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Chemistry

क्लस्टर-प्रेरित डेसर्टप्शन/आयनीकरण मास स्पेक्ट्रोमेट्री के माध्यम से सतहों पर जटिल अणुओं और उनकी प्रतिक्रियाओं का विश्लेषण

Published: March 1, 2020 doi: 10.3791/60487
Automatic Translation
*1, *1, 1, 2, 1
1Institute of Applied Physics and Center for Materials Research (LaMa), Justus Liebig University Giessen, 2Bruker Daltonik GmbH
* These authors contributed equally

Summary

तटस्थ तो कम गतिज ऊर्जा के2 समूहों (< ०.८ ईवी/घटक) का उपयोग आयन ट्रैप द्रव्यमान स्पेक्ट्रोमीटर का उपयोग करके बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमेट्री के माध्यम से आगे विश्लेषण के लिए पेप्टाइड्स या लिपिड जैसे जटिल सतह अणुओं को डेसओर्ब करने के लिए किया जाता है । कोई विशेष नमूना तैयारकरने की आवश्यकता नहीं है, और प्रतिक्रियाओं के वास्तविक समय अवलोकन संभव है।

Abstract

तटस्थ एसओ2 क्लस्टर (डीआईएनईसी) द्वारा प्रेरित हताश/आयनीकरण जटिल अणुओं के द्रव्यमान स्पेक्ट्रोमेट्री (एमएस) और सतहों पर उनकी प्रतिक्रियाओं के लिए एक बहुत ही नरम और कुशल अवशोषण/आयनीकरण तकनीक के रूप में नियोजित है । DINeC कम क्लस्टर ऊर्जा पर नमूना सतह पर प्रभावित एसओ2 समूहों की एक बीम पर आधारित है । क्लस्टर-सतह प्रभाव के दौरान, सतह के कुछ अणुओं को प्रभावित करने वाले क्लस्टर में भंग होने के माध्यम से हताश और आयनित किया जाता है; इस विलीनता-मध्यस्थता हताश तंत्र के परिणामस्वरूप, कम क्लस्टर ऊर्जा पर्याप्त है और अवशोषण प्रक्रिया बेहद नरम है। सतह ी एडोरबेट्स और अणुओं दोनों जिनमें से सतह से बना है, का विश्लेषण किया जा सकता है। पेप्टाइड्स और प्रोटीन जैसे जटिल अणुओं से स्पष्ट और विखंडन मुक्त स्पेक्ट्रा प्राप्त किया जाता है। DINeC किसी भी विशेष नमूना तैयार करने की आवश्यकता नहीं है, विशेष रूप से कोई मैट्रिक्स लागू किया जाना है । विधि नमूनों की संरचना पर मात्रात्मक जानकारी पैदा करते हैं; एक मोनोलेयर के 0.1% के रूप में कम के रूप में एक सतह कवरेज पर अणुओं का पता लगाया जा सकता है। एच/डी एक्सचेंज या थर्मल अपघटन जैसी सतह प्रतिक्रियाओं को वास्तविक समय में देखा जा सकता है और प्रतिक्रियाओं के काइनेटिक्स को कम किया जा सकता है । क्लस्टर बीम उत्पादन के लिए एक स्पंदित नोजल का उपयोग करके, डीआईएनईसी को आयन ट्रैप मास स्पेक्ट्रोमेट्री के साथ कुशलतापूर्वक जोड़ा जा सकता है। आयन जाल की एमएसएन क्षमताओं के संयोजन में डीआईएनईसी प्रक्रिया की मैट्रिक्स-मुक्त और नरम प्रकृति सतहों पर जटिल कार्बनिक नमूनों और कार्बनिक एडोरबेट की रासायनिक संरचना के बहुत विस्तृत और स्पष्ट विश्लेषण के लिए अनुमति देती है।

Introduction

सतह संवेदनशील विश्लेषण तकनीक अक्सर कम ऊर्जा इलेक्ट्रॉनों, परमाणुओं, या आयनों जैसे कण जांच पर आधारित होती है जो ठोस नमूनों के साथ दृढ़ता से बातचीत करते हैं। नतीजतन, वे उच्च सतह संवेदनशीलता दिखाते हैं और सतह संरचना के बारे में विस्तृत जानकारी1प्राप्त की जा सकती है। रासायनिक जानकारी, हालांकि, अक्सर सीमित है। एक उदाहरण के रूप में, एक्स-रे फोटोइलेक्ट्रॉन स्पेक्ट्रोस्कोपी परमाणु संरचना पर और किसी दी गई प्रजातियों के औसत रासायनिक वातावरण पर मात्रात्मक जानकारी दे सकता है (उदाहरण के लिए, एक कार्बनिक अणु में कार्बन परमाणुओं को सतह 2 पर एडोरबेड कियागया)। हालांकि, जटिल, सतह-सोखने वाले अणुओं, जैसे कि उनकी विस्तृत संरचना या बाध्यकारी साइटों के बारे में अधिक विस्तृत जानकारी मानक सतह विश्लेषण तकनीकों के साथ प्राप्त करना मुश्किल है। दूसरी ओर, कार्बनिक अणुओं के माध्यम से सतह कार्यात्मकता में बढ़ती रुचि के साथ ऐसी जानकारी की आवश्यकता बढ़ रही है । जैव अणुओं4,5 के लगाव से ऑन-सरफेस संश्लेषण3 या सतह कार्यात्मकता के विस्तार क्षेत्र दो प्रमुख उदाहरण हैं। इन सभी क्षेत्रों में, सिस्टम को बेहतर ढंग से समझने के लिए सब्सट्रेट-एसोर्बेट और एसोर्बेट-एसोर्बेट इंटरैक्शन पर मौलिक सवालों की जांच की जाती है। इन जांचों के लिए, सोखने वाले अणुओं के बारे में अधिकतम जानकारी वांछनीय है ।

भाग में, माध्यमिक आयन मास स्पेक्ट्रोमेट्री (सिम्स) ऐसी जानकारी दे सकते हैं। पहला, सिम अत्यधिक सतह संवेदनशील है। दूसरा, जैसा कि स्पटर एडोरबेट्स और उनके टुकड़ों का पता एमएस के माध्यम से लगाया जाता है, परमाणु संरचना से परे अच्छी तरह से जानकारी प्राप्त की जाती है। सतह पर सोशया र्इंदों की प्रकृति के आधार पर, इसे द्रव्यमान स्पेक्ट्रम6में देखे गए इसके आणविक द्रव्यमान और टुकड़ा पैटर्न द्वारा पहचाना जा सकता है। प्राथमिक आयनों द्वारा प्रेरित टुकड़े वास्तव में विश्लेषण सामग्री की पहचान के लिए मदद कर सकते हैं । दूसरी ओर, यदि प्राथमिक आयन प्रेरित संशोधन (विखंडन, आयन-प्रेरित प्रतिक्रियाएं, मिश्रण) नमूना की बहुत मजबूत है, तो नमूने की मूल स्थिति के बारे में अधिकांश जानकारी खो जाती है। इस प्रकार, सिम्स में विखंडन को कम करने के लिए प्रमुख प्रयास किए गए हैं (उदाहरण के लिए, प्राथमिकआयनों 7,8,9के रूप में आवेशित आणविक समूहों का उपयोग करना)। हालांकि, विखंडन अभी भी बड़े मैक्रोअणुओं और जैविक नमूनों10के सिम स्पेक्ट्रा पर हावी है, विभिन्न क्षेत्रों में सिम्स के आवेदन को सीमित करता है।

एक विकल्प के रूप में, हमने तटस्थ समूहों (डीआईएनईसी) द्वारा प्रेरित हताश/आयनीकरण को एक नरम और मैट्रिक्स मुक्त आयनीकरण विधि के रूप में दिखाया है जिसे जटिल अणुओं11,12,13,14,15,16, 17के बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमेट्रिक विश्लेषण के लिए सफलतापूर्वक नियोजित किया गया है । डीआईएनईसी आणविक समूहों की एक बीम पर आधारित है जिसमें 103 से 104 एसओ2 अणु(चित्रा 1)शामिल हैं। जब समूह नमूने पर प्रभाव डालते हैं, तो वे सतह पर और में अणुओं के साथ विभिन्न तरीकों से बातचीत करते हैं: पहला, क्लस्टर की गतिज ऊर्जा का एक हिस्सा पुनर्वितरित किया जाता है और अवशोषण को सक्रिय करता है। इसी तरह महत्वपूर्ण, क्लस्टर-सतह प्रभाव11,18,19 (चित्रा 1 और चित्रा 2)के दौरान क्लस्टर में डेसरबिंग अणु भंग हो जाता है। दूसरे शब्दों में, एसओ2के उच्च डिपोल पल के आधार पर, समूह बहुत कुशलता से ध्रुवीय एनालिट्स के लिए एक क्षणिक मैट्रिक्स के रूप में काम करते हैं। नतीजतन, एनालाइट अणुओं का अवशोषण क्लस्टर ऊर्जा में 1 ईवी/अणु और नीचे के रूप में कम होता है । जब एसओ2 क्लस्टर सतही प्रभाव11,19के दौरान और बाद में टूट जाता है तो वाष्पीकरण प्रक्रिया की नरम प्रकृति को प्रणाली के तेजी से ठंडा होने से और अधिक समर्थन मिलता है । इन विभिन्न पहलुओं के परिणामस्वरूप, पेप्टाइड्स, प्रोटीन, लिपिड और रंगों जैसे जटिल अणुओं का क्लस्टर-प्रेरित अवशोषण11,15, डेसोर्बिंग अणुओं के विखंडन के बिना आय करता है ; विशिष्ट द्रव्यमान स्पेक्ट्रा अक्षुण्ण अणु ([एम +एच]+ या [एम-एच] के एम/जेड मूल्य पर प्रमुख चोटीदिखाते हैं-चित्रा 3)। अणु में कार्यात्मक समूहों की संख्या और प्रकृति के आधार पर, फॉर्म के कई आवेशित कांसेशन [एम + एन · एच]एन + 11,15,18मनाया जाता है । जैव अणुओं के लिए, आयनीकरण आमतौर पर क्रमशः11,एक बुनियादी या अम्लीय कार्यात्मक समूह में प्रोटॉन के तेज या अमूर्तके माध्यम से होता है। यदि पानी के अणु नमूने में मौजूद हैं, तो क्लस्टर के2 अणु इन जल अणुओं के साथ सल्फरस एसिड18बनाते हैं। उत्तरार्द्ध एक कुशल प्रोटोन स्रोत के रूप में कार्य कर सकता है जो प्रोटोन तेज (सकारात्मक आयन मोड)13,18के माध्यम से आयनीकरण प्रक्रिया को और बढ़ावा देता है।

Figure 1
चित्रा 1: क्लस्टर-प्रेरित अवशोषण/आयनीकरण और प्रायोगिक सेट-अप का योजनाबद्ध चित्रण । क्लस्टर-प्रेरित डिसोरेशन/आयनीकरण एक उच्च वैक्यूम पोत में किया जाता है । एसओ2 समूहों (पीले बिंदुओं) की एक बीम एक स्पंदित नोजल से एक एसओ2/वहगैस मिश्रण के सुपरसोनिक विस्तार के माध्यम से उत्पादित किया जाता है। क्लस्टर-सतह प्रभाव के दौरान, सतह के अणुओं को हताश और आयनीकृत किया जाता है। आणविक आयनों (लाल/नारंगी डॉट्स) एक पक्षपातपूर्ण ग्रिड, एक दोहरी आयन कीप प्रवेश के माध्यम से स्थानांतरित कर रहे हैं, और ऑक्टोध्रुवीय आयन गाइड बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमेट्री के लिए आयन जाल में । विशिष्ट जन स्पेक्ट्रा बरकरार अणुओं के एम/जेड मूल्यों पर प्रमुख चोटियों को दिखाते हैं, यहां: M1 (नारंगी) और M2 (लाल) सकारात्मक आयन मोड में । झटका: क्लस्टर सतह प्रभाव के दौरान, हताश अणुओं को प्रभावित करने वाले क्लस्टर या इसके टुकड़ों में से एक में भंग कर दिया जाता है। इसके अलावा टूट और एसओ2 अणुओं के वाष्पीकरण तो नंगे, बरकरार आणविक आयन के रूप में बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमीटर में पता चला करने के लिए सीसा । यह भी देखें चित्रा 2। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 2
चित्रा 2: आणविक गतिशीलता सिमुलेशन के स्नैपशॉटभंग के माध्यम से क्लस्टर-प्रेरित अवशोषण को दर्शाते हैं। (क) एक एसओ2 क्लस्टर (300 अणु) सतह पर 1250 मीटर/लंबवत के साथ सतह का रुख करता है जिस पर एक डिपेप्टाइड (एस्पार्टिक एसिड-आर्जिनिन, एएसपी-एआरजी) को एडोरबेड किया जाता है। (ख) क्लस्टर-सतह प्रभाव के दौरान क्लस्टर टूट जाता है । एडोरबेड डिपेप्टाइड आसपास के एसओ2 अणुओं के साथ बातचीत करता है जिससे क्लस्टर के टुकड़ों में से एक में इसका भंग होना पड़ता है। (ग) क्लस्टर के टुकड़ों को सतह से पीछे हटादिया जाता है । लेबल वाले टुकड़े (नीला चक्र) में डाइपेप्टाइड होता है जो इस टुकड़े में हताश होता है। इस आंकड़े को रेफरेंस 19 से संशोधित किया गया है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 3
चित्रा 3: प्रतिनिधि जन स्पेक्ट्रम और एंजियोटेंसिन द्वितीय के आणविक मॉडल। (क) मास स्पेक्ट्रा (शीर्ष पैनल: सकारात्मक आयन मोड, बॉटम पैनल: निगेटिव आयन मोड) जैसा कि एंजियोटेन्सिन II नमूने से क्लस्टर-प्रेरित अवशोषण/आयनीकरण के बाद प्राप्त किया गया है । नमूना एक एसआई वेफर (अपने प्राकृतिक ऑक्साइड द्वारा कवर) पर संबंधित समाधान ड्रॉप-कास्टिंग द्वारा तैयार किया गया था। मुख्य चोटियों को अक्षुण्ण जैव अणु, [एम +एच]+ और [एम-एच] को सौंपा जाता है- कोई विखंडन पैटर्न नहीं देखा जाता है। Dimers ([2M +H]+, तीर) आगे हताश प्रक्रिया की नरम प्रकृति का संकेत मिलता है । एसओ2 क्लस्टर18के प्रभाव के कारण सकारात्मक आयन संकेत अधिक तीव्र होता है । (ख) एंजियोटेन्सिन द्वितीय का अंतरिक्ष भरने वाला मॉडल और अमीनो एसिड अनुक्रम । सफेद गेंदें हाइड्रोजन परमाणुओं का संकेत देती हैं; काला: कार्बन; नीला: नाइट्रोजन; लाल: ऑक्सीजन। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

डीआईएनईसी को किसी भी प्रकार के ठोस नमूने पर लागू किया जा सकता है जो उच्च-वैक्यूम स्थितियों के साथ संगत है। कोई विशेष नमूना तैयारकरने की आवश्यकता नहीं है, विशेष रूप से कोई मैट्रिक्स DINeC-एमएस माप से पहले लागू किया जाना है, मैट्रिक्स की सहायता से लेजर अवशोषण/आयनीकरण (MALDI) बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमेट्री और संबंधिततकनीकों 20,21के विपरीत । यह वैक्यूम चैंबर22 या नमूना तापमान में प्रतिक्रियाशील प्रजातियों की पृष्ठभूमि दबाव जैसे अलग-अलग प्रयोगात्मक स्थितियों के साथ नमूने के रासायनिक परिवर्तनों के वास्तविक समय माप को सक्षम बनाता है। डीआईएनईसी-एमएस की डिटेक्शन लिमिट को फेम्टोमोल रेंज11में दिखाया गया है । जब उपमोनोलेयर शासन में ठोस सतहों पर जैव अणुओं के विश्लेषण पर लागू किया जाता है, तो एक मोनोलेयर के 0.1% के रूप में कम सतह कवरेज23का पता चला था। इस कवरेज शासन में, संकेत तीव्रता सतह कवरेज पर निर्भर करती है और डीआईएनईसी-एमएस का उपयोग सतह संरचना23के मात्रात्मक विश्लेषण के लिए किया जा सकता है। मिश्रित नमूनों के मामले में, नमूना संरचना का मात्रात्मक मूल्यांकन17,24संभव है, क्योंकि आयनीकरण संभावना पर रासायनिक पर्यावरण का कोई बड़ा प्रभाव नहीं देखा जाता है (उदाहरण के लिए, मिश्रित लिपिड/पेप्टाइड नमूनों17के मामले में)। यह सिम्स के स्पष्ट विपरीत है, जिसके लिए किसी दी गई प्रजातियों की आयनीकरण संभावना आमतौर पर विभिन्न रासायनिक घटकों (तथाकथित "मैट्रिक्स प्रभाव"25,26)की उपस्थिति से दृढ़ता से प्रभावित होती है।

सतह विश्लेषण के अलावा, उपसतह क्षेत्र में रासायनिक संरचना की जांच गहराई से प्रोफाइलिंग17के माध्यम से की जा सकती है। वर्तमान सेट-अप के साथ, जैव अणुओं के क्लस्टर-प्रेरित अवशोषण की विशिष्ट अपशीलता दरें10-3 एनएम/एस के आदेश की हैं। मिश्रित लिपिड/पेप्टाइड नमूनों17के लिए 1 से 2 एनएम की सीमा में उच्च गहराई का संकल्प देखा गया है ।

आवेदन का एक और क्षेत्र पतली परत क्रोमेटोग्राफी (टीएलसी) के साथ डीआईएनईसी-एमएस का संयोजन है। पारंपरिक टीएलसी प्लेटों का सीधे डीआईएनईसी-एमएस के माध्यम से विश्लेषण किया जा सकता है। स्थिति पर निर्भर जन स्पेक्ट्रा टीएलसी प्लेटों से प्राप्त किया जा सकता है और इस प्रकार टीएलसी प्लेटों27से बड़े पैमाने पर विशिष्ट क्रोमेटोग्राम प्राप्त किए जा सकते हैं। अलग हुए एनालाइट्स का कोई फिर से एल्यूटिशन आवश्यक नहीं है, ईएसआई28,29के संयोजन में टीएलसी के लिए अलग है। मालडी28,29के साथ टीएलसी के युग्मन के विपरीत, डीआईएनईसी-एमएस + टीएलसी संयोजन के लिए किसी मैट्रिक्स की आवश्यकता नहीं है।

