Summary
هنا ، نقدم بروتوكولا لاجراء تقييم الدموية الغازية من البطين الأيمن والشريان الرئوي في الفئران باستخدام نهج جراحه الصدر المفتوح.
Abstract
فرط ضغط الدم الشرياني الرئوي هو اضطراب مزمن وحاد في القلب. الفئران هي نموذج الحيوانية شعبيه تستخدم لتقليد هذا المرض. ومع ذلك ، يبقي تقييم ضغط البطين الأيمن (RVP) وضغط الشريان الرئوي (PAP) صعبا من الناحية التقنية في الفئران. ومن الصعب قياس RVP و PAP من ضغط البطين الأيسر بسبب الاختلافات التشريحية بين أنظمه القلب الأيمن والأيسر. في هذه الورقة ، نقوم بوصف طريقه القياس الديناميكية للقلب الأيمن المستقرة والتحقق من صحتها باستخدام الفئران الصحية والسليمة. ويستند هذا الأسلوب علي جراحه الصدر المفتوح ودعم التهوية الميكانيكية. وهو اجراء معقد بالمقارنة مع إجراءات الصدر المغلقة. في حين مطلوب جراح مدرب تدريبا جيدا لهذه الجراحة ، وميزه هذا الاجراء هو انه يمكن ان تولد كلا RVP و PAP المعلمات في نفس الوقت ، لذلك هو الاجراء الأفضل لتقييم نماذج الهيئة الخاصة بالهيئة.
Introduction
فرط ضغط الدم الشرياني الرئوي هو اضطراب مزمن وحاد في القلب مع ارتفاع في ضغط الشريان الرئوي (PAP) وضغط البطين الأيمن (RVP) الناجم عن الانتشار الخلوي وتليف الشرايين الرئوية الصغيرة 1. القسطرة الشريان الرئوي ، وتسمي أيضا القسطرة سوان-Ganz2، وتستخدم عاده في الرصد السريري لل RVP و PAP. وعلاوة علي ذلك ، تم استخدام نظام مراقبه عنق الرحم لاسلكيه سريريا3،4،5. لتقليد هذا المرض للدراسة في الفئران ، يتم استخدام بيئة نقص الأكسجين لمحاكاة المظاهر السريرية البشرية لل بي6. في تقييم PAP في الحيوانية ، والحيوانية الكبيرة من السهل نسبيا لرصد من خلال قسطرة الشريان الرئوي باستخدام نفس الأسلوب كما للمواد البشرية ، ولكن الكائنات الصغيرة مثل الفئران والفئران من الصعب تقييم بسبب حجم الجسم الصغيرة. القياس الحركي للنظام البطيني الأيمن في الفئران هو ممكن مع الموجات فوق الصوتية حجم 1 Fr القسطرة7. وقد تم الإبلاغ عن طريقه لقياس rvp و PAP في الفئران في الأدب8,9, ولكن المنهجية تفتقر إلى وصف مفصل. RVP و PAP هي أكثر تحديا لقياس من الضغط البطين الأيسر بسبب الاختلافات التشريحية بين أنظمه القلب الأيمن والأيسر.
للحصول علي كل من المعلمات PAP و RVP في نفس الماوس ، ونحن وصف النهج القائم علي الجراحة في الصدر المفتوح لقياسات القلب السليم الحركية ، والتحقق من صحة مع الفئران الصحية والصحة العامة ، وكيفيه تجنب توليد البيانات الاصطناعية خلال معقده مفتوحة الصدر جراحه. علي الرغم من ان هذا الأسلوب هو أفضل أداء من قبل جراح مدرب تدريبا جيدا ، لديه ميزه القدرة علي تقييم PAP و RVP في نفس الماوس.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
تم استعراض واعتماد بروتوكول الحيوانية من قبل لجنه الرعاية الحيوانية والاستخدام المؤسسي في مستشفي Fuwai ، الاكاديميه الصينية للعلوم الطبية ، كليه الطب الاتحاد بكين (رقم 0000287). تم إسكان الحيوانية التجريبية وتغذيه وفقا للمبادئ التوجيهية لرعاية الماشية في الصين.
ملاحظه: تم إسكان ثمانيه إلى 12 أسبوعا من الذكور C57BL الفئران في بيئة مع 12 ح الظلام/12 ح دوره الضوء. تم إيواء فئران الهيئة العامة للإسكان لمده 4 أسابيع تحت تركيز الأكسجين بنسبه 10 ٪ ، والتي تحتفظ بها غرفه الأكسجين التي تسيطر عليها الأوكسجين للحث علي ارتفاع ضغط الدم الرئوي ، والفئران السيطرة كانت موجودة في الهواء الغرفة (21 ٪ الأكسجين) في ظل ظروف مماثله. وأجريت قياسات RVP و PAP في نهاية 4 أسابيع من التحدي نقص الأكسجين.
1. التحضير قبل الجراحة
- نقع القسطرة محول الضغط (الحجم: 1 Fr) في 0.9 ٪ المالحة في درجه حرارة الغرفة لمده 30 دقيقه علي الأقل قبل التجربة الحركية الدموية.
- تصفيه 2 ، 2 ، 2-تريبروموثانول الحل مع فلتر 0.22 μm وتخزينها في 4-درجه الثلاجة.
- اعداد أدوات الجراحة النظيفة واللوازم مثل القفازات للجراحة.
- اعداد 10 مل من 1.0 ٪ محلول انزيم الجهاز الهضمي لتنظيف القسطرة.
- توصيل القسطرة محول الضغط إلى نظام حجم الضغط.
- معايره محول الضغط قبل الحصول علي قياسات الضغط لكل ماوس.
- تحويل مقبض المعايرة إلى 0 مم زئبق و 25 مم زئبق لإرسال اشاره ضغط التحقق إلى برنامج الحصول علي البيانات وتكوين اعداد المعايرة في البرنامج.
- تحويل مقبض الباب إلى محول وضبط مقبض الباب التوازن إلى الصفر الأساس.
- قم باعداد مجسم فراغي قياسي وطاوله جراحيه صغيره للحيوانات التي يتم التحكم في درجه حرارتها لصيانة درجه حرارة الجسم اثناء الجراحة.
- اعداد نظام أضاءه خفيفه للجراحة المجهرية لتوفير ما يكفي من الضوء علي منطقه الجراحة.
2. جراحه الصدر المفتوح وقياس الديناميكية الدموية
- تخدير الفئران مع 250 مغ/كغ من 2, 2, 2-تريبروموثانول عن طريق انترابيرتينيال (i.p.) حقن. إذا لزم الأمر ، كرر جرعات اضافيه في 1/3 إلى 1/2 من الجرعة الاصليه اثناء العملية.
- أزاله فراء الصدر والرقبة باستخدام ماكينة حلاقه وغسول لأزاله الشعر (الشكل 1ا، 2 ا).
- تامين كل الماوس في موقف ضعيف علي طاوله الجراحية الحيوانية الصغيرة التي تسيطر عليها درجه الحرارة للمساعدة في الحفاظ علي درجه حرارة الجسم (37 درجه مئوية) اثناء الجراحة.
- تنظيف الموقع الجراحي مع 70 ٪ ethanal.
- بمجرد ان يكون التخدير نافذا ، تاكد من التخدير الكافي باستخدام قرصه اصبع القدم.
- اجراء شق في الخط الأوسط علي جلد الرقبة (الشكل 1ا).
- تشريح العضلات الهيكل العظمي باستخدام ملقط المنحني وفضح القصبة الهوائية (الشكل 1B, 1c).
- قم باجراء التنبيب من خلال الفم باستخدام قسطرة الغمد الوريدي المعدلة 22 جرام. تاكد من ان الأنابيب في القصبة الهوائية باستخدام ملقط (الشكل 1د).
- توصيل الأنابيب إلى التنفس الاصطناعي الحيوانية الصغيرة. حساب وتعيين معدل التنفس وحجم المد والجزر علي أساس وزن الجسم وفقا لدليل المستخدم التنفس الاصطناعي10. علي سبيل المثال ، تعيين معدل التنفس إلى 133/دقيقه وحجم المد والجزر إلى 180 μL للحصول علي الماوس 30 ز استنادا إلى الحساب الموصوف.
- تامين الأنابيب للتهوية باستخدام الشريط.
- تاكيد التخدير الكافي التعريفي باستخدام قرصه اصبع القدم.
- اجراء شق منتصف الخط علي جلد الصدر وتشريح عضلات الصدر بعناية باستخدام أداه الحذر (الشكل 2B, 2c).
- قطع القص باستخدام مقص في الوسط وفضح التجويف الصدري (الشكل 2د).
- منع اي نزيف باستخدام أداه الحذر اثناء اجراء جراحه الصدر المفتوح.
- فضح البطين الأيمن مع الجرارات (الشكل 2ه).
- ادخل قسطرة الضغط المشبع بالمحلول الملحي من خلال نفق صغير تم إنشاؤه بواسطة ابره 25 جرام في البطين الأيمن لقياس RVP (الشكل 2F والشكل 3a, 3c).
- امسك كابل القسطرة واعبر الصمام الرئوي بطريقه محوريه مع الشريان الرئوي. مراقبه الموجي الضغط والحصول علي اشاره PAP مستقره (الشكل 3ب ، 3d).
- سجل البيانات الحركية باستخدام نظام الحصول علي البيانات والبرمجيات.
- بعد القياسات النهائية ، موت ببطء الفئران بطريقه انسانيه من خلال حقن i.p. من جرعه زائده من 2 ، 2 ، 2-تريبروموثانول الحل.
- أزاله القسطرة بعناية من نظام القلب الأيمن ووضعها في حقنه 1 مل تحتوي علي 1 ٪ محلول انزيم الهضم.
- استخدام الماء المقطر لمسح باستمرار القسطرة بعناية وتخزينها في المربع الأصلي.
3-تحليل البيانات لديناميكا
ملاحظه: تم تسجيل البيانات الحركية وتحليلها باستخدام البرنامج التحليلي11 (جدول المواد).
- لكل ماوس ، حدد ما لا يقل عن 10 دورات نبضات مستمرة ومستقره دون ضجيج للحصول علي متوسط بيانات RVP أو PAP لكل معلمه.
- استخدام الطالب t-اختبار للمقارنة بين التحكم الجوي العادي ومجموعات نقص الأكسجين. ملاحظه: p < 0.05 اعتبرت هامه إحصائيا. يتم عرض البيانات كمتوسط ± SD.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
تم إدخال قسطرة محول الضغط في البطين الأيمن (الشكل 3ا) من خلال نفق موسع بواسطة ابره 25 غرام ، وتم الحصول علي الموجي rvp نموذجي (الشكل 3ج). تم تعديل القسطرة باستمرار وتقدم ببطء وابقي في نفس المحور مثل الشريان الرئوي اثناء مروره من خلال الصمام الرئوي (الشكل 3ب). عندما تم إدخال جهاز استشعار الضغط بنجاح في الشريان الرئوي ، ظهرت الموجي PAP نموذجيه مع الشق dicrotic مميزه (الشكل 3د). لتجنب توليد البيانات الاصطناعية ، لاحظنا ما إذا كان الموجي قد الضوضاء (الشكل 4) أو ما إذا كان مستوي الصفر من القسطرة قد جنحت (الشكل 5). وفي حاله حدوث ذلك ، تم اجراء تصحيحات ، واستبعدت هذه الأجزاء التي لها ضجيج من تحليل البيانات.
تتميز الشركة بارتفاع مستمر في عنق الرحم و RVP ، والناجم عن زيادة المقاومة في الشرايين الرئوية الصغيرة. يتم تعريف النسبة العامة بواسطة PAP متوسط من ≥ 25 زئبق في الراحة ، تقاس خلال قسطرة القلب الأيمن في العيادة12. قمنا بقياس RVP و PAP في الفئران مع نقص الأكسجين المزمن المستحث (الاحتفاظ بها في الأكسجين 10 ٪ لمده 4 أسابيع) أو مجموعه التحكم (الاحتفاظ بها في الهواء العادي). وترد النتائج في الشكل 6. بالمقارنة مع تلك الموجودة في مجموعه التحكم الجوي العادية ، pap الانقباضي (الشكل 6ا) ، حلمه الرحم الانبساطي (الشكل 6ب) ، يعني pap (الشكل 6ج) ، والضغط الانقباضي البطيني الأيمن (الشكل 6د) وقد زادت جميع بشكل ملحوظ في مجموعه نقص الأكسجين المزمن. وأفادت المحققين أيضا انه بالمقارنة مع نقص الأكسجين وحدها, مزيج من مثبطات vegfr مع نقص الأكسجين المزمن لمده 3 أسابيع للحث علي المركبات البالغة الشدة في الفئران يمكن ان يؤدي إلى زيادة كبيره rvp13,18.
الشكل 1: التنبيب لدعم التهوية الميكانيكية في الفئران. (ا) يتم أزاله الفراء الرقبة باستخدام محلول أزاله الشعر للحصول علي منطقه نظيفه للجراحة. يتم اجراء شق الخط الأوسط علي جلد الرقبة. (ب) تعرض العضلات الهيكلية التي تغطي القصبة الهوائية. (ج) يتم تشريح عضلات الهيكل العظمي بصراحة للكشف عن القصبة الهوائية. يشير السهم الأصفر إلى القصبة الهوائية. (د) يتم إدخال الأنبوب (المعدل باستخدام قسطرة وريديه 22 جرام) في مجري التنفس ، مع تاكيد الوضع باستخدام ملقط. يشير السهم الأصفر إلى الأنبوب داخل القصبة الهوائية. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2: جراحه الصدر المفتوح للقياس الحركي في النظام البطيني الأيمن. (ا) يتم أزاله الفراء الصدري باستخدام محلول أزاله الشعر للحصول علي منطقه نظيفه للجراحة. (ب) يتم اجراء شق الخط النصفي للكشف عن عضلات الصدر الهيكل العظمي وعظم القص. (ج) تستخدم أداه التحذير للتقليل من النزيف اثناء فتح الصدر (يشير السهم إلى الطرف الحذر). (د) يقطع عظم القص علي طول خط الوسط (خط الاندفاع الأصفر). (ه) يتم استخدام اثنين من الجرارات للكشف عن القلب (السهم العلوي يشير إلى الجدار الأذيني الأيمن ، والسهم السفلي يشير إلى الجدار الحر البطين الأيمن). (و) يتم إدخال قسطرة محول الضغط (السهم السفلي) في الغرفة البطينية اليمني باستخدام أداه ثقب (25 G حجم ابره ، السهم العلوي) لإنتاج نفق صغير علي الجدار الحر البطين الأيمن. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3: منحنيات ممثلي RVP و PAP. يتم إدخال القسطرة محول الضغط في الغرفة البطين الأيمن (A) للحصول علي الموجي rvp (C). القسطرة محول الضغط يمر عبر الصمام الرئوي ومن ثم يبقي في الشريان الرئوي (ب) لتوليد الموجي PAP. تشير الأسهم إلى الشق التقليدي المميز علي الموجي PAP (D) ، وهو علامة علي إغلاق الصمام الرئوي. RA = الأذين الأيمن ، RV = البطين الأيمن ، PA = الشريان الرئوي ، LV = البطين الأيسر. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.
الشكل 4: ضجيج الموجي rvp الناجمة عن لمس سطح جهاز استشعار الضغط إلى جدار البطين. تظهر نقطه السهم زيادة حاده في الضغط علي منحني RVP (القناة العليا) ، والذي ينتج في الوقت نفسه تغييرا مصطنعا في dP/dt (القناة السفلي). يتم احتساب dP/dt من RVP. تشير الخطوط المتقطعة إلى ضجيج dP/dt. إذا كانت الضوضاء حاضره باستمرار ، فان ضبط موضع مستشعر القسطرة في البطين يمكن ان يمنع الضوضاء. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.
الشكل 5: صفر الانجراف من محول الضغط خلال قياس rvp. النافذة اليسرى يظهر بشكل مصطنع مرتفعه قليلا نهاية الانبساطي RVP. النافذة اليمني الموسعة يظهر زيادة النهاية الانبساطي RVP (الأسهم تشير إلى نهاية الانبساطي RVP). يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.
الشكل 6: فرط ضغط الدم الرئوي الناجم عن نقص الأكسجين في C57BL فئران. (ا) PAP الانقباضي (spap). (ب) PAP الانبساطي (dpap). (ج) متوسط عنق الرحم (mpap). (د) الضغط الانقباضي البطيني الأيمن (RVSP). (ه) و (و) ، النماذج الموجية التمثيلية لمكافحه الحشرات والفئران علي التوالي *p < 0.05 ؛ الطالب t-اختبار; مجموعه التحكم n = 10; نقص الأكسجين المجموعة n = 3. يتم عرض البيانات كمتوسط ± SD. PAP = ضغط الشريان الرئوي ، RVP = الضغط البطيني الأيمن. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
التنبيب الرغامي هو الخطوة الهامه الاولي لعمليات جراحيه في الصدر المفتوح. الطريقة الكلاسيكية للتنبيب الرغامي للحيوانات الصغيرة ، مثل الفئران أو الفئران ، ينطوي علي اجراء شق علي شكل حرف T علي القصبة الهوائية وادراج مباشره أنابيب الرغامي من النوع Y في القصبة الهوائية. في الممارسة العملية ، نجد ان هذه الطريقة ليست سهله اثناء التشغيل. أنابيب الرغامي من النوع Y كبيره جدا بالنسبة للحيوانات الصغيرة وتشكل زاوية مع القصبة الهوائية. التالي ، فانه من الصعب لإصلاح الأنابيب في مكانها. بالاضافه إلى ذلك ، مره واحده في أنابيب التنبيب بطريق الخطا يخرج من مجري الهواء اثناء جراحه الصدر المفتوح ، فانه يؤدي عاده في وفاه الحيوانية بسبب فقدان دعم التهوية الميكانيكية. ولذلك ، قمنا بتعديل طريقه التنبيب الرغامي14 عن طريق اجراء شق علي الجلد ، وفصل طبقه العضلات لفضح القصبة الهوائية (الشكل 1ج) ، وادراج مباشره الأنابيب الرغامي في مجري الهواء من خلال الحيوانية الفم. ويمكن تاكيد وضع الأنابيب في القصبة الهوائية بسهوله عن طريق لقط القصبة الهوائية باستخدام ملقط (الشكل 1د). بعد أزاله الابره المرشدة واستخدام القسطرة الغمد فقط ، يتم استخدام قسطرة وريديه 22 جرام كانابيب التنبيب. يمكن تامين الأنابيب بسهوله بعد التنبيب. هذا هو وسيله أمنه لأداره التنبيب اثناء الجراحة ، ويمكن ان تحسن بشكل ملحوظ معدل نجاح الحيوانية الصغيرة جراحه الصدر المفتوح. ومع ذلك ، تتطلب هذه الطريقة التدريب والممارسة.
وقد وصفت نهج مغلقه الصدر لقياس القلب الحركي الحق في التفاصيل15,16. أحد القيود علي طريقه مغلقه الصدر هو انه يمكن استخدامها لتقييم فقط RVP, لان القسطرة لا يمكن الوصول إلى الشريان الرئوي في الفئران. نحن نستخدم شق الصدر الخط الأوسط حيث يقع الجدار الحر البطين الأيمن ، تحت القص فقط (الشكل 2د). بعد القسطرة البطينية اليمني للحصول علي RVP ، فمن السهل لإدخال القسطرة بطريقه محوريه مع الشريان الرئوي للحصول علي PAP (الشكل 2ه). عندما يتم قطع القص اثناء الجراحة في الصدر المفتوح ، يتم استخدام أداه التخثر الكهربي لتجنب نزيف مقطع القطع العقدي لمنع انخفاض ضغط الدم الاصطناعي الناجم عن فقدان الدم (الشكل 2ج). وهو اختياري لهذه الجراحة في الصدر المفتوح لاستخدام قسطرة حلقه ف-V للحصول علي كل من RVP وحجم المعلومات17. ومع ذلك ، فمن الأفضل عدم استخدامه للحصول علي PAP بسبب حجمه الأكبر. علي الرغم من ان هذا الأسلوب هو أفضل أداء من قبل جراح مدرب تدريبا جيدا ، فمن الأفضل للنهج مغلقه الصدر لأنه يسمح للحفاظ علي التنبيب الرغامي والوقاية من النزيف اثناء الجراحة في الصدر المفتوح لتجنب وفاه الحيوانية.
بالاضافه إلى ذلك ، يتم ثقب الجدار الحر البطين الأيمن مع ابره 25 G أو أصغر للحد من المقاومة اثناء إدخال القسطرة في البطين. اثناء القسطرة ، يجب الا ينحرف سطح مستشعر الضغط عن مجسم الابره لمنع التلف العرضي لمستشعر القسطرة بواسطة السطح المعدني الحاد. فمن الأفضل عدم استخدام ابره كبيره لثقب الجدار الحر البطين ، كما انه يسبب عاده المزيد من النزيف ، وعدم كفاية حجم الدم في الدورة الدموية يسبب أيضا بيانات الضغط الاصطناعي.
بسبب الحجم الصغير من البطين والحجم غير المنتظم للغرفة البطينية اليمني في الفئران ، فان مستشعر الضغط للقثطار يلامس بسهوله الجدار الحر البطيني الأيمن خلال معدل ضربات القلب العالية. وهذا يولد الضجيج علي منحني الضغط البطيني (الشكل 4) ، والتي تؤثر مباشره علي تحليل الضغط البطيني. في هذه الحالة ، يجب تعديل زاوية وعمق القسطرة حتى يختفي الضجيج للحصول علي الموجي ضغط البطين علي نحو سلس مره أخرى.
حجم صغير من 1 Fr الضغط محول القسطرة7 يجعلها دقيقه جدا ، والضغط الدقيق محول. لا يتم عاده الانحراف الصفري اثناء اختبار القسطرة القياسي في محلول ملحي في المختبر ما لم يكن القسطرة معيبه أو معطوبة. ومع ذلك ، في وجود دم الجسم ، ومكونات الدم التمسك بسطح جهاز استشعار الضغط قد يسبب القسطرة للخضوع الانجراف الصفر خلال تجربه في الجسم الخارجي (الشكل 5). لمعالجه هذه المشكلة ، نقوم بما يلي: أزاله القسطرة مؤقتا من الغرفة البطينية ووضع طرف المستشعر للقثطار في محلول الانزيم الهضمي الدافئ 1.0%. احتضانه لهضم مكونات الدم المرتبطة بسطح جهاز الاستشعار. وبعد مسح القسطرة برفق بالشاش المنقوع بالمحلول الملحي ، ادخل القسطرة مره أخرى إلى الغرفة البطينية للحصول علي الشكل الموجي للضغط البطيني الثابت غير الصفري.
اعداد قسطرة محول الضغط ضروري أيضا للحصول علي بيانات مستقره. يجب ان يتم نقع طرف مستشعر الضغط في القسطرة لمده 30 دقيقه علي الأقل في 0.9 ٪ من المحلول الملحي في درجه حرارة الغرفة قبل اجراء العملية المجرية للحفاظ علي استقرار القثطار. وبهذه الطريقة ، يمكن تثبيت الخصائص الكهربائية لقسطرة محول الضغط علي النحو الأمثل.
وأخيرا ، فان فتره نقص الأكسجين قابله للاستمرار من 3 إلى 4 أسابيع لنموذج ارتفاع ضغط الدم الناجم عن نقص الأكسجين في الفئران6،14،17،18. وأظهرت بياناتنا ان 4 أسابيع من نقص الأكسجين يمكن ان تحفز علي نموذج مستقر ارتفاع ضغط الدم الرئوي في C57BL الفئران, ومستويات PAP و RVP قابله للمقارنة مع الأدب. هناك حاجه إلى مزيد من الدراسة لمعالجه المدة التي يمكن فيها الحفاظ علي نموذج الشكل العام إذا تم وضع الفئران مره أخرى في ظروف نورموكسيك لبروتوكولات نقص الأكسجين المختلفة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
وليس لدي المؤلفين ما يفصحون عنه.
Acknowledgments
ويدعم هذا البحث مشروع التعليم العالي وإصلاح التدريس في كليه الطب التابعة لاتحاد بكين (10023-2016-002-03) ، وصندوق الشباب في مستشفي فواي (2018-F09) ، وصندوق مدير مختبر بكين الرئيسي للبحوث السابقة لاكلينيكيه تقييم لمواد زرع القلب والاوعيه الدموية (2018-PT2-ZR05).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2,2,2-Tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-5G | For anesthesia |
| Animal temperature controller | Physitemp Instruments, Inc. | TCAT-2LV | For temperature control |
| Dissection forceps | Fine Science Tools, Inc. | 11274-20 | For surgery |
| Gemini Cautery System | Gemini | GEM 5917 | For surgery |
| Intravenous catheter (22G) | BD angiocath | 381123 | For intubation |
| LabChart 7.3 | ADInstruments | For data analysis | |
| Light illumination system | Olympus | For surgery | |
| Mikro-Tip catheter | Millar Instruments, Houston, TX | SPR-1000 | For pressure measurement |
| Millar Pressure-Volume Systems | Millar Instruments, Houston, TX | MVPS-300 | For pressure measurement |
| O2 Controller and Hypoxia chamber | Biospherix | ProOx 110 | For chronic hypoxia |
| PowerLab Data Acquisition System | ADInstruments | PowerLab 16/30 | For data recording |
| Scissors | Fine Science Tools, Inc. | 14084-08 | For surgery |
| Small animal ventilator | Harvard Apparatus | Mini-Vent 845 | For surgery |
| Stereomicroscope | Olympus | SZ61 | For surgery |
| Surgery tape | 3M | For surgery | |
| Terg-a-zyme enzyme | Sigma-Aldrich | Z273287-1EA | For catheter cleaning |
References
- Humbert, M., et al. Advances in therapeutic interventions for patients with pulmonary arterial hypertension. Circulation. 130 (24), 2189-2208 (2014).
- Chatterjee, K. The Swan-Ganz catheters: past, present, and future: a viewpoint. Circulation. 119 (1), 147-152 (2009).
- Adamson, P. B., et al. CHAMPION trial rationale and design: the long-term safety and clinical efficacy of a wireless pulmonary artery pressure monitoring system. Journal of Cardiac Failure. 17 (1), 3-10 (2011).
- Abraham, W. T., et al. Wireless pulmonary artery haemodynamic monitoring in chronic heart failure: a randomised controlled trial. The Lancet. 377 (9766), 658-666 (2011).
- Adamson, P. B., et al. Wireless pulmonary artery pressure monitoring guides management to reduce decompensation in heart failure with preserved ejection fraction. Circulation: Heart Failure. 7 (6), 935-944 (2014).
- Shatat, M. A., et al. Endothelial Kruppel-like Factor 4 modulates pulmonary arterial hypertension. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 50 (3), 647-653 (2014).
- SPR-1000 Mouse Pressure Catheter. , Available from: https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000 (2019).
- Tabima, D. M., Hacker, T. A., Chesler, N. C. Measuring right ventricular function in the normal and hypertensive mouse hearts using admittance-derived pressure-volume loops. American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 299 (6), 2069-2075 (2010).
- Skuli, N., et al. Endothelial deletion of hypoxia-inducible factor-2alpha (HIF-2alpha) alters vascular function and tumor angiogenesis. Blood. 114 (2), 469-477 (2009).
- Harvard Inspira Advanced Safety Ventilator User's Manual. , Available from: http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf. (2019).
- LabChart. , Available from: https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE (2019).
- Marius, M. H., et al. Definitions and diagnosis of pulmonary hypertension. Journal of the American College of Cardiology. 62 (25), 42-50 (2013).
- Ciuclan, L., et al. A novel murine model of severe pulmonary arterial hypertension. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 184 (10), 1171-1182 (2011).
- Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A. A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice. Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).
- Chen, W. C., et al. Right ventricular systolic pressure measurements in combination with harvest of lung and immune tissue samples in mice. Journal of Visualized Experiments. (71), 50023 (2013).
- Ma, Z., Mao, L., Rajagopal, S. Hemodynamic characterization of rodent models of pulmonary arterial hypertension. Journal of Visualized Experiments. (110), 53335 (2016).
- Chen, M. Berberine attenuates hypoxia-induced pulmonary arterial hypertension via bone morphogenetic protein and transforming growth factor-β signaling. Journal of Cellular Physiology. , (2019).
- Bueno-Beti, C., Hadri, L., Hajjar, R. J., Sassi, Y. The Sugen 5416/Hypoxia mouse model of pulmonary arterial hypertension. Experimental Models of Cardiovascular Diseases. Methods in Molecular Biology. vol 1816. Ishikawa, K. , Humana Press. New York, NY. (2018).
