ניתן למדוד את הפרמטרים של גל P, מרווחי יחסי ציבור, רוחב QRS ומרווחי זמן QT מהקלטות אק ג (טבלה 2). הבחירה של טוב לעומת תעלות הירך השמאלי ביחס אק ג אלקטרודה הצבתן (האיבר הינד נכון) לא השפיע על האותות BP או אק ג.
איור 1: חומרים. מלקחיים (A) עם שיניים, מספריים כירורגיים (B), (ג) טישו מלקחיים מלקחיים רקמות (D) עם טיפים בסדר, (E) זווית עצה מלקחיים, קלאמפ כלי הדם של בולדוג (F), מחרוזת משי (G), מיקרו (H) מספריים, (אני) פוליאתילן קטטר בהתחברות 26 G x 1/2 '' של צימוד-כיוונית (J), (K) ומחט לחץ מתמר בהתחברות צימוד-כיוונית, מד לחץ דם כספית (L) עם (צימוד החץ הירוק), האינפלציה הנורה עם שסתום אוויר-דליפה (חץ לבן). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 2: ציון דרך השטח עבור עורק הירך. (א) פרקדן לעכבר עם קמט במפשעה שמאל מסומן בקו מקווקו. (B) אשכים העור נאספות על ידי מלקחיים עם השיניים קטועים על ידי מספריים כירורגיים. (ג) אזור הניתוח עבור עורק הירך. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 3: רקמת לנתיחה, תעלות של עורק הירך. (א) נחשף עצב הירך (חץ צהוב) וריד הירך (חץ כחול), עורק הירך (חץ אדום) לאחר ניתוח רקמה. וריד הירך (B), עורק לאחר שרשם עצב. (ג) יישום של בולדוג מלחציים כלי הדם על הטרמינל הגולגולת של עורק הירך גזור. (ד) בעורק הירך עם מלחציים בולדוג, שתי מחרוזות משי עם קשרים רופפים. (E) A חור קטן בצד הגחוני של עורק הירך, שנוצרו באמצעות מספריים מיקרו. (F) החדרת הקטטר פוליאתילן לתוך עורק הירך. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 4: עורק הירך תעלות להקלטה לחץ. הצינורית התוך עורקי (מודגשים על-ידי קו ירוק מקווקו) מקושר עם שני stopcocks-כיוונית (חיצים כחולים) עם מזרקים מלאים heparinized מלוחים. מתמר לחץ (חץ אדום) מקושר את תעלות דרך stopcocks-כיוונית. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 5: הגדרת כל ניסיוני עבור פולשנית לחץ הדם בעורק הירך ו אלקטרוקרדיוגרם. שלושה electrocardiographic מוביל (חצים אדומים) עם אלקטרודות הפלטינה המחט subcutaneously מוכנס על קידמה הדו-צדדיים רגליים וברגל ימין (חיצים צהובים). חשוף נכון עורק הירך עם תעלות (חץ כחול). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 6: נציג לשרטוטים. הקלטות סימולטני של אק ג ולחץ הדם WKY (משמאל), על זה (מימין) א (למעלה), שיטות גלי לחץ הדם בעורק (למטה). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
| WKY | על זה | ערך P | |
| (n = 3) | (n = 3) | ||
| משקל, g | 407.7 ± 6.4 | 353.7 ± 10.3 | < 0.01 |
| קצב הלב, /min | 241.3 ± 15.0 | 262.0 ± 15.7 | 0.18 |
| . לחץ דם סיסטולי, מ מ כספית | 90.0 ± 7.5 | 124.5 ± 15.1 | < 0.05 |
| . לחץ הדם הדיאסטולי, מ מ כספית | 56.3 ± 4.0 | 64.2 ± 0.6 | 0.08 |
| זאת אומרת BP, מ מ כספית | 67.5 ± 5.0 | 84.3 ± 5.0 | < 0.05 |
| לחץ דופק, מ מ כספית | 33.6 ± 4.4 | 60.4 ± 15.1 | 0.08 |
טבלה 1: רמות לחץ הדם נמדד על ידי תעלות פולשנית בעורק הירך. הנתונים מוצגים כמו הממוצע ± סטיית התקן; על זה = באופן ספונטני חולדות עם יתר לחץ דם; WKY = Wistar-קיוטו חולדות; BP = לחץ דם.
| WKY | על זה | ערך P | |
| (n = 3) | (n = 3) | ||
| קצב הלב, /min | 241.3 ± 15.0 | 262.0 ± 15.7 | 0.18 |
| גל P, אלפיות | 38.7 ± 9.3 | 43.0 ± 4.6 | 0.52 |
| מרווח PR, אלפיות | 59.0 ± 7.8 | 61.3 ± 4.7 | 0.69 |
| רוחב QRS, אלפיות | 43.0 ± 11.3 | 50.0 ± 2.6 | 0.4 |
| אלקטרוקרדיוגרם, אלפיות | 112.0 ± 12.8 | 116.7 ± 9.5 | 0.15 |
בטבלה 2: מדידות פרמטרים electrocardiographic. הנתונים מוצגים כמו הממוצע ± סטיית התקן; על זה = באופן ספונטני חולדות עם יתר לחץ דם; WKY = Wistar-קיוטו חולדות.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
תעלות עורקי פולשנית מאפשרת מדידה מדויקת מאוד של BP. זה יכול להיעשות עם צינור PE ללא צורך של קטטר יקר. ניתן גם לבצע מדידת לחץ דם פולשנית בו זמנית עם הקלטה של משטח א.
