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Medicine

चूहे में औसत तंत्रिका उत्थान का मूल्यांकन करने के कार्यात्मक और शारीरिक तरीके

Published: April 18, 2020 doi: 10.3791/59767
* These authors contributed equally

Summary

प्रस्तुत एक प्रोटोकॉल के लिए औसत तंत्रिका (एमएन) घावों के विभिन्न प्रकार का उत्पादन और चूहे में मरम्मत है। इसके अतिरिक्त, प्रोटोकॉल से पता चलता है कि कई गैर-आक्रामक व्यवहार परीक्षणों और शारीरिक मापों का उपयोग करके तंत्रिका की कार्यात्मक वसूली का मूल्यांकन कैसे किया जाए।

Abstract

इस जांच का मुख्य लक्ष्य चूहे में विभिन्न प्रकार के औसत तंत्रिका (एमएन) घावों को कैसे बनाया जाए और मरम्मत करना दिखाया जाए। इसके अलावा, पश्चात फिजियोथेरेपी का अनुकरण करने के विभिन्न तरीके प्रस्तुत किए जाते हैं। परिधीय तंत्रिका घाव और मरम्मत के एमएन मॉडल का उपयोग करके मोटर और संवेदी वसूली का आकलन करने के लिए कई मानकीकृत रणनीतियों का उपयोग किया जाता है, इस प्रकार परिणामों की आसान तुलना की अनुमति दी जाती है। एमएन चोटों से गुजरने वाले चूहों को एक पश्चात फिजियोथेरेपी जैसे वातावरण प्रदान करने के लिए कई विकल्प शामिल हैं। अंत में, पेपर कई नॉनइनवेसिव परीक्षणों (यानी लोभी परीक्षण, पिन चुभन परीक्षण, सीढ़ी सीढ़ी चलने परीक्षण, रस्सी चढ़ाई परीक्षण, और चलने ट्रैक विश्लेषण) का उपयोग करएमएन की वसूली का मूल्यांकन करने के लिए एक विधि प्रदान करता है, और शारीरिक माप (अवरक्त थर्मोग्राफी, इलेक्ट्रोन्यूरोमाइलोग्राफी, फ्लेक्सिऑन स्ट्रेंथ मूल्यांकन, और फ्लेक्सर कार्पी रेडियालिस मांसपेशी वजन निर्धारण)। इसलिए, यह मॉडल विशेष रूप से एक नैदानिक परिदृश्य को दोहराने के लिए उपयुक्त लगता है, जिससे मानव प्रजातियों के परिणामों के बहिर्व्यय को सुविधाजनक बनाया जा सके।

यद्यपि परिधीय तंत्रिका अनुसंधान में सबसे अधिक अध्ययन किया जाने वाला तंत्रिका है, चूहे का विश्लेषण एमएन विभिन्न लाभ प्रस्तुत करता है। उदाहरण के लिए, एमएन घाव अध्ययनों में संयुक्त संकुचन और प्रभावित अंग के स्वत: क्षोपन की घटनाओं में कमी आई है। इसके अलावा, एमएन मांसपेशियों की जनता द्वारा कवर नहीं किया जाता है, जिससे इसका विच्छेदन सियाटिक तंत्रिका की तुलना में आसान हो जाता है। इसके अलावा, एमएन वसूली जल्दी ही मनाई जाती है, क्योंकि एमएन सियाटिक तंत्रिका से कम है। इसके अलावा, एमएन हाथ में उल्नार तंत्रिका के लिए एक समानांतर रास्ता है। इसलिए, उल्नार तंत्रिका को एमएन चोटों की मरम्मत के लिए तंत्रिका भ्रष्टाचार के रूप में आसानी से उपयोग किया जा सकता है। अंत में, चूहों में एमएन अग्रअंग में स्थित है, जो मानव ऊपरी अंग के समान है; मनुष्यों में, ऊपरी अंग सबसे परिधीय तंत्रिका घावों की साइट है।

Introduction

परिधीय तंत्रिका घाव आघात, संक्रमण, वाककुलाइटिस, ऑटोइम्युनिटी, द्रोह, और/या रेडियोथेरेपी1,,2के परिणामस्वरूप नियमित रूप से होते हैं । दुर्भाग्य से, परिधीय तंत्रिका मरम्मत चिकित्सकीय अप्रत्याशित और अक्सर निराशाजनक परिणाम3,,4पेश करने के लिए जारी है । इस बात पर व्यापक सहमति है कि4,5,,6,,7प्रभावित लोगों की संभावना में सुधार लाने के लिए अभी भी काफी बुनियादी और अनुवादात्मक अनुसंधान की आवश्यकता है .

चूहा एमएन मनुष्यों के लिए महान समानताएं दिखाता है8,9 (चित्र ा 1)। एक्सिलरी क्षेत्र में ब्रैकियल प्लेक्सस से निकलने वाली, यह तंत्रिका हाथ के मध्यस्थ पहलू में उतरती है, कोहनी तक पहुंचती है, और बांह के वेंट्रल डिब्बे में अधिकांश मांसपेशियों तक शाखाओं में बंटी होती है। एमएन हाथ तक पहुंचता है, जहां यह थेर मांसपेशियों और पहले दो लुम्ब्रिक मांसपेशियों के साथ-साथ चूहे के हाथ की त्वचा9 (चित्रा 1)के हिस्से के लिए अंतरवत करता है।

चूहे एमएन का उपयोग करके, मनुष्यों में परिधीय तंत्रिका घावों को पर्याप्त रूप से दोहराना संभव है10,,11,,12। इस तंत्रिका में प्रथागत रूप से उपयोग की जाने वाली सियाटिक तंत्रिका के सापेक्ष कई संभावित शोध लाभ हैं। क्योंकि एमएन चूहों के अग्रभाग में स्थित है (मानव ऊपरी अंगों के समान), यह प्रयोगात्मक रूप से चूहे की भलाई पर बहुत छोटे प्रभाव के साथ क्षतिग्रस्त हो सकता है, सियाटिक तंत्रिका की तुलना में, जो पेल्विक अंग13के एक बड़े हिस्से को आंतरिक करता है। इसके अतिरिक्त, मनुष्यों में अधिकांश नैदानिक घाव ऊपरी अंग में होते हैं, जो चूहे के अग्रअंग10,,11,,12,,14,,15,,16से मेल खाती है।

यह पेपर दिखाता है कि चूहे में विभिन्न प्रकार के एमएन घावों का उत्पादन कैसे किया जाए। इसके अलावा, पश्चात फिजियोथेरेपी का अनुकरण करने के विभिन्न तरीके प्रस्तुत किए जाते हैं। अंत में, एमएन की कार्यात्मक वसूली का मूल्यांकन करने के लिए परीक्षण वर्णित हैं। परिधीय तंत्रिका घाव और मरम्मत के एमएन मॉडल का उपयोग करके मोटर और संवेदी वसूली का आकलन करने के लिए कई मानकीकृत रणनीतियां उपलब्ध हैं, इस प्रकार परिणामों की आसान तुलना की अनुमति है। एमएन मॉडल विशेष रूप से नैदानिक परिदृश्य को दोहराने के लिए उपयुक्त है, जिससे मानव प्रजातियों के परिणामों के बहिर्करण को सुविधाजनक बनाया जा सके।

Protocol

पशु विषयों से जुड़ी सभी प्रक्रियाओं को नोवा यूनिवर्सिटी मेडिकल स्कूल, लिस्बन, पुर्तगाल (08/2012/CEFCM) में संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति और नैतिक समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था ।

1. मीडियन नर्व सर्जरी

नोट: सर्जरी के दौरान aseptic तकनीक का पालन करें। व्यक्तिगत सुरक्षाउपकरणों (पीपीई) का उपयोग करें और एक बाँझ सर्जिकल गाउन17पहनते हैं । सर्जरी से पहले सभी आवश्यक शल्य चिकित्सा उपकरणों को ऑटोक्लेव करें (सामग्री की तालिकादेखें)।

  1. 12 हफ्ते पुराने विस्टार चूहों का इस्तेमाल करें। सर्जरी से 7 दिन पहले उन्हें 12 घंटे के हल्के-अंधेरे चक्रों के साथ विज्ञापन लिमिटम भोजन और पानी प्रदान करें। संज्ञाहरण से पहले, आवश्यक संवेदनाकारियों की मात्रा निर्धारित करने के लिए चूहे को तौलें।
  2. केटामाइन (40-80 मिलीग्राम/किलो ग्राम शरीर का वजन) और जाइलाज़ीन (5-10 मिलीग्राम/किलो ग्राम शरीर का वजन) के मिश्रण के इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शन के साथ चूहे को एनेस्थेटकरेंस करें। 1818,19पूरी प्रक्रिया में श्वसन दर को देखकर और एक टो की ओर चुटकी के प्रति प्रतिक्रिया की कमी से संज्ञाहरण की गहराई की जांच करें । यदि 110 चक्रों/मिन या टो की ओर चुटकी के लिए मोटर प्रतिक्रिया18,20से अधिक श्वसन दर या मोटर प्रतिक्रिया पर अतिरिक्त एनालजेसिया प्रदान करें ।
  3. 20,21को रिक्तिपूर्व एनालजेसिया प्रदान करने के लिए 1 मिलीग्राम/किलो मेकोक्सीकैम को नीचे इंजेक्ट करें ।
  4. सर्जरी के दौरान कॉर्नियल घर्षण से बचने के लिए दोनों आंखों में नेत्र जेल लगाएं।
  5. दाईं ओर मध्यस्थ पहलू पर बालों को हटाने के लिए एक डिपिलेटरी क्रीम का उपयोग करें। एक बार किया, क्रीम17को हटाने के लिए गर्म खारे के साथ धोलें।
  6. चूहे को एक हीटिंग पैड पर सुपीन स्थिति में रखना। ऑपरेटिव साइट पर आयोडीन या क्लोरहेक्सीडीन आधारित सर्जिकल स्क्रब लगाएं। इसे कम से कम 15 एस के लिए छोड़ दें और फिर इथेनॉल से पोंछ ें। आवेदन 3x दोहराएं। सुनिश्चित करें कि स्क्रब सर्जरी के साथ आगे बढ़ने से पहले कम से कम 2 मिन के लिए त्वचा के संपर्क में है।
    नोट: सर्जिकल साइट संक्रमण19को रोकने के लिए वैकल्पिक प्रोटोकॉल के लिए अपनी शोध इकाई में संक्रमण नियंत्रण प्राधिकरण से संपर्क करें ।
  7. सर्जिकल क्षेत्र17ड्रेप ।
    नोट: सख्त aseptic शर्तों के तहत सभी प्रक्रियाओं का प्रदर्शन19
  8. 15 नंबर स्केलपेल ब्लेड का उपयोग करके, गहरे मल विमान में दाहिने हाथ और छाती क्षेत्र के मध्य पहलू में त्वचा को छेदना। सावधानी से एक बिजली के कारण का उपयोग कर किसी भी रक्तस्राव जहाजों cauterize।
  9. ध्यान से ब्रेकियल प्रावरणी को विभाजित करें, जो मांसपेशियों को कवर करने वाले एक सफेद म्यान के रूप में प्रस्तुत करता है, थर्मोकोटेरी या कुंद कैंची की एक जोड़ी का उपयोग करके, हाथ के मध्यस्थ पहलू में संवहनी और तंत्रिका संरचनाओं को नुकसान पहुंचाने की परवाह नहीं करता है।
  10. इस मांसपेशी को अंतर्निहित एक्सिलरी धमनी और नस से दूर चिढ़ाने के साथ-साथ ब्रैकल प्लेक्सस की टर्मिनल शाखाओं से भी, पेक्टरलिस प्रमुख मांसपेशी के टर्मिनल सम्मिलन के नीचे स्पष्ट रूप से कैंची की एक जोड़ी खोलें।
  11. एक इलेक्ट्रिक कॉटरी के साथ छाती प्रमुख मांसपेशी के सम्मिलन को विभाजित करें। एक्सपोज करें और पेक्टरलिस माइनर पेशी को सेक्शन करें।
  12. स्पष्ट रूप से ब्रैकील जहाजों से एमएन को विच्छेदन करें और अक्षीय क्षेत्र से कोहनी तक शुरू होने वाली उल्नार तंत्रिका से। यह ब्रैकियल प्लेक्सस की विभिन्न टर्मिनल शाखाओं, अर्थात् औसत, उल्नार, रेडियल, एक्सिलरी और मस्कुलोक्यूटेस नसों(चित्रा 2)के संपर्क की अनुमति देता है।
  13. नीचे वर्णित विभिन्न प्रयोगात्मक समूहों को अलग करें।
    1. केवल एमएन विच्छेदन करके नकली समूह बनाएं।
    2. एक नंबर 5 माइक्रोसर्जरी संदंश, या एक समान साधन22,,23का उपयोग कर के लिए 15 एस के लिए हाथ के मध्य भाग में एमएन संकुचित द्वारा क्रश समूह बनाएं ।
    3. एआरएम में एमएन के मध्य भाग से 10 मिमी लंबे सेगमेंट को उत्पादित करने के लिए माइक्रोसर्जरी कैंची की एक जोड़ी का उपयोग करके एक्सिजन समूह बनाएं। एक्सोनल ग्रोथ को रोकने के लिए 8/0 नायलॉन सीवन के साथ तंत्रिका के समीपस्थ स्टंप को लिगेट करें।
    4. बाद के चरण में वर्णित एमएन के 10 मिमी लंबे खंड का उपयोग करके भ्रष्टाचार समूह बनाएं और इसे 180 ° घुमाएं। बाधित 10/0 नायलॉन टांके का उपयोग कर तंत्रिका भ्रष्टाचार के लिए अनुभागित एमएन के समीपस्थ और डिस्टल स्टंप को टांका।
  14. 1010,24नायलॉन टांके का उपयोग कर त्वचा के घाव को बंद करें ।
  15. 3दिनोंके लिए चूहों को उपलब्ध कराई गई 50 मिलीग्राम प्लास्टिक पानी की बोतलों में 4.48 मिलीग्राम/मीटर की एकाग्रता प्राप्त करने के लिए25 को 43 मिलीग्राम नल के पानी के साथ मिश्रित चेरी-स्वाद वाले एसिटामिनोफेन के 7 मिलीग्राम के साथ पश्चात एनाल्जेसिया प्रदान करें।

2. आवास और फिजियोथेरेपी

  1. व्यायाम सेटिंग्स के लिए एक आसान और तेजी से अनुकूलन सुनिश्चित करने के लिए, सर्जरी से पहले चूहों को फिजियोथेरेपी उपकरणों के साथ 2-4 सप्ताह तक संपर्क करने की अनुमति दें। नीचे विस्तृत प्रक्रियाओं का पालन करके अभ्यास करें।
  2. दिन में एक बार, प्रत्येक चूहे को एक व्यक्तिगत फिजियोथेरेपी क्षेत्र के अंदर रखें, और बाद में कुछ बाधाओं के साथ एक कमरे में क्षेत्र रखें। चूहे को आधे घंटे के लिए स्वतंत्र रूप से कमरे का पता लगाने दें।
  3. चूहों को व्यक्तिगत रूप से अकेले पिंजरों में शामिल रनिंग पहियों के साथ घर में रखें ताकि उन्हें व्यायाम करने में मदद मिल सके।
  4. 4-5 जानवरों के समूह बनाएं और व्यक्तिगत पिंजरों में इन समूहों को घर दें। सीढ़ी, रस्सियों, पहियों, और अन्य पर्यावरण समृद्ध तत्वों सहित पिंजरों को निजीकृत करें।
  5. सर्जरी के बाद दिन व्यक्तिगत पिंजरों के लिए व्यक्तिगत चूहों वापसी ।
  6. सर्जरी के 3 दिन बाद फिजियोथेरेपी अभ्यास फिर से शुरू करें।

3. कार्यात्मक परीक्षण

  1. कार्यात्मक परीक्षण ों को शुरू करने से एक सप्ताह पहले, चूहों को सकारात्मक सुदृढीकरण के रूप में उपयोग किए जाने वाले भोजन व्यवहार के साथ परिचित करें। सर्जरी से पहले और बाद में प्रत्येक परीक्षण के सफल समापन के बाद यह सुदृढीकरण प्रदान करें। 3 सप्ताह की प्रारंभिक प्रशिक्षण अवधि के बाद, सर्जरी के 1 सप्ताह बाद सभी परीक्षणों को फिर से शुरू करें।
  2. शाम को परीक्षण ों का संचालन करें, जब चूहे स्वाभाविक रूप से अधिक सक्रिय होते हैं। सर्जरी के 1 सप्ताह बाद परीक्षण फिर से शुरू करें।
  3. एक ग्रिड पर चूहे रखकर लोभी परीक्षण करें और इसे अपनी पूंछ से उठाएं, जिससे यह ग्रिड को अपने पूर्वपंजों11,,26के साथ पकड़ सकता है। यदि चूहा दोनों पूर्व पंजों के साथ ग्रिड को पकड़ सकता है तो "सकारात्मक" स्कोर आवंटित करें। यदि चूहा घायल पंजा के साथ ग्रिड को नहीं पकड़ सकता है तो "नकारात्मक" स्कोर आवंटित करें।
    नोट: एक सकारात्मक लोभी परीक्षण इंगित करता है कि एमएन का मोटर घटक16,27काम कर रहा है ।
  4. एक पिन चुभन टेस्ट28,29करते हैं ।
    1. 4 एमएम x 4 एमएम स्क्वायर ग्रिड पैटर्न के साथ प्लास्टिक प्लेटफॉर्म बनाएं। 21 सेमी लंबे धातु फ्रेम के साथ इस ग्रिड को सहायता प्रदान करें।
    2. चूहे को मंच पर रखें और ग्रिड को 15.5 सेमी x 15.5 सेमी x 11 सेमी पारदर्शी प्लास्टिक बॉक्स के साथ कवर करें। सामान्य गतिविधियों (जैसे, अन्वेषणात्मक और प्रमुख ग्रूमिंग) कम होने तक कुछ मिनटों तक प्रतीक्षा करें।
    3. परीक्षण शुरू करें जब चूहा स्थिर हो और उसके चार पंजे पर खड़ा हो।
    4. दर्पण की मदद से, जाल के माध्यम से एक एस्थेसिओमीटर (उदाहरण के लिए, 25 ग्राम के झुकने वाले बल के साथ नंबर 4 वॉन फ्रे बाल) डालें और एमएन के त्वचा क्षेत्र में फोर्पॉर्ट के पालमार पहलू को प्रहार करें(चित्रा 1)। प्रत्येक पूर्वपंजा पर मूल्यांकन 5x को वैकल्पिक रूप से दोहराएं, प्रत्येक मूल्यांकन के कुछ सेकंड बाद इंतजार कर रहे हैं।
    5. सही मूल्यांकन के लिए वॉन Frey फिलामेंट30 के झुकने के लिए जांच करें । इस प्रकार वापसी प्रतिक्रियाओं को स्कोर करें: "0" कोई वापसी प्रतिक्रिया के लिए, "1" यदि चूहा धीरे-धीरे तंतु से पंजा निकालता है, "2" यदि चूहा जल्दी से उत्तेजना का जवाब देता है और पंजा निकालता है या पंजा चाटता है।
      नोट: यदि संवत् के एम्ब्रेशन और काटने को उत्तेजना दोहराते हुए देखा जाता है, क्योंकि इन्हें अस्पष्ट प्रतिक्रियाएं माना जाता है।
  5. प्रशिक्षण सत्र
    नोट: कम रोशनी वाले वातावरण में शाम को सर्जरी करने से पहले चूहों को 3 सप्ताह तक रोजाना प्रशिक्षित करें। प्रशिक्षण सत्र ों की सिफारिश विशेष रूप से रस्सी चढ़ाई, सीढ़ी सीढ़ी, और चलने वाले पटरियों परीक्षणों के लिए की जाती है। ये पहले प्रस्तुत आदेश में किया जा सकता है, रस्सी चढ़ाई परीक्षण, सीढ़ी सीढ़ी, और अंत में चलने पटरियों परीक्षण के साथ शुरू । एक नए परीक्षण से पहले एक ही जानवर को कुछ मिनट आराम की अनुमति दें।
    1. पहले सप्ताह के दौरान, चूहे को बॉक्स के प्रवेश द्वार के करीब सीढ़ी/रस्सी/गलियारे के अंतिम तीसरे पर रखें। पशु को धीरे से छूने और/या अपनी पूंछ की नोक खींच द्वारा बॉक्स खोलने की ओर बढ़ने के लिए पशु हालत । चूहे को एक बार बॉक्स में प्रवेश करने के बाद एक भोजन का इलाज प्रदान करें, जिससे परीक्षण दोहराने से पहले इसे कुछ सेकंड का आराम मिलेगा। इसे 5 दिनों के लिए प्रत्येक दिन 5x दोहराएं।
    2. दूसरे सप्ताह के दौरान, सीढ़ी/रस्सी/गलियारे के दूसरे तीसरे पर जानवर को ३.५.१ में चरणदोहराएं ।
    3. तीसरे सप्ताह के दौरान, बॉक्स के प्रवेश द्वार के विपरीत दिशा में सीढ़ी/रस्सी/गलियारे के नीचे चूहे रखें । चरणों को 3.5.1 में दोहराएं, लेकिन केवल जानवर को पुरस्कृत करें जब यह परीक्षण को सही ढंग से पूरा करता है।
  6. सीढ़ी सीढ़ी टेस्ट करें।
    नोट: इस परीक्षण अग्रअंग शक्ति का आकलन करने के लिए प्रयोग किया जाता है, कदम, रखने, रखने, और समन्वय31
    1. सीढ़ी के नीचे चूहे को रखें (120 सेमी x 9 सेमी x 2 सेमी 18 चरण 1.5 सेमी-मोटी, दूरी 4 सेमी के अलावा) के साथ और धीरे से चूहे की पूंछ को छूएं। सुनिश्चित करें कि सीढ़ी को 10 डिग्री के झुकाव पर रखा गया है और एक अंधेरे लकड़ी 31.5 सेमी x 35 सेमी x 35 सेमी बॉक्स पर 13.20 सेमी x 11 सेमी खोलने की ओर जाता है।
    2. एक बार चूहा सीढ़ी चढ़ने लगता है और एक बार चूहे का स्नाउट बॉक्स के प्रवेश द्वार को पार करने के बाद टाइमर को रोक देता है तो टाइमर शुरू करें।
    3. समय रिकॉर्ड करें और परीक्षण 3x दोहराएं, प्रत्येक कम से कम 1 मिन अंतराल से अलग हो गया।
  7. रस्सी चढ़ाई
    नोट: इस परीक्षण लोभी शक्ति है, जो एमएन वसूली३२पर निर्भर है का आकलन करने के लिए प्रयोग किया जाता है ।
    1. रस्सी के नीचे चूहे को रखें और धीरे-धीरे अपनी पूंछ को छूकर चढ़ने के लिए राजी करें। एक बार जब जानवर चढ़ना शुरू कर देता है तो टाइमर शुरू करें और चूहों के स्नैट मंच के प्रवेश द्वार को पार करने के पल को रोक दें।
    2. प्रत्येक परीक्षण के लिए, मंच पर चढ़ने के लिए लिया गया समय और घायल पंजा की पर्चियों की संख्या रिकॉर्ड करें जबकि चूहा रस्सी पर चढ़ता है। यदि जानवर कार्य के दौरान संकोच नहीं करता है या चढ़ाई बंद नहीं करता है तो परीक्षण वैध पर विचार करें। सही ढंग से कार्य करने के बाद चूहे को नाश्ते के साथ प्रदान करें।
    3. समय रिकॉर्ड करें और परीक्षण 3x दोहराएं, प्रत्येक कम से कम 1 मिनट के अंतराल से अलग हो गया।
  8. वॉकिंग ट्रैक्स
    नोट: इस परीक्षण फोरलिम्ब मोटर वसूली33,34के मूल्यांकन के लिए प्रयोग किया जाता है .
    1. एक उपकरण स्थापित करें जिसमें ऊंचाई x 8.7 सेमी चौड़ाई x 43 सेमी लंबाई में 16.5 सेमी तक सीमित रास्ता शामिल है। सुनिश्चित करें कि यह एक काले लकड़ी 23 सेमी x 36 सेमी x 28 सेमी बॉक्स की दीवारों में से एक में आयताकार 8.8 सेमी x 8.2 सेमी खोलने की ओर जाता है। बॉक्स के प्रवेश द्वार को तेजी से बंद करने के लिए एक ऊर्ध्वाधर स्लाइडिंग दरवाजा शामिल करें। चूहे को पुनः प्राप्त करने के लिए उपयोग की जाने वाली हटाने योग्य चोटी को शामिल करें33,34.
    2. गलियारे के फर्श पर ग्राफ पेपर का एक टुकड़ा रखें। चूहे को अपनी पूंछ से पकड़ो और इसे मेथिलीन नीले रंग में भिगोकर एक पेंटिंग ब्रश रखने दें। बॉक्स के अंदर चलने के लिए गलियारे के प्रवेश द्वार पर चूहे की स्थिति। गलियारे के फर्श से ग्राफ पेपर निकालें और परीक्षण दोहराने जब तक दोनों पूर्वपंजों का एक अच्छा प्रतिनिधि छाप प्राप्त की है ।
    3. प्राप्त प्रिंटों से, स्पष्ट लगातार फोर्पॉर्ट प्रिंट के साथ एक का चयन करें, उन्हें एक झगड़ा या जेपीईजी प्रारूप में फोटो करें, और ओपन एक्सेस सॉफ्टवेयर फिजी35का उपयोग करके निम्नलिखित मापदंडों को मापें।
      नोट: सबसे पहले, ग्राफ पेपर में निशान का उपयोग करके प्रत्येक छवि को कैलिब्रेट करें(विश्लेषण करें। स्केल सेटकरें) दूसरा, प्रत्येक छवि को 8-बिट प्रारूप में परिवर्तित करें(छवि। टाइप । 8-बिट)। बाद में, पंजा प्रिंट का चयन करने के लिए आयताकार चयन उपकरण का उपयोग करें। छवि के इस हिस्से को फसल करें (छवि । फसल)। प्रत्येक छवि में, पंजों को हाइलाइट करें और छवि को थ्रेसहोल्ड करके पृष्ठभूमि को हटा दें (छवि । समायोजित करते हैं । दहलीज)
      1. पंजा छाप क्षेत्र को मापने के द्वारा रुख कारक को मापने। पंजा प्रिंट और प्रेस कंट्रोल + एमका चयन करने के लिए आयताकार चयन उपकरण का उपयोग करें ।
      2. पंजा इंप्रेशन की सबसे लंबी लंबाई को मापने के द्वारा प्रिंट लंबाई कारक को मापें (चरण 3.8.3.2-3.3.3.6 के लिए, दो सबसे दूर अंक और प्रेस नियंत्रण + एमका चयन करने के लिए स्ट्रेट-लाइन चयन उपकरण का उपयोग करें) ।
      3. पंजा छाप की व्यापक चौड़ाई को मापने के द्वारा उंगली फैलकारक को मापें।
      4. दूसरी और तीसरी उंगलियों के बीच व्यापक चौड़ाई को मापने के द्वारा मध्यवर्ती उंगली प्रसार कारक को मापें।
      5. किसी दिए गए पक्ष पर लगातार पंजा इंप्रेशन के मुताबिक़ बिंदुओं के बीच की दूरी को मापकर प्रगति की लंबाई को मापें।
      6. पंजा छाप के मध्य भाग और आंदोलन की दिशा29,33,,36के बीच लंबवत दूरी को मापकर समर्थन के आधार को मापें .
        नोट: प्रतिनिधि के दो जोड़े लगातार द्विपक्षीय पंजा इंप्रेशन33में पिछले दो माप प्रदर्शन करें .

4. शारीरिक माप

  1. इन्फ्रारेड थर्मोग्राफी (आईआरटी)37,38,,39.
    1. सुनिश्चित करें कि जिस कमरे में माप किया जाएगा उसका तापमान 0.1 डिग्री सेल्सियस के थर्मल संकल्प के साथ सामान्य डिजिटल हाइड्रोथर्मोमीटर का उपयोग करके 18 डिग्री सेल्सियस-25 डिग्री सेल्सियस के बीच है। सुनिश्चित करें कि कोई महत्वपूर्ण गर्मी स्रोत (जैसे, कंप्यूटर या रेफ्रिजरेटर) मौजूद हैं।
    2. मूल्यांकन से पहले उन्हें मूल्यांकन कक्ष 2 एच में लाकर चूहों को एकजलवायु। प्रयोग शुरू करने से पहले, ऊपर वर्णित चूहे को एनेस्थेट इज़ करें (चरण 1.3-1.6) या संस्था के प्रोटोकॉल का पालन करें। प्रयोग शुरू करने से पहले एक अंगूठी चुटकी के लिए प्रतिक्रिया की कमी के लिए जांच करें ।
    3. अधिग्रहण से पहले इन्फ्रारेड थर्मोग्राफिक कैमरा 15 मिन पर स्विच करें और मूल्यांकन के दौरान इसे बंद न करें। चूहे की त्वचा (ε = 0.98)37,,40,,41से मेल खाने के लिए कैमरे की दूतता पैरामीटर सेट करें।
    4. चूहे को पॉलीथीन स्पंज के साथ एक साफ और स्थिर सतह पर अपने डोरसम पर रखें। सुनिश्चित करें कि कोई चिंतनशील सामग्री और कलाकृतियों के अन्य संभावित स्रोत हैं। डबल फेस गोंद टेप के साथ सूपमें इसके पूर्वपंजों को सावधानी से ठीक करें। सभी मूल्यांकनों के दौरान चूहे के केंद्रीय तापमान की निगरानी के लिए मलाशय के अंदर एक डिजिटल थर्मामीटर 2 सेमी डालें।
    5. थर्मोग्राफिक कैमरा को 90 डिग्री कोण पर और चूहे से 30 सेमी दूरी पर रखें। कैमरे को पूरे जानवर के शरीर पर केंद्रित करें। 30 एस के अलावा तीन अवरक्त थर्मोग्राफी छवियों को प्राप्त करें।
    6. अधिग्रहीत थर्मोग्राम को कंप्यूटर में स्थानांतरित करें और विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग करके उनका विश्लेषण करें। एमएन के प्लांटर क्षेत्र में ब्याज के एक निश्चित आयताकार क्षेत्र (जैसे, 9 x 11 पिक्सल) का उपयोग करके दोनों अग्रपंजे की प्लांटर सतह के तापमान को परिभाषित करें, उदाहरण के लिए पहले मेटाकार्पल पैर पैड(चित्रा 1)के केंद्र में। फ्री फ्लेयर टूल्स सॉफ्टवेयर का इस्तेमाल करते हुए उस पर डबल क्लिक करके थर्मोग्राफी का चयन करें। बाएं टूल्स बार पर बटन"ऐड बॉक्स मापन उपकरण"का चयन करें और दोनों पूर्वपंजों के प्लांटर क्षेत्र पर 9*11 पिक्सल का आयत खींचें। आयत को पिक्सेल में इसके आयाम को समायोजित करते समय पुष्टि की जा सकती है। इसे दोनों पूर्वपंजों पर करें। छवि के दाईं ओर अधिकतम, न्यूनतम और औसत तापमान मिलता है।
    7. पहले से तैयार आरओआई पर, सही क्लिक करें और निर्यात का चयन करें। मतलब, अधिकतम, और न्यूनतम तापमान, साथ ही आरओआई के तापमान का मैट्रिक्स फिर एक .csv दस्तावेज़ को निर्यात किया जाता है। बाद में डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग करके इन डेटा का पता लगाया जा सकता है।
  2. इलेक्ट्रोन्यूरोमायोग्राफिक (एनएमजी) मूल्यांकन
    1. एक विद्युत उत्तेजक स्थापित करें। डिस्पोजेबल एक्यूपंक्चर सुइयों (0.25 मिमी x 25 मिमी) की एक जोड़ी को एक नगण्य बाधा [<1ω]) के साथ टेप करें और उत्तेजना के लिए इलेक्ट्रोड बनाने के लिए उनके बीच 25 मिमी। अब आने वाले संकेतों को लेने और उन्हें डिजिटल सिग्नल में बदलने के लिए उत्तेजक और इलेक्ट्रोड को डेटा अधिग्रहण इकाई से जोड़ें और उन्हें डिजिटल संकेतों में परिवर्तित करें जिन्हें कंप्यूटर सॉफ्टवेयर के साथ संसाधित किया जा सकता है।
    2. एक ही कमरे में मूल्यांकन करें, और हमेशा एक ही नियंत्रित पर्यावरणीय स्थितियों42,,43,,44के तहत। यह सुनिश्चित करने के लिए फोर्पंजा पिंच करें कि डेटा अधिग्रहण शुरू करने से पहले चूहों को गहराई से एनेस्थेटाइज्ड किया जाता है।
      नोट: चूहोंद्वारासहज स्वैच्छिक और/या अनैच्छिक आंदोलनों से जुड़ी परिवर्तनशीलता को कम करने के लिए गहरी संज्ञाहरण सर्वोपरि महत्व का है ।
    3. 1.8-1.13 चरणों में वर्णित सर्जिकल माइक्रोस्कोप के तहत दोनों तरफ एमएन को बेनकाब करें। एक वेंट्रल मिडलाइन चीरा के साथ अग्रभुजा में ब्रैकियल चीरों को लम्बा करने के लिए 15 नंबर स्केलपेल ब्लेड का उपयोग करें।
    4. आईरिस कैंची का उपयोग करके अंतर्निहित पूर्ववर्ती प्रावरणी को स्पष्ट रूप से अलग करके फ्लेक्सर डिजिटोरम अचेतन मांसपेशियों के सतही पहलू को बेनकाब करें। सिग्नल ग्राउंड प्लग को कनेक्ट करने के लिए बाएं हिंदलिम्ब की क्वाड्रिसेप्स फेमोरिस मांसपेशी में जमीन की सुई डालें।
    5. सही फोर्प के साथ शुरू करें और रिकॉर्डिंग इलेक्ट्रोड को फोरपंजा के फ्लेक्सर डिजिटोरम सबिलिज़ीय मांसपेशी पेट और एमएन में घाव साइट पर उत्तेजना इलेक्ट्रोड समीपस्थ में रखें। इन इलेक्ट्रोड को खारा के साथ गीला करें।
    6. सुनिश्चित करें कि सॉफ्टवेयर इस प्रकार सेट किया गया है: चैनल इनपुट पोर्ट 1 (CH1) - 0-10 V के लिए उत्तेजक; और चैनल इनपुट पोर्ट 2 (CH2)-EMG से 30-1,000 हर्ट्ज तक। 10 एमवी की उत्तेजना आयाम चुनकर शुरू करें और 40,000 एमएस की अवधि के लिए 50 किलोवाट की यौगिक मांसपेशी कार्रवाई क्षमता सीएमएपीएस नमूना दर रिकॉर्ड करें। 2,000 मीटर तक पहुंचने तक धीरे-धीरे 10 मीटर वी चरणों में उत्तेजना आयाम में वृद्धि करें। बाएं पंजा42,43,,44के लिए भी यही दोहराएं .
      नोट: सिग्नल को 1,000x तक परिलक्षित किया जाता है और 30-1,000 हर्ट्ज बैंड का उपयोग करके फ़िल्टर किया जाता है। उत्तेजना उत्पादन एक ही नब्ज के लिए निर्धारित है जिसकी अवधि 1 सुश्री42,43,44है .44
    7. रिकॉर्डिंग उपकरण सॉफ्टवेयर में रिकॉर्ड की गई फाइल खोलें।
      नोट: डिफ़ॉल्ट रूप से, स्क्रीन लाल, उत्तेजक दालों में शीर्ष पर टो खिड़कियां दिखाएगी, और नीचे नीले रंग में रिकॉर्डर ENMGs। समय पैमाने के नीचे क्षैतिज स्क्रॉल बार फिसलने से पूर्ण रिकॉर्ड के दृश्य की अनुमति देता है। दो मुख्य उपकरण, ज़ूम टूल और आई-बीम टूल,पैनल के निचले दाईं ओर हैं। ज़ूम टूलका उपयोग करके, सीएमएपी के दृश्य को अनुकूलित करना और ग्राफिक्स का पता लगाना संभव है। विज़ुअलाइज़ेशन स्क्रीन पर एक अच्छी फिटिंग की गारंटी देने के लिए, ज़ूम करने के बाद डिस्प्ले को समायोजित करना आवश्यक हो सकता है। ऐसा करने के लिए, प्रदर्शनका चयन करें । ऑटोस्केल वेवफॉर्म्सआई-बीम टूल रेखांकन के विशिष्ट क्षेत्रों के चयन और वांछित माप के प्रदर्शन की अनुमति देता है। रेखांकन के शीर्ष पर, तीन छोटी खिड़कियां हैं जहां माप प्रदर्शित किए जाते हैं। पी-पी वोल्ट में चयनित क्षेत्र के औसत आयाम मूल्य (उत्तेजक रिकॉर्ड में और ENMGs दोनों में) दिखाता है, जबकि डेल्टा-टी उस चयन के समय अंतराल को दिखाता है।
    8. यौगिक मांसपेशी कार्रवाई क्षमता (CMPA, तालिका 1में वर्णित) से मापदंडों को मापने केलिए "MuAPs के अपर्यवेक्षित वर्गीकरण और EMG में कार्रवाई क्षमताके लिए टूलबॉक्स में सॉफ्टवेयर प्लग से homonymous माप उपकरण का उपयोग कर"45.
    9. प्रत्येक चूहे के लिए, उत्तेजना वोल्टेज का न्यूनतम मूल्य निर्धारित करें जिसके बाद सीएमएपी आयाम आगे नहीं बढ़ता है। 0.05 एमवी प्रोत्साहन से शुरू करें, और 0.05 एमवी के वृद्धिशील वोल्टेज में लगातार बढ़ती उत्तेजनाओं को दें।
    10. एक प्रेरणा उत्तेजना मूल्य प्राप्त करने के लिए इस वोल्टेज से ऊपर 20% एक उत्तेजना लागू करें।
    11. बाद के मूल्य निर्धारित होने और इसी उत्तेजना लागू होने के बाद, अगले सीएमएपी मापदंडों को रिकॉर्ड करें।
  3. फ्लेक्सिशन स्ट्रेंथ मूल्यांकन
    1. एमएन को चरण 4.2 में प्रोत्साहित करने के लिए एक ही उत्तेजक और उत्तेजना इलेक्ट्रोड का उपयोग करें। इनपुट चैनल CH1 को उत्तेजक (0-10 वी) के रूप में सेट करें और 1 एमएस अवधि और 1 हर्ट्ज फ्रीक्वेंसी की दालों के साथ 30 एस की उत्तेजना अवधि के लिए आउटपुट सेटिंग्स। एक डायनामोमीटर लिंक, डी = 0.001 एन के एक कंप्यूटर के लिए एक संकल्प के साथ।
      नोट: डेटा का वास्तविक समय दृश्य कंप्यूटर पर पहले स्थापित सॉफ्टवेयर का उपयोग करके प्रति समय बल (एन/एस) का निर्माण करके प्राप्त किया जा सकता है और एक डायनामोमीटर46से जुड़ा हुआ है।
    2. चरण 4.1.4 में वर्णित चूहे को रखें। दोनों पूर्वपंजों के दूसरे इंटरसोसियस स्पेस के माध्यम से 5/0 रेशम सीवन लूप रखें। सीवन लाइन पर अत्यधिक तनाव डाले बिना डायनामोमीटर के हुक और सामर्टोमीटर के साथ गठबंधन करने के लिए सीवन लूप संलग्न करें।
    3. डायनेमोमीटर रीडिंग में नकली आंदोलन हस्तक्षेप से बचने के लिए टेप के साथ कॉन्ट्रालेटरल पंजा को ठीक करें।
    4. जीरो बटन पर क्लिक कर डायनामोमीटर को जीरो पर सेट करें।
    5. वोल्टेज गाँठ को समायोजित करके उत्तेजक को 1.5 वी के एक सुप्रामैक्सिमस आयाम उत्तेजना में समायोजित करें।
    6. पीसी पर सॉफ्टवेयर एएफएच-01 खोलें। सेपरेटर'डिवाइस'खोलें और डिवाइस FH5का चयन करें। एक नई फ़ाइल बनाएं("माप1"डिफ़ॉल्ट रूप से दिया गया नाम है) और फ़ाइल का नाम बदल दें।
    7. एमएन के समीपस्थ भाग पर इलेक्ट्रोड रखें, कार्यक्रम के तल पर खेलने पर क्लिक करें, 30 एस के लिए डायनामोमीटर पर पुल रिकॉर्ड करें।
    8. डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर में प्राप्त मूल्यों का आयात करें। प्रत्येक मूल्यांकन के लिए शक्ति एक्स समय ग्राफ के लिए अधिकतम और औसत बल मूल्यों और वक्र (AUC) के तहत क्षेत्र की गणना करें।
    9. बाएं पूर्वपंजा के लिए दोहराएं।
  4. मांसपेशियों का वजन
    1. सामान्य संज्ञाहरण के तहत चूहों को47,48से मृत्युंवलिया द्वारा इच्छामृत्यु दी जाती है .
    2. दोनों अग्रभुजाओं से फ्लेक्सर कार्पी रेडिएलिस मांसपेशी को काटें, 15 नंबर स्केलपेल ब्लेड का उपयोग करके, इसकी उत्पत्ति से मांसपेशियों को उसके डिस्टल टेंडन प्रविष्टि तक विच्छेदन करें।
    3. मांसपेशियों को सटीक पैमाने9,49से तौलें .

Representative Results

कुल 34 चूहों को बेतरतीब ढंग से निम्नलिखित समूहों में विभाजित किया गया था: ऑपरेशन के लिए शाम (एन = 17), एक्सीशन (एन = 17), और तंत्रिका भ्रष्टाचार (एन = 10)। सभी चूहे सर्जरी और पश्चात अवधि में अघटनापूर्ण रूप से बच गए। सर्जरी के एक सप्ताह बाद और बाद के १०० दिनों के लिए, सभी जानवरों को सप्ताह में एक बार ऊपर वर्णित कार्यात्मक परीक्षणों से गुजरना पड़ा । इनमें से प्रत्येक परीक्षण के प्रतिनिधि परिणाम नीचे वर्णित हैं।

लोभी टेस्ट

लोभी परीक्षण में सकारात्मक प्रतिक्रिया वाले चूहों का प्रतिशत नकली समूह के लिए सबसे अधिक था। यह मूल्य धीरे-धीरे क्रश और तंत्रिका भ्रष्टाचार समूहों(चित्रा 3)से चूहों में समय के साथ बढ़ गया।

पिन चुभन टेस्ट

नकली समूह से चूहों तंत्रिका भ्रष्टाचार समूह से चूहों के सापेक्ष संचयी पिन चुभन परीक्षण में सबसे अच्छा स्कोर था । दोनों ने एक्सिजन ग्रुप(फिगर 4)में चूहों से बेहतर स्कोर किया था ।

सीढ़ी रनिंग टेस्ट

सीढ़ी रनिंग टेस्ट में चूहों का वेग एमएन घाव को प्रस्तुत चूहों की तुलना में नकली समूह में सबसे अधिक था। बाद के बीच, सीढ़ी चलाने का समय समय के साथ कम हो ता है, एमएन वसूली(चित्रा 5)के समानांतर

रस्सी परीक्षण

सीढ़ी रनिंग टेस्ट में जैसे ही चूहों ने रस्सी पर चढ़ने का समय लिया, वह उन समूहों की तुलना में शाम समूह में छोटा था, जिनमें एमएन घायल हो गया था । इस परीक्षण में चूहों की गति तब बढ़ गई जब एमएन को ठीक होने की अनुमति दी गई(चित्रा 6)।

वॉकिंग ट्रैक विश्लेषण

चलने वाले पटरियों का विश्लेषण पंजा प्रिंट(चित्रा 7)की आकृति विज्ञान में परिवर्तन दिखाने के लिए खड़ा था। इन परिवर्तनों को अक्सर50खंडीय तंत्रिका घावों की तुलना में चोटों को कुचलने में अधिक स्पष्ट किया जाता था ।

इन्फ्रारेड थर्मोग्राफी

सर्जरी के बाद पहले 30 दिनों में फोरपंजे के बीच तापमान अंतर की जांच करते समय थर्मोग्राफी उपयोगी थी। तापमान अंतर चूहों में अधिक गंभीर रूप से घायल एमएन के साथ अधिक ध्यान देने योग्य थे, जैसे कि एक्सीशन समूह(चित्रा 8 और चित्रा 9)के लोगों में।

इलेक्ट्रोन्यूरोमाइलोग्राफी

तालिका 1 इलेक्ट्रोन्यूरोमाइलोग्राफी माप के जैविक महत्व को संक्षेप में प्रस्तुत करती है, जो विभिन्न प्रयोगात्मक समूहों के लिए प्रतिनिधि परिणाम प्रदान करती है। इलेक्ट्रोन्यूरोमाइलोग्राफी के साथ विभिन्न पैटर्न देखे गए। एक सामान्य सीमैप नकली समूह से चूहे की विशिष्ट थी, जबकि एक पॉलीफैसिक सीमैप एमएन के घाव की एक चर डिग्री से जुड़ा हुआ था, जैसा कि क्रश और तंत्रिका भ्रष्टाचार समूहों में(चित्रा 10)में था। एक्सीशन ग्रुप में कोई सीएमएपी नहीं मनाया गया ।

कलाई फ्लेक्सन ताकत

यह देखते हुए कि कलाई फ्लेक्सन मुख्य रूप से एमएन पर निर्भर है, इस परीक्षण का उपयोग इस तंत्रिका के क्षेत्र में मोटर वसूली का मूल्यांकन करने के लिए किया गया था। जब रिकवरी अधिकतम थी तब कलाई में फ्लेक्सिबल स्ट्रेंथ सामान्य के सबसे करीब था (चित्रा 11)

मांसपेशियों का वजन और आकृति विज्ञान

आनन-फानन कार्पिस रेडियालिस मांसपेशी का वजन और आकृति विज्ञान एमएन रिकवरी पर निर्भर था, क्योंकि यह मांसपेशी विशेष रूप से एमएन9,10द्वारा अंतरवत है। इस प्रकार, नकली समूह में सामान्य वजन और आकृति विज्ञान देखा गया। क्रश, नर्व ग्राफ्टऔर एक्सिजन ग्रुप(चित्रा 12)में वजन और मांसपेशियों की ट्रॉफिज्म की कमी देखी गई ।

Figure 1
चित्रा 1: चूहे की औसत तंत्रिका की शरीर रचना विज्ञान का योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व।
(1)चूहे के मस्तिष्क में औसत तंत्रिका की उत्पत्ति और समाप्ति (हरित क्षेत्र = प्राथमिक मोटर क्षेत्र; नीला क्षेत्र = प्राथमिक संवेदी क्षेत्र)। (2)C7 खंड स्तर पर रीढ़ की हड्डी का ट्रांसवर्स सेक्शन; (3)एक्सिलरी तंत्रिका; (4)मस्कुलोक्यूटेनेस तंत्रिका; (5)रेडियल तंत्रिका; (6)मीडियन नर्व; (7)उल्नार तंत्रिका; (8)हाथ की मध्यस्थ कटनेकी शाखा; (9)बांह की मध्यस्थ कटनेकी शाखा; (10)एक्सिलरी धमनी; (11)ब्रैकियल धमनी; (12)मीडियन धमनी; (13)सतही रेडियल धमनी; (14)उल्नार धमनी; (15)प्रोनेटर टेरेस मांसपेशी के लिए औसत तंत्रिका की मोटर शाखा; (16)फ्लेक्सर कार्पिस रेडिएलिस मांसपेशी के लिए औसत तंत्रिका की मोटर शाखा; (17)फ्लेक्सर डिजिटोरम सतही मांसपेशी के लिए औसत तंत्रिका की मोटर शाखा; (18)फ्लेक्सर डिजिटोरम प्रोफंडस मांसपेशी के लिए औसत तंत्रिका की मोटर शाखा; (19)थेनार क्षेत्र के लिए औसत तंत्रिका की संवेदी शाखा; (20)पहले इंटरओसियस स्पेस की आम पालमार धमनी; (21)पहले अंक की रेडियल पालमार डिजिटल धमनी; (22)थेनार मांसपेशियों के लिए औसत तंत्रिका की मोटर शाखा; (23)पालमार धमनी आर्क; (24)पहले अंक की रेडियल पालमार डिजिटल तंत्रिका; (25)पहले अंक की उलनार पालमार डिजिटल तंत्रिका; (26)तीसरे इंटरसोसेसस स्पेस की आम पालमार धमनी; (27)पहले तीन लुम्ब्रिक मांसपेशियों के लिए औसत तंत्रिका के टर्मिनल डिवीजनों की मोटर शाखाएं; (28)दूसरे, तीसरे और चौथे अंकों की उलनार पालमार डिजिटल नसों; (29)उल्नार पालमार डिजिटल धमनियों को चौथे और पांचवें अंक के लिए; (30)दूसरे, तीसरे और चौथे अंकों की रेडियल पालमार डिजिटल नसों; (31)पांचवें अंक की रेडियल पालमार डिजिटल धमनी; (32)फोरपंजा (नीले छायांकित क्षेत्र) में औसत तंत्रिका का त्वचा क्षेत्र। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 2
चित्रा 2: हाथ और अक्षीय क्षेत्रों में औसत तंत्रिका की शल्य चिकित्सा शरीर रचना विज्ञान दिखा चूहे के दाहिने अग्रअंग की तस्वीर।
सीआर, कपाल; मुझे, मध्यस्थ कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 3
चित्रा 3: सर्जरी के बाद 100 दिनों की अवधि में विभिन्न प्रयोगात्मक समूह में सकारात्मक लोभी परीक्षण के साथ चूहों का प्रतिशत। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 4
चित्रा 4: विभिन्न प्रायोगिक समूहों में कॉन्ट्रालेटरल पंजा को सामान्यीकृत संचालित फोर्प में संचयी पिन चुभन परीक्षण परिणामों का उपयोग करके नोसेप्शन मूल्यांकन।
ऊर्ध्वाधर बार 95% आत्मविश्वास अंतराल का प्रतिनिधित्व करते हैं। आंकड़ा के ऊपरी हिस्से में क्षैतिज लाइनें प्रायोगिक समूहों के बीच सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण मतभेदों का संकेत देती हैं, ***पी एंड एलटी;0.001। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 5
चित्रा 5: विभिन्न प्रयोगात्मक समूहों में सीढ़ी रनिंग टेस्ट में औसत गति।
ऊर्ध्वाधर बार 95% आत्मविश्वास अंतराल का प्रतिनिधित्व करते हैं। आंकड़ा के ऊपरी हिस्से में तारक समूहों के बीच सांख्यिकीय महत्वपूर्ण मतभेदों का संकेत देते हैं, * पीएंडएलटी;0.001। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 6
चित्रा 6: नकली और एक्सिजन समूहों में रस्सी परीक्षण में औसत चढ़ाई वेग ।
ऊर्ध्वाधर बार 95% आत्मविश्वास अंतराल का प्रतिनिधित्व करते हैं। आंकड़ा के ऊपरी हिस्से में तारक समूहों के बीच सांख्यिकीय महत्वपूर्ण अंतर दिखाते हैं, * पीएंडएलटी;0.05; **पीएंडएलटी;0.01। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 7
चित्रा 7: विभिन्न प्रयोगात्मक समूहों में ट्रैक मापदंडों घूमना।
संचालित अंग पर मूल्यों को कॉन्ट्रालेटरल अंग को सामान्यीकृत साधनों के प्रतिशत के रूप में व्यक्त किया जाता है। (क)रुख कारक; (ख)प्रिंट लंबाई; (ग)उंगली फैलाने का कारक; (D)मध्यवर्ती उंगली फैलकारक; (ई)स्ट्राइड लेंथ; (एफ)समर्थन का आधार । ऊर्ध्वाधर बार 95% आत्मविश्वास अंतराल का प्रतिनिधित्व करते हैं। आंकड़ा के ऊपरी हिस्से में क्षैतिज लाइनें प्रायोगिक समूहों के बीच सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण मतभेदों का संकेत देती हैं। D30, D60, D90 = 30, 60, और सर्जरी के बाद 90 दिन, * पी एंड एलटी; 0.05; **पीएंडएलटी;0.01; पीएंडएलटी;0.001। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 8
चित्रा 8: मतलब तापमान अंतर अवरक्त थर्मोग्राफी द्वारा पंजीकृत।
बॉक्स भूखंड संचालित पक्ष (दाईं ओर) पर औसत तंत्रिका के पालमार क्षेत्र और शाम (एन = 17) और एक्सीशन (एन = 17) समूहों, * पी एंड एलटी;0.05 में कॉन्ट्रालेटरल साइड (बाएं) के बीच तापमान अंतर का प्रतिनिधित्व करते हैं; **पीएंडएलटी;0.01। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 9
चित्रा 9: सर्जरी के बाद पहले 45 दिनों के दौरान एक्सिजन समूह से एक जानवर के विशिष्ट अवरक्त थर्मोग्राफी पैटर्न। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 10
चित्रा 10: सर्जरी के 90 दिन बाद शाम और तंत्रिका भ्रष्टाचार समूहों के किसी जानवर से यौगिक मांसपेशी कार्रवाई क्षमता(सीएमएपी)के विशिष्ट पैटर्न। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 11
चित्रा 11: दोनों पूर्वपंजों पर कलाई फ्लेक्सन ताकत का मूल्यांकन 90 दिनों के विभिन्न प्रयोगात्मक समूहों में पश्चात।
कलाई फ्लेक्सन ताकत 30 एस की समय अवधि में वक्र (AUC) के तहत क्षेत्र का उपयोग कर और supratetanic उत्तेजना का उपयोग कर मूल्यांकन किया गया था । वर्टिकल लाइनें 95% कॉन्फिडेंस इंटरवल को निरूपित करती हैं। आंकड़ा के ऊपरी हिस्से में क्षैतिज लाइनें समूहों के बीच सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण मतभेदों को उजागर करती हैं, **पीएंड एलटी;0.01। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 12
चित्रा 12: सर्जरी के 100 दिन बाद फ्लेक्सर कार्पी रेडिएलिस मांसपेशी वजन और स्थूल उपस्थिति।
(A)विभिन्न प्रायोगिक समूहों में सामान्यीकृत फ्लेक्सर कार्पी रेडिस मांसपेशी वजन का चित्रण करने वाले बॉक्स भूखंड, **पी एंड एलटी; 0.01; पीएंडएलटी;0.001। (ख) शाम और एक्सिजन प्रायोगिक समूहों में दाईं और बाईं ओर मांसपेशियों की तस्वीरें । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

पैरामीटर पैरामीटर महत्व नकली समूह एक्सिजन ग्रुप एनजी समूह
न्यूरोलॉजिकल उत्तेजना सीमा (%) तंत्रिका उत्थान का मूल्यांकन, क्योंकि सीमैप या दृश्यमान मांसपेशियों के संकुचन12 का उत्पादन करने के लिए आवश्यक तंत्रिका फाइबर की एक न्यूनतम संख्या है 281.63 ± 271.65 5359.98 ± 3466.52 2108.12 ± 2115.13
मोटर उत्तेजना सीमा (%) तंत्रिका उत्थान का मूल्यांकन, क्योंकि सीमैप या दृश्यमान मांसपेशियों के संकुचन12 का उत्पादन करने के लिए आवश्यक तंत्रिका फाइबर की एक न्यूनतम संख्या है 462.52 ± 118.91 1694.10 ± 503.24 1249.50 ± 503.24
विलंबता (%) सबसे तेजी से तंत्रिका फाइबर में तंत्रिका चालन वेग का आकलन, कि सबसे बड़ा myelinated फाइबर४४ कहना है 113.55 ± 25.04 N/A 132.80 ± 69.95
न्यूरोमस्कुलर ट्रांसड्यूक्शन वेग (%) सबसे तेजी से तंत्रिका फाइबर में तंत्रिका चालन वेग का आकलन, कि सबसे बड़ा myelinated फाइबर४४ कहना है 92.01 ± 20.88 N/A 91.30 ± 26.51
सीएमएपीएस आयाम (%) पुनर्निर्मित मोटर इकाइयों की संख्या का मूल्यांकन34 110.63 ± 45.66 N/A 41.60 ± 24.84
सीएमएपी अवधि (%) मांसपेशियों के अंतरीकरण के सिंक्रोनी का आकलन, जो मांसपेशियों के पुनर्वृक्तीकरण की डिग्री और इनरवेटिंग मोटर फाइबर44,,45 के myelination पर निर्भर है 101.12 ± 23.92 N/A 151.06 ± 54.52
एनजी,तंत्रिका भ्रष्टाचार
सीएमएपी,यौगिक मांसपेशी कार्रवाई क्षमता।
N/A,गैर लागू
सभी मापदंडों को औसत कॉन्ट्रालेटरल मूल्यों के प्रतिशत के रूप में व्यक्त किया जाता है।
संख्यात्मक चर औसत ± मानक विचलन के रूप में व्यक्त किए जाते हैं।

तालिका 1: प्रयोग के अंत में इलेक्ट्रोन्यूरोमायोग्राफिक मूल्यांकन।

Discussion

यह पेपर चूहे में विभिन्न प्रकार के एमएन घावों और मरम्मत बनाने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करता है। इसके अतिरिक्त, यह दिखाता है कि कई गैर-आक्रामक व्यवहार परीक्षणों और शारीरिक मापों का उपयोग करके इस तंत्रिका की कार्यात्मक वसूली का मूल्यांकन कैसे किया जाए।

विशेष रूप से, इस पेपर में वर्णित कई कार्यात्मक परीक्षण, अर्थात् सीढ़ी रनिंग टेस्ट और रस्सी परीक्षण, खाद्य इनाम51,,52,53प्राप्त करने की उम्मीद के साथ कार्य करने की चूहे की इच्छा पर काफी निर्भर हैं।, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि चूहे के कुछ उपभेद इस प्रकार केपरीक्षण51, 52,,5353में प्रशिक्षण और प्रदर्शन करने के लिए अधिक उत्तरदायी हैं . उदाहरण के लिए, लुईस चूहे प्रशिक्षण चरण में और बाद में51,,52,,53दोनों में इन परीक्षणों में खराब प्रदर्शन करते हैं।

रैट हाउसिंग को अपने प्राकृतिक अन्वेषणात्मक व्यवहार के साथ समझौते में आंदोलन की पर्याप्त स्वतंत्रता की अनुमति देनी चाहिए, इसके अलावा प्रायोगिक जानवरों को कार्यात्मकपरीक्षण19में मौजूद कुछ तत्वों से परिचित होने की अनुमति देनी चाहिए। इसलिए, आंदोलन की उच्च स्वतंत्रता की अनुमति देने वाले आवास के विभिन्न रूपों को दिखाया गया है। बड़े पिंजरों को संवर्धन तत्वों के साथ व्यक्तिगत किया जाता है जो बाद में कार्यात्मक परीक्षणों (जैसे, रस्सियों और सीढ़ी) में उपयोग किए जाते हैं।

यकीनन, इन समृद्ध तत्वों के साथ-साथ शामिल चल पहियों और व्यक्तिगत प्रशिक्षण क्षेत्रों के साथ पिंजरों पश्चात फिजियोथेरेपी का एक रूप प्रदान करते हैं जो पेरिफेरल तंत्रिका तंत्र10पर संचालित मानव रोगियों के लिए पेश किया जाता है।

गौरतलब है, हालांकि कुछ लेखक चमड़े के ऊतकों और मांसपेशियों के मुखाग्नि को स्पष्ट रूप से या 15 नंबर स्केलपेल के साथ साफ काटने से विच्छेदन करने की वकालत करते हैं, इन संरचनाओं को विच्छेदन करते समय थर्मोके्टरी का उपयोग पोस्टऑपरेटिव हेमेटोमा के जोखिम को कम करने की सिफारिश की जाती है।

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि चूहे में परिधीय तंत्रिका मरम्मत के विभिन्न पहलुओं का परीक्षण करने के लिए कई परीक्षण तैयार किए गए हैं, अर्थात् एक्सोनल पुनर्जनन, लक्ष्य पुनर्निरशन, और कार्यात्मक वसूली, जिनमें से कुछ इस अध्ययन के दायरे से बाहर हैं29,,54,,55,,56। उदाहरण के लिए, काइनेमेटिक विश्लेषण29,,36,,55 और हिस्टोमॉर्फेमेट्रिक मूल्यांकन29,,36,,57 को कई लेखकों द्वारा व्यापक रूप से नियोजित किया जाता है। इसके अतिरिक्त, इनमें से कई परीक्षणों में दक्षता को अधिकतम करने और/या प्रजनन क्षमता५४के लिए भिन्नताएं शामिल हैं । उदाहरण के लिए, यांत्रिक algisemetry (यानी, यांत्रिक दर्दनाक उत्तेजनाओं के लिए प्रतिक्रियाओं का मूल्यांकन) गुणात्मक रूप से एक दिए गए वॉन Frey फिलामेंट का उपयोग कर मूल्यांकन किया जा सकता है, जैसा कि वर्तमान कागज में वर्णित है, या क्रमिक रूप से मजबूत वॉन Frey फिलामेंट्स का उपयोग कर, या यहां तक कि मात्रात्मक रूप से इलेक्ट्रॉनिक उपकरणों का उपयोग कर जो30,,54तक बढ़ते दबाव ों को लागू करते हैं।

इसी तरह, हालांकि कई लेखक चूहे में फोरलिम्ब तंत्रिका मरम्मत का मूल्यांकन करने के लिए चलने ट्रैक विश्लेषण का उपयोग करते हैं, अन्य लेखकों का तर्क है कि एकल एमएन घाव अक्सर पंजप्रिंट10,,58,,59में प्रजनन योग्य परिवर्तन पैदा करने में विफल रहते हैं। इसके अलावा, कुछ ने कहा है कि ये परिवर्तन मांसपेशियों की वसूली10,60के आनुपातिक नहीं हो सकते हैं। इसे ध्यान में रखते हुए, कुछ शोधकर्ताओं ने मुख्य रूप से खंडीय तंत्रिका पुनर्निर्माण10,,50,,61के बाद नेव घावों को कुचलने के बाद वसूली का आकलन करते समय फोरपंजा में ट्रैक विश्लेषण के उपयोग की वकालत की है।

लोभी परीक्षण का व्यापक रूप से उपयोग एमएन16,27द्वारा नियंत्रित मांसपेशियों की मोटर वसूली का मूल्यांकन करने के लिए किया जाता है । इस परीक्षण के साथ प्राप्त डेटा की एकरूपता और प्रजनन क्षमता की गारंटी देने के लिए, बर्टेल्ली एट अल द्वारा प्रस्तावित अच्छी तरह से स्थापित पद्धति का उपयोग करलोइंग टेस्ट लागू करने की सिफारिश कीजाती है। हालांकि, वर्तमान प्रोटोकॉल इस बात में भिन्न है कि यह नियमित रूप से अनुचित तनाव को रोकने के लिए कॉन्ट्रालेटरल पंजा को स्थिर नहीं करताहै 11,,27। यह भी ध्यान दिया जाना चाहिए कि अन्य लेखक, अघायल पंजा को स्थिर करने के बाद, मात्रात्मक रूप से डायनेमोमीटर या स्केल27,,56का उपयोग करके लोभी परीक्षण का आकलन करते हैं। हालांकि, इस मात्रात्मक मूल्यांकन शक्ति शोधकर्ता चूहे की पूंछ26पर लागू होता है से प्रभावित हो सकता है । इसके अलावा, डिजिटल फ्लेक्सर मांसपेशियों द्वारा उत्पन्न ताकत (केवल चूहे में एमएन द्वारा अंतरित और लोभी परीक्षण9की वस्तु) द्वारा कलाई के फ्लेक्सर द्वारा उत्पादित ताकत से अंतर करना मुश्किल है, जिसमें फ्लेक्सर कार्पी उल्नारिस शामिल है जो उल्नार तंत्रिका9,,10,,27से अपने अंतरीकरण को प्राप्त करता है। इन संभावित पूर्वाग्रहों को दरकिनार करने की कोशिश करने के लिए, यह प्रोटोकॉल चिकित्सा अनुसंधान परिषद के पैमाने के समान एक को-ऑर्डिनेटर पैमाने का उपयोग करता है जो आमतौर पर मनुष्यों में मांसपेशियों की ताकत को ग्रेड करने के लिए उपयोग किया जाता है10,,11,,62। वैकल्पिक रूप से, अन्य लेखकों ने वीडियो विश्लेषण और वीडियो आधारित स्कोरिंग सिस्टम11,,63का उपयोग करके लोभी का विस्तृत आकलन बताया है।

सियाटिक तंत्रिका की तुलना में एमएन का उपयोग करने का एक संभावित नुकसान यह है कि उत्तरार्द्ध तंत्रिका के बारे में अधिक मात्रा में जानकारी उपलब्ध है। इसके बदले में, एमएन के साथ प्राप्त आंकड़ों की तुलना पूर्व प्रायोगिक कार्यों के साथ अधिक कठिन46,,48,,64कर सकता है। इसके अतिरिक्त, सियाटिक तंत्रिका की तुलना में एमएन का छोटा आकार सर्जिकल हेरफेर को8,12,,27,,56,,65को अधिक चुनौतीपूर्ण बनाता है।,

इस पेपर में वर्णित कार्यप्रणाली के विपरीत, आर्म और थेनार क्षेत्रों51में रखे गए ट्रांसक्यूटेएनस मोनोएकाधिकार इलेक्ट्रोड का उपयोग करके इलेक्ट्रोन्यूरोमाइलोग्राफी मूल्यांकन किया जा सकता है। कम आक्रामक होने के बावजूद, इस विधि में हाथ क्षेत्र9,,51में उल्नार तंत्रिका के महंगा होने की संभावना के कारण संभावित भ्रम का खतरा होता है।

अधिकांश लेखक इस बात से सहमत हैं कि चूहे में उपयोग किए जाने वाले सभी परीक्षण सामंजस्यपूर्ण परिणाम प्रदान नहीं करते हैं, क्योंकि परिधीय तंत्रिका मरम्मत कारकों की एक जटिल सरणी पर निर्भर करती है, जिसमें न्यूरॉन अस्तित्व, एक्सोनल विस्तार और छंटाई, सिनैप्टोजेनेसिस, डेनवेट संवेदी अंगों और मोटर इकाइयों का सफल पुनर्ग्रहण, और मस्तिष्क प्लास्टिसिटी7,,10,,50,66,,67शामिल है।,

अंत में, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि कृंतक मॉडलों की एक महत्वपूर्ण चेतावनी यह है कि चूहे परिधीय तंत्रिकाएं उनके अंत अंगों के बहुत करीब हैं और उनके पास हार्मोनस मानव संरचनाओं की तुलना में बहुत छोटे क्रॉस-सेक्शनल क्षेत्र हैं। हालांकि, यह आकार अंतर कृंतक में तेजी से प्रयोगात्मक डेटा की गारंटी देता है, और मनुष्यों की तुलना में चूहों में बेहतर समग्र परिणाम 68 की उम्मीद की जानीचाहिए। दरअसल, कई लेखकों ने चेतावनी दी है कि देखभाल का उपयोग किया जाना चाहिए जब मनुष्योंकेलिए कृंतक का उपयोग कर परिधीय तंत्रिका मरम्मत में प्राप्त प्रायोगिक डेटा एक्सट्रपलेशन की कोशिश कर रहा7,69। रहनुमा मॉडल अधिक तुलनीय70माना जाता है. फिर भी, उनका उपयोग नैतिक, साजो-सामान और बजट की कमी71से जुड़ा हुआ है।

हालांकि सियाटिक तंत्रिका परिधीय तंत्रिका अनुसंधान में सबसे अधिक उपयोग की जाने वाली तंत्रिका है, चूहा एमएन कई फायदे प्रस्तुत करता है। उदाहरण के लिए, एमएन घाव संयुक्त संकुचन और प्रभावित पंजा11,,12,16,,56के ऑटोम्यूरेशन की एक छोटी घटनाओं से जुड़े होते हैं।, गौरतलब है कि इसके बाद के ऑटोटॉमी से 11-70% चूहे पीड़ित होते हैं। इससे वर्तमान मूल्यांकन ों को सियाटिक सूचकांक असंभव हो सकताहै । यह, बदले में, एक दिए गए सांख्यिकीय शक्ति बोझिल15प्राप्त करने के लिए आवश्यक जानवरों की संख्या का अनुमान बनाता है ।

इसके अलावा, चूंकि एमएन सियाटिक तंत्रिका से कम होता है, इसलिए तंत्रिका वसूली58,,72,,73,74,,75,,76की जल्दी ही देखी जाती है।, इसके अलावा, एमएन मांसपेशियों की जनता द्वारा कवर नहीं किया जाता है, जिससे इसका विच्छेदन सियाटिक तंत्रिका16की तुलना में तकनीकी रूप से आसान हो जाता है। इसके अतिरिक्त, एमएन हाथ में उल्नार तंत्रिका के लिए एक समानांतर रास्ता है। इसलिए, उल्नार तंत्रिका को आसानी से एमएन चोटों की मरम्मत के लिए तंत्रिका भ्रष्टाचार के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है। अंत में, मनुष्यों में, अधिकांश परिधीय तंत्रिका घाव ऊपरी अंग में होते हैं, जो चूहे77,,78में इस तंत्रिका के उपयोग का समर्थन करता है।

यकीनन, कृंतक प्रयोगात्मक जानवर हैं जो आमतौर पर परिधीय तंत्रिका मरम्मत48,,79के दायरे में उपयोग किए जाते हैं। जैसा कि दिखाया गया है, चूहा एमएन परिधीय तंत्रिका घाव और मरम्मत का एक सुविधाजनक मॉडल है। वास्तव में, मोटर और संवेदी वसूली का आकलन करने के लिए कई मानकीकृत रणनीतियां उपलब्ध हैं, जिससे परिणाम36,46,,60,,80,81,,82की आसान तुलना की अनुमति मिलती है।, इनमें से कई विधियां गैर-आक्रामक हैं, जो दैनिक मूल्यांकन की अनुमति देती हैं।

इसके अलावा, फिजियोथेरेपी परिधीय तंत्रिका चोटों से उबरने वाले रोगियों की देखभाल के मानक का हिस्सा है। जैसा कि इस पेपर में प्रदर्शित किया गया है, एमएन चोटों4,,5को प्रस्तुत चूहों को एक पश्चात फिजियोथेरेपी जैसे वातावरण प्रदान करने के लिए कई रणनीतियां हैं। इसलिए, यह मॉडल नैदानिक परिदृश्य को दोहराने के लिए विशेष रूप से उपयुक्त है, जिससे मानव,प्रजातियों12,27,,48,56,,58,,83के परिणामों के बहिर्वेशन की सुविधा होती है।,

जैसा कि इस पेपर में दिखाया गया है, चूहे के एमएन मॉडल में मोटर और संवेदी वसूली का आकलन करने के लिए कई मानकीकृत रणनीतियां उपलब्ध हैं। इनमें से अधिकांश गैर-आक्रामक प्रक्रियाएं हैं, जो लगातार मूल्यांकन की अनुमति देती हैं। इसके अलावा, मानव प्रजातियों में अधिकांश परिधीय तंत्रिका घाव ऊपरी अंग में होते हैं, उल्लिखित प्रायोगिक फिजियोथेरेपी सेटिंग्स नैदानिक संदर्भ में वसूली की अधिक उपयुक्त नकल कर सकती हैं। यकीनन, यह मानव प्रजातियों के लिए परिणामों के बहिर्वेशन की सुविधा प्रदान कर सकता है, और चूहे में इस तंत्रिका के उपयोग को मान्य कर सकता है।

Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

डायोगो कैसल को उन्नत चिकित्सा शिक्षा के लिए कार्यक्रम से अनुदान मिला, जिसे फंडाकाओ कैलोस्टे गुलबेनकिआन, फंडाकाओ चंपालिमौद, मिनेस्टेरियो दा साऊडे ई फंडाकाओ पैरा ए सिएनसिया ई टेक्नोलोगिया, पुर्तगाल द्वारा प्रायोजित किया गया है। लेखक चित्रा 1में उदाहरण ड्राइंग के लिए श्री फिलिप फ्रैंको के बहुत आभारी हैं । लेखक वीडियो को फिल्माने और संपादन में श्री अल्बर्टो सेवेरिनो की तकनीकी मदद का शुक्रिया अदा करना चाहेंगे । अंत में, लेखक पशु अधिग्रहण और रखरखाव से संबंधित सभी साजो-सामान के पहलुओं में उनकी मदद के लिए सुश्री सारा मार्क्स को धन्यवाद देना चाहते हैं ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Acetaminophen Amazon https://www.amazon.com/Childrens-Tylenol-grape-flavor-ages/dp/B0051VVVZG
Acland clamps Fine Science Tools 00398 V http://www.merciansurgical.com/aclandclamps.pdf
Acland Single Clamps B-1V (Pair) Fine Science Tools 396 http://www.merciansurgical.com
Biogel Surgical Gloves Medex Supply 30465 https://www.medexsupply.com
BSL Analysis BIOPAC Systems https://www.biopac.com/
Castroviejo needle holders Fine Science Tools 12565-14 http://s-and-t.ne
Clamp applicator Fine Science Tools CAF-4 http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf
Constante voltage stimulator BIOPAC Systems STM200 https://www.biopac.com/product/constant-voltage-stimulator-unipolar-pulse/
Cutasept skin disinfectant Bode Chemie http://www.productcatalogue.bode-chemie.com/products/skin/cutasept_f.php
Dafilon 10-0 G1118099 http://www.bbraun.com/cps/rde/xchg/bbraun-com/hs.xsl/products.html?prid=PRID00000816
Derf Needle Holders 12 cm TC Fine Science Tools 703DE12 http://www.merciansurgical.com
Dry heat sterilizer Quirumed 2432 http://www.quirumed.com/pt/material-de-esterilizac-o/esterilizadores
Dynamometer SAUTER FH5 https://www.sauter.eu/shop/en/measuring-instruments/force-measurement/FH-S/
Electroneuromiography setup BIOPAC Systems MP36 https://www.biopac.com/product/biopac-student-lab-basic-systems/
Ethilon 5-0 W1618 http://www.farlamedical.co.uk/
FLIR Software FLIR
Graeffe forceps 0.8 mm tips curved Fine Science Tools 11052-10 http://www.finescience.de
Graph paper Ambar
Heat Lamp HL-1 Harvard Apparatus 727562 https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku3_10001_11051_39108_-1_HAI_ProductDetail_N_37610_37611_37613
Heparin Sodium Solution (Heparin LEO 10000IU/ml) Universal Drugstore http://www.universaldrugstore.com/medications/Heparin+LEO/10000IU%2Fml
High-Temperature Cautery Fine Science Tools AA03 http://www.boviemedical.com/products_aaroncauteries_high.asp
Homeothermic Blanket System with Flexible Probe Harvard Apparatus 507220F https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku3_10001_11051_39108_-1_HAI_ProductDetail_N_37610_37611_37613
Infrared camera FLIR E6 http://www.flir.eu/instruments/e6-wifi/
Instrapac - Adson Toothed Forceps (Extra Fine) Fine Science Tools 7973 http://www.millermedicalsupplies.com
Iris Scissors 11.5 cm Curves EASY-CUT Fine Science Tools EA7613-11 http://www.merciansurgical.com
Ketamine hydrochloride/xylazine hydrochloride solution Sigma- Aldrich K113 https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/k113?lang=pt&region=PT
Lacri-lube Eye Ointment 5g Express Chemist LAC101F http://www.expresschemist.co.uk/lacri-lube-eye-ointment-5g.html
Mayo Scissors 14 cm Straight Chamfered Blades EASY-CUT Fine Science Tools EA7652-14 http://www.merciansurgical.com
Meloxicam Recropharma Mobic https://www.recropharma.com/product-pipeline/meloxicam
Methylene Blue solution Sigma- Aldrich https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product
Micro Jewellers Forceps 11 cm straight 00108 Fine Science Tools JF-5 http://www.merciansurgical.com
Micro Jewellers Forceps 11cm angulated 00109 Fine Science Tools JFA-5b http://www.merciansurgical.com
Micro retractor Fine Science Tools RS-6540 http://www.finescience.de
Micro Scissors Round Handles 15 cm Straight Fine Science Tools 67 http://www.merciansurgical.com
Micro-vessel dilators 11 cm 0.3 mm tips 00124 Fine Science Tools D-5a.2 http://www.merciansurgical.com
Monosyn 5-0 15423BR http://www.mcfarlanemedical.com.au/15423BR/SUTURE-MONOSYN-5_or_0-16MM-70CM-(C0023423)-BOX_or_36/pd.php
Normal saline for irrigation Hospira, Inc. 0409-6138-22 http://www.hospira.com/en/search?q=sodium+chloride+irrigation%2C+usp&fq=contentType%3AProducts
Operating microscope Leica Surgical Microsystems http://www.leica-microsystems.com/products/surgical-microscopes/
Skin Skribe Surgical Skin Marker Moore Medical 31456 https://www.mooremedical.com/index.cfm?/Skin-Skribe-Surgical-Skin-Marker/&PG=CTL&CS=HOM&FN=ProductDetail&PID=1740&spx=1
Snacks Versele-Laga Complete Crock-Berry http://www.versele-laga.com/en/complete/products/complete-crock-berry
Straight mosquito forcep Fine Science Tools 91308-12 http://www.finescience.de
Surgical drapes Barrier 800430 http://www.molnlycke.com/surgical-drapes/
Veet Sensitive Skin Hair Removal Cream Aloe Vera and Vitamin E 100 ml Veet http://www.veet.co.uk/products/creams/creams/veet-hair-removal-cream-sensitive-skin/

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References

  1. Lad, S. P., Nathan, J. K., Schubert, R. D., Boakye, M. Trends in median, ulnar, radial, and brachioplexus nerve injuries in the United States. Neurosurgery. 66 (5), 953-960 (2010).
  2. Murovic, J. A. Upper-extremity peripheral nerve injuries: a Louisiana State University Health Sciences Center literature review with comparison of the operative outcomes of 1837 Louisiana State University Health Sciences Center median, radial, and ulnar nerve lesions. Neurosurgery. 65 (4), Suppl 11-17 (2009).
  3. Dy, C. J., Isaacs, J. American Society for Surgery of the Hand surgical anatomy: nerve reconstruction Vol. 1. Dy, C. J., Isaacs, J. , American Society for Surgery of the Hand. (2017).
  4. Trehan, S. K., Model, Z., Lee, S. K. Nerve Repair and Nerve Grafting. Hand Clinics. 32 (2), 119-125 (2016).
  5. Boyd, K. U., Fox, I. K. Nerve surgery Vol. 1. Mackinnon, S. E. , Thieme. Ch. 4 75-100 (2015).
  6. Geuna, S., et al. Update on nerve repair by biological tubulization. Journal of Brachial Plexius Peripheral Nerve Injury. 9 (1), 3 (2014).
  7. Sulaiman, W., Gordon, T. Neurobiology of peripheral nerve injury, regeneration, and functional recovery: from bench top research to bedside application. Ochsner Journal. 13 (1), 100-108 (2013).
  8. Angelica-Almeida, M., et al. Brachial plexus morphology and vascular supply in the wistar rat. Acta Medica Portuguesa. 26 (3), 243-250 (2013).
  9. Bertelli, J. A., Taleb, M., Saadi, A., Mira, J. C., Pecot-Dechavassine, M. The rat brachial plexus and its terminal branches: an experimental model for the study of peripheral nerve regeneration. Microsurgery. 16 (2), 77-85 (1995).
  10. Casal, D., et al. Reconstruction of a 10-mm-long median nerve gap in an ischemic environment using autologous conduits with different patterns of blood supply: A comparative study in the rat. PLoS One. 13 (4), 0195692 (2018).
  11. Stößel, M., Rehra, L., Haastert-Talini, K. Reflex-based grasping, skilled forelimb reaching, and electrodiagnostic evaluation for comprehensive analysis of functional recovery-The 7-mm rat median nerve gap repair model revisited. Brain and Behavior. 7 (10), 00813 (2017).
  12. Manoli, T., et al. Correlation analysis of histomorphometry and motor neurography in the median nerve rat model. Eplasty. 14, 17 (2014).
  13. Ronchi, G., et al. The Median Nerve Injury Model in Pre-clinical Research - A Critical Review on Benefits and Limitations. Frontiers in Cellular Neuroscience. 13, 288 (2019).
  14. Weber, R. A., Proctor, W. H., Warner, M. R., Verheyden, C. N. Autotomy and the sciatic functional index. Microsurgery. 14 (5), 323-327 (1993).
  15. Charan, J., Kantharia, N. D. How to calculate sample size in animal studies. Journal of Pharmacology & Pharmacotherapeutics. 4 (4), 303-306 (2013).
  16. Bertelli, J. A., Mira, J. C. The grasping test: a simple behavioral method for objective quantitative assessment of peripheral nerve regeneration in the rat. Journal of Neuroscience Methods. 58 (1-2), 151-155 (1995).
  17. Casal, D., et al. A Model of Free Tissue Transfer: The Rat Epigastric Free Flap. Journal of Visualized Experiments. (119), e55281 (2017).
  18. Bertens, A. P. M. G., et al. Anaesthesia, analgesia and euthanasia. Principles of Laboratory Animal Science. Van Zuthphen, L. F., Baumas, V., Beymen, A. C., et al. , Elsevier. 277-311 (2001).
  19. Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. Principles of rodent surgery for the new surgeon. Journal of Visualized Experiments. (47), e2586 (2011).
  20. Lee-Parritz, D. Analgesia for rodent experimental surgery. Israel Journal of Veterinary Medicine. 62 (3), 74 (2007).
  21. Roughan, J. V., Flecknell, P. A. Evaluation of a short duration behaviour-based post-operative pain scoring system in rats. European Journal of Pain. 7 (5), 397-406 (2003).
  22. Bauder, A. R., Ferguson, T. A. Reproducible mouse sciatic nerve crush and subsequent assessment of regeneration by whole mount muscle analysis. Journal of Visualized Experiments. (60), e3606 (2012).
  23. Ronchi, G., et al. Functional and morphological assessment of a standardized crush injury of the rat median nerve. Journal of Neuroscience Methods. 179 (1), 51-57 (2009).
  24. Matsumine, H., et al. Vascularized versus nonvascularized island median nerve grafts in the facial nerve regeneration and functional recovery of rats for facial nerve reconstruction study. Journal of Reconstructive Microsurgery. 30 (2), 127-136 (2014).
  25. Mickley, A. G., Hoxha, Z., Biada, J. M., Kenmuir, C. L., Bacik, S. E. Acetaminophen Self-administered in the Drinking Water Increases the Pain Threshold of Rats (Rattus norvegicus). Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 45 (5), 48-54 (2006).
  26. Mandillo, S., et al. Reliability, robustness, and reproducibility in mouse behavioral phenotyping: a cross-laboratory study. Physiological Genomics. 34 (3), 243-255 (2008).
  27. Papalia, I., Tos, P., Stagno d'Alcontres, F., Battiston, B., Geuna, S. On the use of the grasping test in the rat median nerve model: a re-appraisal of its efficacy for quantitative assessment of motor function recovery. Journal of Neuroscience Methods. 127 (1), 43-47 (2003).
  28. Costa, L. M., Simoes, M. J., Mauricio, A. C., Varejao, A. S. Chapter 7: Methods and protocols in peripheral nerve regeneration experimental research: part IV-kinematic gait analysis to quantify peripheral nerve regeneration in the rat. International Reviews in Neurobiology. 87, 127-139 (2009).
  29. Geuna, S., Varejao, A. S. Evaluation methods in the assessment of peripheral nerve regeneration. Journal of Neurosurgery. 109 (2), author reply 362 360-362 (2008).
  30. Howard, R. F., Hatch, D. J., Cole, T. J., Fitzgerald, M. Inflammatory pain and hypersensitivity are selectively reversed by epidural bupivacaine and are developmentally regulated. Anesthesiology. 95 (2), 421-427 (2001).
  31. Metz, G. A., Whishaw, I. Q. Cortical and subcortical lesions impair skilled walking in the ladder rung walking test: a new task to evaluate fore- and hindlimb stepping, placing, and co-ordination. Journal of Neuroscience Methods. 115 (2), 169-179 (2002).
  32. Thallmair, M., et al. Neurite growth inhibitors restrict plasticity and functional recovery following corticospinal tract lesions. Nature Neuroscience. 1 (2), 124-131 (1998).
  33. Brown, C. J., et al. Self-evaluation of walking-track measurement using a Sciatic Function Index. Microsurgery. 10 (3), 226-235 (1989).
  34. Hruska, R. E., Kennedy, S., Silbergeld, E. K. Quantitative aspects of normal locomotion in rats. Life Science. 25 (2), 171-179 (1979).
  35. Ferreira, T., Rasband, W. ImageJ user guide. ImageJ/Fiji. 1, 155-161 (2012).
  36. Dijkstra, J. R., Meek, M. F., Robinson, P. H., Gramsbergen, A. Methods to evaluate functional nerve recovery in adult rats: walking track analysis, video analysis and the withdrawal reflex. Journal of Neuroscience Methods. 96 (2), 89-96 (2000).
  37. Ludwig, N., Formenti, D., Gargano, M., Alberti, G. Skin temperature evaluation by infrared thermography: Comparison of image analysis methods. Infrared Physics & Technology. 62, 1-6 (2014).
  38. Bennett, G. J., Ochoa, J. L. Thermographic observations on rats with experimental neuropathic pain. Pain. 45 (1), 61-67 (1991).
  39. Wakisaka, S., Kajander, K. C., Bennett, G. J. Abnormal skin temperature and abnormal sympathetic vasomotor innervation in an experimental painful peripheral neuropathy. Pain. 46 (3), 299-313 (1991).
  40. Muntean, M. V., et al. Using dynamic infrared thermography to optimize color Doppler ultrasound mapping of cutaneous perforators. Medical Ultrasonography. 17 (4), 503-508 (2015).
  41. Shterenshis, M. Challenges to Global Implementation of Infrared Thermography Technology: Current Perspective. Central Asian Journal of Global Health. 6 (1), 289 (2017).
  42. Wilbourn, A. J. Nerve surgery Vol. 1. Mackinnon, S. E. , Thieme. 59-74 (2015).
  43. Wu, Y., Martínez, M. ÁM., Balaguer, P. O. Electrodiagnosis in New Frontiers of Clinical Research. Turker, H. , InTech. Ch. 01 (2013).
  44. Werdin, F., et al. An improved electrophysiological method to study peripheral nerve regeneration in rats. Journal of Neuroscience Methods. 182 (1), 71-77 (2009).
  45. Sedghamiz, H., Santonocito, D. Unsupervised Detection and Classification of Motor Unit Action Potentials in Intramuscular Electromyography Signals. 2015 E-health and Bioengineering Conference IEEE. , 1-6 (2015).
  46. Hadlock, T. A., Koka, R., Vacanti, J. P., Cheney, M. L. A comparison of assessments of functional recovery in the rat. Journal of the Peripheral Nervous System. 4 (3-4), 258-264 (1999).
  47. Carstens, E., Moberg, G. P. Recognizing pain and distress in laboratory animals. Ilar Journal. 41 (2), 62-71 (2000).
  48. Tos, P., et al. Chapter 4: Methods and protocols in peripheral nerve regeneration experimental research: part I-experimental models. International Reviews in Neurobiology. 87, 47-79 (2009).
  49. Galtrey, C. M., Fawcett, J. W. Characterization of tests of functional recovery after median and ulnar nerve injury and repair in the rat forelimb. Journal of the Peripheral Nervous System. 12 (1), 11-27 (2007).
  50. Giusti, G., et al. Return of motor function after segmental nerve loss in a rat model: comparison of autogenous nerve graft, collagen conduit, and processed allograft (AxoGen). Journal of Bone and Joint Surgery American. 94 (5), 410-417 (2012).
  51. Stossel, M., Rehra, L., Haastert-Talini, K. Reflex-based grasping, skilled forelimb reaching, and electrodiagnostic evaluation for comprehensive analysis of functional recovery-The 7-mm rat median nerve gap repair model revisited. Brain and Behavior. 7 (10), 00813 (2017).
  52. Nikkhah, G., Rosenthal, C., Hedrich, H. J., Samii, M. Differences in acquisition and full performance in skilled forelimb use as measured by the 'staircase test' in five rat strains. Behavioral Brain Research. 92 (1), 85-95 (1998).
  53. Whishaw, I. Q., Gorny, B., Foroud, A., Kleim, J. A. Long-Evans and Sprague-Dawley rats have similar skilled reaching success and limb representations in motor cortex but different movements: some cautionary insights into the selection of rat strains for neurobiological motor research. Behavioral Brain Research. 145 (1-2), 221-232 (2003).
  54. Navarro, X. Functional evaluation of peripheral nerve regeneration and target reinnervation in animal models: a critical overview. European Journal of Neuroscience. 43 (3), 271-286 (2016).
  55. Costa, L. M., Simões, M. J., Maurício, A. C., Varejão, A. S. P. International Review of Neurobiology. 87, Academic Press. 127-139 (2009).
  56. Ronchi, G., et al. Functional and morphological assessment of a standardized crush injury of the rat median nerve. Journal of Neuroscience Methods. 179 (1), 51-57 (2009).
  57. Raimondo, S., et al. Chapter 5: Methods and protocols in peripheral nerve regeneration experimental research: part II-morphological techniques. International Reviews in Neurobiology. 87, 81-103 (2009).
  58. Bontioti, E. K. M., Dahlin, L. B. Regeneration and functional recovery in the upper extermity of rats after various types of nerve injuries. Journal of the Peripheral Nervous System. 8, 159-168 (2003).
  59. Schönfeld, L. M., Dooley, D., Jahanshahi, A., Temel, Y., Hendrix, S. Evaluating rodent motor functions: Which tests to choose. Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 83, 298-312 (2017).
  60. Urbancheck, M. S. Rat walking tracks do not reflect maximal muscle force capacity. Journal of Reconstructive Microsurgery. 15 (2), 143-149 (1999).
  61. Cudlip, S. A., Howe, F. A., Griffiths, J. R., Bell, B. A. Magnetic resonance neurography of peripheral nerve following experimental crush injury, and correlation with functional deficit. Journal of Neurosurgery. 96 (4), 755-759 (2002).
  62. Wang, Y., Sunitha, M., Chung, K. C. How to measure outcomes of peripheral nerve surgery. Hand Clinics. 29 (3), 349-361 (2013).
  63. Wang, H., Spinner, R. J., Sorenson, E. J., Windebank, A. J. Measurement of forelimb function by digital video motion analysis in rat nerve transection models. Journal of the Peripheral Nervous System. 13 (1), 92-102 (2008).
  64. Yanase, Y. Experimental and Clinical Reconstructive Microsurgery. Tamai, S., Usui, M., Yoshizu, T. , Springer-Verlag. Ch. 2 44-51 (2004).
  65. Barton, M. J., et al. Morphological and morphometric analysis of the distal branches of the rat brachial plexus. Italian Journal of Anatomy and Embryology. 121 (3), 240-252 (2016).
  66. Vincent, R. Adult and obstetrical brachial plexus injuries. Peripheral Nerve Surgery: Practical applications in the upper extremity. Slutsky, D. J., Hentz, V. R. , Churchill Livingstone. 299-317 (2006).
  67. Dahlin, L. B. Peripheral Nerve Surgery: Practical Applications in the Upper Extremity. Slutsky, D. J., Hentz, V. R. , Elsevier. Ch. 1 1-22 (2006).
  68. Vargel, I., et al. A comparison of various vascularization-perfusion venous nerve grafts with conventional nerve grafts in rats. Journal of Reconstructive Microsurgery. 25 (7), 425-437 (2009).
  69. Grinsell, D., Keating, C. Peripheral nerve reconstruction after injury: a review of clinical and experimental therapies. BioMed Research International. 2014, 698256 (2014).
  70. Wang, D., et al. A simple model of radial nerve injury in the rhesus monkey to evaluate peripheral nerve repair. Neural Regeneration Research. 9 (10), 1041-1046 (2014).
  71. Casal, D., et al. Unconventional Perfusion Flaps in the Experimental Setting: A Systematic Review and Meta-Analysis. Plastic Reconstructive Surgery. 143 (5), 1003-1016 (2019).
  72. Bontioti, E. End-to-side nerve repair. A study in the forelimb of the rat. , PhD thesis, Lund (2005).
  73. Bodine-Fowler, S. C., Meyer, R. S., Moskovitz, A., Abrams, R., Botte, M. J. Inaccurate projection of rat soleus motoneurons: a comparison of nerve repair techniques. Muscle Nerve. 20 (1), 29-37 (1997).
  74. Valero-Cabre, A., Navarro, X. H reflex restitution and facilitation after different types of peripheral nerve injury and repair. Brain Research. 919 (2), 302-312 (2001).
  75. Wall, P. D., et al. Autotomy following peripheral nerve lesions: experimental anaesthesia dolorosa. Pain. 7 (2), 103-111 (1979).
  76. Bertelli, J. A., Taleb, M., Saadi, A., Mira, J. C., Pecot-Dechavassine, M. The rat brachial plexus and its terminal branches: an experimental model for the study of peripheral nerve regeneration. Microsurgery. 16, 77-85 (1995).
  77. Wood, M. J., Johnson, P. J., Myckatyn, T. M. Nerve Surgery Vol. 1. Mackinnon, S. E., Yee, A. , Thieme. Ch. 1 1-40 (2015).
  78. Rosberg, H. E. Epidemiology of hand injuries in a middle-sized city in southern Sweden - a retrospective study with an 8-year interval. Scandinavian Journal of Plastic and Reconstructive Surgery and Hand Surgery. 38, 347-355 (2004).
  79. Gordon, T., Borschel, G. H. The use of the rat as a model for studying peripheral nerve regeneration and sprouting after complete and partial nerve injuries. Experimental Neurology. 287, Pt 3 331-347 (2017).
  80. Bertelli, J. A., Ghizoni, M. F. Concepts of nerve regeneration and repair applied to brachial plexus reconstruction. Microsurgery. 26 (4), 230-244 (2006).
  81. Bertelli, J. A., Mira, J. C. Behavioural evaluating methods in the objective clinical assessment of motor function after experimental brachial plexus reconstruction in the rat. Journal of Neuroscience Methods. 46, 203-208 (1993).
  82. Bertelli, J. A., Mira, J. C. The grasping test: a simple behavioral method for objective quantitative assessment of peripherla nerve regeneration in the rat. Journal of Neuroscience Methods. 58 (1-2), 151-155 (1995).
  83. Ronchi, G., et al. Standardized crush injury of the mouse median nerve. Journal of Neuroscience Methods. 188 (1), 71-75 (2010).

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चिकित्सा अंक 158 औसत तंत्रिका तंत्रिका उत्थान परिधीय तंत्रिका तंत्र मरम्मत चूहा प्रयोगात्मक मॉडल सर्जरी कार्यात्मक परीक्षण
चूहे में औसत तंत्रिका उत्थान का मूल्यांकन करने के कार्यात्मक और शारीरिक तरीके
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Casal, D., Mota-Silva, E., Iria, I., More

Casal, D., Mota-Silva, E., Iria, I., Pais, D., Farinho, A., Alves, S., Pen, C., Mascarenhas-Lemos, L., Ferreira-Silva, J., Ferraz-Oliveira, M., Vassilenko, V., Videira, P. A., Goyri-O'Neill, J. Functional and Physiological Methods of Evaluating Median Nerve Regeneration in the Rat. J. Vis. Exp. (158), e59767, doi:10.3791/59767 (2020).

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