डेस्करपशन इलेक्ट्रोस्प्रे आयनीकरण (डीईईई) एमएस-एप्लीकेशंस30,31के लिए एक नरम डिसोरेशन/आयनीकरण विधि भी है । DINeC और DESI के बीच सबसे उल्लेखनीय अंतर हैं: DINeC23की मात्रात्मक प्रकृति, अल्ट्रा-हाई-वैक्यूम (यूएचवी) स्थितियों के साथ इसकी अनुकूलता, विशेष रूप से वैक्यूम23को तोड़ने के बिना यूएचवी स्थितियों में तैयार और स्थानांतरित नमूनों की जांच करने की संभावना, साथ ही साथ19को कुशलतापूर्वक डेसोर्ब नॉनपोलर अणुओं की संभावना।

सैद्धांतिक रूप से, डिएनईसी को किसी भी प्रकार के द्रव्यमान स्पेक्ट्रोमीटर के साथ जोड़ा जा सकता है। हालांकि, आयन ट्रैप द्रव्यमान स्पेक्ट्रोमेट्री के संयोजन में दो मुख्य फायदे हैं: पहला, एक विशिष्ट स्पंदित क्लस्टर बीम की पल्स चौड़ाई और पुनरावृत्ति दर असतत संचय समय के साथ-साथ आयन ट्रैप15,32की स्पेक्ट्रल दर के अनुरूप है। दूसरा, डीआईएनईसी प्रक्रिया की नरम प्रकृति बरकरार अणुओं के अवशोषण की ओर ले जाती है। आयन ट्रैप मास स्पेक्ट्रोमेट्री की एमएसएन क्षमताओं के संयोजन में, यह जांच किए गए नमूनों15के सबसे व्यापक विश्लेषण के लिए अनुमति देता है।

Protocol

नोट: प्रोटोकॉल को किसी भी समय रोका जा सकता है।

1. सब्सट्रेट्स की तैयारी

  1. मानक नमूनों के लिए, 1 x 1 सेमी2के टुकड़ों में सिलिकॉन वेफर्स (लगभग 0.5 से 1 मिमी की मोटाई) से सब्सट्रेट्स को काट ें।
  2. प्रत्येक 15 मिन के लिए इथेनॉल और एसीटोन के अल्ट्रासाउंड स्नान में एसआई सब्सट्रेट्स को साफ करें।
  3. सूखी नाइट्रोजन गैस की एक धारा में सब्सट्रेट्स को सुखा लें।

2. नमूनों की तैयारी

  1. मानक नमूना तैयारकरना
    1. मानक नमूनों के लिए, वैज्ञानिक प्रश्न के अनुसार एनालाइट अणुओं से युक्त समाधान तैयार करें। एनालिएट की एकाग्रता कम से कम 1 x 10-10 मोल/एल होनी चाहिए।
    2. सब्सट्रेट पर सैंपल सॉल्यूशन की ड्रॉप-कास्ट 5 से 30 माइक्रोन। सॉल्वेंट के वाष्प दबाव के आधार पर, नमूना परिवेश की परिस्थितियों में या एक डिसिकाटर में सूखने दें जब तक कि सभी सॉल्वेंट को सुखाया नहीं गया है और एक सूखी फिल्म बनाई गई है। लागू पदार्थ की मात्रा के आधार पर, फिल्म की मोटाई कई दस माइक्रोन (दृश्य निरीक्षण संभव) और मोनोलेयर के बीच उप-मोनोलेयर शासन (इस प्रकार आंख द्वारा पता लगाने योग्य नहीं) के बीच हो सकती है।
    3. नमूने धारक पर नमूने माउंट (उदाहरण के लिए, चिपचिपा टेप या शिकंजा द्वारा कड़ा क्लैंप का उपयोग कर, नमूनों और आवश्यक वैक्यूम शर्तों के आधार पर) ।
    4. यदि संभव हो, तो इसके अतिरिक्त नमूना धारक पर एंजियोटेन्सिन II की माइक्रोमीटर-मोटी फिल्म जैसे संदर्भ नमूना को माउंट करें।
  2. वैकल्पिक नमूना तैयारी
    1. लागू होने पर संबंधित समाधान में वैक्यूम या डिप कोटिंग में इलेक्ट्रोस्प्रे आयन-बीम जमाव (ईएस-आईबीडी) जैसी वैकल्पिक नमूना तैयारी योजनाओं का उपयोग करें।
    2. माउंट नमूने जिन्हें तैयार करने के चरणों से पहले डीआईएनईसी नमूना धारक पर वैक्यूम में तैयार और स्थानांतरित किया जाना है।
    3. सुनिश्चित करें कि अंतिम तैयारी चरण के बाद डुबकी-लेपित नमूने सूखे हैं।
    4. सबसे सरल तैयारी योजना पर विचार करें। एक उदाहरण के रूप में, हाइलाइटर स्याही की जांच के लिए, बस सब्सट्रेट सतह पर एक डॉट आकर्षित करें।

3. डीआईएनईसी मास स्पेक्ट्रोमीटर में नमूनों का स्थानांतरण

  1. परिवेश की स्थितियों से नमूनों का निकासी डीआईएनईसी कक्ष में स्थानांतरित करना
    1. लोड-लॉक सिस्टम को वेंट करें।
    2. लोड-लॉक खोलें और नमूना धारक को माउंट करते हैं।
    3. लोड-लॉक बंद करें और लोड-लॉक चैंबर को 2 x 10-5 मीटर से नीचे के दबाव में पंप करें।
    4. डीआईएनईसी चैंबर में वाल्व खोलें और मुख्य जोड़तोड़ के लिए स्थानांतरण रॉड के साथ नमूना धारक स्थानांतरित करें। नमूना धारक को जोड़तोड़ से अटैच करें।
    5. स्थानांतरण रॉड को वापस लेना और लोड-लॉक और डीआईएनईसी चैंबर के बीच वाल्व बंद करें।
       
  2. खाली DINeC कक्ष में वैक्यूम से नमूनों का हस्तांतरण
    1. एक परिवहन योग्य वैक्यूम कंटेनर का उपयोग करें, जिसे डीआईएनईसी चैंबर के CF40 फ्लैंज से जोड़ा जा सकता है। वैक्यूम को तोड़ने के बिना इस कंटेनर के साथ, वैक्यूम में तैयार किए गए नमूनों को स्थानांतरित करें। सुनिश्चित करें कि नमूने डीआईएनईसी प्रणाली में उपयोग किए जाने वाले जोड़तोड़ के साथ संगत नमूना धारक पर घुड़सवार हैं।
    2. CF40 फ्लैंज के लिए परिवहन योग्य वैक्यूम कंटेनर संलग्न करें और कंटेनर और डीआईएनईसी कक्ष के बीच की मात्रा को पंप करें।
    3. एक बार दबाव 2 x 10-5 मीटर से नीचे गिरा दिया गया है, DINeC चैंबर और परिवहन योग्य वैक्यूम कंटेनर के लिए गेट वाल्व खोलने और एक लड़खड़ा छड़ी या अधिक से अधिक ५० सेमी रैखिक आंदोलन के साथ एक और हस्तांतरण प्रणाली का उपयोग कर जोड़तोड़ पर DINeC चैंबर में नमूना हस्तांतरण ।
    4. स्थानांतरण प्रणाली को वापस लेना और दो गेट वाल्व बंद करें।

4. गैस मिश्रण की तैयारी

  1. पहले 10 मिन के लिए गैस मिक्सिंग सिस्टम के गैस सिलेंडर ों को खाली करके हीलियम में लगभग 3% एसओ2 का मिश्रण तैयार करें।
  2. 1 बार का दबाव पहुंचने तक सिलेंडरों को एसओ2 से भरें।
  3. इसके अलावा सिलेंडरों को हीलियम से तब तक भरें जब तक कि 30 बार का कुल दबाव न हो जाए।
    सावधानी: एसओ2का उपयोग करते समय, नामित गैस अलमारियों में एसओ2 सिलेंडरों को संग्रहित करने जैसी संबंधित सुरक्षा सावधानियों को हमेशा पूरा किया जाना चाहिए।

5. डीआईएनईसी मास स्पेक्ट्रोमीटर की तैयारी

  1. गैस सिलेंडर और नोजल के बीच वाल्व खोलें। गैस मिश्रण प्रणाली की रूपरेखा पर एसओ2/वहगैस मिश्रण के दबाव को 15 बार में समायोजित करें।
  2. संदर्भ नमूना की स्थिति के लिए जोड़तोड़ की स्थिति निर्धारित करें।
  3. सीनिक मास स्पेक्ट्रा को मापने के लिए, नमूना और ग्रिड पूर्वाग्रह को क्रमशः +40 और +7 वी पर सेट करें।
  4. स्पंदित नोजल और आयन ट्रैप मास स्पेक्ट्रोमीटर को चलाने के लिए, बाहरी फ़ंक्शन जनरेटर को 2 हर्ट्ज में सेट करें। देरी जनरेटर के साथ, आयन जाल से स्पष्ट जाल संकेत और 5 एमएस के लिए स्पंदित नोजल के लिए ट्रिगर सिग्नल के बीच समय देरीएन सेट करें।
  5. नियंत्रण सॉफ्टवेयर में, संबंधित बटन दबाकर या मुख्य संवाद खिड़की के मोड पृष्ठ में संबंधित मूल्यों टाइप करके निम्नलिखित मापदंडों को समायोजित करें: स्कैन मोड:बढ़ाया संकल्प, रेंज: m/z 50 - 3000, Accu-time:0.1 एमएस, औसत:10 चक्र, ध्रुवीकरण:cationic मास स्पेक्ट्रा के माप के लिए सकारात्मक
    नोट: एनीनिक स्पेक्ट्रा को मापने के लिए, नमूना और ग्रिड पूर्वाग्रह को जमीन के संबंध में नकारात्मक होना चाहिए, ध्रुवीकरण को नियंत्रण सॉफ्टवेयर में नकारात्मक में बंद करना होगा।

6. सामूहिक स्पेक्ट्रा का मापन

  1. एक बार डीआईएनईसी चैंबर में 3 x 10-6 मीटर से नीचे का दबाव पहुंच जाने के बाद माप शुरू किया जा सकता है। पहले स्टैंड बाय दबाकर माप शुरू करें और फिर नियंत्रण सॉफ्टवेयर में ऑपरेट दबाएं। प्ले बटन दबाने वाले मापों की रिकॉर्डिंग शुरू करें।
  2. लगभग 300 एस के लिए एंजियोटेंसिन II जैसे संदर्भ नमूने से एक परीक्षण स्पेक्ट्रम को मापें। संबंधित मे/जेड मूल्य के लिए निर्धारित क्रोमेटोग्राम का उपयोग करके सिग्नल की समय निर्भरता का पालन करें। स्पष्ट जाल संकेत और स्पंदित नोजल को ट्रिगर करने वाले सिग्नल केबीच समय में देरी के समायोजन से सिग्नल तीव्रता का अनुकूलन करें।
  3. मापी जाने के लिए नमूने की स्थिति में जोड़तोड़ ले जाएँ। नमूना धारक विमान के भीतर नमूना स्थिति के समायोजन द्वारा संकेत तीव्रता का अनुकूलन।
  4. ब्याज की समय अवधि में बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रा प्राप्त करें। प्रयोग के विवरण के अनुसार कक्ष में नमूना तापमान या पृष्ठभूमि दबाव जैसे प्रयोगात्मक मापदंडों को संशोधित करें। प्रायोगिक मापदंडों को अलग करते समय बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रा लेना जारी रखें।

7. डेटा मूल्यांकन

  1. माप समाप्त होने के बाद, डेटा विश्लेषण कार्यक्रम में निर्धारित संबंधित डेटा लोड करें। माउस के सही बटन के साथ क्रोमेटोग्राम में रुचि की समय अवधि का चयन करें। औसत स्पेक्ट्रम एक अलग खिड़की में प्रदर्शित किया जाएगा।
  2. पसंद के कार्यक्रम में आगे की प्रक्रिया के लिए एक डेटा फ़ाइल के रूप में स्पेक्ट्रम का निर्यात करें।

   

Representative Results

निम्नलिखित में, डीआईएनईसी-एमएस के वास्तविक समय आवेदन के लिए दो उदाहरण प्रस्तुत किए गए हैं। चित्रा 4 एंजियोटेंसिन II से प्राप्त द्रव्यमान स्पेक्ट्रम के परिवर्तन को दर्शाता है जब नमूना लगभग 140 डिग्री सेल्सियस तक गर्म होजाता है। जब अंतिम तापमान तक पहुंच जाता है(चित्रा 4बी, चित्रा 4ई),स्पेक्ट्रम एक अतिरिक्त चोटी की विशेषता है जो एच2ओ इकाई(m/z = 1029) के नुकसान का संकेत देता है। उस तापमान पर नमूने को रखते समय, एंजियोटेन्सिन II अणुओं का और अपघटन देखा जाता है(चित्रा 4सी),जिसमें टर्मिनल अमीनो एसिड इकाइयों में से एक का नुकसान, एस्पार्टिक एसिड (मे/जेड = 932, चित्रा 4डीपर चोटी) शामिल है। डेटा का मात्रात्मक विश्लेषण अंतर्निहित प्रतिक्रिया काइनेटिक्स(चित्र4ई)का मूल्यांकन करने की अनुमति देता है। विशेष रूप से, चित्रा 4ई दर्शाता है कि m/z = १०२९ के साथ इकाई एक मध्यवर्ती है जो आगे छोटे टुकड़ों में विघटित के रूप में तीव्रता पहले बढ़ जाती है और फिर कम हो जाती है । सहवर्ती दर स्थिरांक परिमाण के एक ही क्रम में इस प्रकार कर रहे हैं ।

दूसरे उदाहरण के रूप में, एंजियोटेंसिन II22 में हाइड्रोजन/ड्यूटेरियम एक्सचेंज की जांच चित्रा 5में दर्शाई गई है । डीईएनईसी चैंबर (पीडी2ओ =10-4 मीटर) मेंडी2 ओ के लिए एंजियोटेंसिन नमूने के संपर्क में आने पर, एंजियोटेंसिन II के आइसोटोपिक पैटर्न को विस्तृत किया जाता है और डी परमाणुओं द्वारा एच के आदान-प्रदान का संकेत देने वाले उच्च एम/जेड मूल्यों की ओर स्थानांतरित किया जाता है। प्रक्रिया पहले ६० एस के दौरान तेजी से है, लेकिन काफी प्रयोग के आगे पाठ्यक्रम में धीमा: चित्रा 5बी में आइसोटोप पैटर्न एक व्यापक m/z रेंज (लगभग 15 मीटर/जेड इकाइयों) को शामिल किया गया । जब हम एक अणु में आदान-प्रदान एच परमाणुओं की संख्या के रूप में deuteration d की डिग्री को परिभाषित करते हैं, तो डी = 0 से डी = 13 के बीच डी के मूल्यों को स्पेक्ट्रम से निकाला जा सकता है। चित्रा 5सीमें आइसोटोप पैटर्न फिर से चौड़ाई में कम हो जाता है। इस अवलोकन को चोटियों की दृढ़ता से कम तीव्रता के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है जो कम मात्रा में ड्यूटेरेशन से जुड़े होते हैं। चित्रा 5डीमें, स्पेक्ट्रम को लंबे समय तक प्रतिक्रिया समय के लिए दिखाया गया है। कवर एम/जेड रेंज लगभग एक ही रहता है, लेकिन स्पेक्ट्रम के द्रव्यमान का केंद्र अभी भी एम/जेड मूल्यों को बढ़ाने की दिशा में धीरे से बदलाव करता है । लंबे समय तक एक्सपोजर समय के लिए, अणुओं का एक हिस्सा ड्यूटेरेशन, डीमैक्स = 17 की उच्चतम डिग्री तक पहुंचता है। यह कार्बोक्लिक एसिड या अमीन समूहों जैसे कार्यात्मक समूहों से बंधे एच परमाणुओं की संख्या द्वारा दिए गए विनिमय योग्य एच परमाणुओं की अधिकतम संख्या से मेल खाता है।

स्पेक्ट्रा के लौकिक विकास से पहले से ही, यह परिणाम निकाला जा सकता है कि एच/डी एक्सचेंज विभिन्न दर स्थिरांक के साथ होता है । इस अवलोकन के मात्रात्मक विवरण के लिए, ड्यूटेरेशन डी की औसत डिग्री को समय के एक समारोह के रूप में चित्रा 5ई में प्लॉट किया गया है। प्रायोगिक परिणामों (प्रतीकों) के निरीक्षण से तीन अलग-अलग व्यवस्थाओं का पता चलता है: टी एंड एलटी के लिए डीएंडऑपरेटिव की तेजी से वृद्धि; 50 एस, 50 एस &एलटी; टी एंड एलटी; 200 एस के लिए एक मध्यवर्ती शासन, और टी एंड जीटी; 200 एस के लिए धीमी लेकिन लगभग निरंतर वृद्धि। प्रयोगात्मक परिणाम मोंटे कार्लो सिमुलेशन के माध्यम से नकली थे; छद्म पहले आदेश प्रतिक्रिया गतिज प्रतिक्रिया स्थिरांक के साथ मैं एच के लिए ग्रहण किया गया/ तीनों शासनों में सिमुलेशन और प्रायोगिक परिणामों के बीच एक अच्छा समझौता तभी प्राप्त किया गया था जब एंजियोटेन्सिन द्वितीय अणुओं में एच/डी एक्सचेंजके लिए कम से तीन अलग-अलग दर स्थिरांक कश्मीरलागू किए गए थे। चित्रा 5एफ, जीमें, गतिज के रूप में ड्यूटेरेशन की विभिन्न डिग्री के लिए आइसोटोप पैटर्न की राशि से प्रयोगात्मक आइसोटोप पैटर्न फिटिंग से deduced(चित्रा 5ए से चित्रा 5डी)दिखाया गया है । प्रयोगात्मक डेटा और सिमुलेशन के साथ-साथ कम और उच्च डिग्री ड्यूटेरेशन के लिए बहुत अलग विनिमय दरों के बीच अच्छा समझौता स्पष्ट रूप से देखा जाता है। हेक्साग्लाइसिन जैसे विभिन्न ओलिगोपेप्टाइड्स की तुलना करके, तेजी से विनिमय दरों को स्पष्ट कार्यात्मक समूहों के लिए जिम्मेदार ठहराया गया था, जबकि धीमी विनिमय दरें पेप्टाइड की रीढ़22के मिडल समूहों से जुड़ी थीं।

जबकि इन पहले दो उदाहरणों को माइक्रोमीटर-मोटी एंजियोटेंसिन II नमूनों के साथ मापा गया था, चित्रा 6 परिणामों को पता चलता है कि इलेक्ट्रोस्प्रे आयन-बीम जमाव (ईएस-आईबीडी)23के माध्यम से तैयार सोने के नमूनों पर एंजियोटेंसिन II के उपमोनोलेयर कवरेज से प्राप्त परिणाम। पदार्थ की मात्रा पर संकेत तीव्रता की एक रैखिक निर्भरता परिमाण के 3 आदेशों पर देखी जाती है, पता लगाए गए पदार्थ की सबसे कम मात्रा सोने की सतह पर एंजियोटेन्सिन द्वितीय अणुओं के मोनोलेयर के 0.1% से मेल खाती है। आंकड़ा 5 में दिखाए गए एच/डी एक्सचेंज प्रयोगों को भी सबमोनोलेयर शासन23में सोने पर एंजियोटेन्सिन II के साथ किया गया था ।

Figure 4
चित्रा 4: एंजियोटेन्सिन II के थर्मल क्षरण का वास्तविक समय अवलोकन। (ए-सी) एंजियोटेंसिन II नमूने से क्लस्टर-प्रेरित डिसोरेशन/आयनीकरण के बाद प्राप्त जन स्पेक्ट्रा। (A) आरटी (बी) में ताजा नमूना लगभग 140 डिग्री सेल्सियस तक गर्म किया गया। एम/जेड = 1047 पर चोटी के अलावा, जो अक्षुण्ण अणु [एम +एच]+से जुड़ा हुआ है, एम/जेड = 932, 1012 और 1029 पर चोटियों (तीर द्वारा इंगित) दिखाई देते हैं। (ग) बाद की चोटियों में वृद्धि होती है और नमूने को ऊंचा तापमान पर रखते समय मुख्य शिखर समय के साथ कम हो जाता है । (घ) एंजियोटेन्सिन II का संरचनात्मक सूत्र जो टुकड़े (भूरे रंग के कोष्ठक) का संकेत देता है जो एक अमीनो एसिड यूनिट (एस्पार्टिक एसिड) के नुकसान से एम/जेड = 932 पर चोटी की उपस्थिति की ओर जाता है। (ई) नमूना तापमान की समय निर्भरता और भूखंडों (ए) से (सी) में दर्शाई गई मुख्य चोटियों की तीव्रता । ठोस रेखाएं आंखों के लिए मार्गदर्शक हैं। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 5
चित्रा 5: एंजियोटेन्सिन द्वितीय में एच/डी एक्सचेंज का वास्तविक समय अवलोकन । (ए-डी) डीआईएनईसी-एमएस के माध्यम से प्राप्त एंजियोटेंसिन II का कास्टिक मास स्पेक्ट्रा एच/डी एक्सचेंज के कारण, आइसोटोप पैटर्न (ए)में दिखाए गए अविभाजित प्रजातियों के आइसोटोप पैटर्न की तुलना में (बी) से (डी) में उच्च मे/जेड मूल्यों की ओर विस्तृत और बदलाव करता है । लाल रेखाएं डेटा हैं, धराशायी सियान लाइनें डेटा के लिए फिट बैठती हैं, जो ड्यूटेरेशन की विभिन्न डिग्री को ध्यान में रखते हुए हैं। (ई) प्रयोगों (खुले बिंदुओं) से कम समय के रूप में ड्यूटेरेशन डी की औसत डिग्री। इसके अलावा, मोंटे कार्लो सिमुलेशन के माध्यम से परिणाम रहित समय के एक समारोह के रूप में डीडी को दिखाया गया है। काले धराशायी वक्र: एक दर स्थिर खाते में लेने सिमुलेशन(कश्मीर1); लाल वक्र: खाते में तीन दर स्थिरांक(कश्मीर1, कश्मीर2, कश्मीर3)ले रही है । (एफ, जी) मोंटे कार्लो सिमुलेशन (धराशायी लाइनों) के इसी परिणामों के साथ समय के एक समारोह के रूप में एंजियोटेंसिन II (प्रतीक + ठोस लाइनों) के ड्यूटेरेशन की चयनित डिग्री की सापेक्ष संकेत तीव्रता। इस आंकड़े को रेफरेंस 22 से संशोधित किया गया है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 6
चित्रा 6: उपमोनोलेयर शासन में सोने पर एंजियोटेन्सिन II के लिए DINeC-MS का आवेदन। (क) उपमोनोलेयर शासन में अलग-थलग पड़े एंजियोटेनसिन द्वितीय अणुओं के सामूहिक स्पेक्ट्रोमेट्री के लिए बयान और डीआईएनईसी-एमएस के लिए ईएस-आईबीडी के संयोजन का योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व । (ख) डेटा के दो स्वतंत्र सेटों (भरे और खुले प्रतीकों) से प्राप्त नमूने पर जमा की गई राशि पदार्थ पर सिग्नल तीव्रता की निर्भरता । इंसेट: नमूने से प्राप्त डीआईएनईसी मास स्पेक्ट्रा जिस पर दर्शाए गए पदार्थ की मात्रा जमा की गई थी। इस आंकड़े को रेफरेंस 23 से संशोधित किया गया है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Discussion

अब तक किए गए कई अध्ययनों में, विभिन्न पदार्थों पर डीआईएनईसी-एमएस की उच्च संवेदनशीलता का प्रदर्शन किया गया है। दरअसल, यह फेम्टोमोल शासन11में पदार्थ की मात्रा तक एनालाइट्स के माप नहोने की अनुमति देता है। इस उच्च संवेदनशीलता के कारण, नमूना तैयारी, विशेष रूप से सब्सट्रेट सफाई में, डीआईएनईसी द्रव्यमान स्पेक्ट्रा में संदूषण से बचने के लिए अत्यधिक शुद्ध रसायनों के साथ किया जाना चाहिए। के रूप में यह कई विश्लेषण तकनीकों के लिए मामला है, एक खाली सब्सट्रेट से एक उचित पृष्ठभूमि माप एनालिएट और चोटियों जो सब्सट्रेट में अपनी उत्पत्ति है से चोटियों को अलग करने में मदद करता है/

यद्यपि हमने दिखाया है कि किसी दिए गए एनालाइट अणु की आयनीकरण संभावना मिश्रित नमूनों में सह - एसोर्बेट्स या सह -घटकों की उपस्थिति से दृढ़ता से प्रभावित नहीं होतीहै 17,24,आयनीकरण की संभावना पदार्थ से पदार्थ13में भिन्न हो सकती है । इस प्रकार, संदूषकों के रूप में स्वच्छ परिस्थितियों में काम करना और भी महत्वपूर्ण है, जो उनके आयनीकरण की संभावना के आधार पर, एनालाइट की तुलना में बहुत मजबूत संकेत में योगदान दे सकता है। पूर्वसूचित आयनों (उदाहरण के लिए, जैसा कि कई रंग के अणुओं के मामले में पाया जाता है), या कार्यात्मक समूहों के साथ अणु जो प्रोटोन तेज या डिप्रोटोनेशन (यानी, कुर्सियां या एसिड) की दिशा में स्पष्ट प्रवृत्ति दिखाते हैं, आमतौर पर डीआईनेक-एमएस में उच्च आयनीकरण संभावना दिखाते हैं। यदि इस तरह के कार्यात्मक समूह analyte में मौजूद है, आयनीकरण की संभावना कम हो सकती है । इसके बाद नमूनों का इलाज आयनीकरण एजेंटों जैसे ट्राइफ्लोरो एसिड (उदाहरण के लिए, आयनीकरण एजेंट के वाष्प दबाव के लिए नमूने के संपर्क में आने से किया जा सकता है)।

चित्रा 4 और चित्रा 5 में चर्चा किए गए प्रतिनिधि परिणाम बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमेट्री के माध्यम से रासायनिक प्रतिक्रियाओं की वास्तविक समय की जांच के लिए DINeC-एमएस की प्रयोज्यता प्रदर्शित करते हैं । चित्र6 विधि की उप-संवेदनशीलता को दर्शाता है। यदि दो गुणों को संयुक्त किया जाता है, तो सतहों पर रासायनिक प्रतिक्रियाएं और उनके उत्पादों का वास्तविक समय23में पालन किया जा सकता है। यह तथाकथित "ऑन-सरफेस संश्लेषण" के लिए विशेष रूप से रुचि हो सकती है जो सतहों3,33,34,35,36पर मैक्रोमॉलिक्यूलर संरचनाओं की असेंबली की ओर ले जाती है। वर्तमान सेट-अप में, इस तरह की सतह प्रतिक्रियाओं का अवलोकन कम प्रतिक्रियाशीलता जैसे सोने23 और अन्य महान धातुओं के साथ सतहों पर संभव है; प्रयोगों को सिलिकॉन सतहों37जैसी अत्यधिक प्रतिक्रियाशील सतहों पर किया जाना अधिक कठिन होता है, क्योंकि अवशोषण कक्ष में आधार दबाव10-7-मीटर-रेंजमें होता है। वर्तमान गतिविधियां इस सीमा को संबोधित करती हैं और एक यूएचवी-संगत डीआईएनईसी उपकरण बनाया जा रहा है। प्रतिक्रियाशील सतहों के मामले में, सतह एडोरबेट और सतह प्रतिक्रियाओं के माप से पहले एसओ2 और सब्सट्रेट सतह के बीच बातचीत का परीक्षण किया जाना चाहिए।

क्लस्टर बीम तटस्थ होने के कारण इस पर ध्यान केंद्रित नहीं किया जा सकता। इस प्रकार नमूने पर बीम आकार उपयोग में स्किमर के सेट-अप और छिद्र की ज्यामिति द्वारा दिया जाता है; नमूने पर बीम व्यास के लिए विशिष्ट मूल्य एक से कई मिलीमीटर तक है। नतीजतन, नमूना स्कैन करके इमेजिंग केवल बहुत कम रिज़ॉल्यूशन के साथ संभव है। दूसरी ओर, उच्च आयनीकरण संभावना13द्वारा दिए गए, DINeC कुशलता से हताश अणुओं का उपयोग करता है । इस प्रकार, DINeC-एमएस और एक आयन इमेजिंग डिटेक्टर३८ का एक संयोजन अत्यधिक आकर्षक लगता है ।

Disclosures

लेखक घोषणा करते हैं कि उनके पास खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

लेखक हेल्महोल्ट्ज इंटरनेशनल सेंटर फॉर फेयर (HICforFAIR) और हेल्महोल्ट्ज ग्रेजुएट स्कूल फॉर हैड्रॉन एंड आयन रिसर्च (पी.एस.) से वित्तीय सहायता स्वीकार करते हैं। लेखक ों ने संयुक्त ईएस-आईबीडी/डीआईएनईसी प्रयोगों पर उपयोगी सहयोग के लिए प्रो रौशेनबाख (ऑक्सफोर्ड विश्वविद्यालय) और उनकी टीम को धन्यवाद दिया ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Acetone rotisolv HPLC Roth 7328.2 HPLC Gradient Grade
Copper tape
Ethanol rotisolv HPLC Roth p076.1 HPLC Gradient Grade
Helium Praxair 4800086706 Purity 99.9999%
Nitrogen Praxair 40728408 Purity 99.5 - 100%
Silicon Wafers Active Business Company GmbH G60007
Sulfur dioxide Air Liquide P1734S10R0A001 Purity 99.98%
Water rotisolv LC-MS Roth HN43.1 Ultra LC-MS

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रसायन विज्ञान अंक १५७ मास स्पेक्ट्रोमेट्री क्लस्टर अवशोषण मैट्रिक्स मुक्त नरम सतह adsorbates प्रतिक्रिया काइनेटिक्स एच/डी विनिमय
क्लस्टर-प्रेरित डेसर्टप्शन/आयनीकरण मास स्पेक्ट्रोमेट्री के माध्यम से सतहों पर जटिल अणुओं और उनकी प्रतिक्रियाओं का विश्लेषण
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