Summary
我们描述了一种产生双重人性化BLT小鼠的新方法，其特点是功能性人体免疫系统和稳定的人类样肠道微生物群。无需无细菌小鼠或诺生物菌设施即可遵循此协议。
Abstract
具有功能性人体免疫系统的人类小鼠（胡鼠）从根本上改变了对人类病原体和疾病的研究。它们可用于模拟人类或其他动物模型中难以或不可能研究的疾病。肠道微生物群能对人类健康和疾病产生深远影响。然而，鼠肠道微生物群与人类发现的微生物群非常不同。 需要改进具有移植人类肠道微生物群的临床前小鼠模型。因此，我们创造了双胡鼠，具有人体免疫系统和稳定的人样肠道微生物群。点头。Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ （NSG） 小鼠由于其免疫缺陷水平高，是人体化的最佳动物之一。然而，无细菌NSG小鼠和其他各种重要的无细菌小鼠模型目前尚未上市。此外，许多研究环境无法获得诺托生物设施，在诺生物条件下工作通常费用昂贵且耗时。重要的是，无细菌小鼠有一些免疫缺陷，即使在微生物移植后也存在。因此，我们开发了一种不需要无细菌动物或诺生物设施的协议。为了产生双胡鼠，NSG小鼠在手术前接受放射治疗，以产生骨髓、肝脏、胸腺-人化（hu-BLT）小鼠。然后，用广谱抗生素治疗小鼠，以耗尽先前存在的鼠肠微生物群。经过抗生素治疗，通过口服口腔进行粪便移植，并带有健康的人类供体样本。双胡-BLT小鼠根据移植的个体供体样本，具有独特的16S rRNA基因谱。重要的是，移植的人类样微生物群在移植后14.5周的研究期间在双胡-BLT小鼠中保持稳定。
Introduction
人化小鼠（胡鼠）已经改变了对人类健康和疾病的许多方面的研究，包括造脑、免疫、癌症、自身免疫性疾病和传染病1、2、3、4 ，5，6，7，8，9 。与其他小鼠模式不同，这些小鼠具有明显的优势，因为它们具有功能性的人类免疫系统，并且可能感染人类特定的病原体。然而，肠道微生物群的重要性已经通过它在许多人类疾病中的作用，如肥胖，代谢综合征，炎症性疾病和癌症10，11，12， 13.粘膜免疫系统和肠道微生物群受到相互调节，以保持肠道和系统平衡。免疫系统由肠道微生物群的抗原形成，免疫系统在促进共生肠道细菌和消除病原体方面起着重要的调节作用14、15然而，胡鼠的肠道微生物群没有很好地特征，鼠肠道微生物群在组成和功能上与人类有很大不同。这是由于鼠和人肠道之间的进化、生理和解剖学差异，以及饮食等其他重要因素，可能影响胡鼠病模型18的实验结果。因此，除了对胡鼠的鼠肠道微生物群进行分类外，还需要一种具有人类免疫系统和人类肠道微生物群的动物模型来研究人类疾病在体内的复杂相互作用。
直接在人类科目上研究人类疾病往往是不切实际的或不道德的。许多动物模型不能用于研究人类病原体，如人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）。非人类灵长类动物的遗传繁殖，非常昂贵，并且不易受许多人类病原体的影响。被衍生为无细菌（GF）并与类似人类的肠道微生物群重组的小鼠已被广泛用于研究人类健康和疾病。然而，这些动物没有人体免疫系统，与GF动物合作需要专门的设施、程序和专业知识。因此，需要改进临床前模型来研究肠道微生物群群与人体免疫系统的复杂关系。许多小鼠菌株，如NOD。Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ （NSG），不作为 GF 商用。GF动物也可能遭受长期免疫缺陷，这是不能完全逆转的微生物的移植21。因此，我们创造了一种双胡鼠，具有功能性的人体免疫系统和稳定的人样肠道微生物群，在特定的无病原体（SPF）条件下。为了产生双胡鼠，对NSG小鼠进行了手术，以产生骨髓、肝脏、胸腺人化小鼠（hu-BLT）。然后用广谱抗生素治疗Hu-BLT小鼠，然后用健康的人类供体样本进行粪便移植。我们从45只双胡-BLT小鼠和4个人类粪便供体样本中抽取了173个粪便样本的细菌肠道微生物群。双胡-BLT小鼠具有独特的16S rRNA基因图谱，基于移植的个体人类供体样本。重要的是，移植的人类样微生物群在小鼠体内稳定，研究时间长达移植后14.5周。此外，预测的元基因组显示，双胡-BLT小鼠与更类似于人类供体样本的小鼠具有不同的预测功能能力。
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Protocol
此处描述的所有方法均根据内布拉斯加-林肯大学 （UNL） 批准的机构动物护理和研究委员会 （IACUC） 批准的协议进行。UNL的IACUC已经批准了两个与产生和使用hu-BLT小鼠有关的协议，包括双胡鼠。此外，UNL的科学研究监督委员会（SROC）还批准使用人类胚胎干细胞和胎儿组织，这些干细胞和胎儿组织是从高级生物科学资源采购用于人工化小鼠研究（SROC# 2016-1-002）。
1. 老鼠外壳和维修
- 购买6-8周大的NSG小鼠（NOD。Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ）。
- 在SPF条件下，用空气交换、预过滤器和HEPA过滤器（0.22 μm）在温度、湿度和压力可控的房间里安置小鼠。
- 将小鼠安置在高压灭菌的单个微隔离器笼中，在机架系统中，该系统能够使用预过滤器和 HEPA 过滤器（0.22 μm）管理空气交换。
- 在 Ii 类 A2 型生物安全烟气罩中对小鼠执行所有程序和操作，该罩已使用 70% 乙醇进行预处理。在动物室工作之前，淋浴并换上干净的磨砂、泰夫克套装、靴子套、发帽、面罩和手套。在外科手术中，在Tyvek西装上穿手术服。
注：在手术前，紫外线（UV）光净化也是首选。- 如果可能，对所有仪器和试剂进行高压灭菌，然后在转移到烟机罩之前进行消毒。
- 在手术过程中，将动物的单独通风笼子从架子上取下，并在转移到烟罩前进行消毒。
- 给老鼠喂食辐照饮食，并提供高压灭水。根据需要提供辐照食品，并补充额外的辐照食物。每周或根据需要更换高压灭水。
注：也可使用高压酸水。提供的辐照饮食在制造后有6个月的保质期。
2. 人类化BLT小鼠的产生
注：hu-BLT小鼠的生成已描述之前22，23，24。
- 在手术当天，以12 cGy/g的体重剂量对小鼠进行全身照射。
- 给老鼠做手术做准备。
- 给每只辐照小鼠在工作浓度为100mg/kg时混合氯胺酮，在12mg/kg浓度下给予西拉津的混合物，每只小鼠根据体重，通过腹内（IP）注射麻醉，每只小鼠的浓度为130-170μL。要制备3ml的氯胺酮和西拉辛混合物，在100mg/mL的库存浓度下加入0.27毫升的氯胺酮，在100mg/mL至2.7 mL的无菌盐水浓度下加入0.03 mL的西拉津。注射前用70%异丙醇对皮肤进行消毒。
- 通过皮下注射给每只辐照小鼠布丙诺啡 1 mg/kg 的体重（半活 72 小时，SR-LAB），以便长期疼痛管理。
- 通过IP注射给每只辐照小鼠100μL（858μg）的Cefazolin，用于术前抗生素预防。
- 在后来的手术部位，用电动剪发器在小鼠的左侧侧和中侧剪下老鼠的头发，用于暴露左肾。
- 通过踏板反射（紧压脚趾捏合）验证适当的麻醉水平。
- 如果在手术过程中的任何时候需要额外的麻醉，在3-5%时给予无二苯气体。
- 在双眼应用眼膏，防止角膜干燥。如果需要，请应用耳标。
- 做手术将肝脏和胸腺组织植入左肾胶囊。
- 从手术部位中心开始，以圆形方式向外移动，对手术部位的皮肤进行消毒。重复这个过程与70%异丙醇和第三次与碘。
- 使用钳子，首先将一个人类胎儿肝脏组织片段加载到小汽车中。然后使用钳子，将一个人类胎儿胸腺组织片段加载到小汽车中。然后使用钳子，加载另一个人类胎儿肝脏组织片段到小汽车。应将组织切割到 1-1.6 mm 3，以适合小汽车的内部尺寸。
- 使用钳子抬起皮肤，用剪刀纵向进行小切口。将切口扩展到鼠标左侧的 1.5-2 厘米。
- 使用钳子抬起肌肉层，并使用剪刀纵向进行小切口。根据需要延长切口以暴露肾脏。
- 通过轻轻抓住肾脏周围的脂肪组织来暴露肾脏。不要直接接触肾病。
- 使用手术刀在肾胶囊的后端进行1-2毫米切口。
- 缓慢地通过与肾脏长轴平行的切口插入预装小车，并释放肾胶囊和肾脏之间的组织。
- 小心地将肾脏和肠道恢复到正常位置。使用可吸收的 5/0 P-3 （P-13） 缝合线与 13mm 3/8 圆针关闭肌肉层和手术钉关闭皮肤。
- 手术后，将鼠标放入一个干净的灭菌微隔离器笼中进行恢复。
- 为了在手术后恢复期间尽量减少热损失，将装有小鼠的笼子放在连接到水泵加热和循环的加热垫上。
- 监测小鼠，直到它们恢复足够的意识，以保持胸腔回位。
- 在手术完成6小时内，通过尾静脉注射从人类胎儿肝脏组织分离的CD34+造血干细胞。
- 用热灯加热老鼠。用70%异丙醇消毒尾巴，然后将1.5~5×105干细胞/200μL注射到尾静脉。
- 停止注射后的任何出血，并将小鼠返回到微隔离器保持架和微隔离器保持架。
注：手术后小鼠通常被安置在一起，每个微隔离器笼5个，在恢复期间和之后。然而，只有老鼠在同一天接受手术时，它们才能被安置在一起。
- 每天检查老鼠。仔细监控手术钉，并根据需要更换。密切监测小鼠是否有感染或不适的迹象。手术后几天，在微隔离器笼的地板上供应高压灭菌的食物。
- 手术后7-10天取出手术钉。以3-5%的分子气体给小鼠麻醉。小心地取出订书针，然后将抗生素和止痛膏涂抹到部位。
- 允许9-12周重建人体免疫细胞，然后从每个人化小鼠的中液静脉中收集外周血。
- 用适当尺寸的塑料锥形约束装置约束有意识的小鼠呼吸，在小鼠背部附近开口以隔离一条腿。先将鼠标放入约束锥头，然后轻轻地将一条腿拉过腿开口。
- 用70%异丙醇喷洒隔离腿的中侧，然后将抗生素和止痛药膏传播到同一部位。
注：该膏有助于揭示静脉的位置，无需脱毛，也有助于血滴的形成。 - 使用 90° 角的 25 量针，刺穿静脉，并使用 EDTA 涂层血液收集管收集 50-100 μL 的血液。用无菌纱布向部位施加压力，止血。一旦出血停止，老鼠回到他们的笼子。
注：收集的最大血量通常为每周50μL或每两周100μL。 - 使用收集的外周血，使用流动细胞测定法测试人体免疫细胞重组水平，并结合hCD45、mCD45、hCD3、hCD4、hCD8、hCD19抗体进行检测。
3. 抗生素治疗
- 在抗生素治疗之前，收集治疗前粪便样本。将小鼠移动到新的高压灭菌微隔离器笼中。
- 每天准备一杯新鲜宽谱抗生素鸡尾酒。
- 为每个小鼠的微隔离器笼制备含有新鲜制备的Metronidazole（1克/升）、Neomycin（1克/升）、万古霉素（0.5克/升）和安霉素（1克/升）的水。
注：使用高压灭菌或无菌水作为抗生素补充的饮用水。 - 将9.2克葡萄糖加糖饮料混合至250 mL的抗生素补充水中。
注：使用葡萄糖加糖饮料混合掩盖了抗生素的苦味，有助于防止小鼠脱水。 - 改变抗生素和葡萄糖甜饮料混合补充水，并每天将小鼠放入新的灭菌笼。
注：小鼠是共体，每天更换笼子可以防止小鼠重新接种肠道细菌。 - 为了最大限度地移植人样的肠道微生物群，提供14天的抗生素。在抗生素治疗期间，监测小鼠的体重减轻和脱水。体重预计将在前3-4天和高原后，在治疗期间。如果发生脱水，通过腹内注射给小鼠盐水或环线溶液。
注：其他肠道微生物群落人性化方案要求口服抗生素。虽然有效消耗鼠肠道细菌，我们发现，在饮用水中添加抗生素的侵入性较小方法，减轻了我们人性化小鼠的压力，并带来了更好的结果。
- 为每个小鼠的微隔离器笼制备含有新鲜制备的Metronidazole（1克/升）、Neomycin（1克/升）、万古霉素（0.5克/升）和安霉素（1克/升）的水。
4. 供体样本和粪便移植
- 准备人类供体粪便样本。
- 使用适当制备的粪便微生物移植（FMT）材料来源，将粪便移植到人化小鼠体内。
- 在厌氧室中解冻 FMT 制剂并在厌氧条件下将其配比。
- 如果需要，在此步骤中，将粪便样本的相等部分混合在一起，以创建无偏的"人"样本。
- 如果不需要对样品进行等分或混合，则仅在手术前立即解冻，将 FMT 材料的冻结和解冻保持在最低限度。
- 人类粪便移植
- 完成14天的抗生素治疗后，将饮用水改为高压灭菌水，并将小鼠转移到新的灭菌笼中。停止每日保持架更换，并实施每 1-2 周一次的笼式更换计划。
- 在抗生素停止后24小时和48小时进行两次粪便移植。
- 抗生素治疗后24小时，解冻所需量的FMT物质，通过口服口盖给每只小鼠200μL的FMT物质。在抗生素后48小时再次重复程序。
- 将任何剩余的或剩余的解冻FMT材料涂在人性化小鼠的毛皮上或放在笼子的床上用品上。
5. 新鲜粪便样本收集
