Summary
여기에 설명된 방법은 친숙하거나 익숙하지 않은 수컷 쥐 쌍으로 하품 전염 곡선을 얻는 것을 목표로합니다. 구멍이 명확하거나 불투명한 파티션으로 구분된 케이지는 시각적, 후각 또는 두 가지 유형의 감각 큐가 하품 전염을 자극할 수 있는지 여부를 감지하는 데 사용됩니다.
Abstract
의사소통은 동물 사회 생활의 필수적인 측면입니다. 동물은 서로 영향을 미치고 학교, 양떼, 무리에서 함께 모일 수 있습니다. 의사소통은 또한 남녀가 구애하는 동안 상호 작용하는 방식과 라이벌이 싸우지 않고 분쟁을 해결하는 방법입니다. 그러나 여러 유형의 감각 양식이 관련될 가능성이 있기 때문에 통신 기능의 존재를 테스트하기가 어려운 몇 가지 행동 패턴이 있습니다. 예를 들어, 전염성 하품은 동물이 서로 익숙한지 여부에 따라 시력, 청각, 냄새 또는 이러한 감각의 조합을 통해 잠재적으로 발생하는 포유류의 통신 활동입니다. 따라서, 이러한 행동의 가능한 통신 역할에 대한 가설을 테스트하기 위해, 참여 감각 방식을 식별하기 위해 적절한 방법이 필요하다.
여기에 제안 된 방법은 친숙하고 익숙하지 않은 쥐에 대한 하품 전염 곡선을 얻고 시각 및 후각 감각 양식의 상대적 참여를 평가하는 것을 목표로합니다. 이 방법은 저렴한 재료를 사용하며 약간의 변경과 함께 마우스와 같은 다른 설치류 종과 함께 사용할 수도 있습니다. 전반적으로, 이 방법은 인접한 측면에 구멍이 있는 인접한 케이지에 배치된 쥐 간의 통신을 허용하거나 방지하는 불투명 한 분배기(구멍 유무)와 명확한 분배기(구멍 유무)를 대체합니다. 따라서 후각 통신, 시각적 통신, 시각적 및 후각 통신, 시각적 또는 후각 통신의 네 가지 조건을 테스트할 수 있습니다. 쥐 들 간의 사회적 상호 작용발생으로, 이러한 테스트 조건 자연 환경에서 발생할 수 있는 시뮬레이션. 이 점에서, 여기에 제안 된 방법은 생물학적 타당성이 문제를 제기 할 수있는 비디오 프리젠 테이션에 의존하는 전통적인 방법보다 더 효과적입니다. 그럼에도 불구하고, 그것은 하품 전염에서 청각의 잠재적 인 역할과 냄새와 시력의 역할을 구별하지 않습니다.
Introduction
전통적으로, 통신 행동은 두 가지 관점에서 연구되었습니다. 한 가지 관점에서, 병리학자들은 자연 환경에서 동물의 행동을 관찰하고 기록하고 적응값1을인식하려고 시도합니다. 관련된 특정 감각 또는 감각은 이 연구 결과의 1 차적인 관심사가 아니었습니다. 또 다른 관점에서, 생리학자는 동물이 1을 통신하는 메커니즘을 해명하는 데 더 관심이 있습니다. 따라서, 실험실 연구는 감각 양식이 통신에서 재생하는 역할을 해결하는방법을 제공했다 2,3. 적응가치와 즉각적인 메커니즘에 대한 지식이 동물의 사회 생활에서 공동체 행동에 대한 포괄적인 이해를 얻기 위해 필요하기 때문에 이 두 관점은 참으로 상호 보완적입니다.
하품 행동은 물고기에서 영장류5에이르기까지 척추 동물 4의 여러 종에서행동 레퍼토리의 눈에 띄는 구성 요소입니다. 그것은 입의 느린 개방 및 그것의 열린 위치의 유지 보수로 설명 될수있다, 입의 보다 빠른 폐쇄 다음 5. 전체 서열의 지속 기간은 종에 따라 다릅니다. 예를 들어, 영장류는 비 영장류 종 6보다더 긴 기간 동안 하품. 많은 종에서, 인간은 예외인, 남성은 암컷7보다는 더 빈번하게 하품하는 경향이 있습니다. 이 기능은 하품의 가능한 통신 기능을 뒷받침 할 수 있지만 하품의 규칙적인 패턴과 일일 빈도는 생리적 기능을 제안 할 수 있습니다. 쥐에서, 자발적인 하품은 circadian 리듬을 따릅니다, 높은 주파수의 피크와 함께 아침과 오후에 발생8,9.
하품 행동의 한 가지 흥미로운 특징은 척추 동물11,12의여러 종에서 전염성 이 (행동의 방출 자극이 동일한 방법으로10에서 다른 동물이 행동하는 일이 있을 때)일 수 있다는것입니다. 13,14,15,16,조류17 및 설치류18을포함한다. 더욱이, 최근의 증거에 따르면 전염성 하품은 후각 큐(19)에 노출될 때 한 쥐의 하품이 다른 쥐의 생리적상태에 영향을 미칠 수 있기 때문에 통신적 역할을 반영할 수 있음을 나타냈다. 그러나 하품이 의사소통의 역할을 하는지 여부는 여전히 20,21,그리고 전염성 하품을 분석하는 것이 이 문제를 해결하기 위한 필수적인 첫 번째 단계이다.
다른 한편으로는, 전염성 하품은 다른 동물의 관점으로 공감하는 동물의 능력에 연결되었습니다; 따라서, 밀접하게 관련된 개인은 전염을 표시 할 가능성이 더 높습니다4. 이 가설은 동물이 비디오12,13에하품 자극으로 제시되는 실험실 조건에서 자주 테스트되었습니다; 따라서, 전염은 시각적 인 단서를 통해서만 발생할 수 있습니다. 다른 조사는 동물의 그룹을 사용하여 더 자연 조건에서 하품 전염을 평가14,15. 이것의 중요한 문제는 사회적으로 상호 작용하는 동물이 수시로 감각 양식의 조합을 통해 전달되는 신호및 교환 신호에 반응한다는 것입니다. 그들의 결합 된 효과에서 주어진 된 행동에 관련 된 실제 감각을 disentled 항상 쉬운 작업. 전형적으로, 연구자들은 약리학적또는 외과적으로 주어진 감각의 동물의 사용을 방해하고, 그 다음 관련행동 2,3,18,22에서그 감각의 역할을 추론한다. 다행히도, 물리적 장벽만 허용 하거나 동물 간의 통신을 방해 하는 다른 방법이 있다23,24,25,따라서 더 큰 생물학적 타당성을 달성.
여기에 제안 된 방법은 특히 사회적 환경에서 친숙하고 익숙하지 않은 쥐에서 전염성 하품을 연구하도록 설계되었습니다. 공감 가설에 따르면, 이전 그룹은 전염성 하품에 더 취약해야합니다. 이 방법은 동물이 어떤 감각도 외과적으로 또는 약리학적으로 박탈될 것을 요구하지 않는다. 대신, 구멍이있는 인접한 케이지에 쥐를 배치하고 구멍이 있거나없는 명확하거나 불투명한 칸막이를 사용하여 의사 소통을 물리적으로 방해하여 작동합니다. 따라서, 네 가지 테스트 조건을 검사할 수 있습니다: (1) 후각 통신(OC, 천공 된 불투명 분할), (2) 시각적 통신 (VC, 비천공 투명 분배기), (3) 시각 및 후각 통신 (VOC, 천공 된 투명 분배기), 그리고 (4) 어느 쪽도 아닙니다. 시각적 또는 후각 통신 (NVOC, 비 확산 불투명 분배기). 따라서 연구원은 하품 전염에서 후각, 시각적 및 어느 정도 청각 단서의 상대적 기여를 비교할 수 있습니다. 이러한 접근법은도마뱀(23) 및 마우스(26)와 같은 동물의 특정 통신 행동에 관여하는 감각을 분리하기 위해유사한 방법이 사용되었기 때문에 새로운 것이 아니다. 실제로 Gallup과동료 27은 버저리거에서 전염성 하품시 시각적 단서의 역할을 입증하기 위해 유사한 방법을 사용했습니다. 이러한 방법의 주요 특징은 사회적 맥락의 시뮬레이션과 동물에 가해지는 최소한의 스트레스입니다. 더욱이, 상호 작용하는 동물의 사용은 결론의 생물학적 타당성을 증가시킨다.
전염성 하품을 측정하는 방법에는 여러 가지가 있습니다25,28. Dr. Stephen E. G. Lea (개인 통신, 2015)는 이전에 원시학자13,14에 의해 사용 된 방법을 수치적으로 적응시켜 여기에 사용되는 데이터의 이전 분석을위해 18. 이 프로토콜에 제시된 응용 프로그램의 넓은 범위와이 메서드의 향상 된 버전입니다. 지정된 시간 창 안팎에서 쥐의 하품의 총 수를 시간 창 안팎에서 하품에 해당하는 관찰 시간의 비율에 의해 가중치로 구성됩니다.
예를 들어, 랫트 A와 B가 12분 동안 관찰된다고 가정하면 하품은 가장 가까운 분으로 기록되고 3분 의 시간 창은 전염성 하품을 측정하도록 설정됩니다. 다음으로, 각 랫트에 대한 하품의 다음 서열이 고려된다: 랫트 A (0,0,0,0,0,0,0,0,2,1) 및 랫트 B (0,1,1,1,0,0,0,0,0,0,0,0, 3). 각 숫자 (0-3)는 각 분에 득점 하품의 수에 해당한다는 점에 유의해야한다. 쥐 A의 경우, 분 1, 10 및 11 (굵은 유형의 숫자) 동안, 쥐 B는 이전 3 분 (선택한 시간 창) 또는 그 분 이내에 하품하지 않습니다. 그 분에서, 쥐 A는 총 2 번 하품. 따라서, 하품 자극없이 쥐 A의 하품 속도 (비 사후 하품 하품 속도) 2/3 (즉, 0.67 하품 / 분). 나머지 9 분에서, 쥐 B는 같은 분 또는 3 이전 분 중 하나에 적어도 한 번 하품. 쥐 A는 그 9 분에 총 네 번 하품. 따라서 하품 자극에 반응하는 랫트 A의 하품 비율은 4/9(즉, 0.44 하품/분)이다. 동일한 절차를 랫트 B에 적용하면 하품 후 하품 비율이 2/3(즉, 0.66)이고 하품 후 하품 비율이 5/9(0.55)입니다.
반면에 하품이 1분의 가장 가까운 소수자릿수로 기록되면 하품 전염은 하품 후 시간이 조정됩니다. 예를 들어, 랫트 A및 B에 대한 12분 관찰 기간에 걸쳐 다음 하품 시간이 기록되는 경우: 랫트 A(2.3, 5.1, 5.8, 10.4, 11.1)및 랫트 B(1.2, 2.4, 4.5, 5.1, 11.2, 11.6, 11.8). 쥐 A의 경우, 쥐 B가 지난 3분 이내에 하품을 하지 않는 기간은 0내지 1.2분, 8.1~11.2분(즉, 3.1분)이며, 이는 총 4.3분의 비하품 시간을 산출한다. 그 시간 동안 쥐 A 하품 횟수는 3 (굵은 문자의 숫자)이므로 비 사후 하품 하품 비율은 3/4.3 (즉, 0.69)이며, 하품 후 하품 비율은 3/7.7 (즉, 0.38; 12-4.3 min의 분모)입니다. 마찬가지로, 쥐 B의 경우, 쥐 A가 지난 3분 이내에 하품을 하지 않는 기간은 0내지 2.3분, 8.8~10.4분으로 총 3.9분의 결과를 낳는다. 그 기간 내의 쥐 B 하품 횟수는 1이므로 하품 후 가사 비율이 1/3.9 (즉, 0.25)입니다. 따라서 하품 후 하품 비율은 6/8.1(즉, 0.74)입니다.
행동에서 거의 동시 일치하는 것은 개인이 참석하는 것에 대한 제약, 자극에 대한 반응 시간, 시간에 따라 행동의 분포 (예 : 하품)의 존재를 입증하는 이상적인 기준이지만 에피소드에서 발생할 수 있습니다)와 실험 설정에 적응하는 시간은 모두 종 차이를 야기, 어려운 독특한 시간 창을 사용하는 만들기. 이것은 연구원이 결과28을비교할 때 문제를 일으키는 초 5에서 몇 분11까지변화하는 시간 창을 사용한 이유일 수 있습니다. 이 때문에, 하품 전염 곡선을 얻고 종 들 사이의 하품 전염 곡선을 비교하기 위해 시간 창의 범위에 대해 위에서 설명한 절차를 반복하는 것이 제안된다.
등가 하품 전염 곡선은 관찰 기간 동안 각 쥐에 대해 관찰된 하품수를 무작위로 분배하여 비교할 수 있다. 따라서, 제안된 하품 전염을 측정하는 방법은 (1) 하품 속도(non-post-ywn time) 및 (2) 하품 수의 무작위 분포로부터 얻어진 인공 하품 전염 곡선의 두 가지 유형의 제어를 제공한다. 따라서 하품 전염을 분석하는 이러한 접근법은 단일 시간 창 내에서 하품의 백분율 또는 빈도를 이창(25)외부에서 발생하는 것과 비교하는 것과 같은 다른 절차로부터 한 걸음 앞으로 나아가는 방법, 고려없이 실제 시간 프레임. 이 방법은 R-기반프로그램(29)에 의해 보완되어 하나 이상의 시간 창에 대한 전염성 하품의 확률을 편리하고 객관적으로 계산한다.
이 방법의 유용성 및 R 기반 프로그램의 장점을 설명하기 위해 이전에 게시된 연구18의 데이터 세트가 사용됩니다. 실험 조건구성 144 익숙한 또는 익숙하지 않은 조건에 할당 된 남성 쥐. 각 실험 조건에서 랫트는 9쌍의 4개의 하위 그룹으로 세분화하고 전술한 4개의 시험 상황 중 어느 하나에 노출되었다. 각 실험 조건 및 시험 상황에서 쥐의 하품 거동을 60분 동안 기록하였다.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
실험 프로토콜 및 축산은 제도적 지침에 따라 수행되었다.
1. 재료
- 재료 표에서 메서드를 구현하는 데 사용되는 재료의전체 목록을 찾습니다. 그림 1을 사용하여 전문가의 조언을 구하여 뒤집힌 T자형 테이블, 관측 케이지 및 케이지 분할기를 구성합니다. 날카로운 공구와 잠재적으로 위험한 물질의 사용에 대한 안전 표시를 따르십시오.
- 두 개의 레일 모양의 나무 막대(길이 45cm, 서로 0.6cm 분리)를 상단과 나무 조각(100cm x 45cm x 1.5cm)의 중간에 접착하여 뒤집힌 T자 형 테이블을 만듭니다. 그런 다음 두 번째 나무 조각(50cm x 45cm x 0.6cm)을 레일 모양의 막대 사이에 수직으로 놓습니다. 이 두 번째 나무 조각은 한쪽에 있는 쥐 쌍이 반대쪽의 다른쌍을 보는 것을 방지해야 합니다(그림 1).
- 유리와 아크릴을 사용하여 8 개의 관찰 케이지를 만듭니다. 각 케이지(폭 19cm, 길이 19cm, 높이 10cm, 두께 3mm)는 측면 의 중간에 세 줄로 배열된 24개의 등거리 구멍(직경 5mm)을 가지고 있는지 확인합니다. 아크릴 (3mm 두께)의이 측면을 확인하고 쥐가 호흡 할 수 있도록 0.7cm반대측의 높이를 단축.
- 각 관찰 케이지에는 60 분의 관찰 기간 동안 쥐가 자라나고 산만해하지 않도록 아크릴로 만든 슬라이딩 뚜껑이 있는지 확인하십시오.
- 아크릴 (폭 19cm, 높이 30cm, 두께 3mm)에서 4 개의 칸막이만들기. 관측 케이지에 있는 구멍과 일치하는 드릴 24구멍(직경 5mm)을 각각 하나의 투명 디바이더와 하나의 불투명 한 칸막이에 놓습니다.
- 하품 발생을 기록하기 위해 사전에 데이터 시트를 준비합니다. 각 데이터 시트의 제목에, 관찰자의 이름, 실험 조건(즉, 친숙하거나 익숙하지 않은 쥐), 관련 시험 상황(OC, VC, VOC, NVOC), 관측의 날짜 및 초기 및 최종 시간을 포함한다. 데이터 시트의 나머지 부분을 두 개의 열로 나누고, 각 열은 상부에 쓰여진 쥐의 수와 함께, 쥐의 하품 동작을 기록한다.
2. 수속
- 집 144 플라스틱 케이지 (홈 케이지)에서 4 개의 그룹에서 그들은 나이에 2.5 개월에 도달 할 때까지 weaning에서 수컷 쥐. 그들은 호르몬 주기로 인해 행동에 큰 변화를 표시 하는 경향이 있기 때문에 여성 쥐를 사용 하지 마십시오, 테스트 상황의 효과 혼동 될 수 있습니다. 각 케이지의 쥐가 형제가 아닌지 확인합니다.
참고 : 함께 모든 쥐를 얻기 어려울 수 있습니다. 이 경우, 각 실험 조건에서 1회 씩 모든 시험 상황이 표현되도록 적어도 8마리의 친숙한 쥐와 8마리의 익숙하지 않은 쥐의 블록을 생성한다(30). - 쥐를 식별하려면 상업용 마커를 사용하여 꼬리에 기호 숫자로 표시합니다. 예를 들어 점과 선을 결합하여 숫자 1에서 4까지를 나타냅니다(예: 숫자 1의 경우 한 점, 숫자 4의 한 줄). 다른 색상을 사용하여 친숙하고 익숙하지 않은 쥐를 식별합니다.
참고: 동물 시설 직원이 제공한 안전 지침에 따라 쥐를 처리하고 실험이 수행될 기관에서 실험실 동물의 올바른 사용에 관한 권장 사항을 준수합니다. - 임의로 익숙한 쥐의 그룹을 수용하고 익숙하지 않은 그룹을 수용 할 홈 케이지를 선택합니다. 예를 들어, 4개의 홈 케이지에 16마리의 사용 가능한 쥐가 있다고 가정 케이지 1에서 4번의 번호를 입력한 다음 다음과 같이 R(http://cran.r-project.org/ 다운로드)을 사용한다고 가정합니다.[프롬프트(>)] 다음.
> 샘플 (4,4)
【1】4 3 2 1- 친숙한(또는 익숙하지 않은) 쥐를 홈 케이지 4및 3에 그룹화하고, 익숙하지 않은(또는 친숙한) 쥐를 홈 케이지 2와 1에 그룹화한다. 동물 시설 직원이 각 케이지의 신원을 유지하고 동물 시설의 다른 모든 쥐와 동일한 방식으로 쥐를 처리해야 합니다.
- R 프로그램을 다시 사용하고 무작위로 각 실험 조건에서 각 쌍을 형성하는 쥐를 선택합니다. 익숙한 쥐의 각 쌍의 쥐가 같은 홈 케이지에서 유래 있는지 확인하고, 그 반대가 익숙하지 않은 그룹의 쌍에 대한 사실인지 확인합니다. 무작위로 각 실험 조건에서 각 테스트 상황에 대한 쥐의 쌍을 선택합니다.
- 시험 세션당 8개의 가능한 시험 상황 중 2개(각 친숙하고 익숙하지 않은 쥐에 대해 4개)를 가지고 하루에 두 번의 시험 세션을 수행합니다(즉, 60분 관찰 기간). 3시간 이내에 두 개의 테스트 세션을 연속적으로 실시합니다.
참고: 모든 테스트 세션(하루에 4쌍의 쥐)을 아침이나 오후에 실시하여 혼란스러운 요인을 피하십시오. 2일 연속으로 실험의 완전한 복제(8가지 테스트 상황)를 실행합니다.- 실험의 각 복제에 대해 무작위 순서로 테스트 상황을 사용해야 합니다. 예를 들어 숫자 1에서 8을 사용하여 각 테스트 상황을 식별한 다음 다음과 같이 R을 사용합니다.
>샘플(8,8)
[1] 8 7 4 6 5 1 2 3 - 테스트 상황 8과 7을 할당하여 세션 1을 테스트하고, 4 및 6을 테스트하여 세션 2를 테스트합니다. 그런 다음, 각 쥐 쌍(테스트 상황)이 배치될 반전된 T자형 테이블의 측면을 임의로 선택합니다.
- 실험의 각 복제에 대해 무작위 순서로 테스트 상황을 사용해야 합니다. 예를 들어 숫자 1에서 8을 사용하여 각 테스트 상황을 식별한 다음 다음과 같이 R을 사용합니다.
- 실험의 제2 복제(즉, 블록)에 대해 동일한 절차(단계 2.3~ 2.4.2)를 반복한다.
참고: 연구의 목적이 하품 빈도에 대한 사회적 조건(즉, 상호 작용하는 쥐 2마리)의 영향을 테스트하는 경우, 4가지 테스트 상황 각각에 대한 대조군으로 빈 관찰 케이지 옆에 있는 관찰 케이지에 놓인 쥐 하나를 사용합니다. 8마리의 쥐의 대조군에 대해 각 시험 상황에 대해 이 실험을 2x 수행한다. - 처음 네 마리의 쥐를 동물 시설에서 관찰실로 옮겨 시험 세션을 설정하고, 15분 동안 남아 서 새로운 환경에 적응합니다. 개별 케이지에 쥐를 수송하고 수송하는 동안 관찰실에서 서로 분리 유지.
참고: 동물 시설 직원이 제공한 동물 운송안전 지침을 따르고 표시된 옷을 사용하여 실험실에서 동물과 함께 작업하십시오. 쥐는 관찰실에있는 동안 음식과 물에 액세스 할 수 없습니다. - 적응 기간이 경과한 후 반전된 T자형 테이블을 더 큰 직사각형 테이블에 놓습니다. 관찰을 할 때 충분히 방을 조명 천장 램프가 있는지 확인합니다.
- 각 관찰 케이지의 바닥에 필터 용지를 놓고 케이지를 뒤집은 T자형 테이블의 양쪽에 쌍으로 놓습니다. 각 케이지 쌍 사이에 해당 칸막이가 배치됩니다.
참고: 필터 용지를 사용하면 케이지를 더 쉽게 청소할 수 있으며 쥐가 미끄러지지 않고 이동할 수 있는 거친 표면을 제공합니다. - 각 쥐 쌍의 하품 동작을 기록되도록 전략적으로 두 개의 디지털 캠코더를 배치합니다. 캠코더가 삼각대에 안전하게 고정되고 관찰 케이지의 방향이 올바르게 지정되었는지 확인합니다. 캠코더를 데스크톱 컴퓨터에 연결하여 쥐의 동작을 동시에 모니터링합니다.
참고: 플래시 드라이브에 디지털 정보를 저장하여 실험 세션을 영구적으로 보관합니다. 저장 용량이 높은 플래시 드라이브를 사용합니다. - 적응 기간 이후에, 이전에 결정된 할당에 따라 관찰 케이지에 쥐를 놓습니다. 캠코더의 자동 초점을 설정하고 스톱워치로 비디오 녹화를 동시에 시작합니다. 60분 관찰 기간이 끝나면 비디오 녹화를 중지합니다.
참고 : 실험자는 테스트 세션 동안 방 밖에있을 수 있으며 원격으로 관찰 할 수 있지만, 한 사람이 관찰실에있는 것이 좋습니다 (실험 설정에서 가능한 한 멀리) 쥐의 행동을 모니터링하는 동안 테스트 세션이 중단 없이 진행되는지 확인합니다. - 관찰이 끝나면 쥐를 동물 시설의 집 새장에 되돌려 놓습니다. 동물 시설 직원에게 쥐가 다시 음식과 물에 접근할 수 있도록 요청하십시오. 무독성 세제를 사용하여 관찰 케이지를 철저히 청소하고 하루의 두 번째 및 최종 테스트 세션을 수행하기 위해 실험 설정을 준비합니다.
참고: 관찰 케이지에 놓일 때 쥐가 남긴 향을 제거하기 위해 나무를 청소하면 다음 쌍의 쥐의 행동에 영향을 줄 수 있습니다. - 1~2명의 자원봉사자를 배정된 치료법에 부분적으로 장님으로 훈련하여 모든 발생 샘플링 방법을 사용하여 하품을 식별하고 기록합니다. 참관인이 소개 섹션에 설명된 하품의 정의를 사용해야 합니다.
- 표준 재생 시스템을 사용하여 컴퓨터 화면에서 각 비디오를 재생하고 투영합니다. 관찰자에게 각 비디오를 보고 이전에 준비된 데이터 시트를 사용하여 하품 동작을 관찰하고 기록한 다음, 하품을 관찰하고 측정하는 능력을 향상시키기 위해 느린 속도로 비디오를 검토할 수 있도록 하십시오.
- 관찰자에게 다음과 유사한 표기법 시스템을 사용하여 하품을 점수매기도록 요청합니다. 3 || 6 | 9,분 3에서 하나의 하품, 분 6에서 두 하품, 분 9에서 하나의 하품을 나타내는.) 점수 하품 시퀀스(예: 1.2, 2.2, 3.2, 5.0, 5.8)를 더 정밀하게 기록합니다(소수점 1자리로 반올림된 분).
- 또는 표준 데이터 수집 프로그램을 사용하여 비디오의 데이터를 컴퓨터에 직접 입력합니다. 관찰자가 이러한 프로그램에 대해 잘 알고 있는지 확인합니다.
참고: 필요한 경우 관찰자가 두 개 이상의 세션에서 각 비디오를 볼 수 있도록 허용합니다. 한 관찰자가 한 실험 블록에 해당하는 모든 비디오를 볼 수 있는지 확인합니다. 두 명의 관찰자가 이 비디오를 본 경우 하품을 관찰하고 기록하는 능력의 차이가 테스트 상황의 영향을 혼동할 위험이 있을 수 있습니다. 하품이 동일한 방식으로 추가되도록 하기 위해 동영상의 10%-20%에서 다른 관찰자 간의 관찰자 내 신뢰도를 점수화하는 것이 중요합니다.
3. 데이터 처리
- 데이터 시트에서 스프레드시트로 각 쥐의 하품의 시간 순서를 기록합니다. 짧은 제목을 가진 각 쥐에 대해 하나의 열이 있는지 확인합니다(예: 왼쪽과 오른쪽에 익숙한 쥐의 첫 번째 쌍을 나타내기 위해 fr1.l 및 fr1.r). 빈 셀을 0 또는 NA로 채우면 모든 열의 길이가 동일한지 확인합니다(아래 참조).
참고: 보조 문서로 제공된 일반 가이드를 사용하여 데이터를 처리하고, 전염성 하품을 측정하고, 전염성 하품 곡선을 얻기 위해 다음 단계를 완전히 이해합니다.- 하품을 가장 가까운 분으로 기록한 경우, 각 관련 분에서 하품 수를 입력하고 0(하품 없음)을 사용하여 지정된 분에 하품이 발생하지 않은 경우 세포를 채웁니다. 워크시트를 텍스트 파일(.txt)으로 저장합니다.
- 하품을 분 에서 가장 가까운 소수자릿수로 기록한 경우, 순서를 하향식으로 입력하고 "NA"를 사용하여 하품(행)의 수가 열의 수(행)보다 낮은 열의 빈 공간을 채우고 r에 대해 기록된 하품의 최대 수(행)를 작성합니다. 에. 워크시트를 텍스트 파일(.txt)으로 저장합니다.
참고: R은 빈 셀로 작업할 수 있기 때문에 워크시트를 서로 다른 길이의 열로 저장할 수 있습니다. R에서 제공하는 도움말 옵션을 사용하여 누락된 데이터를 처리합니다.
- 시작 R. 이전에 있던 파일에서 데이터를 가져옵니다.
- 확장 "와 프로그램 코드를 저장합니다. R"(보충 자료로 제공됨)은 하품이 정수 또는 소수로 기록되었는지 여부에 따라 특정 프로그램 코드(일반 가이드 참조)를 다운로드합니다. 쥐의 각 쌍과 시간 프레임의 원하는 수에 대한 프로그램을 실행합니다.
- 이제 각 쥐의 하품 수를 무작위로 분포하여 프로그램을 다시 실행합니다(일반 가이드 참조). 모든 실험 조건(예: 친숙하고 익숙하지 않은 쥐) 및/또는 모든 테스트 상황에 대해 동일한 단계(3.3단계 ~ 3.3.1단계)를 따릅니다. 일반 가이드에 표시된 대로 진행하고 결과를 Excel로 내보냅니다.
참고: 텍스트 편집기사용으로 위에서 제안한 대로 이전에 저장된 프로그램을 가져오는 대신 프로그램을 복사하여 R의 작업 영역에 직접 붙여넣습니다.
- 이제 각 쥐의 하품 수를 무작위로 분포하여 프로그램을 다시 실행합니다(일반 가이드 참조). 모든 실험 조건(예: 친숙하고 익숙하지 않은 쥐) 및/또는 모든 테스트 상황에 대해 동일한 단계(3.3단계 ~ 3.3.1단계)를 따릅니다. 일반 가이드에 표시된 대로 진행하고 결과를 Excel로 내보냅니다.
- 하품 전염 곡선을 만들려면 스프레드시트에 이전에 저장된 데이터를 사용합니다. 쥐, 시간 창 및 테스트 상황의 각 쌍에 대한 전염률에서 비 전염률을 뺍니다. 관찰된 데이터와 인위적(무작위로 분산된) 데이터의 분석을 분리합니다.
- 그런 다음 부트스트랩 프로시저를 사용하여 각 시간 창 및 테스트 상황에 대한 신뢰 구간(CI)을 계산합니다(일반 가이드 참조). 친숙하고 익숙하지 않은 쥐에 대한 분석을 분리합니다. 그런 다음 각 실험 조건에 대한 4가지 테스트 상황의 인공 데이터를 결합하고 부트스트랩 절차를 사용하여 각 시간 창에 대한 CI를 계산합니다.
- 그런 다음 각 테스트 상황 및 실험 조건에 대한 플롯을 작성합니다(그림 2 및 그림 3참조). 마지막으로, 테스트 상황 간의 하품 전염 강도를 비교하기 위해 다중 회귀 분석을 수행합니다(아래 참조).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
쥐는 빈번한 하품(시간당 약 22하품 31)을 위해 선택된 스프라그-다울리 쥐의이전에 생산된 서브라인으로부터 선택되었다. 그러나, 익숙하지 않은 9쌍의 익숙하지 않은 수컷 쥐(2.5~3개월 생후)는 시험 상황당 평균 18회, 시간당약 12회 하품을 하였다. 따라서 하품 전염을 측정하는 시험 상황은 하품 동작을 부분적으로 억제한다.
하품 전염은 1 내지 10분까지 의 다양한 시간 창을 통해 측정되었다. 도 2는 각 시간 창 및 시험 상황에 대한 전염 및 비전염 조건에서 익숙하지 않은 수컷 랫트 사이의 하품 비율의 평균 차이를 나타낸다. 이러한 하품 전염 곡선은 평균의 CI가 무작위로 할당 된 수의 CI와 겹치지 않기 때문에 OC 쥐 (천공, 불투명 분배자가있는 케이지에서)만 하품 전염을 보였으며, 시간 창 4 이후부터 는 하품 전염을 보였습니다. 60 분 동안 하품. 밴드는 예상대로 관찰 기간 동안 각 쥐의 하품 수를 무작위로 할당하면 명백한 패턴을 나타내지 않고 약 0으로 진동하는 하품 비율을 생성했다고 지적했다.
데이터에 장착된 다중 선형 회귀 모델은 4개의 테스트 상황으로부터의 곡선이 현저하게다르다는 것을 나타냈다(F1,3 = 11.5, p< 0.0001). 구체적으로, 하품 전염은 OC 쥐에서 보다 강했다: VC 쥐 (비천포, 명확한 분배기와 케이지에 쥐; t = -3.8, p < 0.001), VOC 쥐 (천공, 명확한 분배기와 케이지에 쥐; t = -5.74, p < 0.0001), 및 NVOC 래트 (비천포, 불투명 분배기와 케이지에 쥐; t = -2.64, p < 0.01). 모든 경우에, 자유도는 695이었다, 분석은 네 가지 테스트 상황뿐만 아니라 고려했기 때문에, 뿐만 아니라 10 시간 창. 이러한 조건이 자동 상관 측정을 생성함에 따라, 자기 상관 용어(ARMA, 자동 회귀 이동 평균)가 통계 모델에 추가되었습니다. 10시간 창에 대한 전체 추세도 0 경사(F1,1 = 11.99, p< 0.0001)와 통계적으로 달랐습니다. 도 3은 도2에서, 익숙한 수컷 랫트에 적용된 것과 동일한 분석을 나타낸다. 이 경우, 4개의 테스트 상황 중 어느 것도 그들의 CI가 무작위로 생성된 CI 대역과 중첩되어 하품 전염을 자극하지 않았다. 4개의 시험 상황(F1,3 = p = 0.14)에 차이가 없었다); 비록, 10 시간 창에 하품 전염의 전반적인 증가는 0 경사에서 달랐다 (F1,1 = 9, p < 0.01).
포유류의 사회 생활에서 olfaction의 역할은 OC 쥐만이 하품 전염을 보여주고 VC 쥐18보다더 자주 하품을 하는 이유가 될 수 있습니다. 알비노 쥐뿐만 아니라 비 알비노 쥐를 볼 수 없기 때문에 시각적 단서는 하품을 촉진하지 않을 수 있습니다. 그러나, VC 랫트는 빈케이지(18)옆의 관찰 케이지에 개별적으로 배치된 쥐의 그룹보다 두 배 나 많은 하품을 하였다. 이 발견은 하품의 사회적 특성을 확실하게 뒷받침하며 쥐의 하품 전염이 후각 신호에 의존한다는 것을 시사합니다. 그러나, 후자는 하품 전염에 관여하는 것으로 쥐의 쌍 사이 친숙도의 정도를 지원하고, 청각 단서는 하품 전염이 18발생되는 가능성이 채널이다.
전반적으로, 이들은 익숙하지 않은 쥐보다는 익숙한 하품을 보일 것이라는 예측에 따라 예기치 않은 결과입니다. 제시 된 결과는 긍정적 인 제어를 사용하지 않지만 (우리는 전염성 하품이 밀접하게 관련된 개인에서 관찰되는 데이터가 없습니다), 이 방법은 익숙하지 않은 쥐에서 전염성 하품에 대한 편견이 없는 것으로 여겨진다. 이러한 클레임을 지원하는 몇 가지 요소가 있습니다. 첫째, 친숙하고 익숙하지 않은 쥐는 하품18의평균 주파수에서 다르지 않았다; 따라서 여기에서 발견된 하품 전염의 차이는 하품을 얼마나 자주 했는지에 따라 달라지지 않는 것처럼 보였다. 둘째, 쥐 당 하품의 동일한 숫자가 관찰 기간에 무작위로 할당되었고, 이것은 어떤 그룹에서 하품 전염을 생성하지 않았다는 사실은 익숙하지 않은 쥐에서 전염성 하품의 발견을 더 강력하게 렌더링합니다. 마지막으로, 상호 상관 분석(동작의 동시 일치를 감지하기 위해)이 이전에 여기에 사용된 동일한 데이터 집합에18을 적용했으며 결과는 발견된 것과 일치합니다. 따라서 이 방법은 전염성 하품의 변화를 감지하고 측정할 수 있을 만큼 민감합니다.
또는 여기에서 발견된 것이 전염성 하품인지 의문을 제기할 수 있습니다. 이러한 우려는이 연구에만 국한되지 않습니다. 전염성 하품과 그 인과 관계가 우려를 불러 일으킨 두 가지 관점이 있습니다. 첫째, 공감은 양과 쥐와 같은 공감 및 / 또는 정신 상태 귀속 기술을 표시 할 것으로 예상되지 않는 종은 여전히 전염성 하품을 표시 할 수 있기 때문에, 전염성 하품18의근본적인 유일한 요인이 될 것으로 보인다. 둘째, 전염성 하품이라고 불리는 것이 그렇게 되지 않을 수 있다는 우려가 커지고 있습니다. 수십 년 동안 (소프, 1956; 이전에 인용10),전염성, 고정 관념 행동 패턴과 특히 전염성 하품 사회적 촉진의 표현으로 간주되었습니다. 최근에 는 Kapitány와 Nielsen25가 시뮬레이션 된 데이터를 사용하여 지각 패턴 인식 오류란 전염성 하품이라고 잘못 불릴 수 있다고 제안했습니다. 따라서 문제는 전염성 하품이 측정되는 방식이 아니라 정의되는 방식에 있을 수 있습니다.
요약하자면, 여기서 제안된 방법은 하품 전염을 검출하는데 유용하다. 또한 일부 감각 신호를 폐기하여 감각 큐의 수를 하나 또는 두 개로 줄이는 것이 유용합니다. 특정 예측을 테스트하기 위한 추가 실험은 한 감각의 효과를 다른 감각과 구별하는 데 필요합니다.
그림 1 : 전염성 하품을 측정하기 위한 관찰 설정의 개략적. 4개의 개별 케이지가 뒤집힌 T자형 테이블의 양쪽에 쌍으로 배열되었다. 각 쌍에서, 케이지는 사이에 아크릴 분배기와 서로 마주보고 있었다. 특정 테스트 상황은 케이지 사이의 칸막이에 구멍이 있는지 여부와 명확하거나 불투명한지 여부를 결정합니다. 캠코더는 하품 동작의 인스턴스를 기록하기 위해 전략적으로 배치되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2 : (A) 후각 큐, (B) 시각적 단서, (C) 후각 및 시각적 단서, (D) 시각 또는 후각 단서에 노출 된 익숙하지 않은 수컷 쥐 9 쌍에 대한 하품 전염 곡선. 각 원은 다른 쥐의 하품 전과 하품을 하지 않은 경우 와 같은 분 또는 분(시간 창)에서 하품한 쥐로부터 95% 신뢰 구간(CI)을 가진 하품 비율의 평균 차이를 나타낸다. 파선 위의 하품 비율 값은 하품 전염을 나타내고, 파선 아래의 값은 하품 전염이 아닌 값을 나타냅니다. 각 시간 창에서 포인트에 결합하는 실선은 각 쥐의 하품 수가 60분 관찰 기간에 무작위로 할당되었을 때 각 시간 창에서 하품 비율의 평균 차이를 나타내는 데 사용됩니다. 진한 회색 대역은 각 시간 윈도우에서 4개의 테스트 상황으로부터 임의의 데이터 세트를 결합하여 얻은 95% CI를 나타낸다(연속 음영은 도면의 해석을 용이하게 하기 위해 사용된다). 후각 큐에 노출된 한 쌍의 쥐는 하품된 쥐 중 어느 것도 분석에서 제거되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 3 : (A) 후각 큐, (C) 후각 및 시각적 단서에 노출 된 익숙한 수컷 쥐 9 쌍에 대한 하품 전염 곡선, (D) 시각적 또는 후각 큐. 각 원은 다른 쥐의 하품 전과 하품을 하지 않은 경우 와 같은 분 또는 분(시간 창)에서 하품한 쥐로부터 95% 신뢰 구간(CI)을 가진 하품 비율의 평균 차이를 나타낸다. 파선 위의 하품 비율 값은 하품 전염을 나타내고, 파선 아래의 값은 하품 전염이 아닌 값을 나타냅니다. 실선은 각 래트의 하품 수가 60분 관찰 기간에 무작위로 할당되었을 때 각 시간 창에서 하품 비율의 평균 차이를 나타낸다. 진한 회색 대역은 각 시간 창에서 4개의 테스트 상황에서 임의의 데이터 세트를 결합하여 얻은 95% CI를 나타낸다. 시각적 단서에 노출된 한 쌍의 쥐는 쥐 중 하나가 하품되지 않았기 때문에 분석에서 제거되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
성공적인 결과를 얻으려면 고려해야 할 메서드의 중요한 단계가 있습니다. 익숙한 쥐는 수박 후 실험을 실행하기 전에 적어도 1.5 개월 동안 홈 케이지를 공유해야합니다. 그러나, 익숙하지 않은 쥐는 별도의 홈 케이지에 살고 있어야합니다. 두 경우 모두, 쥐의 쌍은 다른 쓰레기에서 왔어야 하지만 가능한 한 나이에 유사 합니다. 관찰 케이지에 관해서는, 이 쥐 사이의 후각 접촉을 보장하는 유일한 방법이기 때문에, 그들의 구멍은 분배기의 그일치해야합니다. 반면에 칸막이는 시각적 접촉이나 불투명을 보장할 수 있을 만큼 충분히 명확해야 합니다. 쥐의 한 쌍과 다른 한 쌍의 나무 파티션은 한쪽에 쥐가 다른 쪽에있는 것을 보는 것을 방지하기에 충분해야합니다. 또 다른 중요한 측면은 실험의 적절한 디자인입니다. 프로세스가 편향될 수 있다는 의심이 있을 때마다 임의의 절차를 구현해야합니다 30.
이 방법은 사용자에게 심각한 문제를 제시해서는 안됩니다. 유리에 구멍을 만드는 것은 직면 한 주요 기술적 인 문제였고, 그 때문에 아크릴이 대신 사용되었습니다. 그럼에도 불구하고, 유리는 전문적인 조언을 얻을 경우, 전체 관찰 케이지를 만들기 위해 사용될 수있다. 쥐를 손상시킬 수있는 유리 파편을 피하기 위해 구멍의 가장자리가 제출되어 있는지 확인해야합니다. 그러나 주 메서드를 수정하는 것은 권장되지 않습니다(예: 구멍을 크게 만드는 경우). 추가적으로, 남성과 여성의 결합한 단의 사용은 하품 전염을 검출하는 것을 어렵게 만들 수 있습니다.
쥐가 관측 케이지와 칸막이의 재료가 차단되지 않은 주파수에서 소리를 생성하고 인식할 수 있기 때문에 여기에 사용되는 분배기는 쥐가 청각 신호를 사용하는 것을 막기에는 충분하지 않을 수 있습니다. 그러나, 이 상황 자체는 청각 단서가 하품 전염18을 일으키는 원인이 되고 후각 단서가 단지 파트너의 친숙도의 인식의 인식을 촉진했다는 것을 추론하는 것을 가능하게 합니다. 따라서 여기에 제안 된 방법은 여전히 전염성 하품과 그 강도에 관련된 감각을 식별하는 합리적인 증거를 제공합니다.
이전 방법은 주로 실험 개인12,13에비디오를 제시하여 실험실 조건에서전염성 하품을 연구하도록 설계되었지만, 이들은 생물학적 타당성면에서 의심스러운 접근법이었다. 여기에 제시된 방법은 실제 세계에서 발생하는 것과 더 유사한 조건에서 사회적으로 상호 작용하는 동물을 사용하여 이러한 문제를 해결합니다. 또한 단일 실험 설정에서 여러 감각 양식의 참여를 동시에 탐색할 수 있습니다. 이 방법은 청각 큐와 다른 감각 단서의 효과 를 절대적으로 구별하지 않는다는 것을 인식합니다. 그러나, 잘 디자인된 추가 실험은 연구원이 관련시킨 가장 확률이 높은 감각 양식18를추론하는 것을 허용할 수 있습니다. 한 가지 가능한 비침습적 해결책은 백색 잡음을 사용하여 소리를 가리고 청각 신호를 제거하는 것입니다. 유사하게, 연구원은 사회 촉진 연구 결과32에있는 입증된 절차인 후각 단서의 역할을 결정하기 위하여 OC 쥐에서 침구에 순진한 쥐를 드러을 수 있습니다.
이 방법의 사용은 다른 종의 하품 전염을 연구하기 위해 확장 될 수 있습니다. 예를 들어, 이 설정은 마우스및 햄스터와 같은 동물을 간단하게 수정한 후에 하품 전염 곡선을 비교하는 데 사용할 수 있습니다. 다른 종 간의 비교는 예기치 않은 패턴을 나타낼 수 있습니다. 기본 실험 계획은 기니 피그, 고양이 및 토끼와 같은 더 큰 동물과 함께 작동 할 수 있습니다. 마찬가지로, 이 방법은 그루밍 및 긁힘과 같은 잠재적으로 전염성이 있는 다른 행동을 연구하는 데 사용될 수 있습니다. R 기반 프로그램은 여러 시간 창에 대한 하품 전염을 계산하는 데 소요되는 시간을 줄일 수 있으며 사용자가 이전에 관련 데이터를 수집 한 경우 다른 척추 동물 종의 하품 전염을 측정하는 데 사용할 수 있습니다.
요약하면,이 방법의 주요 장점은 하품 전염 곡선을 획득하고 관련된 감각 양식의 상대적 역할 사이의 차별을 돕는 것입니다. 하품 전염 곡선의 취득은, 우리가 아는 한, 전염의 힘을 측정하고 이 강렬이 종 사이에서 어떻게 변화하는지 관찰하기 위하여 유용할 지도 모르다 새로운 접근입니다. 이에 따라, 상기 방법은 양16,늑대15,개33,뱀34,및 물고기5와같은 다른 동물 종에서 일부 변형과 함께 사용될 수 있다. 뱀을 제외한 모든 종에서 하품은 이전에 문서화되었습니다. 사실, 여기에 제시 된 것과 유사한 방법은 budgerigars27에서성공적으로 사용되었습니다. 이 방법은 또한 전염성이 있는 행동의 그밖 모형을 공부하기 위하여 이용될 수 있습니다. 예를 들어, 설치류에서 정서적 반응성, 손질 및 긁힘과 같은 행동은 전염성이 있을 수 있습니다. 사실, 여기에 제안 된 방법은 익숙한 쥐(18)에서전염성 감정적 반응성을 보였다.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
저자는 이해 상충을 선언하지 않습니다.
Acknowledgments
A. M. 부분적으로 비에르렉토리아 드 도센시아, 베네메리타 유니버시다드 아우토노마 드 푸에블라에 의해 투자되었다. 우리는 특히 촬영을위한 쥐의 사용에 대한 동물 시설 "클로드 버나드"의 직원에게 빚지고있다. 우리는이 원고의 초기 버전에 대한 자신의 의견에 대한 익명의 심판에게 감사드립니다. 프리젠 테이션은 사려 깊은 의견으로 인해 덜 성급하고 균형잡히지 않습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Acrylic dividers | Handcrafted | Not available | Two dividers, one clear and one opaque, will have 24 holes each. The other two dividers, one clear and one opaque, will have no holes. See the main text for details of construction. |
| An R-based program | Benemérita Universidad Autónoma de Puebla | Not available | This is the program used to assess yawn contagion in rats. See the main text for information about the way the program is used. |
| Data sheets | The user can elaborate them | Not available | These forms will be used for the observer to record the frequency of yawning behaviour by viewing the video recordings. Alternatively, a notebook can be use provided you follow the suggestions given in the main text. |
| Desktop computer | Any maker | Not available | Make sure the computer has a video card capable of conveniently processing the video recordings of yawning behaviour. |
| Digital camcorders | Any maker | Not available | They will be used to video record yawning behaviour of each pair of rats; there will be 2 pairs of rats per experimental session. |
| Flash drive | Any maker | Not available | Each experimental session will last 60 min, and so you will require sufficient memory to store the video recording. |
| Glass cages | Handcrafted | Not available | Each cage (19 X 19 X 10 cm height) will have 24 holes (0.5 cm diameter) forming three rows in the middle of one of its sides. See the main text for more details about their construction. It is recommended to fabricate one extra cage in case one of them is accidentally broken. |
| Markers | Sharpie or any other maker | Not available | Permanent markers to number the rats. See the main text to see one way of using painting symbols on the rat's tail. |
| Pencils | Any maker | Not available | They are used by the observer to record the frequency of yawning. It is important that the observer has previously been trained to recognize yawning behaviour and operate the video player system. |
| R software | R Development Core Team | Not available | Download R at: http://cran.r-project.org/ |
| Rail-like wooden bars | Handcrafted | Not available | They will be fixed in the middle of the rectangular wooden sheet forming a track, where a second wooden sheet is placed. See the main text for additional instructions for construction. |
| Rectangular table | Any maker | Not available | This is the table (approximately 2 x 1 m) where the inverted T-shaped table will be placed for performing the observation of yawning behaviour. |
| Sprague-Dawley male rats | Any local supplier of laboratory animals | Not available | Nine pairs of male rats per test situation are necessary for each group, familiar and unfamiliar rats, because with this sample size the interindividual variation that might exist in yawning frequency will not severely affect the conclusions drawn from the statistical analysis performed to the data. |
| Spreadsheet software | Microsoft | Not available | Excel will be the software used to store the yawning recordings initially recorded on the data sheets. Revise the main text for instructions about the recommended way of doing the transcription. |
| Square filter papers | Any maker | Not available | They are used for covering the cage's bottom. |
| Tripods | Any maker | Not available | They will be used for fixing the camcorders in front of each pair of observation cages. |
| Wooden Inverted T-shaped table | Handcrafted | Not available | Read the instructions in the main text to see the way of constructing it. If preferred, a different material to wood can be used. Make sure any material is as resistant as possible to the transmission of ultrasounds, which the rats might use for communication. |
References
- Cézilly, F. A. History of Behavioural Ecology. Behavioural Ecology. Danchin, E., Giraldeau, L. A., Cézilly, F. , Oxford University Press. 3-27 (2008).
- Medina, L. M., Garcia, C. M., Urbina, A. F., Manjarrez, J., Moyaho, A. Female vibration discourages male courtship behaviour in the Amarillo fish (Girardinichthys multiradiatus). Behavioural Processes. 100, 163-168 (2013).
- Mekdara, P. J., Schwalbe, M. A., Coughlin, L. L., Tytell, E. D. The effects of lateral line ablation and regeneration in schooling giant danios. Journal of Experimental Biology. 221 (8), 175166 (2018).
- Walusinski, O. Contagious Yawning. Encyclopedia of Animal Cognition. Vonk, J., Shackelford, T. K. , Springer Nature. Switzerland. 1-5 (2018).
- Baenninger, R. Some comparative aspects of yawning in Bettasplendens, Homosapiens, Pantheraleo, and Papio sphinx. Journal of Comparative Psychology. 101 (4), 349-354 (1987).
- Gallup, A. C., Church, A. M., Pelegrino, A. J. Yawn duration predicts brain weight and cortical neuron number in mammals. Biology Letters. 12, 20160545 (2016).
- Baenninger, R. On yawning and its functions. Psychonomic Bulletin and Review. 4 (2), 198-207 (1997).
- Anías, J., Holmgren, B., Urbá-Holmgren, R., Eguíbar, J. R. Circadian variation of yawning behavior. Acta Neurobiologiae Experimentalis. 44 (4), 179-186 (1984).
- Holmgren, B., et al. Food anticipatory yawning rhythm in the rat. Acta Neurobiologiae Experimentalis. 51 (3-4), 97-105 (1991).
- Byrne, R. W. The evolution of intelligence. Behaviour and Evolution. Slater, P. J. B., Halliday, T. R. , Cambridge University Press. Cambridge. 223-265 (1994).
- Provine, R. R. Yawning as a stereotyped action pattern and releasing stimulus. Ethology. 72 (2), 109-122 (1986).
- Provine, R. R. Faces as releasers of contagious yawning: An approach to face detection using normal human subjects. Bulletin of the Psychonomic Society. 27 (3), 211-214 (1989).
- Anderson, J. R., Myowa-Yamakoshi, M., Matsuzawa, T. Contagious yawning in chimpanzees. Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 271 (Suppl 6), S468-S470 (2004).
- Palagi, E., Leone, A., Mancini, G., Ferrari, P. F. Contagious yawning in gelada baboons as a possible expression of empathy. Proceedings of the National Academy of Sciences. 106 (46), 19262-19267 (2009).
- Romero, T., Ito, M., Saito, A., Hasegawa, T. Social modulation of contagious yawning in wolves. PLoS One. 9 (8), e105963 (2014).
- Yonezawa, T., Sato, K., Uchida, M., Matsuki, N., Yamazaki, A. Presence of contagious yawning in sheep. Animal Science Journal. 88 (1), 195-200 (2017).
- Miller, M. L., Gallup, A. C., Vogel, A. R., Vicario, S. M., Clark, A. B. Evidence for contagious behaviors in budgerigars (Melopsittacus undulatus): an observational study of yawning and stretching. Behavioral Process. 89 (3), 264-270 (2012).
- Moyaho, A., Rivas-Zamudio, X., Ugarte, A., Eguíbar, J. R., Valencia, J. Smell facilitates auditory contagious yawning in stranger rats. Animal Cognition. 18 (1), 279-290 (2015).
- Moyaho, A., Flores Urbina, A., Monjaraz Guzmán, E., Walusinski, O. Yawning: a cue and a signal. Heliyon. 3 (1), e00437 (2017).
- Gallup, A. C. Why do we yawn? Primitive versus derived features. Neuroscience&BiobehavioralReviews. 35, 765-769 (2011).
- Gallup, A. C., Clark, A. B. Commentary: Yawning, acute stressors, and arousal reduction in Nazca booby adults and nestlings. Frontiers in Psychology. 6, 1654 (2015).
- Fentress, J. C. Development of grooming in mice with amputated forelimbs. Science. 179 (4074), 704-705 (1973).
- Nicoletto, P. F. The roles of vision and the chemical senses in predatory behavior of the skink, Scincella lateralis. Journal of Herpetology. 19 (4), 487-491 (1985).
- Fehér, O., Wang, H., Saar, S., Mitra, P. P., Tchernichovski, O. De novo establishment of wild-type song culture in the zebra finch. Nature. 459 (7246), 564-568 (2009).
- Kapitány, R., Nielsen, M. Are yawns really contagious? A critique and quantification of yawn contagion. Adaptive Human Behavior Physiology. 3 (2), 134-155 (2017).
- Langford, D. J., et al. Social modulation of pain as evidence for empathy in mice. Science. 312 (5782), 1967-1970 (2006).
- Gallup, A. C., Swartwood, L., Militello, J., Sackett, S. Experimental evidence of contagious yawning in budgerigars (Melopsittacus undulatus). Animal Cognition. 18, 1051-1058 (2015).
- Campbell, M. W., de Waal, F. B. Methodological Problems in the Study of Contagious Yawning. The mystery of yawning in physiology and disease. Walusinski, O. , Karger Publishers. Basel. 120-127 (2010).
- R Development Core Team. R: A language and environment for statistical computing. , R Foundation for Statistical Computing. Vienna, Austria. http://www.R-project.org (2009).
- Moyaho, A., Beristain-Castillo, E. Experimental Design: Basic Concepts. Encyclopedia of Animal Behavior. Choe, J. C. 3, Second Edition, Academic Press. 471-479 (2019).
- Urbá-Holmgren, R., et al. Genotypic dependency of spontaneous yawning frequency in the rat. Behavioral Brain Research. 40 (1), 29-35 (1990).
- Smith, M. L., Hostetler, C. M., Heinricher, M. M., Ryabinin, A. E. Social transfer of pain in mice. Science Advances. 2, e1600855 (2016).
- Joly-Mascheroni, R. M., Senju, A., Shepherd, A. J. Dogs catch human yawns. Biology Letters. 4 (5), 446-448 (2008).
- Barthalmus, G. T., Zielinski, W. J. Xenopus skin mucus induces oral dyskinesias that promote escape from snakes. Pharmacology Biochemistry and Behavior. 30 (4), 957-959 (1988).
