Summary
هذه المادة يوضح نهج خارج الدورة لطمس الكيس اللافاوفي الخنزير غينيا وإصابة القناة اللافاوفية مع اختيار غرامة من أجل حث الهيدروبس اللافاوتيكي التجريبية.
Abstract
الهيدروكالية اللاففاوية هي توسيع لوسائل الإعلام السكالا التي ترتبط في معظم الأحيان بمرض مينيير ، على الرغم من أن الآلية (الفيزيولوجيا) المرضية لا تزال غير واضحة. من أجل دراسة كافية لخصائص الهيدروكالية اللافاوفية ، مثل أصول فقدان السمع منخفض التردد ، هناك حاجة إلى نموذج موثوق به. خنزير غينيا هو نموذج جيد لأنه يسمع في المناطق منخفضة التردد التي تتأثر بشكل افتراضي بالمياه المائية اللافاوفية. وقد أظهرت الأبحاث السابقة أن الهيدروكالية اللافاوفية يمكن أن يتم حثها جراحيًا عن طريق النهج اللاطرادية أو خارج الدورة التي تنطوي على الحفر على القناة اللافاوفية والحويصلات. ومع ذلك ، ما إذا كان من الممكن إنشاء نموذج هيدروبس الانففاوتيك باستخدام نهج خارج الدورة التي تجنبت الحفر الخطير على القناة اللافاوفية والكيس غير معروف. وكان الهدف من هذه الدراسة لإظهار نهج خارج الدورة المنقحة للحث على الهيدروبس اللافاوتيكي التجريبي ة في 30 يوما بعد العملية عن طريق طمس الكيس الليمفاوي ة وإصابة القناة اللمفاوية اللافاوتيكية مع اختيار غرامة. ويتألف حجم العينة من سبعة خنازير غينيا. وأجريت قياسات وظيفية للسمع وحصدت العظام الزمنية في وقت لاحق للتحليل النسيجي. وكان هذا النهج معدل نجاح 86٪ في تحقيق هيدروبس الخلايا الليمفاوية. كان خطر تسرب السائل النخاعي ضئيلاً. ولم تحدث في العينة أي وفيات أو إصابات في ما بين العمليات الجراحية. طريقة المقدمة يوضح وسيلة آمنة وموثوق بها للحث على الهيدروبس اللافاوفي في نقطة زمنية سريعة نسبيا من 30 يوما. الآثار السريرية هي أن الطريقة المقدمة توفر نموذجا موثوقا لمواصلة استكشاف أصول فقدان السمع منخفضة التردد التي يمكن أن تكون مرتبطة هيدروبسيا ً داوفيلاتيك.
Introduction
هيدروبسة الاندوسالفية الاندافية هو توسيع وسائل الإعلام سكالا. يمكن قياس وجود هيدروبس الخلايا الليمفاوية اللاففاوتيكية باستخدام المنطقة المقطعية للوسائط سكالا. ويعتقد أن الهيدروكالية السريرية يمكن أن تكون مرتبطة مع انخفاض التردد الحسية فقدان السمع، مثل تلك التي ينظر إليها في مرض مينيير. ولكن أصل (أو أصل) فقدان السمع لا يزال غير واضح. لدراسة أصول فقدان السمع منخفض التردد المرتبط بهيدروساخ الغدد الليمفاوية الداوفية دراسة كافية، هناك حاجة إلى نموذج موثوق به.
