Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

פולשנית הערכה היפודינמית עבור מערכת המוח הימני ואת ההיפוקסיה המושרה לחץ דם ריאתי בעכברים

Published: October 24, 2019 doi: 10.3791/60090

Summary

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לבצע הערכה פולשנית הומודינמיקה של החדר הימני והעורק הריאתי בעכברים באמצעות גישה לניתוח פתוח בחזה.

Abstract

יתר לחץ דם ריאתי (אח י) הוא הפרעת לב כרונית וחמורה. עכברים הם מודל פופולרי בעלי חיים המשמש כדי לחקות את המחלה. עם זאת, הערכה של לחץ חדרית הימני (RVP) ולחץ עורק הריאתי (פאפ) נשאר מאתגרת מבחינה טכנית בעכברים. RVP ו-פאפ קשה יותר למדוד מאשר הלחץ החדרית השמאלי בגלל הבדלים אנטומיים בין מערכות הלב השמאלי והימני. במאמר זה, אנו מתארים הלב הימני יציב היקף שיטת המדידה ואת האימות שלה באמצעות עכברים בריאים ו-אח. שיטה זו מבוססת על ניתוח בחזה פתוח ותמיכה באוורור מכני. זהו תהליך מסובך בהשוואה להליכי החזה הסגורים. בעוד מנתח מיומן היטב נדרש עבור ניתוח זה, היתרון של הליך זה הוא שהוא יכול לייצר גם RVP ו-פאפ פרמטרים באותו זמן, כך הוא הליך מעדיף להערכה של מודלים פה.

Introduction

יתר לחץ דם ריאתי (אח י) הוא הפרעת לב כרונית וחמורה עם העלאת הלחץ בעורק הריאתי (פאפ) ולחץ המוח הימני (RVP) הנגרמת על ידי התפשטות הסלולר פיברוזיס של עורקים ריאתי קטן 1. קטטרי עורק ריאתי, המכונים גם ברבור-גנץ2, משמשים בדרך כלל בניטור הקליני של rvp ו-פאפ. יתר על כן, מערכת ניטור פאפ אלחוטית שימש קלינית3,4,5. כדי לחקות את המחלה למחקר בעכברים, סביבה ארוי משמש כדי לדמות הביטויים הקליניים האנושיים של אח6. בהערכה של פאפ בבעלי חיים, בעלי חיים גדולים קל יחסית לפקח דרך קטטרים עורק הריאתי באמצעות אותה טכניקה של האנשים האנושיים, אבל בעלי חיים קטנים כגון חולדות ועכברים קשה להעריך בגלל גודל הגוף הקטן שלהם. מדידה הומודינמית של המערכת הימני החדרית בעכברים אפשרי עם מידה קטנה במיוחד 1 הקטטר Fr7. שיטה למדידת rvp ו-פאפ בעכברים דווחו בספרות8,9, אבל המתודולוגיה חסרה תיאור מפורט. RVP ו-פאפ הם מאתגרת יותר למדוד מאשר הלחץ החדרית השמאלי בגלל הבדלים אנטומיים בין מערכות הלב השמאלי והימני.

כדי לקבל גם את הפרמטרים פאפ ו-RVP באותו עכבר, אנו מתארים גישה בחזה פתוח מבוסס ניתוח עבור מדידות הלב הנכון, האימות שלה עם עכברים בריאים ו-אח, וכיצד להימנע מיצירת נתונים מלאכותיים במהלך פתוח החזה מסובך ניתוח. למרות טכניקה זו מבוצעת בצורה הטובה ביותר על ידי מנתח מיומן היטב, יש לו את היתרון של היכולת להעריך פאפ ו RVP באותו עכבר.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

הפרוטוקול בעלי החיים נבדק ואושר על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים והשתמש בוועדה בבית החולים Fuwai, האקדמיה הסינית למדע הרפואה, המכללה לרפואה פקינג האיחוד (NO 0000287). בעלי החיים הניסיוניים שוכנו וניזונו על פי ההנחיות לרווחת בעלי חיים בסין.

הערה: C57BL עכברים בני שמונה עד 12 שבועות שוכנו בסביבה עם מחזור אור של 12 שעות כהה/12 h. עכברים פה שוכנו 4 שבועות תחת ריכוז חמצן של 10%, מתוחזק על ידי תא היפוקסיה מבוקרת חמצן כדי לגרום ליתר לחץ דם ריאתי, ועכברים שליטה היו שוכנו באוויר בחדר (21% חמצן) בתנאים זהים. RVP ומדידות פאפ בוצעו בסוף 4 שבועות של אתגר היפוקסיה.

1. הכנה לפני הניתוח

  1. להשרות צנתר מתמר הלחץ (גודל: 1 Fr) ב 0.9% תמיסת מלח בטמפרטורת החדר לפחות 30 דקות לפני הניסוי הומודינמי.
  2. פילטר 2, 2, 2-טריברואואתנול פתרון עם מסנן 0.22 יקרומטר ולאחסן במקרר 4 מעלות.
  3. הכנת כלי ניתוח מנוקה ואספקה כגון כפפות לניתוח.
  4. הכינו 10 מ ל של 1.0% הפתרון אנזים העיכול עבור ניקוי קטטר.
  5. לחבר את צנתר מתמר הלחץ למערכת עוצמת הלחץ.
  6. כיול את מתמר הלחץ לפני קבלת מדידות הלחץ עבור כל עכבר.
    1. סובב את כפתור הכיול ל-0 mmHg ו-25 מ מ כדי לשלוח אות לחץ אימות לתוכנת רכישת הנתונים ולקבוע את תצורת הגדרת הכיול בתוכנה.
    2. לסובב את הידית כדי מתמר ולהתאים את כפתור איזון לאפס הבסיסית.
  7. הגדרת stereomicroscope רגיל ושליטה טמפרטורה בעלי חיים קטנים כירורגית לתחזוקת טמפרטורת הגוף במהלך הניתוח.
  8. הגדר מערכת תאורה אור לניתוח מיקרו כדי לספק אור מספיק על האזור הכירורגי.

2. ניתוח פתוח בחזה ומדידת הומודינמיקה

  1. עכברים מורדם עם 250 מ"ג/ק ג של 2, 2, 2-Tribromoethanol דרך הזרקה של הצפק. במקרה הצורך, חזור על מינון משלים ב-1/3 כדי 1/2 של המנה המקורית במהלך ההליך.
  2. הסרתפרווה בחזהובצוואר באמצעות קרם גילוח והסרת שיער (איור 1, 2a).
  3. אבטח כל עכבר במיקום פרקדן על הטמפרטורה מבוקרת בעלי חיים קטן כירורגי בטבלה כדי לסייע בשמירה על טמפרטורת הגוף (37 ° c) במהלך הניתוח.
  4. נקו את האתר הכירורגי עם 70% ethanal.
  5. לאחר הרדמה היא בתוקף, לאשר אינדוקציה הרדמה נאותה באמצעות צביטה בבוהן.
  6. הפוך את החתך לקו האמצע על הצוואר (איור 1א).
  7. לנתח את שריר השלד באמצעות מלקחיים מעוקל לחשוף את קנה הנשימה (איור 1B, 1c).
  8. לבצע צנרור דרך הפה באמצעות שינוי 22 G ורידי קטטר המעטפת. ודא כי אבובים הוא בקנה הנשימה באמצעות מלקחיים (איור 1ד).
  9. לחבר את אבובים אל מאוורר בעלי חיים קטנים. לחשב ולהגדיר קצב נשימה ונפח הגאות על בסיס משקל הגוף על פי המדריך למשתמש ההנשמה10. לדוגמה, הגדר קצב נשימה ל-133/min ונפח הגאות ל-180 μL עבור עכבר בגודל 30 גר' המבוסס על החישוב המתואר.
  10. אבטחו את צינורות האוורור באמצעות הקלטת.
  11. לאשר אינדוקציה הרדמה נאותה באמצעות צביטה בבוהן.
  12. לעשות חתך באמצע קו על העור בחזה בזהירות לנתח את שרירי החזה באמצעות כלי הבית (איור 2B, 2c).
  13. חותכים את עצם החזה באמצעות מספריים לרוחב האמצע וחושפים את חלל החזה (איור 2ד).
  14. למנוע דימום כלשהו באמצעות כלי הקאולטרי במהלך הניתוח הפתוח בחזה.
  15. לחשוף את חדר החדר הימני עם רטרקטורים (איור 2E).
  16. הכנס את הלחץ מלוחים ספוג מתמר באמצעות מנהרה קטנה שנוצרה עם מחט 25 גרם לתוך החדר הימני כדי למדוד RVP (איור 2F ואיור 3a, 3c).
  17. להחזיק את כבל קטטר לחצות את שסתום הריאות בצורה קואקסיאליים עם עורק הריאות. להתבונן הלחץ בצורת גל ולקבל אות פאפ יציבה (איור 3B, 3d).
  18. הקלטת נתונים הומודינמיים באמצעות מערכת רכישת נתונים ותוכנה.
  19. לאחר המדידות הסופיות, המתת החסד עכברים באמצעות הזרקת כאיי פי הזרקה של מנה עודפת של 2, 2, 2-Triרומטוזיס הפתרון.
  20. בזהירות להסיר קטטר מן המערכת הלב הימני המקום לתוך מזרק 1 mL המכיל 1% אנזים העיכול פתרון.
  21. השימוש במים מזוקקים לשטוף ברציפות את הקטטר בזהירות לאחסן אותו בתיבה המקורית.

3. ניתוח נתונים עבור הומודינמיקה

הערה: נתוני ה-הומודינמיקה נרשמו ונותחו באמצעות תוכנת ניתוח11 (טבלת חומרים).

  1. עבור כל עכבר, בחר לפחות 10 פעימות לב רציף ויציב ללא רעש כדי להשיג את הנתונים הממוצעים של RVP או נתוני פאפ עבור כל פרמטר.
  2. השתמש ב- t-test של הסטודנט כדי להשוות את השליטה באוויר רגיל וקבוצות היפוקסיה. הערה: p < 0.05 נחשב משמעותי מבחינה סטטיסטית. נתונים מוצגים כממוצע ± SD.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

צנתר מתמר הלחץ הוכנס לחדר הימני (איור 3א) דרך מנהרה מורחבת על ידי מחט 25 גרם, ו rvp אופייני בצורת גל (איור 3ג) הושגה. הקטטר היה מותאם ללא הרף ומתקדם לאט ונשמר באותו ציר כמו עורק הריאות תוך כדי עובר דרך שסתום הריאות (איור 3ב). כאשר חיישן הלחץ הוכנס בהצלחה לתוך העורק הריאתי, כיתה של פאפ אופייני עם חריץ dicrotic אופייני הופיע (איור 3ד). כדי למנוע את הדור של נתונים מלאכותיים, הבחנו אם בצורת גל היה רעש (איור 4) או אם רמת אפס של הקטטר נסחף (איור 5). אם זה קרה, נעשו תיקונים, וקטעים אלה עם רעש לא נכללו בניתוח נתונים.

אח א מאופיין העלאת מתמשכת ב-פאפ ו RVP, הנגרמת על ידי עמידות מוגברת בעורקים הריאתי הקטן. אח א מוגדר על ידי פאפ ממוצע של ≥ 25 mmHg במנוחה, נמדד במהלך צנתור לב ימני במרפאה12. מדדנו RVP ו-פאפ ב עכברים עם היפוקסיה כרונית המושרה (שמרו על 10% חמצן עבור 4 שבועות) או קבוצת בקרה (נשמר באוויר תקין). התוצאות מוצגות באיור 6. בהשוואה לאלה בקבוצה רגילה בקרת אוויר, פאפ הסיסטולי (איור 6A), פאפ דיאסטולי (איור 6B), אומר פאפ (איור 6ג), והלחץ הסיסטולי הימני החדרית (איור 6D) גדלו באופן משמעותי בקבוצת ההיפוקסיה הכרונית. חוקרים דיווחו גם כי בהשוואה היפוקסיה בלבד, שילוב של מעכב ומעכבי עם היפוקסיה כרונית במשך 3 שבועות כדי לגרום פה חמור בעכברים יכול לגרום rvp מוגבר משמעותית13,18.

Figure 1
איור 1: צנרור לתמיכת אוורור מכני בעכברים. (א) הפרווה הצוואר הוסר באמצעות קרם הסרת שיער כדי לקבל אזור נקי לניתוח. החתך של קו האמצע נעשה על העור של הצוואר. (ב) שריר השלד המכסה את קנה הנשימה נחשף. (ג) שרירי השלד הם בכדי לגזור במיומנות כדי לחשוף את קנה הנשימה. החץ הצהוב מציין. את קנה הנשימה (ד) אבובים (שונה באמצעות 22 G ורידי קטטר) מוכנס לתוך דרכי הנשימה, עם המיקום אישר באמצעות מלקחיים. החץ הצהוב מציין את האבובים בתוך קנה הנשימה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 2
איור 2: ניתוח פתוח בחזה למדידת מדידת ההודינמיקה במערכת הבין-חדרית הימנית. (א) פרווה בחזה הוסר באמצעות קרם הסרת שיער כדי לקבל אזור נקי לניתוח. (ב) חיתוך קו אמצע נעשה כדי לחשוף את שרירי השלד החזה ואת עצם החזה. (ג) כלי קאולטרי משמש כדי למזער את הדימום במהלך פתיחת החזה (החץ מציין את העצה נמנעתי). (ד) עצם החזה נחתכת לאורך קו האמצע (קו המקף הצהוב). (ה) שני ריטרקטורים משמשים כדי לחשוף את הלב (החץ העליון מציין את הקיר הימני הזרוע, ואת החץ התחתון מציין את הקיר הימני הבין חדרית). (ו) מתמר הלחץ קטטר (החץ התחתון) מוכנס לתוך התא התאי הימני באמצעות הכלי ניקוב (25 בגודל מחט, החץ העליון) כדי לייצר מנהרה קטנה על הקיר הימני החדרית בחינם. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 3
איור 3: הנציג rvp ועקומות פאפ. צנתר מתמר הלחץ מוכנס לחדר הימני הנכון (א) כדי להשיג את rvp צורת גל (ג). צנתר מתמר הלחץ עובר דרך שסתום הריאות ולאחר מכן נשאר בעורק הריאתי (ב) כדי ליצור את צורת הפאפ. החיצים מציינים את חריץ הדיקטסטי האופייני על צורת הבית (D), שהיא סימן לסגירת שסתום ריאתי. RA = הפרוזדור הימני, RV = החדר הימני, הרשות = עורק הריאות, LV = שמאל החדר השמאלי. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 4
איור 4: rvp רעש של צורת גל נגרמת על ידי נגיעה של משטח חיישן הלחץ על הקיר חדרית. נקודת החץ מראה עלייה חדה בלחץ על עקומת RVP (הערוץ העליון), אשר במקביל מייצרת שינוי מלאכותי dP/dt (הערוץ התחתון). dP/dt מחושב מ-RVP. הקווים המקווקו מצביעים על רעש dP/dt. אם הרעש הוא כל הזמן נוכח, התאמה של מיקום חיישן קטטר בחדר יכול למנוע רעש. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 5
איור 5: אפס סחיפה של מתמר הלחץ במהלך rvp מדידה. החלון השמאלי מראה באופן מלאכותי מעט מוגבה הקצה-דיאסטולי RVP. החלון המורחב הימני מראה מוגברת הקצה-דיאסטולי RVP (חיצים מצביעים על הקצה-דיאסטולי RVP). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 6
איור 6: היפוקסיה-המושרה לחץ דם בעורק הריאתי בעכברים C57BL. (A) סיסטולית (spap). (ב) הדיאסטולי (ב) מאוד. (ג) מתכוון פאפ (מ). (ד) לחץ סיסטולי המוח הימני (RVSP). (ה) ו-(ו), המייצג צורות פאפ לשליטה ו-פה עכברים בהתאמה *p < 0.05; מבחן tשל הסטודנט; בקרת קבוצה n = 10; קבוצת היפוקסיה n = 3. נתונים מוצגים כממוצע ± SD. פאפ = לחץ עורק הריאתי, RVP = לחץ המוח הימני. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

צנרור קנה הוא הצעד החשוב הראשון לניתוחי חזה פתוח. השיטה הקלאסית של צנרור קנה לבעלי חיים קטנים, כגון חולדות או עכברים, כרוך ביצוע חתך בצורת T על קנה הנשימה ומוסיף ישירות Y סוג צינורות הקנה אל קנה הנשימה. בפועל, אנו מוצאים כי שיטה זו אינה קלה במהלך הפעולה. צינור Y סוג אל הקנה הוא גדול מדי עבור בעלי חיים קטנים וצורות זווית עם קנה הנשימה. כך, קשה לתקן את הצינורות במקום. בנוסף, ברגע אבובים צנרור בטעות יוצא מן האוויר במהלך ניתוח בחזה פתוח, זה בדרך כלל גורם למוות בעלי חיים בגלל אובדן תמיכה אוורור מכני. לכן, שינינו את שיטת הצנרור האנדוריקל14 על ידי יצירת חתך על העור, הפרדת שכבת השריר כדי לחשוף את קנה הנשימה (איור 1ג), וישירות להוסיף את צינורות הקנה אל דרכי הנשימה דרך ה פיו של בעל החיים. המיקום של אבובים בקנה הנשימה יכול להיות מאושר בנוחות על ידי הצבת קנה הנשימה באמצעות מלקחיים (איור 1ד). לאחר הסרת המחט מדריך ורק באמצעות קטטר נדן, a 22 G ורידי קטטר משמש אבובים צנרור. אבובים ניתן לאבטח בקלות לאחר צנרור. זוהי דרך בטוחה לנהל צנרור במהלך הניתוח והוא יכול לשפר באופן משמעותי את שיעור ההצלחה של ניתוח בעלי חיים קטנים בחזה פתוח. עם זאת, שיטה זו דורשת הכשרה ותרגול.

הגישה הסגורה למדידה של הלב הימני הדינמי תוארה בפירוט15,16. מגבלה אחת של שיטת החזה הסגור היא כי ניתן להשתמש בו רק כדי להעריך RVP, כי הקטטר לא יכול לגשת לעורק הריאתי בעכברים. אנו משתמשים חתך החזה באמצע הדרך שבו הקיר הימני החופשי ממוקם, ממש מתחת עצם החזה (איור 2ד). לאחר הנכון צנתור המוח כדי להשיג RVP, קל להכניס את הצנתר בצורה קואקסיאליים עם עורק הריאות כדי לקבל פאפ (איור 2E). כאשר עצם החזה נחתך במהלך הניתוח הפתוח בחזה, כלי אלקטרוקרישה משמש כדי למנוע חיתוך שורה של חתך על מנת למנוע הפחתת לחץ דם מלאכותי הנגרמת על ידי איבוד דם (איור 2ג). זה אופציונלי עבור ניתוח פתוח בחזה להשתמש קטטר לולאה P-V כדי לקבל את שני RVP ומידע נפח17. עם זאת, עדיף לא להשתמש בו כדי לקבל פאפ בגלל גודלו הגדול. למרות שיטה זו מבוצעת באופן הטוב ביותר על ידי מנתח מיומן היטב, עדיף הגישה סגור החזה כי זה מאפשר את התחזוקה של צנרור הקנה ומניעת דימום במהלך ניתוח בחזה פתוח כדי למנוע מוות בעלי חיים.

בנוסף, הקיר הימני החלק החופשי מנוקב עם 25 גרם או מחט קטנה יותר כדי להפחית את ההתנגדות במהלך החדרת הקטטר לתוך החדר. במהלך הצנתור, משטח חיישן הלחץ אסור לסטות מן השיקוע של המחט כדי למנוע נזק מקרי לחיישן הקטטר על ידי משטח מתכת חדה. עדיף לא להשתמש במחט גדולה כדי לנקב את הקיר חינם חדרית, כפי שהוא בדרך כלל גורם דימום נוסף, ואת נפח הדם מספיק זרימת הדם גורמת גם נתונים ללחץ מלאכותי.

בגלל הנפח הקטן של החדר ואת הגודל בלתי סדיר של התא החדרית הימני בעכברים, חיישן הלחץ של הקטטר נוגע בקלות את הקיר הימני הנכון בתוך שיעור פעימות לב. זה יוצר רעש על עקומת הלחץ החדרית (איור 4), ישירות להשפיע על ניתוח הלחץ החדרית. במקרה זה, את הזווית ואת העומק של הקטטר צריך להיות מותאם עד הרעש נעלם כדי להשיג לחץ חדרית חלקה בצורת גל שוב.

הגודל הקטן של 1 מתמר הלחץ הצנתר7 הופך אותו מאוד מדויק, לחץ מאוד מדויק. אפס להיסחף הוא בדרך כלל לא מנוסה במהלך מבחן קטטר רגיל בתמיסה מלוחים בלתי מתורבת, אלא אם הקטטר פגום או ניזוק. עם זאת, בנוכחות דם הגוף, רכיבי הדם הקפדה על משטח חיישן הלחץ עלול לגרום הקטטר לעבור אפס להיסחף במהלך ניסוי vivo (איור 5). כדי לטפל בבעיה זו, אנו עושים את הפעולות הבאות: באופן זמני להסיר את הצנתר החוצה מן התא החדרית ומקום את קצה החיישן של הקטטר לתוך חם 1.0% פתרון אנזים העיכול; דגירה אותו כדי לעכל את רכיבי הדם המחוברים למשטח החיישן; ואחרי לנגב בעדינות את הקטטר עם גזה ספוג מלוחים, להכניס את הצנתר חזרה לחדר החדרית כדי לקבל יציבה, ללא אפס לחץ הסחף המוח גל.

הכנת צנתר מתמר הלחץ חיוני גם כדי להשיג נתונים יציבים. חיישן הלחץ קצה של הקטטר חייב להיות ספוג לפחות 30 דקות ב 0.9% תמיסת מלח בטמפרטורת החדר לפני בהליך vivo כדי לשמור על יציבות הצנתר. בדרך זו, מאפייני החשמל של קטטר מתמר הלחץ יכול להיות מיוצב בצורה אופטימלית.

לבסוף, תקופת ההיפוקסיה הוא בר קיימא מ 3 עד 4 שבועות עבור מודל ההיפוקסיה המושרה לחץ דם בעכברים6,14,17,18. הנתונים שלנו הראו כי 4 שבועות של היפוקסיה יכול לגרום למודל לחץ דם ריאתי יציב בעכברים C57BL, ו-פאפ ו-RVP רמות הם המקבילה עם הספרות. מחקר נוסף נדרש כדי להתמודד עם כמה זמן מודל פה יכול להישמר אם העכברים הם לשים בחזרה בתנאים normoxic עבור פרוטוקולים היפוקסיה שונים.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

. למחברים אין מה לגלות

Acknowledgments

מחקר זה נתמך על ידי פרויקט החינוך לתארים מתקדמים והוראה של המכללה האקדמית לרפואה של פקינג (10023-2016-002-03), הקרן לנוער של החולים fuwai (2018-F09), ואת קרן המנהל של בייג המעבדה המפתח של מחקר טרום קליני ו הערכה לחומרים לשתל לב וכלי דם (2018-PT2-ZR05).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
2,2,2-Tribromoethanol Sigma-Aldrich T48402-5G For anesthesia
Animal temperature controller Physitemp Instruments, Inc. TCAT-2LV For temperature control
Dissection forceps Fine Science Tools, Inc. 11274-20 For surgery
Gemini Cautery System Gemini GEM 5917 For surgery
Intravenous catheter (22G) BD angiocath 381123 For intubation
LabChart 7.3 ADInstruments For data analysis
Light illumination system Olympus For surgery
Mikro-Tip catheter Millar Instruments, Houston, TX SPR-1000 For pressure measurement
Millar Pressure-Volume Systems Millar Instruments, Houston, TX MVPS-300 For pressure measurement
O2 Controller and Hypoxia chamber Biospherix ProOx 110 For chronic hypoxia
PowerLab Data Acquisition System ADInstruments PowerLab 16/30 For data recording
Scissors Fine Science Tools, Inc. 14084-08 For surgery
Small animal ventilator Harvard Apparatus Mini-Vent 845 For surgery
Stereomicroscope Olympus SZ61 For surgery
Surgery tape 3M For surgery
Terg-a-zyme enzyme Sigma-Aldrich Z273287-1EA For catheter cleaning

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Humbert, M., et al. Advances in therapeutic interventions for patients with pulmonary arterial hypertension. Circulation. 130 (24), 2189-2208 (2014).
  2. Chatterjee, K. The Swan-Ganz catheters: past, present, and future: a viewpoint. Circulation. 119 (1), 147-152 (2009).
  3. Adamson, P. B., et al. CHAMPION trial rationale and design: the long-term safety and clinical efficacy of a wireless pulmonary artery pressure monitoring system. Journal of Cardiac Failure. 17 (1), 3-10 (2011).
  4. Abraham, W. T., et al. Wireless pulmonary artery haemodynamic monitoring in chronic heart failure: a randomised controlled trial. The Lancet. 377 (9766), 658-666 (2011).
  5. Adamson, P. B., et al. Wireless pulmonary artery pressure monitoring guides management to reduce decompensation in heart failure with preserved ejection fraction. Circulation: Heart Failure. 7 (6), 935-944 (2014).
  6. Shatat, M. A., et al. Endothelial Kruppel-like Factor 4 modulates pulmonary arterial hypertension. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 50 (3), 647-653 (2014).
  7. SPR-1000 Mouse Pressure Catheter. , Available from: https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000 (2019).
  8. Tabima, D. M., Hacker, T. A., Chesler, N. C. Measuring right ventricular function in the normal and hypertensive mouse hearts using admittance-derived pressure-volume loops. American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 299 (6), 2069-2075 (2010).
  9. Skuli, N., et al. Endothelial deletion of hypoxia-inducible factor-2alpha (HIF-2alpha) alters vascular function and tumor angiogenesis. Blood. 114 (2), 469-477 (2009).
  10. Harvard Inspira Advanced Safety Ventilator User's Manual. , Available from: http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf. (2019).
  11. LabChart. , Available from: https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE (2019).
  12. Marius, M. H., et al. Definitions and diagnosis of pulmonary hypertension. Journal of the American College of Cardiology. 62 (25), 42-50 (2013).
  13. Ciuclan, L., et al. A novel murine model of severe pulmonary arterial hypertension. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 184 (10), 1171-1182 (2011).
  14. Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A. A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice. Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).
  15. Chen, W. C., et al. Right ventricular systolic pressure measurements in combination with harvest of lung and immune tissue samples in mice. Journal of Visualized Experiments. (71), 50023 (2013).
  16. Ma, Z., Mao, L., Rajagopal, S. Hemodynamic characterization of rodent models of pulmonary arterial hypertension. Journal of Visualized Experiments. (110), 53335 (2016).
  17. Chen, M. Berberine attenuates hypoxia-induced pulmonary arterial hypertension via bone morphogenetic protein and transforming growth factor-β signaling. Journal of Cellular Physiology. , (2019).
  18. Bueno-Beti, C., Hadri, L., Hajjar, R. J., Sassi, Y. The Sugen 5416/Hypoxia mouse model of pulmonary arterial hypertension. Experimental Models of Cardiovascular Diseases. Methods in Molecular Biology. vol 1816. Ishikawa, K. , Humana Press. New York, NY. (2018).

Tags

רפואה סוגיה 152 יתר לחץ דם ריאתי הומודינמיקה לחץ חדרית ימני לחץ עורק הריאתי עכבר צנתור היפוקסיה
פולשנית הערכה היפודינמית עבור מערכת המוח הימני ואת ההיפוקסיה המושרה לחץ דם ריאתי בעכברים
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Luo, F., Wang, X., Luo, X., Li, B.,More

Luo, F., Wang, X., Luo, X., Li, B., Zhu, D., Sun, H., Tang, Y. Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice. J. Vis. Exp. (152), e60090, doi:10.3791/60090 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter