Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Cancer Research

Murine modell av metastatisk leverskader svulster i innstillingen av iskemi reperfusion skade

Published: August 30, 2019 doi: 10.3791/59748

Summary

Vi beskriver i detalj en klinisk relevant tykktarmskreft leveren metastaser (CRLM) tumor modell og påvirkning av leveren ischemia reperfusion (I/R) i tumor vekst og metastasering. Denne modellen kan bidra til å bedre forstå mekanismene underliggende kirurgi-indusert fremme av leveren metastatisk vekst.

Abstract

Liver iskemi og reperfusion (I/R) skade, en felles klinisk utfordring, er fortsatt en uunngåelig patofysiologiske prosess som har vist å indusere flere vev og organskade. Til tross for nylige fremskritt og terapeutiske tilnærminger, har den generelle sykelighet forble utilfredsstillende, spesielt hos pasienter med underliggende parenkymatøs unormalt. I sammenheng med aggressiv kreft vekst og metastasering, kirurgisk I/R mistenkes for å være arrangøren regulere tumor tilbakefall. Denne artikkelen tar sikte på å beskrive en klinisk relevant murine modell av leveren I/R og tykk tarms leveren metastasering. Ved å gjøre det, har vi som mål å hjelpe andre etterforskere i å etablere og perfeksjonere denne modellen for deres rutine forskning praksis for å bedre forstå effekten av leveren i/R på å fremme leveren metastaser.

Introduction

Leveren er en av de vanligste stedene for utvikling av metastatisk sykdom1. Dødelighet er nesten alltid skyldes komplikasjoner forbundet med tumor vekst i leveren. Hos pasienter med metastatisk solide svulster i leveren, er kirurgi fortsatt en avgjørende intervensjon for sykdomskontroll og en mulig helbredende tilnærming. Men det store flertallet av pasientene til slutt til stede med tilbakevendende sykdom, hovedsakelig i leveren2,3. Under hepatic kirurgi, intraoperativ blødning er vanlig, ofte nødvendiggjør blodoverføring og ulike tekniske tilnærminger for kontroll av blødning, inkludert vaskulær spenn metoder. Men slike tiltak forårsaker hepatic iskemi/reperfusion (I/R) til leveren vev. De negative virkningene av i/R på leverfunksjonen har blitt godt dokumentert. Leveren I/R fornærmelse tenner inflammatorisk kaskader under restaurering av blodstrøm via inflammatoriske trasé4. Ikke bare lever I/R skade bidra til leversvikt, men dagens bevis viser også at jeg/R skade stimulerer tumor celle vedheft, og fremmer forekomsten av metastaser dannelse og vekst av eksisterende micrometastatic sykdom5. Vi har tidligere rapportert at kirurgisk stress induserer aktivering av immunceller som ikke bare bidrar i veksten av den primære svulsten, men også Letter metastaser ved å fange kreftceller i sirkulasjon6.

Her beskriver vi i detalj en teknikk for å etablere en lever metastasering mus tumor modell. I denne modellen presenterer vi også en metode for å indusere hepatic iskemi reperfusion skade som fungerer som et surrogat til kirurgisk stress stede klinisk under hepatectomies. Den kombinerte metoder for kreft injeksjon og hepatic i/R kan med hell tolke utviklingen av CRLM hos pasienter som har gjennomgått primære tumor reseksjon.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle dyr protokoller er godkjent av institusjonelle Animal Care og bruk komiteen og levd opp til National Institutes of Health (NIH) retningslinjer. Instrumenter som brukes til alle kirurgiske inngrep ble grundig sterilisert.

1. innledende forberedelse

  1. Før injisere kreftceller i musen milt, autoklav og sterilisere alle instrumenter som skal brukes under inngrepet.
  2. Sterilisere og/eller autoklav en oppvarming pad, kirurgiske hansker, gasbind, par av saks, små klemmer, fartøy dilator, kirurgisk tang, og en nål holderen.
  3. Forbered postoperativ smertestillende (0,1 mg/kg buprenorfin) som skal administreres etter splenektomi og hver 12 h i 2 dager.

2. cellekultur

  1. Sørg for at kreftceller er fri for mycoplasma forurensning ved hjelp av en mycoplasma ELISA Kit.
  2. Forbered en 500 mL oppløsning av Dulbecco ' s modifiserte Eagle medium (DMEM) dyrking medium ved 4 ° c for kulturen av murine tykktarmskreft celler (MC38). Den dyrking Media bør suppleres med 10% varme-deaktivert fosterets storfe serum (FBS), 100 U/mL av penicillin, 100 μg/mL Streptomycin, 15 mM HEPES og 200 mM av L-glutamin.
  3. Kultur kreftceller i en DNAse-og RNAse-fri kolbe (75 cm2). Ruge celle kulturen i en celle/vev fuktet inkubator som inneholder 5% CO2. Oppretthold temperaturen ved 37 ° c.
  4. Når voksende cellene nå 90-100% confluency, aspirer gamle medier, vaske celler med 1x fosfat-bufret saltvann (PBS) og deretter behandle dem med 1x Trypsin (0,25%) å koble celler fra flasken.
  5. Samle celler i et 15 mL konisk rør og sentrifuge i 5 min ved 700 x g.
  6. Aspirer mediene og vask med 1x PBS to ganger ved gjentatt sentrifugering.
  7. Fortsett med å bekrefte celle levedyktigheten ved å farge celler med trypan blå flekk (0,4%).
  8. Resuspend celler til en konsentrasjon på 1 x 106 celler/100 μL i 1x PBS. Pipet celler grundig for å unngå klumper. Hold kreftceller på isen før injeksjon.

3. sprøytebruk av tumorceller

  1. Bedøve 8 – 12-ukers-gammel mannlig (C57BL6) mus ved å administrere ketamin (150 mg/kg) og xylazine (12 mg/kg) intraperitonealt ved bruk av en 1 mL 25 G (0,5 mm x 16 mm) nål.
  2. Barbere magen huden av mus ved hjelp av Clippers å unngå postoperative infeksjoner.
  3. Plasser mus på det magnetiske fiksator uttrekks systemet. Bekreft at musene er helt under påvirkning av anestesi ved å knipe en tå eller halen.
  4. Legg saltvann dråper i øynene for å unngå tørrhet under inngrepet.
  5. Scrub povidon-jod løsning (7,5%) til den barberte bukveggen for å desinfisere huden før du gjør et kirurgisk snitt.
  6. Først løfte huden med tann tang og lage en midtlinjen snitt ved hjelp av kirurgiske saks. Deretter løfter mage muskelen og peritoneum å skape et midtlinjen snitt på ca 3 cm lengde (midabdominal til xiphoid prosess for å avdekke abdominal innholdet. Vær forsiktig med å forlenge snittet utover xiphoid prosessen for å unngå omfattende blødning.
  7. Plasser hemostat på begge sider av snittet og under xiphoid prosessen. Forlenge magen ved å trekke halen nedover og taping det. Bruk 6-tommers steril bomulls tupp applikator for å skille og eksponere milten fra bukspyttkjertelen fettvev.
  8. Før injeksjon i milten, Vortex kreftceller for å unngå celle klumper.
  9. Bruk en 0,5 mL 28 G (0,36 mm x 13 mm) insulinsprøyte til injeksjon. Unngå luftbobler.
  10. Langsomt og forsiktig injisere 100 μL av celler inn i spissen av milten. Plasser en bomulls spiss og Legg til forsiktig Trykk for å unngå tilbakestrømning i mageregionen. En vellykket injeksjon kan observeres ved å identifisere endringen i fargen på leveren under injeksjonen.
  11. Fukt et sterilt gasbind med 1x PBS og plasser det over dissekert området.
  12. Overfør musene til en varmepute i 15 minutter slik at kreftceller kan sirkulere i systemet.
  13. For å fortsette med kirurgisk iskemi og reperfusion Kader, Følg trinn 5.3-5.10.
    Merk: denne prosedyren er å studere effekten av I/R indusert etablering av metastatisk fokus.

4. splenektomi

  1. Hvis du vil utføre en splenektomi, bruker du en håndholdt cauterization enhet. Løft milten forsiktig med glatt tang og cauterize de milt blodkarene for å unngå overdreven blødning. Fjern milten ved å transecting fartøyene på cauterized-seksjonen.
  2. Umiddelbart etter inngrepet, lukke snittet i et dobbelt lag mønster ved først suturing muskelen laget og deretter huden. Bruk 4-0 polypropylen sting for både bukveggen og huden.
  3. Før du gjentar prosedyren på et annet dyr, desinfisere alle instrumenter ved enten å sprøyte dem med 70% isopropanol eller sette dem inn i en perle bad.
  4. Plasser mus tilbake i originale bur og se etter tegn på nød og post-kirurgisk smerte.
  5. Injiser postoperativ smertestillende (buprenorfin 0,1 mg/kg) hver 12 h for 2 dager for å unngå post-kirurgiske smerter.

5. iskemi reperfusion skade

  1. Ved 5 dager etter den første laparotomy, bedøve mus ved å administrere ketamin (150 mg/kg) og xylazine (12 mg/kg) intraperitonealt ved hjelp av en 1 mL 25 G (0,5 mm x 16 mm) nål. Følg trinn 3.3 – 3.4.
  2. Scrub povidon-jod løsning (7,5%) på den barberte buken på musen for å desinfisere huden og utføre en midtlinjen laparotomy som beskrevet ovenfor i trinn 3,6.
  3. Ved hjelp av to fuktet bomull tips, forsiktig flytte tarmen fra hulrommet for å avdekke tilhørende strukturer, inkludert portalen vene. Analysere leveren hilum fri for omkringliggende vev.
  4. Løft opp medianen og venstre lateral fliker mot membranen. Skill quadrate flik fra venstre lateral flik ved dissekere leveren hilum med våren saks ved hjelp av en drifts mikroskop for å tillate klar synlighet mot portalen triaden struktur.
  5. Plasser en liten fuktig bomullspinne mellom median flik og høyre lateral flik for å skape tilstrekkelig plass for å klemme. Bruke fartøyet dilator tang, forsiktig passere 10 cm tråden (4,0 polypropylen Sutur) for å løfte portalen triaden. Tette alle strukturer i portalen triaden (hepatic arterien, Portal vene, og galle duct) til venstre og median lever fliker ved å plassere en mikrovaskulær klemme ved hjelp av en mikro-serrefine klemme applikator med lås.
  6. Hvis fliker ikke viser signifikant blanchering, justere klemmen ved å fjerne og reapplying.
    Merk: Hvis den umiddelbare blanchering av leveren ikke oppstår selv etter justere klemmen, nøye vurdere om du vil fortsette med i/R.
  7. Fjern den lille bomullspinnen plassert mellom medianen og høyre side fliker. Erstatte tarmen forsiktig inn i bukhulen. Dekk til bukveggen med en fuktig gasbind (fuktet med 1x PBS) og dekk med en plastfolie for å minimere fordamping tap.
  8. Plasser musen på varmeputen og påfør klemmen for en periode på 60 min.
  9. Gjennom iskemisk intervall, søker bevis for iskemi skade ved å visualisere den bleke blanchering av høyre midtre og venstre midtre og lateral fliker.
  10. Initiere reperfusion ved å fjerne klemmene etter 60 min periode.
    Merk: tegn på reperfusion kan observeres ved en umiddelbar fargeendring av median og venstre lateral fliker.
  11. Umiddelbart etter reperfusion, Lukk snittet med et dobbelt lag Sutur mønster ved først suturing muskelen laget og deretter huden. Bruk 4-0 polypropylen-Sutur ved hjelp av en nål holder for å lukke bukveggen og huden.
  12. Før du gjentar prosedyren på et annet dyr, desinfisere alle instrumenter ved enten å sprøyte dem med 70% isopropanol eller sette dem inn i et oppvarmet perle bad.
  13. Plasser mus tilbake i originale bur og se etter tegn på nød og post-kirurgisk smerte.
  14. Injiser postoperativ smertestillende (0,1 mg/kg buprenorfin) hver 12 h i 2 dager for å unngå etter kirurgiske smerter.
  15. For lever I/R humbug mus, utføre laparotomy, hilum disseksjon og abdominal sting.
    Merk: Rollen til kirurgisk stress som påvirker opprettelsen av leveren metastaser kan undersøkes gjennom to ulike eksperimentelle design. Ovennevnte protokollen (modell-1) brukes til å etablere micrometastatic leversykdom og studere effekten av leveren i/R på deres vekst (figur 1a). Alternativt kan leveren i/R og tumor injeksjon utføres samtidig (modell-2) for å studere effekten av i/r-skade ved etablering av nye metastatisk fokus (figur 1B). For å gjøre dette, injisere kreftceller i milten som beskrevet ovenfor og la dem sirkulere i 15 min. Utfør lever I/R eller humbug kirurgi etter sirkulerende periode for 60 min. Utfør lateral splenektomi 60 min senere, og lukk deretter laparotomy snitt.