עקומת למידה העיקריים של שיטה זו הוא מיומנות ניסיוני נדרשים נקרר כלי דם קטנים. בידיים מנוסים, שיעור מוצלח עבור עורק הירך תעלות יכולים לגשת 100%. תרגול מומלץ לפני ביצוע ניסויים אמיתיים. כמה נקודות לציון במהלך ההליך: (1) יצירת חיות בטוח לחלוטין. הם מורדם לפני תחילת הניתוח; (2) להשתמש במלחצת בולדוג במיקום גבוה של העורק חשוף לפני החיתוך הקיר עורקי כדי למנוע דימום נרחב; (3) לבצע את החתך בלבד מעל החומה הגחון של העורק ולמנוע פגיעה בקיר הגבי; ו- (4) מיקום קבוע של מערכת תעלות, הפניות electrocardiographic מסייעת למנוע תנועה חפצים במהלך ההקלטה.
סיבוכים פוטנציאליים עם הליך זה כוללים דימום של הקרע כירורגי. דימום ב תעלות מוצלחת וחלקה של עורק הוא טריוויאלי מאוד. בדימום יכולה להיגרם על ידי נזק מקרי עורק הירך או וריד או הענפים העיקריים בזמן רקמות. דימום יכול להעצר על-ידי דחיסה מוקד עם כדור צמר גפן נקי. גורם נוסף של דימום העיקריים הוא שיבוש תעלות הירך. במקרה זה, אובדן הדם הוא בדרך כלל גדול מספיק כדי לגרום ירידה משמעותית ב- BP מערכתית. בשלב זה, BP הקלטה יופרו מוקדם.
מד מרחק ההשתלה גם הוא טכניקה הוקמה עבור BP פולשנית הקלטה8. היתרון של בדיקות וטלמטריה הוא היכולת לקבל הקלטה רציפה אמינות גבוהה לאורך תקופות ארוכות יחסית של זמן בהכרה, לנוע בחופשיות חיות ללא המגבלות של איפוק או הרדמה. הקלטות BP ישיר יכול להיעשות עם שכל תת עורית של העורק תעלות9ומשדרי רדיו. עם זאת, עשויה להיות מאתגרת להשתיל את מד מרחק בהצלחה, החומרה והתוכנה עבור רדיו טלמטריה יקרות.
ישנן כמה מגבלות למדידה BP פולשני על ידי תעלות בעורק הירך. קודם כל, זה לא ניתן לבצע אצל חולדות ערככם ומודעת. שנית, לחץ הדם בעורק הירך עשוי להיות גבוה יותר או נמוך יותר לחץ הדם באבי העורקים המרכזית. תעלות השלישי, עורקי, יכול להיות קשה עבור מכרסמים קטנים, שבו שמנקזים עשוי להיות קטן מדי כדי להוסיף את צינור PE. רביעית, צריך להיות מאתרים את העורק cannulated לאחר השלמת את הקלטת BP, מצדו של עורק הירך תגרום רגל איסכמיה. בשל מגבלה זו, בעלי החיים מורדמים בדרך כלל בעקבות הקלטת BP פולשני.
עורק הירך פולשנית תעלות דורש הרחקה מאלחש את החיות, אשר פוטנציאל מציג מתח ומשפיע נתונים BP והן אלקטרוקרדיוגרם10. ניתן להקל את הלחץ על ידי הרדמה המתאים. הרדמה כולל פרוטוקולים זריקה או באינהלציה. ב ניסיון העבר שלנו, מרדימים גבוהה BP מוגברות ב I.P. WKY חולדות מרמז כי החיות היו עדיין תחת לחץ או כאב. לחץ דם נורמלי בחולדות WKY בהכרה היא. מ מ 130/80 כספית; זה ירד מתחת 100 מ מ כספית בחולדות שלנו ומורדמת-שאיפה WKY (טבלה 1). הרדמה inhalational (איזופלוריין) יש מספר יתרונות על סוכנים להזרקה: התפרצות מהירה לטיפול בבעלי חיים מינימלית, להקל על בקרת, אין סמים מבוקרת, החלמה מהירה. החסרונות הם, העלות של הציוד, הסכנה החשיפה של האדם במקרה עם דליפת גז משמעותי לתוך סביבת העבודה, ויש מדכאים השפעה משמעותית על הפחתת לחץ דם BP. איזופלוריין-induced להתייחס בעת בחירת המשטר הרדמה.
