Summary
Bu protokolün amacı, kuduz testi için tatmin edici doku örnekleri elde etmek için küçük ve büyük hayvanlarda güvenli Otopsi teknikleri göstermektir.
Abstract
New York Devlet Sağlık Bakanlığı (NYSDOH) kuduz Laboratuvarı her yıl 9.000 numuneleri 6.000 arasında alır ve New York dışında tüm devlet için kuduz testi gerçekleştirir. Kuduz Laboratuvarı, yarasalardan boporn 'a kadar olan çeşitli hayvanları otopsi. Bu numunelerin çoğu hayvan nörolojik işaretler sergileme, ancak, az 10% aslında kuduz için test pozitif; Bu semptomların nedeni olarak travma, lezyonlar veya diğer bulaşıcı ajanlar ima. Tanısı konulmamış bulaşıcı ajanlar aerosolizasyon riski nedeniyle, kuduz Laboratuvarı elektrik aleti veya testereleri kullanmaz. Kafatasları makas ile girilmez hayvanlar için üç Otopsi teknikleri sunulacak. Laboratuar, enfeksiyöz ajanlar için potansiyel maruz kalma azaltmak, numunenin gereksiz manipülasyon ortadan kaldırmak ve işlem süresini azaltmak için bu teknikleri uyguladı. Tercih edilen bir tekniğin diğerine karşı avantajları, numunenin eğitilmiş bireyin işlenmesine tabidir.
Introduction
Kuduz laboratuarının otopsi katında çalışmak doğal olarak tehlikelidir. Zaman zaman, numuneler gömülü kirpi quills, oklar/mermi/granül veya koruyucu nakliye Wrap nüfuz olabilir maruz kemik parçaları dahil yabancı nesneler ile gelir. Yanlış paketleme, numuneleri açmak isteyen bireyleri tehlikeye atarak sızıntıya neden olabilir. Fiziksel yaralanmalara ek olarak, otopsi teknisyenler CNS ve numunelerin vücut sıvılarından bilinmeyen zoonotik bulaşıcı ajanlar maruz risk. Ayrıca, numune tarafından taşınan Ektoparazitleri diğer zoonotik hastalıkları iletebilir, Pire ve keneler yaygın olarak sunulan hayvanların görülür. Coğrafi konuma ve türlere bağlı olarak maruz kalan hastalıklar farklılık gösterir. Doğu Equine Ensefalit virüsü (eeev) veya Batı Nil virüsü (WNV) gibi arbovirüsler, Lyme hastalığı veya Tularemi de dahil olmak üzere kene kaynaklı hastalıklar, Q ateşi veya tüberküloz neden bakteri, ve bulaşıcı prionlar olası tehlikeleri az sayıda isim1 , 2 , 3' ü yapın.
Bu yöntemlerin amacı, elektrikli aletlerin veya testere4,5' in aksine aerosolizasyon potansiyelini en aza indiren enstrümanları kullanarak güvenli ve verimli nekropsy teknikleri göstermektir. Genellikle, kuduz laboratuarında küçük hayvanların Nekropsi kranial kaslar uzağa kesme ve bir çekiç kullanarak ve kalvarium6kaudal dorsal kısmını açmak için kesmeli gerektirir. Kalvarium bu alanın çıkarılması arka beyin ortaya çıkarır, tüm beyinli ve kranial beyin kökü de dahil olmak üzere. Değiştirilmiş Otopsi teknikleri kafatası ventral kısmında yapılabilir, büyük kranial kaslar ve kafatası kalın bölgelerden kaçınarak. Ancak, bu değiştirilmiş Otopsi teknikleri sadece numune servikal vertebra olmadan mümkündür.
Benzer şekilde, büyük hayvanlarda beyin dokusu kafatası kasları ayırarak ve kafatasının kaudal dorsal kısmını açarak kaldırılabilir7. Büyük hayvanların kafatasları genellikle kalın olarak beyinli ve beyin kökü açığa çıkarmak için önemli çaba gereklidir. Kafatasının nüfuz edilmesini önlemek için, büyük bir hayvanın kafası, kafatasının Ventro-caudal kısmı teknisyene bakacak şekilde konumlandırılır. Modifiye enstrümanları kullanarak, serebellum ve beyin kökü foramen magnum üzerinden kaldırılır. Bu, TSE Avrupa Birliği referans laboratuvarı tarafından önerilen, Trans, Spongiform ensefalopati (TSE) araştırmaları için tavsiye edilen örnek edinme yöntemine benzerdir8. Cranial vertebra önceden foramen magnum erişim sağlamak için kaldırılmalıdır.
Bu tekniklerin uygulanması, kuduz laboratuvarlarında uygun şekilde eğitimli teknisyenler için faydalıdır. Kuduz laboratuvarı çeşitli boyutlarda örnekler aldığında, juvenil yarasalar yetişkin taslak atlar9, teknisyen bireysel koşula göre seçim için çeşitli yöntemler vardır. Büyük bir hayvan için gösterilen yöntem, alanda otopsi gerçekleştiren veterinerler için de uygundur, çünkü kuduz testi için tüm büyük bir hayvan kafası nakliye hantal ve pahalıdır. Bu tekniklerden herhangi birini uygulamak, aerosol üretiminin potansiyelini azaltarak, numunenin işlenmesini azaltarak ve işlem süresini tasarruf ederek güvenliği artıracaktır. Ancak, alanda kuduz testi için özel olarak ayarlanan bir laboratuar ile aynı avantajlara sahip olmadığı için, bu prosedürlerde yapılan değişikliklerin özellikle kişisel koruyucu ekipmanların (PPE) kullanımı güvenlik üzerine odaklanmasını gereklidir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Açıklanan tüm yöntemler Wadsworth Center kurumsal hayvan bakımı ve kullanım Komitesi (ıAYUC) tarafından onaylanmıştır.
1. hazırlık
- Don PPE, minimum göz koruması (gözlük veya yüz kalkanı), cerrahi veya N-95 maske ve lateks içermeyen eldivenler.
- Tek kullanımlık çalışma yüzeyi (örn. Kraft kağıt veya emici pedler) ve temiz Otopsi aletleri (Şekil 1) ile, ideal olarak bir bio-güvenlik dolabı (BSc), çalışma alanı hazırlayın.
- Numunenin çalışma yüzeyine yerleştirin ve dekompasyonu, kafatası hasarı, olası tehlikeleri (örneğin, kirpi quills, neşter bıçakları) ve kırılma kalitesi de dahil olmak üzere numunenin durumunu değerlendirmek için araçları kullanın.
2. ventral Yöntem
Not: örnek düzgün çene hattı, foramen magnum ve oksipital kondyle açık olacak dekolçlama olduğunda. Ventral yöntemi, beyinli ve beyin kökü almak için daha az karmaşıktır.
- Örnekten ventral yan yukarı ve burun BSC arka doğru distale yönlendirme ile konumlandırın.
- Bir ortopedik çekiç/Mallet sağ elle (sağ el) ve aynı zamanda bir meclis üyesi sol elinde kesmeli tutun tutun.
- Bir "V" açılış yapma temporal kemik ve oksipital kemik sağ tarafı arasında yönlendirmenin köşe noktası ile 45 ° açı kesikli konumlandırın.
- İki kemik ayrı kadar çekiç ile kesikli üst grev. Basisphenoid kemiğinin bitişiğinde kesim yapın.
- Temporal kemik/oksipital kemiğin sol tarafında tekrar edin (Şekil 2a).
- Kafatasının "V" alanını keskiyle aşağı doğru bend. Beynin tüm rhombencephalon alanını (serebellum ve beyin kökü) açığa çıkarır (Şekil 2B).
- Beyin sapı ve beyinli makas ve forseps ile dışarı Scoop. Beyin kökü ve serebellum tek bir parça içinde çıkmadı Eğer kafatası kalan tüm parçaları çıkarın.
3. dorsal yöntemi
Not: numune (foramen magnum görünmez) kötü bir debelitasyon varsa ve boyun kolayca otopsi sırasında kaldırılamaz veya beyine zarar şüpheleniyorsanız, dorsal yöntemi kullanılmalıdır.
- Numunenin burun ile dorsal, BSC arka doğru distale yönlendirerek konumlandırın.
- Tümör tenacula kullanarak, tenacula dişleri ile sol temporal kas kavramak ve kolu sıkarak kilit.
- Keskin oyma bıçağı ile kemik aşağı temporal kas kes.
- Numune 180 ° ' yi tenacula ve bıçakla döndürün (el değil) ve ters temporal kas üzerinde işlemi tekrarlayın. Kafatasını açığa çıkarın.
- Parietal ve intraparietal kemik kavşakında kafatası ortasına kesenin köşe noktası ile 45 ° açı bir kesikli konumlandırın.
- Parietal kemik kafatası üst yarısında yatay bir açılış yapılıncaya kadar bir çekiç ile kesin üst grev.
- Numuneyi 180 ° döndürün ve işlemi ters tarafta tekrarlayın.
- Kesim 1 ' in sonuna (Şekil 3A) ve 90 ° ' lik yatay açılarak kesin noktasını yerleştirin. Açılış Oksipital kemiğe ulaşana kadar çekiç ile grev (numunenin boyutuna bağlı olarak yaklaşık 10 cm).
- Numuneyi yuvarlayın ve kesme 2 ' nin sonundaki ters tarafta tekrarlayın.
Not: BSC 'nin arkasına doğru yerleştirilmiş numune dorsal ve burun Ile kafatasındaki açıklıklar bir baş aşağı "U" benzer. - "U" altındaki kafatası içine tenacula dişleri takın ve kendini doğru burnumu. Beyin ve serebellum (Şekil 3B) kaudal ucunu açığa çıkarın.
- Bir kepçe olarak makas kullanın ve boşluğun içinden tüm serebellum dışarı burnumu.
- Foramen beyin kök kızdırmak için doku forseps kullanın.
4. büyük hayvan yöntemi
- Numuneyi, kafatasının dorsal kısmının, kafatası ve foramen magnum 'un teknisyene bakan kaudal kısmı ile otopsi yüzeyi ile temas etmesi için konumlandırın.
- Değiştirilmiş Stiletto bıçağı omurilik ve spinal meningler arasında mümkün olduğunca foramen magnum içine yerleştirin.
- Spinal meninges serebellum ve beyin kökü ayırmak için omurilik etrafında puan. Bıçak foramen magnum aracılığıyla yerleştirildikten sonra, yavaşça kafatası boyunca takip etmek için bıçak açı mümkün olduğunca.
- Nöral doku ve spinal meningler arasındaki uzaya bir kimya spatula veya ince, uzun işlenmiş kaşık yerleştirin.
- Spinal menenjlerin bağlantı sağlamak için omurilik ve beyine etrafında prob kesilmiş olmuştur.
- Beyin sapı forseps ile tutun. Öte yandan, kaşık rostrally sonra dorsal serebellum kadar toplamak için ilerlemek. Aynı anda forseps ile beyin kökünü geri çekin ve kaşık kullanarak serebellum dışarı kepçe.
Not: kuduz testi için yeterli serebellum kurtarmak için birden fazla girişimde bulunabilir.
5. Post nekropsy
- Tüm tek kullanımlık malzemelerin (eldiven, pedler, çalışma alanı kaplamaları) ve kullanılmayan dokularda biyotehlikeli atıkların atılması.
- Tüm enstrümanları (örn. Endüstriyel Bulaşık makinesi, otoklav, kimyasal dezenfektan, kaynatma) kullanılabilir yöntemle temizleyin ve dezenfekte edin.
- % 20 çamaşır suyu ve/veya% 70 etanol ile tüm çalışma yüzeylerini temizleyin ve dezenfekte edin.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
31 Ocak 2019 ve 28 Şubat 2019 tarihleri arasında kafatası ile gönderilen tüm karasal numuneler, bir boyun varlığı ve toplanan otopsi yöntemi ile ilgili bilgiler vardı. Bu süre zarfında 170 kafaları temsil edilen 18 tür ile necropsied edildi. 52% (89/170) düzgün bir şekilde çökmemiş. Kalan üç tüm vücut örnekleri dahil olmak üzere en az bir vertebra bağlı vardı. % 75 (128/170) kullanılan ventral Yöntem, o zaman, bu boynları, 49 tarihinde mevcuttu. Bir boyun ile gönderilen numuneler mümkün olduğunda ventral yönteme izin vermek için otopsi sırasında kaldırılacaktır. Üç büyük hayvan (sığır, geyik, domuz) gönderildi ve iki olguda büyük hayvan Protokolü kullanıldı. Ek test için ekstra beyin dokusu örnekleri gerekli olduğu için büyük hayvan Protokolü domuz üzerinde kullanılmadı. Bir sincap bir ezilmiş kafatası ile gönderildi ve sadece cilt maruz beyin dokusu uzakta kesme, böylece yukarıdaki yöntemlerden hiçbiri kullanılmış (Tablo 1).
Taze bozulmamış gönderimler, her üç yöntem güvenilir kuduz tanılama test sonuçları için gerekli doku ile sonuçlanır. Bazen, serebellum ve beyin kökü bozulmamış kaldırılamaz, ancak bu dokulardan tüm doku kaldırıldıktan sonra bu dokular tespit edilebilir ve buna göre işlenir.
Bu üç değerli Yöntem, laboratuvarda alınmadan önce neden olan kötü numune kalitesini telafi edemez. Travma, debileşim ve kötü dekomapitasyon yöntemleri, numunelerin ne kadar verimli bir şekilde toplanıp sonuçlanmasına bakılmaksızın sonucu etkileyebilir.
Şekil 1: kuduz nekropinde kullanılan aletler. Kavisli keskin-künt Mayo makas, diş olmadan düz uçlu doku soyunma forseps, Meclis üyesi ortopedik kemik kesiği, ortopedik Mallet-çekiç, kilitleme tümör-tenacula, Restoran-kalite oyma bıçak, modifiye stiletto bıçak, kimya kaşık, ve Keskinleştirilmiş çorba kaşığı. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.
Şekil 2: Necropsy ventral yöntemi. (A) kesimlerin konumu: ok tabanında bir kesin yer noktası, yeşil ok yönünde kesilmiş ve foramen magnum etrafında bir "V" oluşturan sarı ok sonra tekrarlayın. Beyin kökü ve serebellumu açığa çıkarmak için "V" aşağı. (B) beyin kökü (yeşil) ve serebellum (mavi) Necropsy ventral yöntemi kullanılarak maruz kaldığında. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.
Şekil 3: dorsal Necropsy yöntemi. (A) kesimlerin konumu: ok tabanında bir kesin yer noktası ve sırayla ok yönünde kesilmiş bir "U" oluşturan kaydetti. "U" aşağı beyin kökü ile beyinli ortaya çıkarmak için aşağı. (B) dorsal yöntemi kullanılarak maruz kaldığında serebellum (Daire). Beyin kökü doğrudan altında yatıyor ve serebellum kaldırılıncaya kadar görünmez. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.
| Tür | vertebra bağlı | kullanılan yöntem V = ventral, D = dorsal, LA = büyük hayvan | Toplam | Yorum |
| Ayı | No | V | 2 | |
| Kedi | No | V | 32 | |
| Kedi | No | D | 3 | 2 yeterli makas ile kafatası açmak için küçük, 1 kafatası üst açığa inceleniyor olduğunu abur vardı |
| Kedi | Evet | V | 11 | |
| Kedi | Evet | D | 8 | |
| No | La | 1 | ||
| No | V | 1 | ||
| Evet | V | 2 | ||
| Evet | D | 3 | ||
| Geyik | No | La | 1 | |
| Köpek | No | V | 19 | |
| Köpek | No | D | 3 | |
| Köpek | Evet | V | 2 | 1 küçük köpek oldu |
| Köpek | Evet | D | 18 | |
| Gelincik | No | V | 1 | |
| Fisher | No | V | 1 | |
| uçan sincap | Evet | D | 1 | Tüm vücut |
| gri tilki | No | V | 2 | |
| gri tilki | Evet | V | 4 | |
| Domuz | Evet | V | 1 | |
| Kirpi | No | V | 1 | |
| Rakun | No | V | 16 | |
| Rakun | No | D | 1 | Dondurulmuş |
| Rakun | Evet | V | 26 | |
| kırmızı tilki | No | V | 2 | |
| Skunk | No | V | 1 | |
| Skunk | Evet | V | 3 | |
| Sin -cap | No | V | 1 | |
| Sin -cap | Evet | D | 1 | tam vücut, ezilmiş kafatası, kullanılmış makas maruz beyin boşluğu cilt kesmek için |
| Weasle | No | D | 1 | |
| Woodchuck | Evet | D | 1 | Tüm vücut |
| Toplam | 170 | |||
| Toplam dökümü | ||||
| boyun ile | 81 | |||
| hiçbir boyun | 89 | |||
| ventral Yöntem | 128 | |||
| dorsal yöntemi | 39 | |||
| büyük hayvan yöntemi | 2 | |||
| diğer Yöntem | 1 | |||
| boyun ile ventral Yöntem | 49 |
Tablo 1:31 Ocak 2019 Şubat 'tan itibaren New York devlet sağlık kuduz Laboratuvarı 'nda 2019 Ekim 'den gelen kafatası dokusu çıkarılması gerektiren numunelerin dökümü.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Kuduz otopsi için gönderilen numuneler genellikle nörolojik bir hastalıktır ile uyumlu klinik belirtiler öyküsü vardır. Klinik hastalığın varlığı, Zoonotik hastalıklar da dahil olmak üzere çeşitli bozukluklar ile ilişkili olabilir, bir laboratuar personeli için risk artan enfeksiyon elde. Bu riskleri azaltmak için, numunelerin işlenmesi ve manipülasyonunu azaltan teknikler uygulanmaktadır.
Gösterilen Yöntemler sadece tek bir hayvandan istenen dokulardan kaldırmak için bir otopsi olay temsil eder. Daha yaygın olarak birden fazla numune bir vardiya işlenir ve örnekleri arasında çapraz kontaminasyon sağlamak için bakım gereklidir. Temiz bir çalışma yüzeyi (tek kullanımlık Kraft kağıt veya pedler), yeni bir set temiz, dezenfekte edilen aletler ve eldiven değişiklikleri zorunludur. Dokular elde edildikten sonra, mikroskopiye veya RNA ekstraksiyonu için moleküler yöntemler için slaytlar yapmak da dahil olmak üzere, bireysel laboratuar işleme protokolü takip edilebilir.
Bu teknikleri laboratuar veya alanda başarıyla uygulamak için birkaç temel önkoşul vardır. Önceki kuduz aşısı ve PPE, kuduz şüphelisi hayvanı olan herkes için kritik öneme sahiptir. Kuduz laboratuvarlarında çalışan bireyler, altı ayda bir anti-kuduz antikorlarının yeterli seviyede olmasını sağlamak için serum test edilmelidir10. Eeev, WNV ve sığır Spongiform ensefalopati (BSE) gibi diğer zoonotik hastalıkların, kuduz olarak benzer işaretler sunabileceği ve kuduz şüpheli hayvanların11,12' de de ortaya çıkabilecek olduğunu hatırlamak önemlidir.
Uygun bakımlı enstrümanlar güvenli bir şekilde Necropsy gerçekleştirmek için esastır. Bir numune biyolojik tehlike çantasından çıkarıldıktan sonra, kazaların potansiyelini azaltmak için sadece eller değil, enstrümanlar ile manipüle edilmelidir. Küçük hayvan Necropsy önce, teknisyen kafatası tabanına tercih edilen ventral yaklaşım mümkün olup olmadığını belirlemek için numunenin durumunu değerlendirmek gerekir. Büyük hayvanlar ile ek vertebra foramen magnum aracılığıyla doku almadan önce kaldırılması gerekebilir gibi tam olarak numunenin durumunu değerlendirmek için çok hantal olabilir.
Sınırlamalar, numune durumu, doku kalitesi ve kalan servikal vertebra miktarı dahil olmak üzere tüm nekropsy tekniklerde kendilerini sunar. Servikal vertebralar, kuduz analizinin sonuçlarını etkilemez, ancak ciddi derecede deforme olmuş doku, tatmin edici olmayan sonuçlara neden olabilir. Kuduz teşhis daha hassas moleküler Yöntemler doğrudan floresan antikor Assay (DFA) tarafından test edilemedi belirli örneklerde başarılı test izin verebilir, ciddi deforme numuneler dahil13. Ancak, hiçbir hassasiyet uygun doku örnekleme ihtiyacını değiştirebilir.
Kuduz laboratuarında yaygın bir sorun, alanda büyük hayvan otopsi yapıldığında test için uygunsuz veya yetersiz beyin dokusu alıyor. Gerekli doku olmadan, ve ek dokular resubmission için kullanılamaz ise, bizim kuduz Laboratuvarı mevcut doku üzerinde test yapacak ama numune negatif doğrulamak mümkün değildir, bunun yerine test için tatmin edici değildir. Saman yöntemi veya Retro orbital Route14gibi alan dokusu koleksiyonları için diğer yayımlanan yöntemler vardır. Her iki yöntem kafatası açmak için gerek kalmadan beyin dokusu toplamak. Bir saman veya tek kullanımlık pipet foramen magnum ya da göz yuvasına oluşturulan bir delik ya da eklenir ve beyin üzerinden itti, temelde bir çekirdek örnek alarak ve mutlaka beyin kökü tam kesit örnekleme değil. Bu alan yöntemleri, laboratuvarımızda test etmek için tatmin edici bir şekilde numune toplamadığı için, bu süreçler Bu yazıda gösterilmiyor veya incelenmez.
Alanda büyük hayvan otopsi kuduz testi için doğru doku kaldırmak için eğitimli olmayan bireyler için zor olabilir. Bunun yerine, 20-45 kg arasında tartmak hayvan, tüm başkanı hem alan veteriner ve kuduz Laboratuar teknisyenleri için hantal ulaşım oluşturarak gönderilir. Laboratuvarımızda büyük hayvan otopsi tekniği üzerine eğitim için sıkça yapılan istekler yapılmıştır. Bu makalenin amacı, bu bilgileri, çalışmalarını bu tekniklerden yararlanabilir bireyler ve gruplara dağıtmaktır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarların ifşa etmesi gereken hiçbir şey yok.
Acknowledgments
Biz bu projeyi desteklemek için sağlık Wadsworth Center New York Eyalet Bakanlığı minnettar. Biz de Amy Willsey ve Frank Blaisdell bölümü sağlık Wadsworth merkezi ve LL Ranch, Altamont, NY destek kabul etmek istiyorum.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Chemistry spoon | Any | ||
| Curved, sharp-blunt mayo scissors | Sklar | 14-2055 | Sklar Operating Scissors 5-1/2 Inch Premium OR Grade Stainless Steel Finger Ring Handle Curved Sharp/Blunt |
| Large sharp restaurant-quality carving knife | Dexter | P94848 | 8" Scalloped Utility Knife, white handle |
| Locking tumor-tenacula | Diamond Scientific and Surgicals | N/A | Czerny Tenaculum Forcep |
| Modified stiletto knife (6.5 inch long blade carving knife ground to 0.5 inch wide) | Dexter | P94848 | Modified 8" Scalloped Utility Knife, white handle |
| Orthopedic mallet-hammer | Mortech | N/A | Postmortem hammer with hook |
| Sharp councilman orthopedic bone chisel | Shandon | 60-5 | Councilman's Chisel Blade: 2 in x 2.25 in standard 7 in |
| Sharpened tablespoon or other long handled spoon | Any | ||
| Smooth-tipped tissue dressing forceps without teeth | Shandon | 63-03 | Shandon Broad Point Dressing Thumb Forceps |
| Powder-free non-latex gloves | Any | ||
| Safety glasses, goggles, or faceshield | Any | ||
| Surgery or N-95 mask | Any | ||
| Kraft paper, butcher paper, absorbent pad, etc | Any |
References
- Centers for Disease Control and Prevention (CDC). West Nile virus activity - United States, 2009. MMWR Morbidity and Mortality Weekly Report. 59 (25), 769-772 (2010).
- McDaniel, C. J., Cardwell, D. M., Moeller, R. B. Jr, Gray, G. C. Humans and cattle: A review of bovine zoonoses. Vector Borne and Zoonotic Diseases. 14 (1), 1-19 (2014).
- Spickler, A. R. Zoonotic diseases. Merck Veterinary Manual. , Available from: https://www.merckvetmanual.com/public-health/zoonoses/zoonotic-diseases (2019).
- Wenner, L., Pauli, U., Summermatter, K., Gantenbein, H., Vidondo, B., Posthaus, H. Aerosol generation during bone-sawing procedures in veterinary autopsies. Veterinary Pathology. 54 (3), 425-436 (2017).
- Green, F. H. Y., Yoshida, K. Characteristics of aerosols generated during autopsy procedures and their potential role as carriers of infectious agents. Applied Occupational and Environmental Hygiene. 5 (12), 853-858 (1990).
- Barrat, J. Simple technique for the collection and shipment of brain specimens for rabies diagnosis. Laboratory techniques in Rabies 4th Edition. Meslin, F. X., Kaplan, M. M., Koprowski, H. , World Health Organization. 425-427 (1996).
- Ness, S. L., Bain, F. T. How to perform an equine field necropsy. American Association of Equine Practitioners. 55, 313-316 (2009).
- Animal & Plant Health Agency. Sample requirements for TSE testing and confirmation – EURL guidance. , Available from: https://protect2.fireeye.com/url?k=09f00f8d-55d40ec4-09f2f6b8-0cc47aa8d394-3f805f032cc98df8&u=https://science.vla.gov.uk/tse-lab-net/documents/tse-oie-rl-samp.pdf (2019).
- New York State Department of Health, Wadsworth Center. Rabies reports. , Available from: https://www.wadsworth.org/programs/id/rabies/reports (2019).
- CDC. Protocol for postmortem diagnosis of rabies in animals by direct fluorescent antibody testing: A minimum standard for rabies diagnosis in the United States. , Available from: https://www.cdc.gov/rabies/pdf/rabiesdfaspv2.pdf (2019).
- Miller, L. D., Davis, A. J., Jenny, A. L., Fekadu, M., Whitfield, S. G. Surveillance for lesions of bovine spongiform encephalopathy in U.S. cattle. Developments in Biological Standardizations. 80, 119-121 (1993).
- Andrews, C., Gerdin, J., Patterson, J., Buckles, E. L., Fitzgerald, S. D. Eastern equine encephalitis in puppies in Michigan and New York states. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. 30 (4), 633-636 (2018).
- Appler, K., Brunt, S., Jarvis, J. A., Davis, A. D. Clarifying indeterminate results on the rabies direct fluorescent antibody test using real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction. Public Health Reports. 134 (1), 57-62 (2019).
- Chapter 7. Brain removal. Laboratory techniques in Rabies 5th Edition. Rupprecht, C. E., Fooks, A. R., Abela-Ridder, B. , World Health Organization. 67-72 (2018).