6. vurdering av drevne mus

  1. Under den kirurgiske prosedyren sikre at musene er under påvirkning av scenen III anestesi ved å utføre palpebral og hornhinnen refleks test. Ytterligere bedøvelse dose må gis på tegn på reflekser.
  2. Gi postoperativ smertestillende (buprenorfin 0.1 mg/kg) rett etter operasjonen og hver 12h i 2 dager for å unngå innlegg kirurgiske smerter.
  3. Tillat mus 30 – 60 min av utvinning tid fra anestesi. Konstant overvåke mus og ikke la dem uten tilsyn før fullstendig gjenoppretting.
  4. Se etter nødsignaler som bøyd tilbake, lukkede øyne, langsom bevegelse, og unnlatelse av å stelle. Behandle deretter til mus tilbake til sin normale aktivitet.
  5. Supplimental omsorg inkludert væsker, varme, yohimbin reversering agent for xylazine, mykt papir håndkle sengetøy (for å unngå aspirasjon) bør gis etter operasjonen for å forbedre utvinningen perioden.

7. vurdering av leveren iskemi reperfusion skade

  1. Umiddelbart etter påføring av klemmen, må du kontrollere blek blanchering av median og venstre lateral fliker oppstår i forhold til nucleus caudatus og quadrate fliker.
  2. Vurdere lever iskemi skade ved å måle serum alanin aspartattransaminase (sALT), serum aspartate aspartattransaminase (sAST) og serum melkesyre dehydrogenase (sLDH) nivåer. Blodet kan trekkes fra ansikts vene for å trekke serum 3 – 6 timer etter initiering av reperfusion. Utfør leveren histologi å analysere prosent tumor området innenfor iskemiske flik.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Alle wildtype (C57BL6) mus (n = 20) ble utsatt for leveren metastaser modellen ved hjelp av protokollen beskrevet ovenfor. Alle injisert mus med eller uten iskemi reperfusion skade overlevde før datoen for offer. Det skjematisk diagram figur 1a av en kreft-injisert leveren illustrerer klemme av portalen triaden (hepatic arterien, Portal vene, og galle duct) som induserer en delvis leveren iskemiske (70%) fornærmelse mot medianen og venstre lateral fliker. En økning i antall leveren metastaser kan observeres innen 2-3 uker post iskemi reperfusion skade. Mus injisert med MC38 kreftceller ble tilfeldig delt inn i humbug og I/R grupper. Som vist i figur 1B, gjennomgikk den første gruppen av mus splenektomi 15 min etter at kreften ble injisert. Liver ischemia reperfusion kirurgi ble utført 5 dager etter injeksjonen. Denne modellen gjør at sirkulerende kreftceller (CCs) å etablere innenfor organene. Figur 2a viser at kirurgisk stress betydelig økt mengden av pre-etablerte micrometastases i leveren. Den andre gruppen (figur 1C) gjennomgikk kirurgisk i/R 15 min etter kreft injeksjon. Reperfusion ble indusert ved å fjerne mikrovaskulær klemme 60 min etter påføring. Den samtidige påvirkning av kirurgisk stress fører (figur 2b) til fangst av nylig injisert kreftceller i leveren etablere en micrometastatic prioriteringer. Dette øker betydelig antall metastatisk knuter i leveren.

Figure 1
Figur 1: En skjematisk fremstilling av eksperimentell design. (A) skjematisk diagram av en kreft injisert leveren illustrerer klemme på portalen triaden (hepatic arterien, Portal vene, og galle duct) som induserer en delvis (70%) leveren iskemiske fornærmelse mot median og venstre lateral fliker. En økning i antall leveren metastaser kan observeres i iskemiske fliker innen 2-3 uker etter reperfusion. I utgangspunktet ble mus utsatt for intrasplenic injeksjon av MC38 tykktarmskreft i både tumor fangst (B) og tumor vekst (C) modell. Sham mus ble også utsatt for laparotomy uten anvendelse av mikrovaskulær klemmer. To-tre uker etter at i/R, mus ble ofret, og leveren vev ble høstet. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 2
Figur 2: representative bilder av mus injisert med murine kreft. (A) representative leveren metastasering bilde av en tumor vekst modell (modell-1) viser en betydelig økning i brutto tumor knuter på overflaten av leveren etter inducing hepatic i/r i forhold til ikke-I/R gruppe. (B) på samme måte, i innstillingen av tumor fange modell (modell-2), lever i/R viste en betydelig økning i tumor knuter 2 uker etter i/r i forhold til ikke-I/R gruppe. *, P < 0,05. Resultatene uttrykkes som gjennomsnittlig ± standardavvik. Gruppe sammenligninger ble utført ved hjelp av student t test (n = 5/Group). Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Dyre modellen som er beskrevet i dette manuskriptet er basert på to store tilnærminger. Den første er å anerkjenne evnen til kreftceller å lokalisere og sprer i leveren fliker. Den andre er å studere effekten av hepatic iskemi reperfusion skade påvirke tumor vekst og metastaser. Denne modellen tillater relevant studie av leveren metastaser i fravær av sekundære metastaser i en immunkompetente mus. Modellen er nyttig for å håndtere spørsmålene om metastatisk effektivitet, for eksempel celle overlevelse extravasations og spredning.

I den første modellen, kreftceller injiseres først og micrometastatic sykdom er tillatt å danne. Deretter, lever I/R utføres 5 dager senere. Denne modellen er viktig når man studerer effekten av kirurgi på allerede etablerte micrometastatic sykdom. Selv om Imaging har betydelig forbedret i det siste tiåret, er det fortsatt mulighet for tilstedeværelsen av micrometastatic sykdom som kanskje ikke oppdages av Imaging og blir etterlatt etter en planlagt leveren reseksjon med den hensikt å kurere. Denne gjenværende mikroskopiske sykdom er påvirket av inflammatoriske forandringer med følgende kirurgi, spesielt leveren I/R, og veksten er eksponentielt økt. På den annen side, i den andre modellen leveren i/R og tumor injeksjon utføres på samme tid. Denne modellen fokuserer på virkningene av leveren i/R på sirkulerende kreftceller og etablering av nye metastatisk fokus. Under lever kirurgi, manipulering av svulsten utgivelser tumorceller i sirkulasjon. Selv om de fleste sirkulerende celler blir ivaretatt av vertens immun overvåkning, kan en rekke celler etablere metastatisk fokus. Denne andre modellen er designet for å studere dette fenomenet.

Dyremodeller, for eksempel orthotopic lever injeksjon7 og hale vene injeksjon8, kan ikke være anatomisk gjennomførbart for slike studier. Det har vist seg at halen vene injeksjon vanligvis resulterer i en økt metastasering av lungene i forhold til leveren. Den orthotopically injisert kreft modellen har en økt risiko for leverskade påvirke mikromiljøet for tumor å vokse. Som et alternativ til milt injeksjon av svulster, portalen venen kan også utnyttes. Portalen vene injeksjon har vært en veletablert metastatisk modell i å studere leveren metastaser9,10,11. Injeksjon av kreftceller gjennom portalen venen ikke kompromiss fjerning av milten i forhold til modellen som er beskrevet ovenfor. Dette faktisk vil unngå immune konsekvenser. Men, har Portal vene injeksjon en økt risiko for overdreven blødning på grunn av venøs rive (på injeksjonsstedet) og trombose under eller etter påføring av mikrovaskulær klemme på portalen triaden. Disse risikoene er eksponentielt økt når både tumor injeksjon og klemmer er gjort på samme dag. Vår gruppe har utført begge metodene, og vi har fått lignende resultater9,12. Vi erkjenner at portalen vene injeksjon krever høyere tekniske ferdigheter når det gjøres på samme tid som klemmer og er forbundet med høyere komplikasjoner. Begge metodene er gyldige for å studere leveren metastaser.

Det er mange viktige aspekter som må vurderes før og under hele prosedyren. Bruk av kreftceller spesielt med samme art bakgrunnen er at eksperimentene før injeksjon. Celle nummeret er også viktig å vurdere i denne studien, så lite antall celler kan ikke være tilstrekkelig til å fullføre studien i løpet av kort tid (3 uker). Øke antall kreftceller bør unngås siden det kan føre til en emboli effekt fører til trombose og død av gnager. Modellen er beskrevet i dette manuskriptet med celle konsentrasjon på 1 x 106 er spesifikk for MC38 cellelinjen og har tillatt oss å observere en betydelig forskjell i tumorveksten stimulert av effekten av kirurgiske iskemi reperfusion skade. Vi anbefaler å prøve ulike konsentrasjoner av kreftceller avhengig av konkrete eksperiment med ønsket kreftcelle linje av interesse. Tilsvarende kan merking av kreftceller være svært nyttig i mange metastasering studier. Dette vil gi en idé om prosentandelen av celler som er i stand til å frø og sprer. Videre riktig anvendelse av portalen klemme å indusere hepatic iskemi skaden er svært viktig i denne modellen. Manglende evne til å fullstendig blokkere blodstrømmen kan føre til mindre eller ingen innvirkning på kreftcellene. Som beskrevet i metodene, er det viktig å sørge for at blanchering av leveren fliker oppstår etter påføring av mikrovaskulær klemmer. Til slutt, coagulating fartøy riktig via cauterization er avgjørende for å unngå indre blødninger. I vår erfaring, spesielt med bruk av elektrokautering, blødning fra milt seng er svært uvanlig, og siden vi utfører en gjenta laparotomy bare 5 dager etter den første operasjonen, er mengden av adhesjon minimal. Men hvis blødning er oppstått, kan dette utgjøre en mer vanskelig andre operasjon. Hvis blødning oppstår etter splenektomi, kan dette tyde på at sirkulerende kreftceller kan også ha implantert i bukhulen og dermed kan påvirke resultatene av eksperimentene. Det anbefales at du bruker forsiktighet når du håndterer dette problemet, fordi det kan påvirke eksperimentene og resultatene. Forsiktig tanke må gis for å avgjøre om ikke å fortsette med i/R i disse musene.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne avslører ingen interessekonflikter som angår dette arbeidet.

Acknowledgments

Forfatterne takker Sara Minemyer og Alexander comerci for språklig revisjon.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Dulbecco's Modified Eagle Medium Lonza 12-614F
Fetal Bovine Serum Lonza 900-108
L-Glutamin Gibco 25030-081
Penicilin Fisher scientific 15-140-122
Stretomysin Fisher scientific 15-140-122
HEPES Fisher Scientific SH3023701
Trypsin Hyclone sh30042.02
Cell culture Flask 75cm 5 Cells Star 658170
15ml PP Conical Tubes BioExcell 41021037
Trypan Blue Stain Giibco 15250-061
Gauze Fisherbrand 1376152
Cautry Bovie AA01
Microvascular clamp Finescience tools 18055-03
Micro-Serrefine clamp applicator with lock Fine science toosl FST-18056-14
Spring scissor Fine science toosl FST-15021-15
Vessel Dilator Fine science toosl FST-00276-13
Magnetic fixator Retraction system Fine science toosl FST-18200020
Micro-Adson Forceps Fine science toosl FST-11019-12
Micro-Adson Forceps Fine science toosl FST-11018-12
4-0 polypropylene suture Ethicon K881H
Needle holder Harvard Apparatus 72-8826
Heating Pad Fisher scientific 1443915
Clipper Oster 559A
Povidone-Iodine solution Medline MDS093945
Syringe 1ml 25G BD safety Glide 305903
Insulin syringe 0.5 ml BD insulin Syringes 32946
Cotton -Tipped Applicator Fisher Scientific 23-400-101
Surgical Microscope Leica LR92240
Mycoplasma Elisa Kit Roche 11663925910
Ketamine Putney #056344
Xylazine NADA #139-236
ALT strip Heska 15809554
AST strip Heska 15809542
LDH strip Heska 15809607

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Riihimäki, M., Hemminki, A., Sundquist, J., Hemminki, K. Patterns of metastasis in colon and rectal cancer. Scientific Reports. 6 (1), 29765 (2016).
  2. Oki, E., et al. Recent advances in treatment for colorectal liver metastasis. Annals of gastroenterological surgery. 2 (3), 167-175 (2018).
  3. Wolpin, B. M., Mayer, R. J. Systemic treatment of colorectal cancer. Gastroenterology. 134 (5), 1296-1310 (2008).
  4. van Golen, R. F., Reiniers, M. J., Olthof, P. B., van Gulik, T. M., Heger, M. Sterile inflammation in hepatic ischemia/reperfusion injury: present concepts and potential therapeutics. Journal of Gastroenterology and Hepatology. 28 (3), 394-400 (2013).
  5. Demicheli, R., Retsky, M. W., Hrushesky, W. J. M., Baum, M., Gukas, I. D. The effects of surgery on tumor growth: a century of investigations. Annals of Oncology. 19 (11), 1821-1828 (2008).
  6. Tohme, S., et al. Neutrophil Extracellular Traps Promote the Development and Progression of Liver Metastases after Surgical Stress. Cancer Research. 76 (6), 1367-1380 (2016).
  7. Tseng, W., Leong, X., Engleman, E. Orthotopic mouse model of colorectal cancer. Journal of Visualized Experiments. (10), 484 (2007).
  8. Elkin, M., Vlodavsky, I. Tail vein assay of cancer metastasis. Current Protocols in Cell Biology. 19 (19.2), (2001).
  9. Thalheimer, A., et al. The intraportal injection model: A practical animal model for hepatic metastases and tumor cell dissemination in human colon cancer. BMC Cancer. 9 (1), 29 (2009).
  10. Frampas, E., Maurel, C., Thedrez, P., Le Saëc, P. R. emaud-, Faivre-Chauvet, A., Barbet, J. The intraportal injection model for liver metastasis: Advantages of associated bioluminescence to assess tumor growth and influences on tumor uptake of radiolabeled anti-carcinoembryonic antigen antibody. Nuclear Medicine Communications. 32 (2), 147-154 (2011).
  11. Goddard, E. T., Fischer, J., Schedin, P. A Portal Vein Injection Model to Study Liver Metastasis of Breast Cancer. Journal of Visualized Experiments. (118), (2016).
  12. Limani, P., et al. Selective portal vein injection for the design of syngeneic models of liver malignancy. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. 310 (9), G682-G688 (2016).

Tags

Kreftforskning lever metastaser leveren ischemia-reperfusion laparotomy splenektomi murine tykktarmskreft leverskade mus modell
Murine modell av metastatisk leverskader svulster i innstillingen av iskemi reperfusion skade
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Yazdani, H. O., Tohme, S. MurineMore

Yazdani, H. O., Tohme, S. Murine Model of Metastatic Liver Tumors in the Setting of Ischemia Reperfusion Injury. J. Vis. Exp. (150), e59748, doi:10.3791/59748 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter