Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Chemistry
Click here for the English version

Chemistry

المرحلة الصلبة 11ج-ميثيل ، تنقيه وصياغة لإنتاج المتتبعين PET

Published: October 24, 2019 doi: 10.3791/60237
Automatic Translation
*1, *1, 1, 1, 1, 1,2
1McConnell Brain Imaging Centre, Montreal Neurological Institute, McGill University, 2Department of Neurology and Neurosurgery, McGill University
* These authors contributed equally

Summary

نحن الإبلاغ عن تقنيه الكربون-11 كفاءه الإشعاع لإنتاج المتعقبات ذات الصلة سريريا ل بوزيترون الانبعاثات التصوير المقطعي (PET) باستخدام المرحلة الصلبة خراطيش الاستخراج. 11 C-يتم تمرير عامل ميثيلتينغ من خلال خرطوشه محمله مسبقا مع السلائف والشطف المتعاقبة مع الايثانول المائي يوفر المتعقبات الكيميائية النقية كيميائيا وإشعاعيا في الغلات الاشعاعيه العالية.

Abstract

ويعتمد الإنتاج الروتيني للمتتبعات الاشعاعيه المستخدمة في التصوير المقطعي للانبعاثات البوزيترونه (PET) في الغالب علي الكيمياء الرطبة حيث يتفاعل التزامن الإشعاعي مع سلائف غير مشعة في المحلول. هذا النهج يتطلب تنقيه المقتفي بواسطة اللوني السائل عاليه الأداء (HPLC) تليها أعاده صياغة في المذيبات الحيوية المتوافقة للاداره البشرية. وضعنا مؤخرا رواية 11ج-ميثيل نهج لتوليف كفاءه عاليه من الكربون-11 المسمي PET صيدلية ، والاستفادة من خراطيش المرحلة الصلبة كما المتاح "3 في 1" وحدات لتوليف وتنقيه أعاده صياغة المتتبعين. هذا النهج يلغي استخدام HPLC المعد ويقلل من خسائر المتتبع في خطوط النقل وبسبب الاضمحلال الإشعاعي. علاوة علي ذلك ، تعمل التقنية المستندة إلى الخرطوشة علي تحسين موثوقيه التوليف ، وتبسط عمليه الاتمته وتسهل الامتثال لمتطلبات ممارسات التصنيع الجيدة (GMP). هنا ، ونحن نظهر هذه التقنية علي سبيل المثال لإنتاج PET المقتفي بيتسبرغ مجمع B ([11ج] pib) ، وهو معيار الذهب في وكيل التصوير المجرية للويحات اميلويد في العقول البشرية.

Introduction

بوزيترون الاشعه المقطعية (PET) هو طريقه التصوير الجزيئي الذي يعتمد علي الكشف عن الاضمحلال المشع لنظائرها المرتبطة بجزيء نشط بيولوجيا لتمكين التصور في الجسم الحيوي من العمليات البيوكيميائية والإشارات والتحولات . الكربون-11 (t1/2 = 20.3 min) هي واحده من النظائر المشعة الأكثر استخداما في PET بسبب وفره في الجزيئات العضوية وقصيرة نصف العمر الذي يسمح لإدارات التتبع متعددة في نفس اليوم لنفس الموضوع الإنسان أو الحيوانية و يقلل من عبء الإشعاع علي المرضي. وتستخدم العديد من المتتبعين المسمية مع هذا النظير في الدراسات السريرية والبحوث الصحية الاساسيه لفي الجسم الحيوي التصوير PET من الأهداف ذات الصلة بيولوجيا الكلاسيكية والناشئة-[11ج] Raclopride ل d2/د3 مستقبلات, [11ج] PiB للويحات اميلويد ، [11C] PBR28 للبروتين المتحول-علي سبيل الاسم فقط عدد قليل.

وغالبا ما تنتج الكربون-11 المسمية المتعقبات PET عن طريق 11C-ميثيلation من السلائف غير المشعة التي تحتوي علي-OH (الكحول والفينول وحمض الكربوكسيليه) ،-NH (أمين واميد) أو-SH (thiol) المجموعات. بإيجاز, خلقت النظائر في الغاز هدف من [سيكلوترون] عن طريق 14[ن] ([ب], α)11[ك] رد فعل نوويه في الشكل كيميائي [11ك] [كو]2. ثم يتم تحويل هذا الأخير إلى [11ج] يوديد الميثيل ([11c]ch 3I) عن طريق اما الكيمياء الرطبة (تخفيض إلى [11ج] ch3OH مع lialh4 تليها تبريد مع مرحبا)1 أو الجافة الكيمياء (التخفيض الحفاز إلى [11ج] CH4 متبوعا باليود الراديكالي مع الجزيئية I2)2. [11جيم] Ch3يمكن بعد ذلك تحويلها إلى مزيد من رد الفعل 11c-ميثيل ترايفلات ([11c] CH3otf) عن طريق تمريرها علي عمود ترايفلات الفضة3. ثم يتم تنفيذ 11C-ميثيلation اما عن طريق فقاعات الغاز المشع إلى محلول من السلائف غير المشعة في المذيبات العضوية أو عن طريق المذيبات الأسير أكثر اناقه "حلقه" الطريقة4,5. و 11C-الراسم ثم تنقيته عن طريق hplc, أعيدت صياغتها في المذيبات الحيوية, ومرت من خلال فلتر معقم قبل ان تدار للأشخاص البشر. ويجب ان تكون كل هذه التلاعبات سريعة وموثوقه بالنظر إلى النصف القصير من عمر الكربون-11. ومع ذلك ، فان استخدام نظام HPLC يزيد بشكل كبير من الخسائر في وقت التتبع والإنتاج ، وغالبا ما يتطلب استخدام المذيبات السامة ، ويعقد الاتمته ويؤدي أحيانا إلى فشل التوليفات. وعلاوة علي ذلك ، فان التنظيف المطلوب للمفاعلات وعمود HPLC يطيل التاخير بين توليفات دفعات التتبع اللاحقة ويزيد من تعرض الموظفين للإشعاع.

الكيمياء الاشعاعيه من الفلور-18 (t1/2 = 109.7 min) ، والنظائر الأخرى المستخدمة علي نطاق واسع PET ، وقد تم مؤخرا المتقدمة عن طريق تطوير مجموعات المستندة إلى كاسيت التي تتجنب الحاجة إلى تنقيه hplc. من خلال توظيف المرحلة الصلبة استخراج (مهندس) خراطيش ، وهذه مجموعات المتاح بالبالكامل تسمح للإنتاج الروتيني موثوق بها من 18f-tracers ، بما في ذلك [18f] fdg ، [18f] fdg ، [18و] الكوبي وغيرها ، مع توليف أقصر مرات ، وانخفاض مشاركه الموظفين والحد الأدنى من صيانة المعدات. واحده من الأسباب الكربون-11 لا يزال النظير اقل شعبيه في التصوير PET هو عدم وجود مجموعات مماثله للإنتاج الروتيني من 11C-tracers. سيؤدي تطويرها إلى تحسين الموثوقيه التركيبية إلى حد كبير ، وزيادة الغلات الكيميائية الاشعاعيه ، وتبسيط الاتمته والصيانة الوقائية لوحدات الإنتاج.

وتستفيد مجموعات الإنتاج المتاحة حاليا من خراطيش الحبر غير المكلفة وغير القابلة للتصرف ، بدلا من أعمده HPLC لفصل المتتبع الإشعاعي عن النظائر المشعة غير المتفاعلة والسلائف وغيرها من المنتجات المشعة وغير المشعة. ومن الناحية المثالية ، فان تفاعل الاشعه الشعاعية يمضي أيضا علي نفس الخرطوشة ؛ علي سبيل المثال, و [18و] فلوروميثيلاثيون من ثنائي ميثيل امينوايثانول مع الغازية [18و] CH2brf في إنتاج سرطان البروستاتا التصوير المقتفي أليفه [18و] فلوروميثيلكولين يحدث علي الموجبة-تبادل الراتنج خرطوشه 6. علي الرغم من ان إجراءات مماثله لأشعه الشعاعية لعده 11c-القصبات علي خراطيش وقد تم الإبلاغ عن7,8 وأصبحت قويه بشكل خاص للتخليق الإشعاعي من [11ج] الكولين9 و [11ج] ميثيونين10، تظل هذه الامثله مقتصرة علي متتبعي الأورام PET حيث غالبا ما لا يكون الانفصال عن السلائف مطلوبا. وقد أبلغنا مؤخرا عن تطوير "[11ج] مجموعات" لإنتاج [11ج] CH3I11 واللاحقة 11c-ميثيلation ، فضلا عن الصلبة التي تدعمها المرحلة التوليف12 في مساعينا تبسيط الإنتاج الروتيني من 11C-tracers. هنا ، نود ان نظهر تقدمنا باستخدام مثال المرحلة الصلبة دعم التركيب الإشعاعي من [11ج] pib ، والتتبع الإشعاعي للتصوير aβ التي أحدثت ثوره في مجال التصوير مرض الزهايمر (AD) عندما تم تطويره لأول مره في 2003 ( الشكل 1) 13و14. في هذه الطريقة ، متقلبة [11C] CH3otf (bp 100 °c) يتم تمريرها فوق 6-آوه-bta-0 السلائف المودعة علي الراتنج من خرطوشه المتاح. المقتفي PET [11C] ثم يتم فصل pib من السلائف والشوائب المشعة عن طريق التملص من خرطوشه مع الايثانول المائي المتوافقة بيولوجيا. وعلاوة علي ذلك ، فاننا الألى هذه الطريقة من [11C] pib التركيب الإشعاعي باستخدام وحده توليف الكيمياء الاشعاعيه التي تعمل عن بعد ومجموعات كاسيت المتاح. علي وجه التحديد ، نفذنا هذا التركيب الإشعاعي علي وحده الكيمياء الاشعاعيه 20 صمام ، مجهزه بمحرك حقنه (موزع) الذي يناسب معيار 20 مل من البلاستيك حقنه القابل للتصرف ، وحده تحكم تدفق الغاز ، ومضخة فراغ وقياس. نظرا لبساطه هذه الطريقة ، ونحن علي ثقة من انه يمكن تعديلها علي معظم المتاحة تجاريا تخليق الألى ، اما القائم علي كاسيت أو تلك المجهزة بصمامات ثابته. تسهل هذه التقنية المدعومة من المرحلة الصلبة [11C] إنتاج pib متوافق مع أنظمه ممارسات التصنيع الجيدة (GMP) ويحسن موثوقيه التوليف. التقنية الموصوفة هنا تقلل أيضا من كميه السلائف المطلوبة للتخليق الإشعاعي ، وتستخدم فقط المذيبات الحيوية "الخضراء" وتقلل الوقت بين دفعات الإنتاج المتتابعة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. اعداد المخازن المؤقتة والتملص

  1. حل 2.72 غرام من خلات الصوديوم ثلاثي هيدرات في 100 mL من الماء لاعداد 0.2 M محلول خلات الصوديوم (الحل A).
  2. أذابه 11.4 مل من حمض الخليك الجليدي في 1 لتر من الماء لاعداد 0.2 محلول حمض الخليك M (محلول B).
  3. الجمع بين 50 مل من الحل A مع 450 mL من الحل B لاعداد خلات العازلة في pH 3.7 (المخزن المؤقت 1) وفقا للمركز المرجعي العازلة15. التحقق من درجه الحموضة من العازلة مع شرائط الحموضة أو متر الأس الهيدروجيني.
  4. الجمع بين 12.5 مل من الايثانول المطلق مع 87.5 mL من العازلة 1 لجعل 12.5 ٪ مائي EtOH الحل (غسل 1) في زجاجه 100 mL.
  5. الجمع بين 15 مل من الايثانول المطلق مع 85 mL من العازلة 1 لجعل 15 ٪ مائي EtOH الحل (غسل 2) في زجاجه 100 mL.
  6. الجمع بين 5 مل من الايثانول المطلق مع 5 مل من المخزن المؤقت 1 لجعل 50 ٪ محلول مائي EtOH (النهائي التملص) ورسم 2.5 mL من هذا الحل في حقنه 10 مل.

2-تطبيق السلائف علي الخرطوشة

  1. تمرير 10 مل من الماء تليها 5 مل من الأسيتون من خلال خرطوشه tC18 لشرط مسبق.
  2. تجفيف خرطوشه مع تيار من النيتروجين في 50 mL/min لمده 1 دقيقه.
  3. تذوب 2 ملغ من السلائف 6-OH-BTA-0 في 1 مل من الأسيتون لامائية.
  4. عقد العروة-تلميح 250 μL الدقة الزجاج حقنه أسفل ، وسحب 100 μL من محلول السلائف و 50 μL من وساده الهواء علي راس السائل. أزاله الابره وتطبيق الحل السلائف علي خرطوشه tC18 من نهاية الإناث عن طريق دفع ببطء الغطاس علي طول الطريق إلى أسفل. لا تضغط علي الحل أكثر من ذلك!

3. اعداد مشعب لتوليف الألى

  1. تامين القياسية 5-ميناء المتعدد المتاح علي وحده التوليف وتجميعها وفقا لشكل 2 والخطوات 3.2-3.5 أدناه.
    ملاحظه: نوصي باستخدام الفتحات المقاومة لأسيتون (انظر جدول المواد).
  2. المنفذ 1 لديه موقعين. قم بتوصيل المدخل الأفقي بالموزع الألى المزود بحقنه 20 مل. توصيل المدخل العمودي للزجاجة مع غسل 1.
  3. توصيل إخراج الوحدة التي تنتج [11C] CH3otf إلى منفذ 2 من مشعب.
  4. قم بتثبيت خرطوشه tC18 المحملة بالسلائف 6-OH-BTA-0 بين المنفذين 3 و 4.
  5. ويوجد في الميناء 5 موقعان. توصيل ماخذ الأفقي إلى زجاجه النفايات التي يجب ان تعقد ما لا يقل عن 200 mL. قم بتوصيل المنفذ العمودي بالقارورة المعقمة لجمع التتبع عن طريق الفلتر المعقم.

4. التركيب الإشعاعي [11C] pib

تحذير: يجب اجراء جميع التلاعبات التي تنطوي علي نظائر مشعة في خليه ساخنه محمية بالرصاص من قبل الافراد المدربين تدريبا كافيا للعمل مع المواد المشعة.
ملاحظه: هذا البروتوكول لا يغطي تفاصيل إنتاج [11c] CO2 في سيكلوترون وتحويلها إلى [11c] CH3otf باستخدام وحده الكيمياء الاشعاعيه. ستعتمد هذه الإجراءات علي المعدات الفردية لمختبر الكيمياء الاشعاعيه وهي خارج نطاق هذا البروتوكول. وقد تم تجهيز مركز المحبوبة لدينا مع ساينوترون IBA ، والتي تنتج الكربون-11 في شكل كيميائي من [11c] CO2عن طريق 14ن (ف ، α)11ج رد فعل نووي مع n2/O2 خليط الغاز (99.5:0.5) في الغاز الهدف ، ووحده متاحه تجاريا لإنتاج [11ج]ch 3I عن طريق "الطريقة الجافة" (التخفيض الحفاز إلى [11ج] ch4 متبوعا باليود الراديكالي). [11جيم] يتم إنتاج ch3otf عن طريق تمرير [11C] ch3I أكثر من عمود ترايفلات الفضة تسخينها إلى 175 درجه مئوية في 20 مل/دقيقه.

  1. تسليم [11ج] ch3otf في مشعب من خلال المنفذ 2 وتمريرها من خلال خرطوشه tC18 المحملة في 20 مل/دقيقه تدفق الناتج ينظمها [11c] ch3otf وحده ، عن طريق الموانئ 3 و 4 وفي زجاجه النفايات كما هو مبين في الشكل 2(ا)
  2. بمجرد ان يتم نقل جميع النشاط الإشعاعي والمحاصرين علي خرطوشه tC18 كما رصدها كاشف النشاط الإشعاعي وراء حامل خرطوشه ، ووقف تدفق الغاز عن طريق إغلاق المنفذ 2. السماح لخرطوشه الجلوس لمده 2 دقيقه لاستكمال رد الفعل.
  3. سحب 19 مل من محلول 1 غسل (انظر الخطوة 1.4) من زجاجه 100 mL في حقنه موزع من خلال منفذ 1 في 100 mL/min كما هو مبين في الشكل 2ب.
  4. الاستغناء 18.5 مل من محلول غسل 1 من موزع من خلال خرطوشه tC18 عبر الموانئ 3 و 4 وفي زجاجه النفايات في 50 mL/min كما هو مبين في الشكل 2ج. ضمان عدم وجود فقاعات الهواء في مشعب لأنها قد تقلل من كفاءه الفصل.
  5. كرر الخطوات 4.3 و 4.4 أربع مرات ، وسحب وصرف 18.5 مل من محلول 1 غسل في كل مره. الحجم الكلي للغسيل 1 حل مرت من خلال tC18 هو 92.5 mL; ومع ذلك ، فانه يمكن ان تختلف داخل نطاق 90-100 mL اعتمادا علي وحده توليف معينه المستخدمة.
  6. تبديل خط الإدخال علي المنفذ 1 من غسل 1 لغسل حل 2 (انظر الخطوة 1.5).
  7. كرر الخطوات 4.3 و 4.4 ثلاث مرات ، وسحب وصرف 18.5 مل من محلول 2 غسل في كل مره. الحجم الكلي للغسيل 2 حل مرت من خلال tC18 هو 55.5 mL. ومع ذلك ، فانه يمكن ان تختلف داخل نطاق 50-60 mL اعتمادا علي وحده توليف معينه المستخدمة.
  8. تبديل صمام 5 نحو القارورة النهائية كما هو مبين في الشكل 2د. قطع الخط من موزع وتوصيله إلى 10 مل حقنه تحتوي علي 2.5 mL من الحل النهائي التملص (50 ٪ مائي EtOH ، انظر الخطوة 1.6) و 7.5 مل من الهواء.
  9. عقد أسفل حقنه ، ودفع يدويا الحل النهائي التملص (2.5 mL) تليها الهواء (7.5 mL) من خلال خرطوشه tC18 عن طريق الموانئ 3 و 4 وفي قارورة معقمه لجمع التتبع عن طريق فلتر معقم كما هو مبين في الشكل 2دال-
  10. افصل الحقنه الفارغة ، قم بتوصيل حقنه 10 مل التي تحتوي علي 10 مل من المخزن المؤقت للفوسفات المعقم (لا يتم تضمين الوصفة لأنها قد تختلف) وادفع الحجم بالبالكامل من خلال خرطوشه tC18 إلى القارورة المعقمة كما هو موضح أعلاه (الشكل 2د ). قطع الحقنه ومسح الخط مع 10 مل من الهواء باستخدام نفس الحقنه.
  11. سحب 0.7 mL من صياغة التتبع النهائي وجمع عينات لإجراءات مراقبه الجودة (0.1 mL) ، اختبار اندوتوكسين البكتيرية (0.1 mL) والعقم (0.5 mL).

5-إجراءات مراقبه الجودة

تحذير: يجب إخضاع كل دفعه من المتتبع الإشعاعي لإجراءات مراقبه الجودة المناسبة قبل الإفراج عن موقع تصوير PET للاداره في المواد البشرية أو الحيوانية. واضعو هذه المخطوطة ليسوا مسؤولين عن الامتثال لجهاز التتبع الإشعاعي المنتج في مراكز أخرى مع أنظمه السلطة الصحية المحلية.

  1. تنفيذ إجراءات مراقبه الجودة قبل الإفراج ، والتي يجب ان تشمل اختبارات للهوية الكيميائية الاشعاعيه (RCI) ، والنقاء الكيميائي الإشعاعي (المعبر) ، والنقاء الكيميائي والنشاط المولي من المقتفي ، فضلا عن محتوي المذيبات المتبقية ودرجه الحموضة للصياغة.
  2. تحديد RCI ، المعبر ، النقاء الكيميائي والنشاط المولي عن طريق نظام HPLC التحليلية مجهزه الاشعه فوق البنفسجية (الرصد في 350 nm) وكاشفات النشاط الإشعاعي ، وعمود المرحلة المعكوسة. تحديد أوقات الاستبقاء من 6-OH-BTA-0 و 6-آوه-BTA-1 ومعايره الصك لقياس محتوي كل مجمع.
  3. تحديد المحتوي المتبقي من المذيبات من خلال نظام التحليل اللوني للغاز المزود بعمود شعري. تحديد أوقات الاستبقاء من الأسيتون والايثانول ومعايره الصك لقياس محتوي كل مذيب.
  4. اجراء اختبار اندوتوكسين البكتيرية باستخدام قارئ خرطوشه مجهزه خراطيش مناسبه.
  5. اجراء تحليل العقم من العينة علي الأقل 14 يوما بعد التوليف لضمان عدم وجود نمو البكتيريا أو إرسال عينه العقم إلى مختبر معتمد من قبل السلطة الصحية المحلية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

لتلخيص التركيب الإشعاعي النموذجي ل [11ج] pib ، يتم تمرير الغاز [11c] CH3Otf أولا من خلال خرطوشه tC18 محمله مسبقا بمحلول السلائف (الشكل 1). بعد ذلك يتم تحقيق الفصل بين خليط التفاعل عن طريق الشطف المتعاقب بحلول الايثانول المائي علي النحو التالي. أولا ، 12.5 ٪ EtOH التملص الغالبية من غير متفاعل [11C] CH3OTF و 6-OH-bta-0 ، ثم 15 ٪ etoh يغسل الشوائب المتبقية ، وأخيرا محلول الايثانول 50 ٪ التملص من المطلوب [11c] pib في قارورة معقمه. ثم يتم تخفيف المقتفي مع العازلة الفوسفات العقيمة ويخضع لإجراءات صارمة لمراقبه الجودة قبل الإفراج إلى موقع التصوير PET. ويتم تمثيل الاشعه فوق البنفسجية التحليلية النموذجية HPLC والإشعاع الإشعاعي للدفعة [11C] pib المناسبة للاداره في الشكل 3.

الوقت الكلي التركيب الإشعاعي هو 10 دقيقه بدءا من تسليم [11c] CH3OTF ، و rcy من [11ج] pib باستخدام 0.2 ملغ من السلائف هو 22 ٪ (بدءا من [11c] ch3otf ، غير مصححه للتحلل) والنشاط المولي هو 190 GBq/μmol. يجب ان المقتفي الامتثال لجميع مواصفات مراقبه الجودة لل مولتيانتر الموروثة المهيمنة الزهايمر شبكه المحاكمات وحده (ديان-TU) للتجارب السريرية: يجب ان تكون نقاء الكيميائية الاشعاعيه فوق 95 ٪ ؛ يجب ان يكون محتوي الشوائب غير المشعة اقل من 1.3 ميكروغرام لكل 10 مل جرعه; يجب ان يكون الأس الهيدروجيني ضمن نطاق 4-8 ؛ ويجب ان تكون محتويات الايثانول والأسيتون اقل من 10 ٪ و 3000 جزء في المليون ، علي التوالي. يجب ان تكون العينات أيضا معقمه وخاليه من السموم. ويرد في الجدول 1موجز لنتائج أربعه مسارات نموذجيه للتخليق الإشعاعي.

ولكي تعمل التقنية المبلغ عنها بشكل سليم ، يجب توخي الحذر خلال عده خطوات حاسمه موصوفه أعلاه. لتطبيق السلائف علي خرطوشه tC18 (الخطوة 2.4) يجب ان لا يتم دفع الحل نحو الإخراج ، وذلك لعدم تقصير المسار الفعال للفصل بين [11C] pib من مواد البداية غير المتفاعلة والمنتجات الجانبية المحتملة. يجب الا يتجاوز تدفق [11ج] CH3otf من خلال خرطوشه اثناء النقل 20 مل/دقيقه (الخطوة 4.1). بمجرد ان يبدا التملص (الخطوة 4.4) ، من المهم جدا للحفاظ علي خرطوشه الرطب وعدم السماح الهواء من خلال لتجنب توجيه الآثار التي قد تؤدي إلى انخفاض نقاء المقتفي أو انخفاض RCY بسبب خسائر [11C] pib في النفايات. إذا كان المشعب 5-الميناء المستخدمة في التركيب الإشعاعي (الخطوة 3.1) ليست مقاومه لأسيتون ، مثل مشعب البولي القياسية مثل ACC-101 ، يجب ان لا تتجاوز كميه الأسيتون 100 μL كما احجام أكبر قد تتلف متعددة اثناء نقل النشاط يؤدي إلى فشل التوليف. في حاله عدم استيفاء درجه الحموضة للمواصفات ، قد يتم شطف خرطوشه tC18 بشكل اختياري مع 10 مل من الماء المعقم بين الخطوات 4.7 و 4.8 في زجاجه النفايات.

Figure 1
الشكل 1: التركيب الإشعاعي ل [11ج] pib بواسطة 11c-ميثيلation من 6-OH-bta-0 السلائف مع [11c] CH3otf. [11ج] pib هي واحده من المتتبعين الأكثر استخداما علي نطاق واسع للتصوير من لويحات اميلويد المرتبطة مع AD وغيرها من الظروف العصبية من قبل PET. يتم توليف هذا التتبع عاده عن طريق 11c-ميثيلation من السلائف الانيلين دعا 6-آوه-bta-0 باستخدام [11c] ميثيل ترايفلات ([11c] CH3otf) اما في الحل أو في حلقه حقن hplc الجافة (المذيبات تقنيه أسيره). يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 2
الشكل 2: التوليف والتنقية خطوه بخطوه لل [11ج] pib علي خرطوشه tC18. (ا) الغازية [11ج] CH3يتم تمرير otf من خلال خرطوشه محمله 6-آوه-bta-0. كما هو موضح في الخطوات 4.1 و 4.2 ، [11C] CH3otf محاصر علي خرطوشه تحتوي علي السلائف ويتفاعل مع السلائف في درجه حرارة الغرفة لمده 2 دقيقه. (ب) غسل 1 أو غسل 2 يتم سحب الحل في حقنه موزع. كما هو موضح في الخطوة 4.3 ، مضخة حقنه من وحده تسحب المكبس من حقنه قص صعودا ، وسحب حل اما التملص من خلال خط متصل بالمنفذ 1 من مشعب. (ج) يتم غسل الشوائب إلى زجاجه نفايات. كما هو موضح في الخطوة 4.4 ، مضخة حقنه من وحده يتحرك المكبس من الحقنه المقطوعة إلى أسفل ، ودفع محلول غسل سحبها من خلال خرطوشه tC18 عبر الموانئ 1 و 3 و 4 من مشعب في زجاجه نفايات. يتم تكرار الخطوات الممثلة في الرسمين التخطيطيين B و C في دوره عده مرات لغسل جميع المواد غير المتفاعلة من الخرطوشة ، كما هو موضح في الخطوات 4.5-4.7. (د) [11ج] pib هو التملص مع النهائي التملص في قارورة معقمه من خلال فلتر معقم. كما هو موضح في الخطوات 4.8 و 4.9 ، يتم قطع الحقنه في مضخة حقنه من الخط واستبدالها أولا مع حقنه 10 مل تحتوي علي 2.5 mL من 50 ٪ الايثانول المائي. ثم يتم تبديل المنفذ 5 من المشعب نحو القارورة المعقمة و [11ج] pib يتم التملص من tC18 يدويا. ثم يتم استبدال حقنه فارغه مع حقنه أخرى تحتوي علي 10 مل من العازلة الفوسفات العقيمة ويتم دفع المحتويات بأكملها من خلال tC18 لشطف الخطوط كما هو موضح في الخطوة 4.10. القارورة المعقمة تحتوي الآن علي [11C] pib في 12.5 mL 10 ٪ مخزنه محلول الايثانول المائي. وقد تم تعديل هذا الرقم من Boudjemeline وآخرون12. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 3
الشكل 3: مراقبه الجودة التحليلية HPLC من [11C] pib. (ا) فترات الاستبقاء من[11ج]ch 3OH (من التحلل من [11ج] ch3otf) ، غير متفاعل [11c] Ch3otf ، والراسم [11ج] pib علي الكروماتوجرام الإشعاعي هي 2.1 ، 4.0 و 6.6 دقيقه ، التوالي. ويبين تحليل تتبع النشاط الإشعاعي ان المعبر الذي يقع في [11C] pib هو 98.0 في المائة. (ب) فترات الاستبقاء من 6-OH-bta-0 (السلائف) و 6-آوه-bta-1 (الراسم الذروة) علي الكروماتوجرام الاشعه فوق البنفسجية هي 3.6 و 5.9 دقيقه ، علي التوالي. ويبين تحليل اثر الاشعه فوق البنفسجية تركيز السلائف المتبقية دون الحد المقبول (1.3 ميكروغرام) وعدم وجود شوائب أخرى غير مشعة. التالي ، فان نقاء الكيميائية الاشعاعيه والكيميائية من المقتفي هو مقبول للدراسات PET السريرية. HPLC الشروط-العمود (جدول المواد): 5 μm ، 100 x 4.0 مم ؛ المرحلة المتنقلة: 40:60 اسيتلونيتريل/معدل تدفق المياه: 0.7 mL/min. الرجاء انقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 4
الشكل 4: الاستفادة المثلي من 6-OH-BTA-0 كميه السلائف. اقل كميه (0.1 ملغ) يوفر [11ج] pib في الغلة الاشعاعيه الكيميائية المعتدلة (rcy) من 18.1 ± 3.8 ٪. التركيب الإشعاعي بدءا من 0.2 ملغ يوفر [11C] PIB ل rcy من 22.0 ± 3.1 ٪ ، في حين زيادة المبلغ إلى 0.3 ملغ زيادة تحسين rcy إلى 32.1 ± 3.7 ٪ ، علي حساب كميه اعلي قليلا من السلائف في المنتج النهائي. لا يتم تصحيح جميع RCY لاضمحلال (الوقت تخليق الشعاعية من 10 دقيقه) بدءا من النشاط الإشعاعي لل [11C] CH3otf المحاصرين علي خرطوشه tC18. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 5
الشكل 5: مراقبه الجودة التحليلية HPLC من [11C] ABP688. (ا) يظهر الكروماتوجرام الإشعاعي معبرا لمركب (E)-و (Z)-[11C] ABP688 98.1%. (ب) الاشعه فوق البنفسجية اللونية يظهر تركيز السلائف المتبقية فوق 10 ميكروغرام. في حين ان النقاء الكيميائي قد يكون مقبولا للدراسات السريرية PET, النشاط المولي منخفضه فعاله نسبيا (Am ≪ 37 gbq/μmol) يتطلب مزيد من التحسين تنقيه. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

الدفعه تشغيل 1 تشغيل 2 تشغيل 3 تشغيل 4
[11جيم] CH3otf, gbq 9.21 11.25 7.84 6.44
[11جيم] PiB, GBq 2.26 2.37 2.11 1.41
RCY ،% * 24.5 21.1 26.9 21.8
النسبة المئوية 98 97.2 97.8 99.2
النشاط المولي ، GBq/ميكرومول 154.6 322.6 121.1 162.1
السلائف المتبقية ، ميكروغرام 0.32 0.55 0.58 0.87
الرقم الهيدروجيني 5 5 5 5
محتوي EtOH ،% 9.4 8.8 7.7 8.1
محتوي الأسيتون ، جزء في المليون 33 38 46 33
اختبار BET N/A < 10 الاتحاد الأوروبي/مل < 10 الاتحاد الأوروبي/مل < 10 الاتحاد الأوروبي/مل
اختبار العقم N/A لا نمو لا نمو لا نمو
* الحاشية: من [11C] CH3otf ، غير مصححه لاضمحلال

الجدول 1 يتم تشغيل النتائج التمثيلية ل [11ج] إنتاج pib في ظل ظروف محسنه. جميع الدفعات متوافقة مع متطلبات المتتبعين المخصصة للدراسات السريرية للحيوانات أليفه.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

علي الرغم من ظهور الاخيره وموافقه الهيئة من عده 18F-المسمي المتعقبات PET ، مثل florbetapir ، florbetapir و flutemetamol ، [11C] pib يبقي المقتفي القياسية الذهب للتصوير اميلويد بسبب امتصاص الدماغ بسرعة وانخفاض غير محدده ملزمه. حاليا يتم توليف هذا التتبع عن طريق اما الكيمياء الرطبة16 أو باستخدام "حلقه جافه" نهج4،17. كلا الأسلوبين تتطلب تنقيه HPLC تليها أعاده صياغة في الايثانول المائي ، والذي يستغرق حوالي 20-30 دقيقه بدءا من [11C] CH3otf. مستوحاه من بعض التقارير السابقة علي المرحلة الصلبة المدعومة 11ج-تقنيات ميثيل والاهميه السريرية ل [11ج] pib ، ونحن تهدف إلى تطوير التركيب الإشعاعي لهذا التتبع باستخدام غير مكلفه القابل للتصرف المرحلة الصلبة استخراج ( ) خراطيش باعتبارها "3 في 1" الكيان لرد الفعل ، وتنقيه وصياغة.

الخطوات الأكثر اهميه للنجاح في إنتاج المتعقبات PET للتصوير في الجسم البشري في البشر هي: 1) دمج النظائر المشعة في جزيء التتبع ؛ 2) فصل المتتبع من الأنواع المشعة غير المتفاعلة وغير المشعة ؛ 3) أعاده صياغة المقتفي في مذيب متوافق بيولوجيا. 4) الامتثال لإجراءات مراقبه الجودة. واستنادا إلى الطريقة التي سبق الإبلاغ عنها بالمذيبات ، توقعنا ان تتطلب التقنية المدعومة من المهندسين التقنيين كميه اقل من السلائف مقارنه ب 11ج-ميثيل في المحلول. علي وجه الخصوص ، وذكرت سابقا الإجراءات الأسير المذيبات لتخليق الشعاعية من [11ج] pib تتطلب 0.5-1.0 ملغ من السلائف4،17. وهكذا ، حققنا لم تصحح لاضمحلال الغلة الكيميائية الاشعاعيه من [11c] pib بدءا من [11c] CH3otf في ثلاثه كميات مختلفه من 6-OH-bta-0:0.1 ، 0.2 ، و 0.3 ملغ. حتى اقل كميه (0.1 ملغ) يوفر كميه معتدله من [11ج] pib ، وان كان في منخفضه نسبيا واقل موثوقيه rcy (18.1 ± 3.8 ٪). التركيب الإشعاعي بدءا من 0.2 ملغ يوفر RCY من [11C] pib (22.0 ± 3.1 ٪) ، في حين زيادة المبلغ إلى 0.3 ملغ زيادة تحسين rcy (32.1 ± 3.7 ٪) ، علي حساب كميه اعلي قليلا من السلائف في المنتج النهائي. في جميع الحالات ، تم الانتهاء من التركيب الإشعاعي في 10 دقيقه. التالي ، فان كميه السلائف المثلي تعتمد علي RCY المطلوب ونقاء [11C] pib في مراكز PET خاصه. ويرد في الشكل 4موجز لنتائج تجارب تحسين الغلة الكيميائية الاشعاعيه استنادا إلى كميه السلائف. ولا سيما ان محاولات التخليق الإشعاعي باستخدام [11ج] CH3I كعامل ميثيل أو الايثانول كرد فعل مذيب لم تسفر عن المطلوب [11ج] pib (البيانات غير معروضه).

وكان الفصل الكمي لخليط رد فعل التخليق الإشعاعي علي خرطوشه قصيرة من الجزء الأكثر تحديا من التقنية الموصوفة. افترضنا ان الأمينات العطرية 6-oh-bta-0 و 6-آوه-bta-1 موجودة في الغالب في اشكالها بروتيني في وسائل الاعلام الحمضية ، التالي سيكون لها ملامح التملص أكثر وضوحا من مرحله عكس المرحلة الصلبة. التالي ، تم اعداد جميع حلول الايثانول المائي باستخدام 0.2 M خلات العازلة في pH 3.7. بعد ذلك ، قررنا ان محاليل الايثانول المائي مع تركيز etoh تصل إلى 15 ٪ تدريجيا الوت السلائف غير المتفاعلة 6-OH-bta-0 و [11c] CH3otf ، في حين ان الاشعه الشعاعية [11c] pib لا يزال محاصرا علي خرطوشه tC18. من أجل منع المخلفات من تلك الشوائب في صياغة التتبع النهائية تم زيادة تركيز الايثانول من 12.5 ٪ إلى 15 ٪ في التدرج الشطف. بعد ان تم غسلها جميع الشوائب من خرطوشه ، وقد تحققت المقتفي التملص باستخدام كميه الحد الأدنى (2.5 mL) من محلول الايثانول المركزة (50 ٪). من أجل الحفاظ علي محتوي الايثانول تحت الحد 10 ٪ ولتحقيق درجه الحموضة من المقتفي وضعت ضمن النطاق المقبول للحقن البشري (4-8) ، تم تخفيف المقتفي مع العازلة الفوسفات العقيمة.

بعد الظروف الأمثل ، تم أتمته التركيب الإشعاعي ل [11ج] pib باستخدام وحده التوليف الألى المتاحة تجاريا (ASU) ، مجهزه حقنه موزع ومشعب المتاح. الاعداد متعددة لهذا ASU معينه واضحة كما هو موضح في الخطوات 3.1-3.5. ومن الجدير بالذكر ان هذه المنهجية يمكن تنفيذها بسهوله علي معظم الأخرى المتاحة لشركه ASU التالية الوصفات الموصوفة أعلاه. تحت ظروف الأمثل ، يتم توليف دفعات من [11C] pib مناسبه للتطبيق السريري مع الانشطه النهائية تتراوح من 1.4 إلى 2.4 gbq (38-61 mCi).

وفي الاونه الاخيره ، قمنا بتطبيق تقنيه "3 في 1" للاشعه الشعاعية من [11ج] ABP688 ، وهو متتبع للحيوانات أليفه لتصوير مستقبلات الغلوتامات متابتروبيك النوع 5 (mGlu5)18،19. يعتمد التركيب الإشعاعي لهذا التتبع علي 11ج-ميثيل من مجموعه-OH في التاكسج. ولذلك ، فان أضافه القاعدة مطلوبه لأزاله السلائف من ميثيل الميثيل. تم اختيار هيدروكسيد التيتراتوتيلامونيوم (كمحلول 1 م في MeOH) كقاعده لأنه قابل للذوبان في معظم المذيبات العضوية القطبية. في تجربه الاشعه الشعاعية الاوليه ، تم خلط محلول من السلائف (0.5 ملغ) في DMSO (100 μL) مع 1 M TBAOH في MeOH (20 μL) وتم تطبيق الخليط بعناية علي خرطوشه tC18 كما هو موضح أعلاه (انظر الخطوة 2.4). الغازية [11C] CH3لقد مررت من خلال خرطوشه كما هو موضح في الخطوات 4.1-4.2 وسمح للرد علي المضي قدما في درجه حرارة الغرفة لمده 5 دقائق. التملص متسلسلة مع حلول الايثانول المخفف في 0.2 م الصوديوم بيكربونات العازلة (pH 8.5- 9.0)-92 مل من 15 ٪ EtOH تليها 92 مل من 20 ٪ EtOH-غسلها خارج رد فعل [11C] CH3I والسلائف المتبقية. النقي المشع كيميائيا [11C] ABP688 (rcy = 18.2% ، المعبر > 98.0%) ثم تم التملص مع 50 ٪ EtOH الحل في نفس المخزن المؤقت من خلال فلتر معقم كما هو موضح في الخطوات 4.9-4.11. علي الرغم من حقيقة ان أكثر من 98 ٪ من السلائف تتم أزاله مع تمييع الايثانول يغسل ، ووجود بعض السلائف غير المتفاعلة في المقتفي النهائي (تصل إلى 20 ميكروغرام) يتطلب المزيد من التحسين الأمثل لاجراء التركيب الإشعاعي. وهذا التحسين مستمر ، ستنشر نتائج هذا المشروع في الوقت المناسب. يظهر التحليل التمثيلي HPLC للاشعه فوق البنفسجية والإشعاع الإشعاعي لمجموعه ABP688 [11C] علي الشكل 5.

وفي الختام ، قمنا بتطوير المرحلة الصلبة كفاءه دعم الكربون-11 الاجراء الإشعاعي باستخدام خراطيش غير مكلفه بسهوله المتاحة باسم "3 في 1" الكيانات للتخليق الإشعاعي ، وتنقيه ، وصياغة المتعقبات PET المستخدمة لسريريه التصوير. ويتم إنتاج القصبات المناسبة للحقن البشري في غضون 10 دقائق بدءا من أضافه 11c-عامل ميثيلتينغ ([11c] ch3OTF أو [11c] ch3I) في النشاط العالي والمولي. نحن مؤتمتة بالبالكامل هذه التقنية لجعلها متوافقة مع قواعد ممارسه التصنيع الجيد (GMP) التي تفرضها الصحة والإشعاع السلطات السلامة. المرحلة الصلبة دعم التركيب الإشعاعي يتطلب كميه منخفضه من السلائف ، يتجنب استخدام المذيبات السامة ، ويقلل من الوقت التوليف والجرعة الاشعاعيه التي تكبدها الموظفون. وعلاوة علي ذلك ، وتجنب الفشل المرتبطة HPLC يحسن موثوقيه التركيب الإشعاعي ويسمح لتطوير مجموعات المتاح للإنتاج التتبع الروتينية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

ويعلن صاحبا البلاغ انهما لا يملكان مصالح مالية متنافسة.

Acknowledgments

وقد دعمت هذه الدراسة جزئيا من قبل منحه 18-05 من جمعيه الزهايمر في كندا (ل ا. ك.) ومؤسسه الدماغ كندا بدعم من الصحة كندا. ويود المؤلفون ان ينووا بكلية الطب بجامعه مكغيل ، ومعهد مونتريال للامراض العصبية ، ومركز التصوير الدماغي في ماكنيل لدعم هذا العمل. ونشكر أيضا السيدة مونيكا لاكاتوس-ساميلا علي المساعدة في إجراءات مراقبه الجودة والاتصالات مع السيد جان بول سوسي وغسان ماسارووه للوصول إلى النظائر المشعة ومرفق الكيمياء الاشعاعيه.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
6-OH-BTA-0 ABX advanced biochemical compounds 5101 Non-radioactive precursor of [11C]PiB
6-OH-BTA-1 ABX advanced biochemical compounds 5140 Non-radioactive standard of [11C]PiB
Agilent 1200 HPLC system Agilent Agilent 1200 Analytical HPLC system
Ethanol absolute Commercial alcohols 432526
Hamilton syringe (luer-tip, 250 µL) Hamilton HAM80701
MZ Analytical PerfectSil 120 MZ-Analysentechik GmbH MZ1440-100040 Analytical HPLC column
Perkin Elmer Clarus 480 GC system Perkin Elmer Clarus 480 Gas chromotograph
polycarbonate manifold Scintomics ACC-101 Synthesis manifold
Restek MTX-Wax column (30 m, 0.53 mm) Restek 70625-273 Analytical GC column
Scintomics GRP module Scintomics Scintomics GRP Automated synthesis unit
Sep-Pak tC18 Plus Waters WAT020515 Solid phase extraction cartridge
solvent-resistant manifold Scintomics ACC-201 Synthesis manifold
Spinal needle BD 405181
Sterile extension line B. Braun 8255059
Sterile filter Millipore SLLG013SL
Sterile vial (20mL) Huayi SVV-20A
Sterile water Baxter JF7623
Synthra MeIplus Research Synthra MeIplus Research [11C]CH3I/[11C]CH3OTf module
Syringe (10 mL) BD 309604
Syringe (1mL) BD 309659
Syringe (20 mL) B. Braun 4617207V Dispenser syringe
Vent filter Millipore TEFG02525

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Langstrom, B., Lundqvist, H. The preparation of 11C-methyl iodide and its use in the synthesis of 11C-methyl-L-methionine. The International journal of applied radiation and isotopes. 27 (7), 357-363 (1976).
  2. Larsen, P., Ulin, J., Dahlstrøm, K., Jensen, M. Synthesis of [11C]iodomethane by iodination of [11C]methane. Applied radiation and isotopes. 48 (2), 153-157 (1997).
  3. Jewett, D. M. A simple synthesis of [11C]methyl triflate. International journal of radiation applications and instrumentation. Part A, Applied radiation and isotopes. 43 (11), 1383-1385 (1992).
  4. Wilson, A. A., Garcia, A., Houle, S., Vasdev, N. Utility of commercial radiosynthetic modules in captive solvent [11C]-methylation reactions. Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals. 52 (11), 490-492 (2009).
  5. Wilson, A. A., Garcia, A., Jin, L., Houle, S. Radiotracer synthesis from [(11)C]-iodomethane: a remarkably simple captive solvent method. Nuclear medicine and biology. 27 (6), 529-532 (2000).
  6. Fedorova, O. S., Vaitekhovich, F. P., Krasikova, R. N. Automated Synthesis of [18F]Fluoromethylcholine for Positron-Emission Tomography Imaging. Pharmaceutical Chemistry Journal. 52 (8), 730-734 (2018).
  7. Jewett, D. M., Ehrenkaufer, R. L., Ram, S. A captive solvent method for rapid radiosynthesis: application to the synthesis of [1-(11)C]palmitic acid. The International journal of applied radiation and isotopes. 36 (8), 672-674 (1985).
  8. Watkins, G. L., Jewett, D. M., Mulholland, G. K., Kilbourn, M. R., Toorongian, S. A. A captive solvent method for rapid N-[11C]methylation of secondary amides: application to the benzodiazepine, 4'-chlorodiazepam (RO5-4864). International journal of radiation applications and instrumentation. Part A, Applied radiation and isotopes. 39 (5), 441-444 (1988).
  9. Hockley, B. G., Henderson, B., Shao, X. Chapter 27, Synthesis of {11C]Raclopride. Radiochemical Syntheses. , John Wiley & Sons. 167-175 (2012).
  10. Lodi, F., et al. Reliability and reproducibility of N-[11C]methyl-choline and L-(S-methyl-[11C])methionine solid-phase synthesis: a useful and suitable method in clinical practice. Nuclear Medicine Communications. 29 (8), 736-740 (2008).
  11. Jolly, D., et al. Development of "[(11)C]kits" for a fast, efficient and reliable production of carbon-11 labeled radiopharmaceuticals for Positron Emission Tomography. Applied radiation and isotopes. 121, 76-81 (2017).
  12. Boudjemeline, M., et al. Highly efficient solid phase supported radiosynthesis of [(11) C]PiB using tC18 cartridge as a "3-in-1" production entity. Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals. 60 (14), 632-638 (2017).
  13. Mathis, C. A., et al. A lipophilic thioflavin-T derivative for positron emission tomography (PET) imaging of amyloid in brain. Bioorganic and medicinal chemistry letters. 12 (3), 295-298 (2002).
  14. Mathis, C. A., et al. Synthesis and evaluation of 11C-labeled 6-substituted 2-arylbenzothiazoles as amyloid imaging agents. Journal of medicinal chemistry. 46 (13), 2740-2754 (2003).
  15. Buffer Reference Center. , Sigma Aldrich. Available from: https://www.sigmaaldrich.com/life-science/core-bioreagents/biological-buffers/learning-center/buffer-reference-center.html (2019).
  16. Philippe, C., Mitterhauser, M., Wadsak, W. Chapter 18, Synthesis of 2-(4-N-[11C]Methylaminophenyl)-6-Hydroxybenzothiazole ([11C]6-OH-BTA-1; [11C]PIB). Radiochemical Syntheses. , John Wiley & Sons. 177-189 (2012).
  17. Shao, X., Fawaz, M. V., Jang, K., Scott, P. J. H. Synthesis and Applications of [11C]Hydrogen Cyanide. Radiochemical Syntheses. , John Wiley & Sons. 207-232 (2015).
  18. Ametamey, S. M., et al. Radiosynthesis and preclinical evaluation of 11C-ABP688 as a probe for imaging the metabotropic glutamate receptor subtype 5. Journal of Nuclear Medicine. 47 (4), 698-705 (2006).
  19. Ametamey, S. M., et al. Human PET studies of metabotropic glutamate receptor subtype 5 with 11C-ABP688. Journal of Nuclear Medicine. 48 (2), 247-252 (2007).

Tags

الكيمياء ، العدد 152 ، الكربون-11 ، الاشعه الشعاعية ، بوزيترون التصوير المقطعي الانبعاث ، صور ، [11ج] pib ، [11c] ABP688 ، 11c-ميثيل ، المرحلة الصلبة المدعومة التوليف ، المرحلة الصلبة استخراج ، الاتمته
المرحلة الصلبة <sup>11</sup>ج-ميثيل ، تنقيه وصياغة لإنتاج المتتبعين PET
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Singleton, T. A., Boudjemeline, M.,… More

Singleton, T. A., Boudjemeline, M., Hopewell, R., Jolly, D., Bdair, H., Kostikov, A. Solid Phase 11C-Methylation, Purification and Formulation for the Production of PET Tracers. J. Vis. Exp. (152), e60237, doi:10.3791/60237 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter