Summary
Burada, Yetişkin, erkek Wistar fareler içinde lateral sıvı perküsyon hasarı (FPı) modeli ile şiddetli TBı teşvik etmek için bir protokol sunuyoruz. Ayrıca, sürekli video-EEG kayıtlarını toplamak ve travma sonrası epileptogenesis ile tutarlı epileptiform deşarj için monitör kullanmak üzere bir kablosuz telemetri sisteminin kullanımını da gösteriyoruz.
Abstract
Lateral sıvı perküsyon hasarı (FPı) modeli iyi kurulmuştur ve TBı ve post-travmatik epilepsi (PTE) çalışması için kullanılmıştır. Bununla birlikte, bu modeli kullanan farklı çalışmalarda kullanılan belirli parametreler için önemli değişkenlik bildirilmiştir, bu nedenle laboratuvarlar arasındaki sonuçları uyumlu hale getirmek ve yorumlamak zordur. Örneğin, Kraniyektomi boyutu ve konumu ile ilgili değişkenlik bildirilmiştir, luer kilit hub Kraniyektomi göreli olarak nasıl yerleştirildiğini, dura için uygulanan atmosferik basınç ve basınç nabız süresi. Bu parametrelerin her biri, doğrudan PTE 'nin insidansı ile ilişkilendiren yaralanma şiddetini etkileyebilir. Bu, çok çeşitli mortalite oranları, refleks süreleri ve konvülsif nöbetlerin görülme sıklığı olarak ortaya çıkmaktadır. Burada çalışmalar arasında uyumlaşma kolaylaştırmak için kullanılan yöntem için ayrıntılı bir protokol sunuyoruz. Elektrografik değişiklikleri sürekli olarak izlemek ve nöbet aktivitesini tespit etmek için kablosuz EEG telemetri sistemi ile birlikte FPı kullandık. FPı, sol Yarımküre üzerinde, bregma ile Lambda arasında ve lateral sırtın bitişiğinde 5 mm 'lik Kraniyektomi oluşturarak indüklenir. Bir luer kilit Merkezi, Kraniyektomi üzerine kafatasına sabitlenir. Bu hub FPı cihazına bağlanır ve 20 milisaniyelik basınç nabzı, bir büküm kilidi konnektörü üzerinden hub 'a bağlı basınç tüpünden doğrudan sağlam dura 'ya teslim edilir. Kurtarma sonrasında, fareler hub kaldırmak için yeniden anestezize edilir. Beş 0,5 mm, paslanmaz çelik EEG elektrot vidaları kafatasından dura ile temas yerleştirilir ve dört kayıt elektrotları ve bir referans elektrot olarak hizmet vermektedir. Elektrot telleri, kemik çimento ile yerine sabitlendiği bir kaide konektörüne toplanır. TBı sonrası 4 hafta boyunca sürekli video/EEG kayıtları toplanır.
Introduction
2015, Kongre 'ye yapılan bir rapora göre, hastalık kontrol merkezleri, yılda yaklaşık 2.500.000 kişi, ABD 'de travmatik beyin hasarı (TBı) muzdarip olduğunu bildirdi1. TBI 'ın semptomatik epilepsilerin% 20 ' sini ve tüm epilepsilerin% 5 ' i2,3,4' ün neden olduğu tahmin edilmektedir. Ayrıca TBı hastalarının yaklaşık% 20 ' si travma sonrası epilepsi5' i geliştirir. Daha da önemlisi, TBı 'ın bir sonucu olarak oluşan kronik, tekrarlayan nöbetler genellikle farmakoresisttir, hastalığın yükünü arttırmaktadır6. Travma sonrası epilepsi (PTE) ' ye yol açan mekanizmalar belirsiz kalır. Ancak, birkaç anahtar Epidemiyoloji çalışmaları, travma sonrası epilepsi (PTE)2,4,7,8,9 gelişme riskini ve potansiyel risklerini inceledi ,10,11. Bu Epidemiyoloji çalışmaları epileptogenesis riski ile yaralanma şiddetinin korelasyonunu güçlendirdi.
Yeni Anti-epilepsi terapileri tanımlamak için yaygın olarak kullanılan mevcut yöntemler, epilepsi12' ye sebep olmak için kemoterapi-konvülkerler veya elektrik çıra kullanan modellerde yoğun olarak kullanılırlar. TBı hastaları tarafından bu modellerde geliştirilen ilaçların farmako-direncinin yüksek insidansı göz önüne alındığında, TBı kaynaklı nöbetlerin kemokonvülsan veya Kindling kaynaklı nöbetlerden farklı olabilir ve farklı yollar veya süreçleri içerebilir epileptogenez. Bu nedenle, bir TBı modeli daha fazla travma sonrası epileptogenesis önlemek için daha etkili tedaviler gelişimi için uygun olabilir.
Tbi 'nin sıvı perküsyon hasarı (FPI) modeli yıllardır kullanılmıştır ve TBI ve PTE 'yi araştırmak için iyi kurulan bir yöntemdir13,14,15,16,17, 18. ancak, son zamanlarda gözden geçirildiği gibi, laboratuarları arasında bildirilen FPI yöntemleri değişkenlik yüksek derecede vardır19,20. Laboratuvarlar arasında bu tutarlılık eksikliği preklinik bulguların yeniden üretilebilirliği önler ve sonuçların yorumu bir meydan okuma yapar. Sonuç olarak, bu tür çalışmalar için daha fazla uyum kurulması yönünde artan faiz ve çabaları uygulandı21,22,23,24.
Travma sonrası epileptogenesis eğitimi konusunda odaklı laboratuvarlar arasındaki tutarlılığı ve uyumsuzluk daha da artırmak için, burada yaklaşımımızın ayrıntılı bir metodolojisi sunuyoruz. Daha önce, şiddetli TBı20' den altı hafta sonra% 60 ' lık Konvülsif nöbet sıklığı bildirdik. Şimdi yaralanma gününde başlayan fareler izlemek için bu yaklaşımı kullanın ve sürekli onları takip 24 saat kadar 4 hafta. Biz çeşitli avantajlar karşılıyor bir kablosuz telemetri sistemi kullanmayı seçtiniz. İlk olarak, fareler serbestçe kendi kafesi hakkında hareket edebiliyoruz, ve böylece stres azaltır. İkinci olarak sinyal gürültüsüne bir azalma sıçan zemin olarak hizmet vermektedir. Ayrıca, mevcut sistemimiz her üç düzlemde (X, Y ve Z) hızlı hareket algılayan ve Konvülsif nöbet olaylarını belirlemek için yararlı olabilir bir ivmeölçer kullanır. Son olarak, kablosuz telemetri sistemi ek tuz enjeksiyonları gibi fareler daha kolay yönetimi için izin verir, tartım ve sinir şiddeti puanları yürütmek, fareler bir Tether bağlı olduğunda karmaşık. Ancak, bu yaklaşım da çeşitli sınırlamalar vardır. İlk olarak, bir sistemin ilk maliyeti aynı anda sekiz fareler kadar kayıt $60.000 aralığında olabilir. İkincisi, güç bir pil kaynağı ile sınırlıdır. Bu da piller için günlük izleme ve değiştirme gerektirir. Pil değişiklikleri arasında gereken süre örnekleme hızından etkilenebilir. Ancak, 1000 Hz örnekleme hızı için, piller genellikle haftada bir kez değiştirilir. Sınırlı güç kaynağı aynı zamanda sistemi yalnızca dört EEG sinyalinden kayıt için kısıtlar. Son olarak, sinyal bırakma sınırlıdır ancak bazen oluşur. Ancak, bu yaklaşım, travma sonrası epileptogenez izlemek için tutarlı ve güvenilir bir yöntem sağlar ve yeni terapötik tedavilerin tanımlanması yardımcı olabilir.
Protocol
Tüm prosedürler, Buffalo kurumsal hayvan bakımı ve kullanım komitesinde üniversite 'nin kurallarına göre onaylanmıştır ve takip edilmiştir.
1. akışkan perküsyon hasarı
- Bir laboratuvar ceket veya cerrahi elbise, cerrahi maske, cerrahi eldiven ve baş kapsayan ve cerrahi site temas tüm araçları ve malzemeleri sterilize giyin.
- Bir 10-12-haftalık, Erkek, Wistar sıçan (350-400 g) ile% 3 isofluran ve 1 L/min oksijen, fareler için uygun boyutta bir indüksiyon odasında anestezize. İndüksiyon odasından sıçan çıkarın ve bilinçsiz bir kez hazırlık alanına taşıyın. Steril oftalmik merhem her iki gözün içine koyun.
- Yeterli cerrahi alan üretmek için kulakların kaudal tabanına gözlerinin hemen yukarısındaki #40 bir bıçak ile elektrik kesiciler ile sıçan kafasına saç tıraş. Siteden herhangi bir gevşek, kırpılmış saç çıkarın.
- 70% etanol tarafından izlenen tıraşlı kafa derisi için% 2 chlorohexidine Scrub uygulayarak cerrahi site temizleyin. Merkezden başlayın ve içe dönük çevrelerde kesi bölgesinden uzakta dışarı doğru hareket ettirin. Bu işlemi 3 kez tekrarlayın. Aynı moda siteye Betadine çözüm uygulayın ve kurumaya izin.
- Anestezik sıçan stereotaktik çerçeve içine yerleştirin ve anestezi korumak 2-3% Isoflurane-1 L/min oksijen nosecone üzerinden. Fare anestezi bir cerrahi düzlemde olduğundan emin olmak için arka ekstremite ve palpebral refleks kaybı çekilme refleks kaybı için kontrol edin.
- Cerrahi boyunca solunum hızını, kalp hızını, vücut sıcaklığını ve oksijen doygunluğunu izleyin. 300-400 BPM arasında kalp hızını koruyun, ve% 90 üzerinde SpO2 .
Not: bir darbe-oksimetre bağlı bir arka ayak kalp hızı ve SpO2okuma sabit sağlamak için kullanılabilir. BPM 400 üzerinde bir kalp hızı sıçan yeterli anestezize olmadığını gösterir. 37 °C ' de ayarlanan bir rektal termometre ile birleşen bir kendinden düzenleyen ısınma yastığı, vücut sıcaklığını korumak için ameliyat boyunca sıçan altında konumlandırılabilir. Bir optik fiber lamba ile birlikte bir ışık kaynağı ile bir mikroskoptan prosedür görselleştirilmesi için yararlıdır. - Kullanarak bir 23 g iğne enjekte 0,5% bupivakain hidroklorür intradermal yerel analjeziye için kesi sitede kafa derisi içine 10-15 dakika önce bir kesi yapmadan.
- #10 bir neşter bıçağı kullanarak derinin deri ve kas yoluyla 1,5-2.5 cm orta hat kesi yapın. Kafatası ortaya çıkarmak ve net bir cerrahi alan sağlamak için cilt ve kas geri çekin. Altta yatan fasya ve yağ dokusu steril pamuk SWABS ile kemik uzağa yansıtmak.
Not: bir elektrikli koter ünitesi hızlı hemostaz elde etmek için yararlıdır. - Kadın-dişi luer kilit hub tabanı kafatası ile floş dinlenmek böylece düzgün bir düz yüzey üretmek için bir cerrahi küret kullanarak Sol parietal kemik lateral sırt tıraş.
- Kafatası yüzeyini ve çevreleyen dokulara 2,0 mg/mL gentaminisin çözeltisi ile steril tuz içinde irrigate yapın. Steril bir SWABS ile Blot aşırı çözüm.
- Kemiği kurutmak için kafatasına% 3 hidrojen peroksit uygulayın.
Not: kemik yeterince kuru değilse diş çimento düzgün uymaz ve sağlam bir mühür oluşturur. - Sol parietal kemik ile 5 mm çap Kraniyektomi sitesi oluşturun.
Not: stereotaktik çerçeveye bağlı bir güç matkap içine yerleştirilen bir trefin bit Kraniyektomi başlatmak için yararlı olabilir. Kraniyektomi işlemini kalan kemikten yavaşça bitirmek için 5 mm çapında bir trefin ile el matkap kullanın. Kraniyektomi tamamlanmasına yakın zaman, altta yatan Dura mater rüptürü önlemek için ters trefin döndürün. Orada disk çevresi etrafında kafatası inceltme olacak ve hafifçe basıldığında kafatası flep gevşek hissedeceksiniz. - Cerrahi küret ve pürüzsüz doku forseps ile kemik flep çıkarın.
Not: bazı kanama ortaya çıkabilir, ancak hemostaz hızlı bir şekilde steril pamuk SWABS ile nazik basınç uygulayarak elde edilebilir. - Bir mikroskoptan ve aydınlatma görsel rüptürü belirtileri için dura incelemek için kullanın. Kemik ince bir jant Kraniyektomi sitenin çevresi etrafında kalacak. Yavaşça bu jant pürüzsüz doku forseps dura rüptürü için değil dikkat çekmek ile çıkarın.
- Herhangi bir kemik tozu kaldırmak ve kafatası kurutmak için 70% etanol ile kafatası Swab.
- Luer kilit merkezinin alt kenarı etrafında ince bir siyanoakrilat jel tutkal tabakası uygulayın ve açılışa engel olmadan Kraniyektomi üzerine kafatasına sabitleyin. Dura ile temas tutkal getirmek için değil dikkatli olun. Ayrıca, göbek dış tabanı etrafında ek ince tutkal tabakası ile yerine luer kilidi mühürleyin.
- Diş çimentosu için bir bulamaç hazırlayın. Bir yerde güvenli hale getirmek için luer kilit hub tabanı etrafında ve üzerinde kafatası yüzeyine çimento uygulayın.
- Luer Lock hub 'ı steril koruyucu serbest yapay cereberal omurilik sıvısı (CSF) çözeltisi ile doldurun (pH 7,4) bir şırınga ve iğne kullanarak, böylece plazmaya ait bir konveks bolus jantın üst kısmında görülebilir.
Not: çözüm diş çimento gibi dura nemli tutacak yanı sıra mühür bütünlüğü bir göstergesi olarak hizmet verir. Çözüm düzeyi hiç düşerse, bu sistemde bir sızıntı göstergesidir ve luer kilidi kaldırılması ve değiştirilmesi gerekir. - Diş çimento tamamen tedavi edildikten sonra, gaz anestezi durdurma ve stereotaktik çerçeveden sıçan çıkarın.
- Sıçan FPı cihazının yanında bir platforma yerleştirin.
- FPı cihazının sıvı rezervuar sonunda basınç dönüştürücünde uzanan eğri bir metal ucu vardır. 2 cm 'lik erkek luer kilit büküm konnektörüne karşı uçtan sona erdirme ile kavisli ucunun sonuna kadar basınç tüpünün 12 cm uzunluğunda olmasını sağlayın. Sıçan kafatasındaki göbek dişi ucunu erkek konektörüne bağlayarak, fareyi FPı cihazına sabitleyin.
Not: bağlantının sıkıca sabitlendiğinden ve tüm hava kabarcıklarının sistemden çıkarıldığından emin olun. - Hayvan sternal vurgulanmakla yerleştirin ve tekrar geri çekilme refleks iade için kontrol edin. En kısa sürede sıçan çekilme refleks geri gelir ama hala yatıştırıcı, tek bir 20 MS basınç nabız neden ve yaralanma teşvik FPı cihazın sarkaç bırakın.
Not: Bu nörojenik kaynaklı pulmoner ödem nedeniyle artan mortalite neden eğilimindedir gibi hayvan derinden anestezi ederken yaralanma teşvik etmek önemlidir. Tüm cihazlar değişkenlik gösterir. Ancak, bu deney için kullanılan cihazda, çekiç 17 ° açı yerleştirme bir 2,2-2,3 atmosferik basınç nabız üretir. Yaralanmamış, Sham hayvanları, gerçek sıvı nabzının dışında, tüm aynı prosedürlere sahiptir. - Yaralanmadan sonra hemen FPı cihazdan sıçan kesmek, sternal recumbency yerleştirin ve spontan nefes dönene kadar bir burun koni üzerinden ek oksijen (1 L/dak) sağlar. Apne yaralanma beklenen bir sonucudur. Gerekirse, sıçan kendiliğinden kendi kendine nefes almaya başlayana kadar bir torba Vana maskesi ile periyodik manuel nefes sağlar.
Not: genellikle, apne 2 dakikadan az sürer. Kalp hızı (> 500 BPM) geçici hızlı yükselişi, bir katekolamin patlaması nedeniyle basınç nabzının uygulanması hemen sonra görülür. Bu, sıçan ayağına bağlı bir nabız oksimetresi ile izlenebilir ve şiddetli bir yaralanmanın oluştuğunu gösteren olası bir gösterge olarak hizmet verebilir. - Sürekli sıçan monitör ve (dört ekstremite üzerinde istikrarlı ambulasyon) nişan refleks dönüş süresini kaydedin.
- Her sıçan için atmosferik basınç nabzının büyüklüğü, birbirlerinin ± 0,05 atmosferleri içinde olmalıdır. Basınç nabzının her birinin osiloskop üzerinde tutarlı genlik ve süre ile pürüzsüz bir sinyal ürettiğini onaylayın.
Not: gürültülü bir sinyal, yaralanma nabzını teslim etmeden önce kaldırılmalıdır sistem hava kabarcıkları gösterebilir. Şiddetli bir yaralanma üreten atmosferik basınç darbeleri, bu deneyde, genellikle 30-60 min hayvan nişan süreleri neden olanlar vardır. Bu nişan süreleri yaklaşık% 40-50 mortalite oranı ile ilişkilidir. - Destekleyici bir bakım olarak subkutan 10 mL prewarmed tuzlu yönetmek.
- Onun ev kafesi için sıçan dönmek ve en az 4 h kurtarmak için izin.
Not: fareler anestezi altında hemen geri yerleştirildiğinde artan mortalite gözlenmiştir.
2. kortikal EEG elektrotları ve video-EEG kaydının implantasyon
- Yaralanmadan sonra 4 h, daha önce açıklandığı gibi sıçan anestezize ve luer kilit hub ve diş çimento kaldırmak için stereotaktik çerçeveye geri yerleştirin.
Not: hub ve çimento kolayca orta basınç ile yapışacak. Hub çıkardıktan sonra, herhangi bir yırtılması veya dura zarar dikkatle kontrol edin. Dikkatlice dura zarar ile herhangi bir hayvan ötenize. - 5 pilot deliklerin delineceği yerlerin her birinde kafatasına% 0,5% bupivakain hidroklorür küçük bir damla uygulayın (bkz. Şekil 1).
- El 0,1 mm matkap biti ile kafatası aracılığıyla pilot delikleri matkap.
- Bir paslanmaz çelik elektrot vidasını aşağıdaki konumlarda bulunan her bir pilot deliğe sabitleyin: bir referans vidası, serebellum üzerinde lambda için kaudal yerleştirilir. Kayıt elektrotları yerleştirilir: 1) Yarımküre ipsilateral ve Kraniyektomi için rostral üzerinde; 2) Yarımküre ipsilateral ve Kraniyektomi için kaudal üzerinde; Kraniyektomi için Yarımküre kontralateral ve rostral üzerinde 3); 4) Yarımküre kontralateral ve Kraniyektomi için kaudal üzerinde.
- Herhangi bir kemik tozu kaldırmak için% 70 etanol ile kafatası Swab.
- Maruz dura kapsayacak şekilde steril kemik balmumu ince bir tabaka ile Kraniyektomi site kapak.
- Renk kodlu bir elektrot telinin maruz kalan ucunu, belirlenmiş Paslanmaz Çelik elektrot vidası etrafında sıkıca sarmalayarak, 5 EEG elektrotlara bir elektrot dizisi bağlayın.
Not: her elektrot kablounun zıt uçları, Kaide konnektörü içinde belirli bir konuma yerleştirilir. - Kemik Çimento Bulamaç hazırlayın.
- Kaide altında bir bobin içine elektrot telleri toplamak ve kemik çimento ile yerine teller ve Kaide güvenli. Kemik çimentosu iyileşene kadar Kaide konumunu tutun.
Not: kemik özellikle kuru ve uygun yapışma elde etmek ve transmitteri erken kaldırılması önlemek için herhangi bir kalıntı kan geçersiz olmalıdır. - Hayvanı stereotaktik çerçeveden çıkarmadan önce kablosuz transmitteri yeni piller ile Kaide 'ye takın.
- Hayvan ev kafesi yerleştirin ve alıcı yakınlığı ve belirlenmiş bir video kamera görünümünde kafes yerleştirin. Video/EEG kaydını başlatın.
3. video-EEG kayıtlarının toplanması
- EEG sinyalleri toplamadan önce, arka plan gürültüsüne sahip herhangi bir frekans ile EEG kaydının toplanması önlemek için herhangi bir potansiyel müdahale frekansları belirlemek için sıçanların EEG koleksiyonu için barındırılacak oda bir frekans süpürme yapın.
- Tüm transmitterleri, parazit içermeyen belirli frekanslara ayarlayın.
- Her programlanabilir transmitteri örnekleme sıklığını ve giriş aralığını ayarlayın.
Not: Bu, sistem üreticisi tarafından sağlanan akıllı bir araç kullanılarak yapılabilir. Transmitterler en fazla 1000 Hz hızında örnek alabilir ve maksimum ± 10 mV giriş aralığıdır. Bu denemede 0,5 Hz ile 30 Hz arasında EEG kayıtları incelendi. Bu nedenle, örnek oranı 250 Hz 'de ayarlandı. Biz genellikle daha az Amplitütler gözlemlemek 1 mV. Bu nedenle, set giriş aralığı ± 2 mV idi. - Her bir kablosuz transmiteri belirli bir alıcıya benzersiz bir frekans ile bağlayan yaralanma gününde sürekli olarak video-EEG ' i kaydetmek için üretici tarafından sağlanan EEG toplama yazılımını kullanın.
Not: her verici alıcı çifti 4 Monopolar EEG kanallarını ve X, Y ve Z düzlemlerinde ivme izleme yeteneğine sahiptir. EEG verileri, bir depolama sunucusuna yazılabilir. Video verileri, depolama sunucusuna bağlı bir NAS cihazına kaydedilmelidir. EEG analiz yazılımı, depolama sunucusu tarafından tutulan zamana göre video ve EEG kaydını eşitler. - Kendi 2 MP çözünürlük kamera (1920 x 1080) 30 kare/s kaydetmek için yapılandırılmış her sıçan video kaydetmek için video toplama yazılımı kullanın.
Not: her kamera gece video koleksiyonu için kendi kızılötesi aydınlatma vardır. - Sistem tüm video ve EEG kayıtlarını otomatik olarak bir depolama sunucusuna her 24 saat kaydetmek için yapılandırın. Videolar oldukça büyük dosyalar üretir.
4. video/EEG Analizi
- 1/10 s çözünürlükte her EEG kaydı ile videoyu senkronize edin. Her iki EEG ve video kesin zaman damgası ile bir meta dosyası oluşturur sistem üreticileri video/EEG analiz yazılımı kullanarak bunu.
- El ile EEG kayıtları aracılığıyla nöbet etkinliğini tanımlayan dizin olaylarını tanımlamak için ekran.
- Video/EEG analiz yazılımını ve Endeks EEG olaylarını kullanarak, anahtar parametrelerini kullanan bir yapılandırma dosyası oluşturun (örneğin, belirli frekans bantlarında güç, frekans bantlarının toplam güce oranı, ivme eşiği, vb.) özellikleri tanımlamak için potansiyel nöbet olayların.
- EEG analiz yazılımını çalıştırmak için, yapılandırma dosyasında seçilen parametrelere dayalı olarak nitelendiği, BT kaydının potansiyel bölgelerini belirleyin.
Not: EEG analiz yazılımı otomatik nöbet tespiti için izin verir ve EEG sinyalleri ilgi bölgeleri vurgular ve sinyal boyunca FFT güç spektrum analizi sağlar. - Her bir sıçan ilgili EEG kayıtlarıyla senkronize edilen satın alma sırasında toplanan video kayıtlarını kullanarak potansiyel konvülsif nöbetleri onaylayın.
Representative Results
Bu model ile, biz yetişkin, Erkek, Wistar fareler içine ciddi TBı indüklenen. Burada tarif ettiğimiz koşullar altında, genellikle% 40-50 ' lık mortalite oranlarını ve daha önce20' si açıklandığı gibi 30-60 dk 'nın refleks sürelerini gözlemliyoruz. Yaralanma gününde video/EEG kayıtlarını 24 saat/gün başlayarak toplayabildik. Dört Monopolar EEG elektrotları ve tek bir referans elektrot konumunu gösteren bir diyagram Şekil 1a gösterilir. Burada açıklanan koşullarla beklenen TBı lezyonlarının konumunu ve görünümünü gösteren görüntüler Şekil 1B-D' t a gösterilir. Burada anlatılan şartlar altında, TBı sonrası ilk üç gün içinde Delta yavaşlamasını sürekli olarak gözlemliyoruz. Daha az ağır yaralı fareler tek taraflı, aralıklı Delta yavaşlama (rakamlar 2C-D) sergiler. Bunun aksine, daha şiddetli yaralanmalardan sonra sürekli olarak bilateral Delta yavaşlaması görülür (Şekil 3C-D). Tüm TBı fareler bir derece Delta yavaşlama sürekli gözlenen ama herhangi bir Sham (sadece Kraniyektomi) kontrol fareler (rakamlar 2A-b; 3A-b) tespit edilmedi. Çoğu TBı fareler yaralanmadan sonra ilk üç gün boyunca kapsamlı Delta yavaşlatma sürekli gözlenen. İlginçtir, fareler genellikle yaralanma sonrası ilk üç gün sırasında belirgin kilo kaybı gösterir. Non-konvülsif nöbetler bazen TBı aşağıdaki ilk hafta içinde görülür (Şekil 4 C-D). 1 hafta sonrası TBI (Şekil 5C-D) sonrasında, yetiştirme ve düşme ile ilişkili başak kümeleri olarak başvuran klinik nöbetler ve önkol klonüs görülebilir. Son olarak, Şekil 6 zaman zaman aralıklı sinyal bırakma ve pil yetmezliği nedeniyle sinyal kaybı temsili görüntüleri sunar.
Şekil 1 . Kraniyektomi, elektrot yerleştirme ve lezyonun yeri. (A) kraniektomi (sol Yarımküre 'de gri daire) konumları ile sıçan kafatası bir Şematik diyagramı gösterir, dört Monopolar elektrotlar (siyah nokta; 1, 2, 3, 4) bregma ve lambda ve referans elektrot arasında bulunan (siyah nokta, R) yerleştirilmiş orta çizgi, lambda posterior; (B) kırmızı bir daire ile tanımlanan lezyonun konumu ile koronal Post-mortem T2 MRI taramalarını gösterir; (C) lezyonun konumu ve büyüklüğü belirlendiği (mavi bölge) korteks 2-b haritasını gösterir. (D) bir nissl gösterir lezyon kutulu ile lekelenmiş koronal bölüm, lezyon 100 x sağ görüntüde büyütülmüş. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.
Şekil 2 . Tek taraflı, aralıklı Delta yavaşlama orta TBı gününde toplanır. (A) cerrahi gün bir Sham çalışan, yaralı kontrol sıçan bir 90 s EEG izleme gösterir. Tüm dört kanal sunulmuştur. 10 s uzun iz (kutulu bölgeden alınan) daha iyi temel EEG deseni görselleştirmek için 3 kanal ayıklandı. Bunun bir 2048 MS EPOC bölümü daha sonra ilgili FFT analiz edilecek seçildi. (B) 2048 MS 'nin FFT analizi, cerrahi gününde yaralanmamış Sham tarafından işletilen hayvandan EPOC seçti. (C) yaralanma gününde orta derecede yaralı bir hayvanın aralıklı, tek taraflı Delta yavaşlama modelini gösteren bir 90 s EEG Trace gösterir. 10 s uzun iz (kutulu bölgeden alınan) daha iyi Delta EEG deseni yavaşlatan görselleştirmek için 3 kanal ayıklandı. Bunun bir 2048 MS EPOC bölümü daha sonra ilgili FFT analiz edilecek seçildi. (D) 2048 MS 'nin FFT analizi, yaralanma gününde orta TBI HAYVANıNDAN EPOC seçildi. 90 s EEG izlerine, yukarıdan aşağıya kadar 1, 2, 3, 4, Şekil 1' de görüldüğü gibi Kraniyektomi sitesi çevresindeki yerlere karşılık gelen biopotentials vardır. Gri dikey işaretler, EEG izleri üzerinde 1 s aralıkları tanımlar. Tüm EEG izleri (± 500 μV) bir ölçekte gösterilir. FFT analiz grafiklerinde, genel olarak analiz edilen frekans aralığı 0,5-30 Hz idi. Bu daha fazla Delta 4 ayrı frekans bantları (sarı, 0.5-4 Hz), Theta (mor, 4-8 Hz), Alfa (kırmızı, 8-12 Hz), ve Beta (yeşil, 12-30 Hz) kırıldı. FFT analizinde gösterilen% (güç) grafiği, analiz edilen EPOC 'daki toplam gücün yüzdesini daha önce belirtilen frekans bandından gelir ve EEG dalga formlarının daha matematiksel karakterizasyonu için izin verir. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.
Şekil 3 . İkili, sürekli Delta yavaşlama şiddetli TBı gününde toplanan. (A) cerrahi gün bir Sham çalışan, yaralı kontrol sıçan BIR 90 s EEG izleme gösterir. Tüm dört kanal sunulmuştur. 10 s uzun iz (kutulu bölgeden alınan) daha iyi temel EEG deseni görselleştirmek için 3 kanal ayıklandı. Bunun bir 2048 MS EPOC bölümü daha sonra ilgili FFT analiz edilecek seçildi. (B) 2048 MS 'nin FFT analizi, cerrahi gününde yaralanmamış Sham tarafından işletilen hayvandan EPOC seçti. (C) yaralanma gününde ağır yaralı bir hayvanın sürekli, bilateral Delta yavaşlama modelini gösteren bir 90 s EEG Trace gösterir. 10 s uzun iz (kutulu bölgeden alınan) daha iyi Delta EEG deseni yavaşlatan görselleştirmek için 3 kanal ayıklandı. Bunun bir 2048 MS EPOC bölümü daha sonra ilgili FFT analiz edilecek seçildi. (D) 2048 MS 'nin FFT analizi, yaralanma gününde şiddetli TBI HAYVANıNDAN EPOC seçildi. 90 s EEG izlerine, yukarıdan aşağıya kadar 1, 2, 3, 4, Şekil 1' de görüldüğü gibi Kraniyektomi sitesi çevresindeki yerlere karşılık gelen biopotentials vardır. Gri dikey işaretler, EEG izleri üzerinde 1 s aralıkları tanımlar. Tüm EEG izleri (± 500 μV) bir ölçekte gösterilir. FFT analiz grafiklerinde, genel olarak analiz edilen frekans aralığı 0,5-30 Hz idi. Bu daha fazla Delta 4 ayrı frekans bantları (sarı, 0.5-4 Hz), Theta (mor, 4-8 Hz), Alfa (kırmızı, 8-12 Hz), ve Beta (yeşil, 12-30 Hz) kırıldı. FFT analizinde gösterilen% (güç) grafiği, analiz edilen EPOC 'daki toplam gücün yüzdesini daha önce belirtilen frekans bandından gelir ve EEG dalga formlarının daha matematiksel karakterizasyonu için izin verir. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.
Şekil 4 . Nonkonvülsif elektrografik nöbet toplanan 3 gün ağır TBı sonrası. (A) BIR 90 s EEG izleme bir Sham çalışan, yaralanmamış kontrol sıçan 3 gün25 ameliyattan sonra gösterir. Tüm dört kanal sunulmuştur. 10 s uzun iz (kutulu bölgeden alınan) daha iyi temel EEG deseni görselleştirmek için 3 kanal ayıklandı. Bunun bir 2048 MS EPOC bölümü daha sonra ilgili FFT analiz edilecek seçildi. (B) 2048 MS FFT analizi, ameliyat sonrası üç25 gün içinde yaralanmamış Sham çalışan hayvanın EPOC seçilmiş. (C) bir 90 s EEG Trace üç 25 gün sonrası şiddetli yaralanma gösterir. Bu gösteri Binası, hızlı spiking desen ve tüm 4 toplama kanalları arasında bilateral mevcut. 10 s uzun iz (kutulu bölgeden alınan) daha iyi spiking EEG deseni görselleştirmek için 3 kanal ayıklandı. Bunun bir 2048 MS EPOC bölümü daha sonra ilgili FFT analiz edilecek seçildi. (D) 2048 MS 'nin FFT analizi, yaralanma gününde şiddetli TBI HAYVANıNDAN EPOC seçildi. 90 s EEG izlerine, yukarıdan aşağıya kadar 1, 2, 3, 4, Şekil 1' de görüldüğü gibi Kraniyektomi sitesi çevresindeki yerlere karşılık gelen biopotentials vardır. Gri dikey işaretler, EEG izleri üzerinde 1 s aralıkları tanımlar. Tüm EEG izleri (± 500 μV) bir ölçekte gösterilir. FFT analiz grafiklerinde, genel olarak analiz edilen frekans aralığı 0,5-30 Hz idi. Bu daha fazla Delta 4 ayrı frekans bantları (sarı, 0.5-4 Hz), Theta (mor, 4-8 Hz), Alfa (kırmızı, 8-12 Hz), ve Beta (yeşil, 12-30 Hz) kırıldı. FFT analizinde gösterilen% (güç) grafiği, analiz edilen EPOC 'daki toplam gücün yüzdesini daha önce belirtilen frekans bandından gelir ve EEG dalga formlarının daha matematiksel karakterizasyonu için izin verir. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.
Şekil 5 . Konvülsif elektrografik nöbet TBı sonrası 9 gün toplanan. (A) ameliyat sonrası dokuz (9) gün sonra bir Sham tarafından işletilen, yaralı olmayan kontrol sıçan BIR 90 s EEG Trace gösterir. Tüm dört kanal sunulmuştur. 10 s uzun iz (kutulu bölgeden alınan) daha iyi temel EEG deseni görselleştirmek için 3 kanal ayıklandı. Bunun bir 2048 MS EPOC bölümü daha sonra ilgili FFT analiz edilecek seçildi. (B) 2048 MS 'nin FFT analizi, ameliyattan sonra dokuz (9) günden itibaren yaralanmamış Sham çalışan hayvandan EPOC seçilmiş. (C) bir 90 s EEG izleme dokuz (9) gün şiddetli yaralanma sonrası gösterir. Bu gösteri Binası, hızlı spiking desen ve tüm 4 toplama kanalları arasında bilateral mevcut. 10 s uzun iz (kutulu bölgeden alınan) daha iyi spiking EEG deseni görselleştirmek için 3 kanal ayıklandı. Bunun bir 2048 MS EPOC bölümü daha sonra ilgili FFT analiz edilecek seçildi. (D) 2048 MS 'nin FFT analizi, AĞıR TBI hayvanından dokuz (9) günden sonra yaralanmalara neden olan EPOC seçilidir. 90 s EEG izlerine, yukarıdan aşağıya kadar 1, 2, 3, 4, Şekil 1' de görüldüğü gibi Kraniyektomi sitesi çevresindeki yerlere karşılık gelen biopotentials vardır. Gri dikey işaretler, EEG izleri üzerinde 1 s aralıkları tanımlar. Tüm EEG izleri (± 500 μV) bir ölçekte gösterilir. FFT analiz grafiklerinde, genel olarak analiz edilen frekans aralığı 0,5-30 Hz idi. Bu daha fazla Delta 4 ayrı frekans bantları (sarı, 0.5-4 Hz), Theta (mor, 4-8 Hz), Alfa (kırmızı, 8-12 Hz), ve Beta (yeşil, 12-30 Hz) kırıldı. FFT analizinde gösterilen% (güç) grafiği, analiz edilen EPOC 'daki toplam gücün yüzdesini daha önce belirtilen frekans bandından gelir ve EEG dalga formlarının daha matematiksel karakterizasyonu için izin verir. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.
Şekil 6 . Sinyal düşmesi. Bunlar, EEG kaydında olduğu gibi, verici veya alıcı sorunları nedeniyle hangi sinyalin düşmesi durumunda 3 ayrı örnektir. (A) Bu, bir KAYıTTA EEG sinyalinin aralıklı olarak düşmesi örneğidir. (B) Bu, sürekli kablosuz telemetri sırasında pil arızası nedeniyle açılan bir örnek bir EEG izleme görünür. (C) Circled bölgesinde, sinyal kalitesi (QoS) 100 'den 0 ' a düştüğünde, EEG takibinin düzleştirilmiş ve 0 μV 'de durgun hale geldiği görülebilir. Gri dikey işaretler, EEG izleri üzerinde 1 s aralıkları tanımlar. Tüm EEG izleri (± 500 μV) bir ölçekte gösterilir. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.
Discussion
FPI TBI modeli 14,26,27,28için kullanılan özel parametreler ve yöntemler ile ilgili laboratuvarlar arasında önemli değişkenlik bildirilmiştir. Bu tutarsızlıklar çelişkili sonuçlara neden oldu ve laboratuvarlar arasındaki çabaları ve sonuçları uyumlu hale getirmek zorlaştırıyor. Burada, travma sonrası epileptiform aktivitesini izlemek için uzun vadeli, sürekli video/EEG kaydı yaklaşımımızı açıklayan ayrıntılı bir metodoloji sunduk. Bir dizi adım, açıklanan yöntemle tekrarlanabilir sonuçlar oluşturmak için önemlidir.
İlk olarak, travma sonrası epilepsinin insidansı yaralanma şiddeti ile ilişkilendirir, en şiddetli TBı neden koşullar uygulanır. Özellikle, yeterince büyük bir dura alanının maruz kalmasını sağlamak için 5 mm 'lik Kraniyektomi kullanın. Buna ek olarak, bir dişi-dişi luer kilit cihazını kafatasının yüzeyine sabitleyin, doğrudan Kraniyektomi üzerine yerleştirilen açılış ile. Bu, daha küçük bir Kraniyektomi (3 mm) kullanmış ve/veya Kraniyektomi içinde değiştirilmiş bir iğne hub yerleştirmiş olan diğer laboratuvarlar farklıdır, hangi etkin açılış boyutunu azaltır. Luer kilidi Kraniyektomi dışında yerleştirerek, 5mm açılış korunur. Bu özel parametreler dura 'ya uygulanan genel kuvveti etkiler. Dura 'ya uygulanan atmosferik basınç da gözlenen yaralanma şiddeti üzerinde büyük bir etkiye sahiptir. Ne yazık ki, atmosferik basınç son derece değişkendir ve cihaz bağımlı görünüyor. Bazı Labs 8-10 MS18basınç nabız uygulayarak bildirdi. Bunun aksine, burada açıklanan yöntem 20 MS basınç nabzı ile sonuçlanır. Bu daha şiddetli yaralanma oluşturmak için görünen diğer laboratuvarlar ile tutarlı 14,28. Yaralanma inducing basınç nabız Labs arasında önemli değişkenlik gösteren bir parametre olduğunu ve ampirik olarak tanımlanmalıdır açıktır. Bununla birlikte, yaralanma şiddeti mortalite oranlarının (% 40-50), reflektif refleks süreleri (> 30 dk)26birleşimine göre belirlenebilir. Aynı zamanda sadece sağlam dura olan hayvanların çalışmaya dahil edilmesi de önemlidir. Buna ek olarak, Kraniyektomi herhangi bir tutkal veya çimento gibi Kraniyektomi altında dura bir parçası sıvı basıncı Nabız tam gücüne maruz değildir, sonra hayvan çalışma ortadan kaldırılması gerekir okcluded. Ayrıca, luer kilit altında fazla tutkal dura uyabilir ve başarılı bir yaralanma sonra bile çimento kapağı ile kaldırabilirsiniz. Son olarak, osiloskop izi üzerindeki basınç darbe eğrisinin pürüzsüz şekli, sıvı odasında hava kabarcıkları bulunmadığını ve pistonun empedans olmadan hareket ettiğini gösteren göstergesi sağlar.
Anestezi, kontrol edilmesi gereken başka bir kritik faktördür. Isoflurane pozlama anestezi bir cerrahi düzlem korumak için mümkün olan en düşük düzeylerde tutulmalıdır. İsofluran veya uzun süreler için daha yüksek seviyelere maruz kalan fareler, neurogenic kaynaklı pulmoner ödem geliştirmek için daha olasıdır. Kafatasının hazırlanması yöntemin başka bir kritik yönünü temsil eder. Özellikle, kafatasını kurutmak ve herhangi bir kemik tozunu çıkarmak, farelerin transmiteri zamanından önce kaldırmasını önlemeye yardımcı olur.
Vidaların yerleştirilmesi ve EEG kablolarının bağlanması açıkça tekrarlanabilir kayıtlar üretmek için önemlidir. Bu vidalar çok derinden beyin üzerinde bir lezyon ikna etmek için yerleştirilmez önemlidir. Yetişkinlerin Kraniyektomi (12 haftalık) erkek Wistar farelerinden kurtarılan kemik flebi sürekli olarak 2 mm kalınlığında. 2,5 mm mili ile EEG elektrot vidalarını kullanın. Bu vidalar sadece kemik tabanına uzatmak ve beyin içine çıkıntı yok sağlamak için bir spacer olarak kavisli sivrisinek hemostatik forseps ipuçlarını kullanmak yararlıdır.
Burada sunulan yaklaşım bazı sınırlamalar var. Piller düzenli olarak değiştirilmelidir. Pil değişikliklerinin sıklığı örnekleme hızına bağlıdır. Piller genellikle haftada bir kez 1000 Hz 'de örnekleme hızı olarak değiştirilir. Bu zaman dilimi örnekleme hızını azaltarak uzatılabilir. Sistem aynı zamanda dört Monopolar EEG elektrotlardan kayıt ile sınırlıdır. Ancak, bu Yarımküre başına iki kanal sağlar ve odak ve genelleştirilmiş olaylar arasında ayrım yapabilir ve anterior ve posterior değişiklikler arasında ayırt edebilirsiniz. Bu yaklaşımlara rağmen, bu yaklaşım, sürekli video/EEG izleme ve şiddetli TBı takipte epileptiform değişikliklerinin tespiti yapmak için makul bir yöntem sağlar.
Burada açıklanan yöntem, TBı takipte bir ay içinde hem elektrografik hem de konvülsif nöbetlerde sonuçlanır. Bu nedenle, bu yaklaşım, şiddetli TBI takipte epileptogenez önlenmesi için potansiyel terapötik çalışma için makul bir zaman çerçevesi sağlar. Bu yaklaşım aynı zamanda PTE ile ilişkili moleküler mekanizmaları araştırmak için bir yöntem sağlar ve PTE geliştirme riski en çok olan hastaları tanımlamak için kullanılabilecek potansiyel biyomarkerlerin tanımlanmasına neden olabilir.
Disclosures
Chelasea R Richardson EMKA Scientific bir çalışanı, bu kablosuz telemetri sisteminin tedarikçisi açıklanmıştır.
Acknowledgments
Biz grafik tasarım ve rakamlar hazırlanması onun paha biçilmez destek için Paul Dressel teşekkür etmek istiyoruz.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1.00 mm Drill Bits | Drill Bit City: New Carbide Tools | 05M200 | |
| 3M ESPE Durelon Carboxylate Cement | 3M , Neuss Germany | 38019 | Dental Cement |
| 4-0 Suture | Ethicon, Sommerville, NJ | K831H | 4-0 Ethicon Perma-hand Silk, 26mm 1/2c Taperpoint, 30" (75cm), Black Braided non-absorbable suture |
| 5 mm outer diameter trephine | Fine Science Tools | 18004-50 | |
| Bonewax | Medline Industries, Mendelcin, IL | REF DYNJBW25 | |
| Buprenorphine HCL, Injection (0.3 mg/mL) 1 mL vial | Par Pharmalogical, Chestnut Ridge NY | 3003706 | NDC 42023-179-01 |
| Dumont #6 Forceps | Fine Science Tools | 11260-20 | |
| Dumont #7b Forceps | Fine Science Tools | 11270-20 | |
| ecgAUTO | EMKA Technologies, Falls Church, VA | ||
| Female Luer Thread Style Coupler Clear Polycarbonare | Cole-Palmer instrument | SKO#45501-22 | Order lot #214271 |
| Foot Power Drill | Grobet USA, Carlstadt, NJ | Model C-300 | |
| GentaMax 100 (Gentamicin, Sulfate Solution) | Phoenix, Manufactured by Clipper Distributing Company LLC, St. Joseph, MO | NDC 57319-520-05 | |
| Hill's Prescription Diet a/d Canine/Feline | Hill's Pet Nutrition, Inc. , Topeka, KS | ||
| IOX2 Software | EMKA Technologies, Falls Church, VA | ||
| Isoflorane, USP | Piramal Enterprise Limited, Andhra, India | NDC 66794-013-25 | |
| IsoTech Anesthesia machine | SurgiVet | WWV9000 | |
| Lateral FPI device | AmScien | 302 | curved tip, with pressure tubing extension. connected via screw lock connector (Cole-Palmer; #4550-22) |
| Leica A60 Stereomicroscope | Leica Biosystems, Richmond, VA | PN: 10 450 488 | |
| Marcaine (0.5%) Bupivacaine hcl injection usp 5 mg/mL | Hospira, Lake Forest, IL | CA-3627 | 50mL multiple dose vial; NDC 0409-1610-50 |
| Micro-Adson Forceps | Fine Science Tools | 11018-12 | |
| Olsen-Hegar Needle Holders with Suture Cutters | Fine Science Tools | 12002-14 | |
| PALACOS R+G bone cement with gentamicin | Heraeus, | REF: 5036964 | Radiopaque bone cement containing 1 x 0.5g Gentamicin |
| Physio Suite | Kent Scientific, Terrington, CT | ||
| Povidone-iodine solution | Betadine | ||
| Puralube Vet Ointment | Dechra Veterinary Products, Overland Park KS | NDC 17033-211-38 | |
| Scalpel blade (#10) and holder | Integra Miltex, York, PA | REF: 4-110 | |
| Scalpel Handle - #4 | Fine Science Tools | 10004-13 | |
| Sickle Knife | Bausch + Lomb Storz Instruments | N1705 HM | 5mm curved blade. Round handle. Overall length 168mm, 6.6 inches. |
| Silverstein Micro Mirror | Bausch + Lomb Storz Instruments | N1706 S8 | 3mm diameter. Angled 45 degrees. Overall length 180mm, 7.2 inches |
| Storage NAS | Synology Inc. | DS3615xs | |
| Synology Assistant | Synology Inc. | ||
| Thermal Cautery Unit | Geiger Medical Technology, Delasco Council Bluffs, IA | Model NO: 150 | |
| Vetivex | Dechra Veterinary Products, Overland Park KS | Veterinary pHyLyteTM Injection pH 7.4 (Multiple Electrolytes Injection, Type 1, USP) | |
| Video Cameras | TRENDnet, Torrance, CA | TV-IP314PI | Indoor/Outdoor 4MP H.265 WDR PoE IR Bullet Network Cameral |
| Video NAS | Synology Inc. | DS916 | |
| Wistar IGS rats | Charles River | strain code 003 | 12 wk old at the time of injury |
| Wullstein Retractor | Fine Science Tools | 17018-11 |
References
- Flanagan, S. R. Invited Commentary on Centers for Disease Control and Prevention Report to Congress: Traumatic Brain Injury in the United States: Epidemiology and Rehabilitation. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 96, 1753-1755 (2015).
- Annegers, J. F., Coan, S. P., Hauser, W. A., Leestma, J., Duffell, W., Tarver, B. Epilepsy, vagal nerve stimulation by the NCP system, mortality, and sudden, unexpected, unexplained death. Epilepsia. 39, 206-212 (1998).
- Lowenstein, D. H. Epilepsy after head injury: an overview. Epilepsia. 50, Suppl 2 4-9 (2009).
- Englander, J., et al. Analyzing risk factors for late posttraumatic seizures: a prospective, multicenter investigation. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 84, 365-373 (2003).
- Faul, M. X. L., Wald, M. M., Coronado, V. G. Traumatic Brain Injury in the United States: Emergency Department Visits, Hospitalizations and Deaths 2002-2006. Centers for Disease Control and Prevention, National Center for Injury Prevention and Control. , Atlanta (GA). (2010).
- Herman, S. T. Epilepsy after brain insult: targeting epileptogenesis. Neurology. 59, 21-26 (2002).
- Annegers, J. F., Coan, S. P. The risks of epilepsy after traumatic brain injury. Seizure. 9, 453-457 (2000).
- Christensen, J., Pedersen, M. G., Pedersen, C. B., Sidenius, P., Olsen, J., Vestergaard, M. Long-term risk of epilepsy after traumatic brain injury in children and young adults: a population-based cohort study. Lancet. 373, 1105-1110 (2009).
- Webb, T. S., Whitehead, C. R., Wells, T. S., Gore, R. K., Otte, C. N. Neurologically-related sequelae associated with mild traumatic brain injury. Brain Injury. 29, 430-437 (2015).
- Mahler, B., Carlsson, S., Andersson, T., Adelow, C., Ahlbom, A., Tomson, T. Unprovoked seizures after traumatic brain injury: A population-based case-control study. Epilepsia. 56, 1438-1444 (2015).
- Wang, H., et al. Post-traumatic seizures--a prospective, multicenter, large case study after head injury in China. Epilepsy Research. 107, 272-278 (2013).
- Simonato, M., French, J. A., Galanopoulou, A. S., O'Brien, T. J. Issues for new antiepilepsy drug development. Current Opinion in Neurology. 26, 195-200 (2013).
- Xiong, Y., Mahmood, A., Chopp, M. Animal models of traumatic brain injury. Nature Review Neuroscience. 14, 128-142 (2013).
- Kharatishvili, I., Nissinen, J. P., McIntosh, T. K., Pitkanen, A. A model of posttraumatic epilepsy induced by lateral fluid-percussion brain injury in rats. Neuroscienc. 140, 685-697 (2006).
- McIntosh, T. K., et al. Traumatic brain injury in the rat: characterization of a lateral fluid-percussion model. Neuroscience. 28, 233-244 (1989).
- Thompson, H. J., et al. Lateral fluid percussion brain injury: a 15-year review and evaluation. Journal of Neurotrauma. 22, 42-75 (2005).
- Curia, G., Eastman, C. L., Miller, J. W., D'Ambrosio, R. Modeling Post-Traumatic Epilepsy for Therapy Development. Translational Research in Traumatic Brain Injury. Laskowitz, D., Grant, G. , Boca Raton (FL). (2016).
- D'Ambrosio, R., Fairbanks, J. P., Fender, J. S., Born, D. E., Doyle, D. L., Miller, J. W. Post-traumatic epilepsy following fluid percussion injury in the rat. Brain. 127, 304-314 (2004).
- Saatman, K. E., et al. Classification of traumatic brain injury for targeted therapies. Journal of Neurotrauma. 25, 719-738 (2008).
- Smith, D., Brooke, D., Wohlgehagen, E., Rau, T., Poulsen, D. Temporal and Spatial Changes in the Pattern of Iba1 and CD68 Staining in the Rat Brain Following Severe Traumatic Brain Injury. Modern Research in Inflammation. 4, 9-23 (2015).
- Ndode-Ekane, X. E., et al. Harmonization of lateral fluid-percussion injury model production and post-injury monitoring in a preclinical multicenter biomarker discovery study on post-traumatic epileptogenesis. Epilepsy Research. 151, 7-16 (2019).
- Ciszek, R., et al. Informatics tools to assess the success of procedural harmonization in preclinical multicenter biomarker discovery study on post-traumatic epileptogenesis. Epilepsy Research. 150, 17-26 (2019).
- Immonen, R., et al. Harmonization of pipeline for preclinical multicenter MRI biomarker discovery in a rat model of post-traumatic epileptogenesis. Epilepsy Research. 150, 46-57 (2019).
- Kamnaksh, A., et al. Harmonization of pipeline for preclinical multicenter plasma protein and miRNA biomarker discovery in a rat model of post-traumatic epileptogenesis. Epilepsy Research. 149, 92-101 (2019).
- Redell, J. B., Moore, A. N., Ward, N. H., Hergenroeder, G. W., Dash, P. K. Human traumatic brain injury alters plasma microRNA levels. Journal of Neurotrauma. 27, 2147-2156 (2010).
- Smith, D., et al. Convulsive seizures and EEG spikes after lateral fluid-percussion injury in the rat. Epilepsy Research. 147, 87-94 (2018).
- Eastman, C. L., Fender, J. S., Temkin, N. R., D'Ambrosio, R. Optimized methods for epilepsy therapy development using an etiologically realistic model of focal epilepsy in the rat. Experimental Neurology. 264, 150-162 (2015).
- Shultz, S. R., et al. Can structural or functional changes following traumatic brain injury in the rat predict epileptic outcome. Epilepsia. 54, 1240-1250 (2013).