יישומים נוספים אפשריות למדידה BP פולשני. על פי עקרונות דינמיקה של נוזלים על מהירות גל הדופק (PWV), עורק נוקשה מפיצה מהירה יותר גל11את הדופק. בשעת החלת cannulations כפול על העורק הראשי ועל הירך, ניתן לקבוע את PWV של אבי העורקים. ניתן למדוד את האורך של אבי העורקים הדופק הפצת כמרחק בין קצות הצינורית ב (proximal) בעורק דיסטלי עורקים (הירך). PWV הוא היחס בין האורך אבי העורקים ואת ההבדל בין הזמן את הערכים מינימלי של פולסים עורקי לקרע,12.
הגדרת שתוארו לעיל עבור אלקטרוקרדיוגרם בו זמנית, הקלטה התוך עורקי. לחץ דם בחולדות ניסיוני הוא טכניקה זולה ונגישה מאוד עבור מחקרים פיזיולוגיים או תרופתי חוקרת פתוגניים או טיפולית מנגנונים לרפואה לב וכלי דם.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
המחברים אין לחשוף.
Acknowledgments
מחקר זה נתמך על ידי משרד המדע טייוואן, טכנולוגיה מעניקה 104-2314-B-037-080-MY3 ביותר ולהעניק ביותר 107-2314-B-037-110 HCL, מכוני מחקר הבריאות הלאומית של טייוואן NHRI-EX107-10724SC.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Polyethylene tube | BECTON DICKINSON | 427401 | internal diameter of 0.5 mm, outer diameter of 0.9 mm |
| 26 G x 1/2"" needle | TERUMO | 160426D | |
| Adson Forceps | TOP Line | 12-540 | 12 cm (4.75") Long, Straight, 1 x 2 Teeth |
| Bulldog vascular clamp | Teleflex | 357581 | 8 mm |
| Computer | AUSUS | X453M | |
| Exernal analog signal recording device | iWorx | T5141538 | This allows the recording of up to three channels of ECG, EMG or EEG as well as GSR (skin conductance) from a single iWire input on the recording Module. |
| Graefe Forceps | AESCULAP Surgical Instruments | BD312R | MICRO DRESSING FORCEPS, CURVED, SERRATED, 105 mm, 4 1/8 |
| Mecury sphygmomanometer | Spirit | CK-101 | |
| Pressure transducer | iWorx | IworxBP100 | |
| Semken Forceps | MEDE TECHNIK | 10-104 | 100 mm |
| Software | LabScribe3 | ||
| Surgical scissors | HEBU | 1714 | 14.5 cm long |
| Syringe (1 mL) | TERUMO | 160426D | |
| Three-way stopcocks | Cole-Parmer | EW-30600-23 | |
| Tipped forceps | World Precision Instruments | 504506 | 11 cm long, 0.1 x 0.06 mm Tips |
| Vannas Scissors | World Precision Instruments | 500086 | 8.5 cm long, Straight, 0.025 x 0.015 mm Tips, 7mm super fine Blades |
References
- Shiou, Y. -L., Huang, I. C., Lin, H. -T., Lee, H. -C. High fat diet aggravates atrial and ventricular remodeling of hypertensive heart disease in aging rats. Journal of the Formosan Medical Association. , (2017).
- Parasuraman, S., Raveendran, R. Measurement of invasive blood pressure in rats. Journal of Pharmacology, Pharmacotherapeutics. 3 (2), 172-177 (2012).
- Fink, G. D. Does Tail-Cuff Plethysmography Provide a Reliable Estimate of Central Blood Pressure in Mice? Journal of the American Heart Association: Cardiovascular and Cerebrovascular Disease. 6 (6), e006554 (2017).
- Wilde, E., et al. Tail-Cuff Technique and Its Influence on Central Blood Pressure in the Mouse. Journal of the American Heart Association: Cardiovascular and Cerebrovascular Disease. 6 (6), (2017).
- Braga, V. A., Prabhakar, N. R. Refinement of Telemetry for Measuring Blood Pressure in Conscious Rats. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science : JAALAS. 48 (3), 268-271 (2009).
- Kaese, S., Verheule, S. Cardiac electrophysiology in mice: a matter of size. Frontiers in Physiology. 3 (345), (2012).
- Okamoto, K., Aoki, K. Development of a strain of spontaneously hypertensive rats. Japanese Circulation Journal. 27, 282-293 (1963).
- Van Vliet, B. N., Chafe, L. L., Antic, V., Schnyder-Candrian, S., Montani, J. P. Direct and indirect methods used to study arterial blood pressure. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 44 (2), 361-373 (2000).
- Alam, M. A., Parks, C., Mancarella, S. Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry. Journal of Visualized Experiments. (111), e53991 (2016).
- Irvine, R. J., White, J., Chan, R. The influence of restraint on blood pressure in the rat. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (3), 157-162 (1997).
- Nvd Vosse, F., Stergiopulos, N. Pulse Wave Propagation in the Arterial Tree. Annual Review of Fluid Mechanics. 43 (1), 467-499 (2011).
- Cosson, E., et al. Aortic stiffness and pulse pressure amplification in Wistar-Kyoto and spontaneously hypertensive rats. The American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 292 (5), H2506-H2512 (2007).