- 在转移到烟机罩之前，先将单独的纸袋高压灭菌。
- 在烟机罩中，将一只鼠标放入每个纸袋中，让鼠标排便。
- 使用无菌钳子，将粪便样品收集到1.5 mL塑料管中，在-80°C冷冻。将小鼠返回到微隔离器笼中。
注：这种收集粪便样本的方法允许从单个小鼠收集新鲜的粪便样本，而无需任何压力诱导操作。
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Representative Results
图1显示了用于创建双胡-BLT小鼠的方法的大纲，并简要描述了在NSG小鼠中添加功能性人体免疫系统和稳定的人样肠道微生物群的过程。图2显示了术后10周对人化BLT-小鼠的外周血液进行流式细胞测定分析的例子。图3显示了用于转移肠道微生物群以创建双胡鼠的人类粪便供体样本的相对丰度。图 4显示了抗生素治疗引起的脾脏和的类人位变化，类似于在无细菌动物身上观察到的变化。图5显示了16S rRNA测序数据的主要成分分析（PCA）图，显示双虎小鼠具有人类供体样本所特有的类似人类的肠道微生物群落。
图 1：创建双重人性化的BLT小鼠。创建双胡-BLT鼠标是一个两步过程。第一步是将人体免疫系统移植到NSG小鼠身上。在手术当天，NSG小鼠被给予照射，为干细胞创造一个利基。然后，小鼠植入人类胎儿肝脏和胸腺组织，并注射人类造血干细胞。人体免疫细胞重组在手术后10周左右检查。 第二步是移植人类肠道微生物群。老鼠用抗生素治疗，以减少预先存在的鼠肠道细菌。然后给老鼠进行粪便移植，以提供人类肠道微生物群。请点击此处查看此图的较大版本。
图 2：在双人机化BLT小鼠中测试人体免疫细胞重组。手术后10周，人性化BLT-小鼠外周血的流式细胞学分析示例。图中显示了用于识别淋巴细胞群、mCD45-hCD45+ 细胞、CD19+ B细胞、CD3+ T细胞、CD4+ T细胞和CD8+T细胞的浇注策略。请点击此处查看此图的较大版本。
图 3：人类供体粪便样本概况。家庭一级显示的3个人类捐献者和混合（所有捐赠者）样本的相对丰度。请点击此处查看此图的较大版本。
图 4：抗生素治疗的小鼠类似于无细菌表型。胡鼠在抗生素治疗（抗生素）治疗（抗生素）或无抗生素治疗（对照）后被牺牲。经过抗生素治疗，人化小鼠的表型开始类似于无细菌动物的表型。由于抗生素治疗，脾脏大小（左）减少，黄体变大（右）。请点击此处查看此图的较大版本。
图 5：双人性化BLT小鼠具有粪便供体特定的肠道微生物群。16S rRNA测序数据的PCA图显示，在人类粪便移植后，双胡-BLT小鼠具有个体人类粪便供体所特有的肠道微生物群落。请点击此处查看此图的较大版本。
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Discussion
这里描述的方案是为创造双hu-BLT小鼠，具有功能性的人类免疫系统和稳定的人样肠道微生物群。该协议可以适应其他人性化或非人性化的小鼠模型，而无需GF动物和转基因设施。虽然此处描述的方法相对简单，但有几个关键细节对于成功创建双胡-BLT 小鼠非常重要。NSG小鼠具有极缺免疫性，预防感染是小鼠长期生存的关键。我们采取了以下措施来预防感染。首先，动物被安置在带有HEPA滤波器（0.22 μm）的单个微隔离器笼中，在专用套件中进行空气汇率管理。机架的空气处理器包含预滤器以及 HEPA 过滤 （0.22 μm） 供应和排气，以及对保持箱排气温度和相对湿度的实时在线监控。其次，每个进入动物房间的人必须洗澡，穿干净的磨砂和鞋子，并戴上手套，一次性的Tyvek西装，靴子，发帽，和面罩。第三，所有程序，包括笼子更换和添加食物和水，都在II类A2类生物安全烟气罩内进行，该罩在70%乙醇和紫外线的预先消毒后进行。第四，在生存手术中使用无菌手术技术，包括外科医生和助手，他们穿着额外的保护层，包括手术服和手套。手术在消毒的烟罩内进行，只使用无菌仪器、纱布和伤口闭合材料，同时在整个手术过程中保持手套和仪器的无菌性。最后，为了防止感染，并确保移植的人类样肠道微生物群的稳定性，给小鼠的所有食物和水都是无菌的。所有食物都应进行辐照，所有水都应高压灭。为了尽量减少疼痛和痛苦，我们在手术前对小鼠施用长效丁丙诺啡皮下。氯胺酮和西拉辛的组合小鼠手术麻醉是非常可靠的，可以持续约30分钟。如果这还不够长，我们给胶质气体进一步麻醉小鼠。手术后保持小鼠体温也很重要。我们把笼子放在加热的加热垫上，直到通过尾静脉注射造血干细胞。当时，老鼠从麻醉中恢复，并返回到机架。
为了耗尽鼠肠道微生物群并准备人类粪便移植，必须始终使用新鲜制备的抗生素，每天更换抗生素补充水和笼子。这将在整个14天的抗生素治疗中使用许多微隔离器笼，但它确保小鼠不会通过共体痛重新接种。在抗生素治疗期间，监测小鼠的体重和健康也至关重要。粪便移植后，小鼠很快恢复了任何体重减轻。重要的是要尽量减少粪便移植材料的任何冻融周期，并确保在需要等分样品时使用厌氧室。在制造双胡-BLT小鼠时，尽量减少小鼠的处理和压力非常重要。这有助于预防感染，提高长期存活率。
我们最初尝试用抗真菌的amphotericin B对小鼠进行预处理，但发现小鼠不能很好地耐受这种治疗，并且不再使用。我们还试验了不同持续时间的抗生素治疗。我们发现，虽然大多数鼠肠道细菌在7天的抗生素治疗后似乎已经耗尽，但经过14天的治疗后，供体移植水平要高得多。我们还尝试通过每天两次的口服加韦治疗抗生素。然而，我们发现这种方法对我们的胡鼠来说太具有侵入性了。我们切换到一个单一的每日食量时间表，但老鼠仍然显得紧张和不健康。我们发现在饮用水中提供抗生素是最好的方法。它减少了对小鼠的处理量和压力，同时仍然充分减少鼠肠道细菌。我们在饮用水中提供葡萄糖加糖饮料混合物，以确保小鼠获得足够的抗生素剂量，并防止脱水。在抗生素治疗的前3-4天，小鼠体重确实会减少，但通过腹内注射提供额外液体不会增加体重。粪便移植后，小鼠很快恢复了体重减轻。
虽然此方法能够可重复生成双 hu-BLT 小鼠，但该模型存在一些限制。首先要考虑的是，hu-小鼠具有组织性较差的淋巴结构，包括生殖中心，导致抗体类切换减少和亲和力成熟受限。然而，NSG hu-BLT小鼠具有全身免疫重组和可翻译的T细胞反应，可用于模拟许多人类疾病。另一个问题是，在人类过度免疫重组数月后，一些小鼠体内潜在的移植物与宿主疾病（GVHD）可能发展。我们和其他人已经观察到GVHD表现，如性白质炎，脱发，体重减轻，和错位，必须仔细监测25。
有记载的用抗生素26、27、28、29、30、31来消耗小鼠肠道细菌的治疗方案。我们选择抗生素鸡尾酒，因为它们已知有能力瞄准肠道中的多种细菌，而且我们在文献中发现了几种细菌枯竭的成功例子。许多已发表的病例使用远没有那么严格的抗生素疗程，但在我们的研究中，我们发现，需要14天才能最佳地移植人样的肠道微生物群。虽然我们最初尝试了基于Hintze等人的一种方案，但我们发现口腔口腔侵入性太高，抗真菌治疗对小鼠26有害。我们认为，NSG hu-BLT 小鼠是独一无二的，与其他更健壮的小鼠相比，侵入性较低的程序更受欢迎。在我们的研究中，我们没有使用GF动物。利用GF小鼠研究肠道微生物群的影响已有据可查，然而，这些动物没有人体免疫系统19，32。此外，我们承认，使用GF NSG hu-BLT小鼠模型将为研究创造有趣的机会。其一，研究人类免疫细胞重组和HIV-1等人类特定病原体的发病机制，而不存在肠道微生物群，可以提供有趣的结果。此外，GF模型可能允许在粪便移植后更完整地重组类似人类的肠道微生物群。然而，GF小鼠有持久的免疫缺陷，即使在肠道微生物群重组21。我们的模型具有使用 SPF 住房条件的优点，与 GF 设施相比，这些条件广泛可用且成本更低。我们的模型还具有不干扰正常程序产生hu-BLT小鼠的优点，因为不需要一个完全GF环境。
我们认为，这种双胡-BLT小鼠模型的独特之处，它不仅可用于研究人体免疫功能和人类疾病，而且可以确定肠道微生物群对疾病发病机制和体内治疗的影响。通过这个协议，我们可以重新产生具有人类供体特定肠道微生物群谱的双胡-BLT小鼠。因此，我们相信，使用双胡-BLT小鼠将有利于未来的个性化医学应用，旨在测试肠道微生物群对治疗各种人类疾病（如HIV-1和癌症）的影响。总之，我们的双胡-BLT小鼠模型是一个重要和新颖的临床前模型，它既具有功能性的人体免疫系统，又具有稳定的人类肠道微生物群，用于研究人类健康和疾病。
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Disclosures
作者没有什么可透露的。
Acknowledgments
我们要感谢万燕民、康国斌和帕拉比·昆都协助生产BLThuman小鼠。我们要感谢UNMC基因组学核心基金，他们从内布拉斯加州功能基因组学研究网络获得部分支持，NE-INBRE P20GM103427-14，神经感官系统的分子生物学CoBRE P30GM110768，弗雷德和帕梅拉巴菲特癌症中心 - P30CA036727，根和红生物研究中心（CRRI） 36-5150-2085-20，内布拉斯加州研究计划。我们要感谢内布拉斯加大学林肯生命科学系及其工作人员的帮助。这项研究部分得到美国国家卫生研究院（NIH）资助R01AI124804、R21AI122377-01、P30 MH062261-16A1慢性HIV感染和衰老神经艾滋病（CHAIN）中心，1R01AI111862至Q Li的支持。 资助者在研究设计、数据收集和分析、编写手稿或决定出版方面没有作用。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Animal Feeding Needles 18G | Cadence Science | 9928B | |
| Clidox-s Activator | Pharmacal Research Laboratories | 95120F | |
| Clidox-s Base | Pharmacal Research Laboratories | 96125F | |
| DGM 108 cage rack | Techniplast | ||
| Flat Brown Grocery Bag 3-5/8"D x 6"W x 11-1/16"L | Grainger | 12R063 | |
| FMT Upper Delivery Microbiota Preparations | OpenBiome | FMP30 | |
| Grape Kool-Aid | Kraft Foods Inc. | ||
| hCD19-PE/Cy5 | Biolegend | 302209 | |
| hCD3-PE | Biolegend | 300408 | |
| hCD4-Alexa 700 | Biolegend | 300526 | |
| hCD45-FITC | Biolegend | 304006 | |
| hCD8-APC/Cy7 | Biolegend | 301016 | |
| Lactate Buffered Ringer's Solution | Boston BioProducts Inc | PY-906-500 | |
| mCD45-APC | Biolegend | 103111 | |
| Microvette 100 K3E | Microvette | 20.1278.100 | |
| Neosporin First Aid Antibiotic/Pain Relieving Ointment | Neosporin | ||
| NSG mice (NOD.Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ) | The Jackson Laboratory | 005557 | |
| PrecisionGlide 25 G Needle | BD | 305127 | |
| RS200 X-ray irradiator | RAD Source Technologies | ||
| Sealsafe Plus GM500 microisolator cages | Techniplast | ||
| Sterile Non-woven Gauze | Fisherbrand | 22-028-558 | |
| Teklad global 16% protein irradiated mouse chow | Teklad | 2916 |
References
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