في عام 1965، وصفت كيمورا وشوكنيشت كيفية حث الهيدروكات اللمفاوية في خنزير غينيا باستخدام نهج intradural1. وشملت تقنيتهم استخدام نهج الفوسا القحفي الخلفي للوصول إلى الفوسا الأوبركولوم وsubarcuate. الخطوات التي تنطوي على قطع دورا، تراجع المخيخ مع محلول رينجر غارقة وسادة القطن، والحفر عبر القناة اللافاوفية والجزء المتوسط من الكيس الليمفاوي ة. ثم وضع شمع العظام في operculum لفصل القناة اللمفاوية الانفية من كيس اللاففاوتيك المنفطي المنفأ. تم إغلاق عيب القحفي ة عن طريق وضع مسحوق الجيلاتين القابل للامتصاص (على سبيل المثال، جيلفوم) وحصاد العضلات المفرطة. تم العثور باستمرار على الأدلة النسيجية للهيدروكالية اللافاوفية في أيام ما بعد الجراحة 1 و 3 و 7 و 14 و 21 و 30 ، مما يدل على أن النهج اللاطرادي كان طريقة موثوقة للحث على هيدروبس ة اللمفاوية اللافاوفية المؤكدة علمًا النسيجيًا. باستخدام نفس النهج التفكيكي مثل كيمورا وشوكنيخت ، ولكن مع نقاط زمنية مختلفة ، أكد الملح وDeMott أن وسائل الإعلام سكالا في المنعطف الثاني من القوقعة تم توسيعها بشكل كبير في اليوم 4 وما بعده2. في حين أن المراضة الفعلية للتحريض على تسرب السائل النخاعي (CSF) باستخدام نهج كيمورا وشوكنيخت اللارادتوري لم يتم الإبلاغ عنها في الدراسة الأصلية ، فإن وجود تسرب CSF يمكن أن يزيد من خطر الإصابة بالتهاب السحايا. وقد اقترح أن فقدان CSF يمكن أن يؤدي إلى تدفق perilymph، مما أدى إلى التوسع المؤقت في وقت واحد من حجم اللمفاوية في خنزير غينيا3. نهج خارج الدورة لتحريض الهيدروكال ية اللافاوفية سيكون خيارا أكثر أمانا.
في عام 1989، وصف أندروز وبومر نهجين جراحيين خارج الدورة للوصول إلى الكيس والقناة اللمفاوية، إما عن طريق نهج الفوسا القحفي الأوسط أو نهج الفوسا القحفي الخلفي، لطمسالكيساللمفاوي 4 . وصفوا إزالة الأوبركولوم مع حفر الماس، ومن ثم إما الحفر قبالة الجزء الوسيط من الكيس الليمفاوي ة أو باستخدام اختيار غرامة لتعطيل الكيس والقناة اللافاوفية. في عام 1993، وصف لي، رايت، ومايرهوف نهجا مماثلا، والتي شملت الحفر من خلال الكيس الليمفاوي والقناة، ولكن اختلف في أنها أيضا عرقلت في وقت واحد القناة القوقعة5. أظهروا وجود هيدروكات اللاففاولوجية، كما تم تقييمها عن طريق علم الأنسجة، في أربعة أسابيع بعد طمس الكيس اللمفاوي اللاإرفي وعرقلة قناة القوقعة. وكان ميجيريان وآخرون أول من نشر مقالا فيديو يدل على طمس خارج الدورة من الكيس والقناة التي شملت الحفر مباشرة على الجزء المتوسط من operculum للدخول في كيس اللاففاوتيك والقناة6. أظهروا أدلة النسيجية من الهيدروكالتيك اللاففاولي في خنزير غينيا ضحى في 28 أسبوعا بعد الجراحة، فضلا عن فقدان السمع في المنطقة 16 كيلو هرتز6. ما إذا كان من الممكن للحث على الهيدروبس اللافاوفي المؤكد بشكل النسيجي وفقدان السمع منخفض التردد في وقت مبكر باستخدام النهج خارج الدورة غير معروف.
الهدف العام لهذا التقرير هو إظهار نهج خارج الدورة للحث على الهيدروبس اللمفاوي ة اللافاوفية التجريبية في 30 يوما بعد الجراحة عن طريق طمس الكيس اللمفاوي اللافي وإصابة القناة اللمفاوية اللافاوية مع اختيار غرامة. الأساس المنطقي وراء استخدام هذه التقنية هو ميزة تجنب الحاجة إلى الحفر على العظام الصدغية petrous ، وبالتالي إزالة خطر إصابة الدورة عن طريق الخطأ والتسبب في تسرب CSF ، مما يقلل من إمكانية إصابة القناة نصف الدائرية الخلفية ، والحد من خطر إصابة الجيوب الأنفية السينية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
وقد أجريت جميع الإجراءات المذكورة أدناه مباشرة في قسم البروتوكول على النحو المبين في البروتوكولات التي وافقت عليها جامعة واشنطن في لجنة سانت لويس المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها.
1. تحريض مخدر ورصد العلامات الحيوية
ملاحظة: استخدمت هذه الدراسة الخنازير الغينية المصطبغة من سلالة المعاهد القومية للصحة التي تم الحصول عليها من مستعمرة تربية داخلية.
- استخدام الخنازير غينيا من أي من الجنسين، ويزن ما لا يقل عن 350 غرام.
- ضع خنزير غينيا في isolette احترار حديثي الولادة وإعطاء خليط الكيتامين / xylazine داخل perperitoneally (50 ملغ / كغ الكيتامين و 10 ملغ / كغ xylazine) للتخدير التعريفي. مراقبة خنزير غينيا حتى يفقد إصبع القدم قرصة منعكس.
- بمجرد فقدان ردود الفعل قرصة إصبع القدم يحدث، حلاقة الرقبة الخلفية ورأس خنزير غينيا مع أداة تشذيب الشعر المعلن عنها عادة للاستخدام البشري.
- حقن بولوس تحت الجلد من 12 مل من محلول رينغر المرضع في الجزء الخلفي من الحيوان.
- ضع خنزير غينيا على وسادة الاحترار مع رفع الساقين ووضع 27.5 G فراشة إبرة داخل perperitoneally. تحقق من أن إبرة الفراشة في الموضع الصحيح في الفضاء داخل perperitoneal عن طريق ضمان استنشاق الهواء فقط. إذا تم تستنشق الدم أو السوائل، هناك قلق للتسليم في الجهاز الوعائي أو الأمعاء. يتم استخدام إبرة الفراشة للإعطاء المتكرر للتخدير.
- الوجه خنزير غينيا إلى الموقف المعرض وتأمين الرأس إلى حامل ستيريومية.
- تأمين مقياس أكسدة النبض إلى القدم. إذا كان استخدام الخنازير غينيا المصطبغة، يمكن أن يمنع الكفوف المصطبغة تشبع الأكسجين القراءة. لذلك ، ضع مقياس أكسدة النبض على أي مخلب غير مصطبغ.
- إدراج مسبار درجة حرارة المستقيم لمراقبة درجة حرارة الجسم. المسبار المستقيم هو جزء من نظام بطانية الاحترار الذي يحافظ على درجة حرارة الجسم في 38 درجة مئوية. لا تقم بتشغيل بطانية الاحترار حتى يكون مسبار المستقيم في مكانه لتجنب ارتفاع درجة الحرارة في بطانية الاحترار. إذا كان وجود صعوبة في وضع مسبار المستقيم، يمكن وضعه جنبا إلى جنب مع جسم خنزير غينيا.
- تطبيق مواد التشحيم على كلتا العينين من خنزير غينيا لمنع سحجات القرنية.
- إدارة الأكسجين التكميلي حسب الحاجة عن طريق أنابيب مطاطية وضعها بالقرب من الأنف للحفاظ على مستويات تشبع الأكسجين فوق 90٪.
- إعطاء enrofloxacin 0.5 ملغ / كغ تحت الجلد كوقاية مضاد حيوي.
- إعطاء 0.25 ملغ / كجم bupivacaine مع 1:100،000 الادرينالين تحت الجلد في موقع شق المتوقع للتخدير الموضعي والآثار الانقباضية.
- توفير التخدير الصيانة كل 20 دقيقة لمدة 4 دورات ومن ثم فقط حسب الحاجة على أساس العلامات الحيوية. مراقبة بشكل روتيني عمق التخدير حسب درجة حرارة الجسم، ومعدل التنفس، وتشبع الأكسجين، ومعدل ضربات القلب.
- مراقبة العلامات الحيوية كل 15 دقيقة (درجة الحرارة، ومعدل التنفس، ومعدل ضربات القلب، وتشبع الأكسجين).
2. التحضير الجراحي
- مرة واحدة يتم وضع رأس خنزير غينيا بشكل آمن في حامل ستيريو، وضع قطعة من شريط اخفاء على ظهره لتوفير التوتر الكافي على طول الجلد التي تغلب على occiput. تأمين نهايات الشريط إلى حامل ستيريوتك.
- الإعدادية ليبرالية الجلد التي تغلب على الرقبة الغربية والخلفية مع محلول اليود و70٪ الإيثانول بطريقة معقمة ثلاث مرات.
- عند هذه النقطة، استخدم الاحتياطات المعقمة والأدوات الاوتوكلافية. ضع الستائر العقيمة فوق خنزير غينيا.
3- العمليات الجراحية
- باستخدام شفرة 15، وجعل شق صغير، خط الوسط على طول occiput الخلفي تمتد إلى أسفل في الرقبة الخلفية. مرة واحدة تحت الجلد، واستخدام مقص القزحية لفصل عضلات عنق الرحم الخلفية اليمنى من العظام القذالية. إذا حدث أي نزيف أثناء قطع العضلات، والتحكم عن طريق الضغط باستخدام كرة قطنية معقمة.
-
باستخدام مزيج من #3 مم، #2 ملم، #1 مم الساالى بور مع 5-0 شفط والري المعقم، وإجراء استئصال القحفي ة التي يحدها قمة القذالي الخارجية، ريدج الحمل، خط خياطة occipitomastoid، والهامش الظهري من ماغنوم foramen.
- ضع بلطف قطعة صغيرة من كرة القطن المالحة المبللة تحت العظام أثناء فصل العظم القذالي عن الدورة.
- هيكل عظمي الجيوب الأنفية السينية مع #0.5 ملم الماس بور وإزالة بعناية العظام التي تغلب عليه.
- بمجرد تعرض الجيوب الأنفية السينية ، اسحب بلطف الجيوب الأنفية السينية باستخدام كرة القطن والتحول إلى استخدام شفط 3-0.
- تحديد operculum كشق مثل الهيكل الذي يقع داخل عظم الصدغي ة. وسوف تقع الفوسا تحت القوس وبتفوق والجيوب الأنفية السينية سوف يكون ليال لذلك. ثم يتم تصور الجزء خارج osseous من الكيس الأنفتري الأنجلي ككيس واضح يدخل الأوبركولوم وتعلق على الدورة التي تغلب على الجيوب الأنفية السينية. العجة بيضاوية الشكل، حوالي 3 إلى 4 مم في 1.5 إلى 2 مم. ومع ذلك ، كما يتضح من وجهة النظر الجراحية ، يظهر الأوبركولم كشق حوالي 1 مم. الجزء المرئي من الكيس من وجهة النظر الجراحية هو تقريبا نفس حجم الجزء المرئي من الأوبركولم، إن لم يكن أصغر.
-
تطبيق تراجع لطيف إلى الجيوب الأنفية السينية medially من أجل تصور واضح للجزء خارج osseous من كيس الخلايا الليمفاوية اللاصفية وزيادة التوتر بين أجزاء خارج نطاق الجلد وداخل الجيوب الأنفية من الكيس الداخلي.
- استخدم اختيار ًا دقيقًا بزاوية لمحو الجزء الوسيط من الكيس اللمفاوي اللافي. ومن الأهمية بمكان أن عملية الحذف لا تترك أي صلة مرئية بين الدورة وoperculum; ثم وضع اختيار غرامة داخل operculum لكشط على نطاق واسع على طول داخل العظام لجرحذلك.
- بدوره اختيار غرامة في اتجاه القناة اللافاوفية وتعطيل عمياء بطانة. عند هذه النقطة قد يحدث بعض النزيف من وعاء داخل العجة. ويمكن السيطرة عليها مع قطعة صغيرة من القطن.
- تجفيف الشوفان فارغة مع قطعة صغيرة من القطن. باستخدام شفط 3-0 حسب الحاجة للحفاظ على القطن الجاف.
- الحصول على غبار العظام باستخدام كوريت صغيرة لكشط على طول الجزء القرفصاء من العظام الصدغية. حزمة بسخاء operculum مع غبار العظام. استخدام كرة القطن وشفط للحفاظ على المنطقة الجافة في حين التعبئة مع غبار العظام.
- تطبيق شمع العظام على operculum لختمه. تأكد من عدم وجود شمع عظمي زائد يُطرد في الجمجمة.
- استخدام شمع العظام لتغطية عيب الجمجمة.
- تقريبي عضلات عنق الرحم الخلفية مع 4-0 مضفر، خياطة قابلة للامتصاص بطريقة متقطعة.
- قم بإجراء إغلاق تحت المركب باستخدام خياطة مضفرة وقابلة للامتصاص 4-0.
4- الرعاية بعد الإجراء
- إزالة خنزير غينيا من حامل ستيريوتكتيكي مخصص ونقل إلى isolette الاحترار.
- إعطاء 2 ملغ / كجم Atipamezole و 24 مل من حل الحلبة المرضعة (تحت الجلد بعيدا عن الشق). إعطاء حل الحلبة المملة بسبب آثار مدر للبول من xylazine. إدارة 0.2 ملغ / كجم ميلوكسيكام تحت الجلد لتغطية المسكنات بعد الجراحة.
- الحصول على علامات حيوية كل 15 دقيقة حتى يخرج خنزير غينيا تماما من التخدير.
- إعطاء إضافية 12 مل بولوس السوائل من محلول الحلبة المرضعة حوالي 2 ساعة من نهاية الجراحة خلال فترة النقاهة.
- مرة واحدة في خنزير غينيا هو في حالة تأهب، وانسداد، وإبطال، وجود حركات الأمعاء، والعودة خنزير غينيا إلى منشأة الحيوان. هناك حاجة إلى ما يقرب من 2 إلى 4 ساعات لخنزير غينيا للخروج تماما من التخدير.
- مراقبة الخنازير غينيا مرتين يوميا في الأيام الثلاثة الأولى بعد الجراحة. إذا لوحظت علامات عدم الراحة، وإدارة 0.2 ملغ/ كجم ميلوكسيكام تحت الجلد كل 24 ساعة حسب الحاجة. بدلا من ذلك، buprenorphine (0.05 ملغ / كجم) يمكن أن تدار تحت الجلد إذا لم يتم إدارة الأعراض بما فيه الكفاية من قبل ميلوكسيكام.
- إعطاء 12 مل بولوس السائل من حل الحلبة المرضعة دون الجلد مرتين في اليوم لمدة تصل إلى ثلاثة أيام حتى يصل خنزير غينيا إلى الوزن قبل الجراحة. إذا وصل خنزير غينيا إلى وزنه قبل الجراحة قبل اليوم الثالث بعد الجراحة ، فأوقف السوائل. إذا استمر خنزير غينيا في إنقاص وزنه بعد الأيام الثلاثة الأولى ، فاستخدم هزة تغذية مكملة يتم الإعلان عنها عادة للاستهلاك البشري الممزوج بحبيبات طعام خنزير غينيا المسحوقة.
- مراقبة الخنازير غينيا الأسبوعية حتى نقطة نهايتها.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
استخدمت الطريقة المعروضة نهجًا خارج الدورة لطمس الكيس اللمفاوي اللافطي وإصابة القناة اللمفاوية اللاففاوتيكية بانتقاء ناعم في سبعة خنازير غينيا تتكون من ذكرين وخمس إناث. كان متوسط مدة الجراحة 2 ساعة من الشق إلى الإغلاق. وتراوح إجمالي وقت الحفر بين 5-10 دقائق. كانت هناك حاجة إلى ما يصل إلى 4 ساعات لخنزير غينيا للخروج بشكل كامل من التخدير. لم تكن هناك وفيات داخل العملية أو بعد العملية الجراحية في العينة. ولم تقع إصابات في القناة نصف الدائرية الخلفية أو الدورة في أي من خنازير غينيا. إصابة في الجيوب الأنفية السينية وقعت في خنزير غينيا واحد (مستثناة من تحليل البيانات).
خضعت خنازير غينيا لإجراء ثانٍ في يوم التضحية (يوم ما بعد الجراحة 30) لإجراء قياسات وظيفية سمعية شملت الموجي العصبي المتداخل السمعي (ANOW) وإمكانات عمل مركب القوقعة (CAPs). تم إجراء قياسات ANOW و CAP، وأجريت التحليلات، باستخدام الأساليب الموصوفة سابقا7،8،9. ANOW هو قياس العصبية البحتة التي تنشأ من الإثارة العصبية في قوقعة apical نصف7،8،9. بعد اختبارات الوظيفة السمعية ، تم حصاد الأذنين على الفور وإعدادها للتحليل النسيجي باستخدام الأساليب الموصوفة سابقًا10. تم الانتهاء من إعداد النسيج الناجح في ست آذان، ولكن إحدى الأذنين أظهرت الدموع في غشاء ريسنر. تم القضاء على الأذن مع الدموع من التحليل النسيجي ولكن أبقى في التحليل الفسيولوجي. تم قياس المنطقة المقطعية من وسائط سكالا باستخدام ImageJ11. كشف التحليل النسيجي للعظام الصدغية عن هيدروبسة الانففاولوجية في ستة من أصل سبعة خنازير غينيا في جميع أنحاء القوقعة اليمنى مقارنة بالقوقعة اليسرى(الشكل 1). في الشكل 1، يتم توسيع منطقة المقطعية وسائل الإعلام العرضية على التشغيل ، والأذن اليمنى (الأحمر) بالمقارنة مع المخالفة ، الأذن اليسرى (الأزرق) ، مما يدل على الهيدروبس الليمفاوي ة في الأذن اليمنى. كما تم قياس المنطقة المقطعية للوسائط السكالا عبر كل منعطف ومقارنتها بالسيطرة على خنازير غينيا(الشكل 2). لم يتم تضمين التدابير من أذن واحدة في الشكل 2 بسبب مشكلة إعداد النسيجية التي تسببت في غشاء ريسنر المسيل للدموع. وقد خضعت خنازير غينيا الخاضعة للسيطرة إما لعملية جراحية صورية (تم فيها تحديد الالحويصلات اللمفاوية اللافاوتيكية ولكن لم يتم إزعاجها) أو لم تخضع لأي عملية جراحية غير تلك اللازمة لاتخاذ تدابير وظيفية سمعية. بالمقارنة مع عنصر التحكم ، كانت المنطقة المقطعية العرضية أكبر بشكل عام في الأذنين الباقية بعد 30 يومًا من طمس الكيس اللمفاوي(الشكل 2). تم زيادة عتبات ANOW (≤ 1 كيلو هرتز) في ستة من أصل سبعة خنازير غينيا التي أظهرت هيدروكات الانففاولوجية مقارنة بالخنازير الغينية الخاضعة للسيطرة، مما يدل على وجود فقدان السمع منخفض التردد(الشكل 3). الموجة 1 من استجابة جذع الدماغ السمعية، أو إمكانية عمل مركب القوقعة (CAP)، كانت العتبات ضمن النطاق الطبيعي عند ترددات أعلى من 8 كيلو هرتز في ستة من أصل سبعة خنازير غينيا(الشكل 3).
الشكل 1: صور النسيجية لقطع منتصف modiolar من قوقعة خنزير غينيا. نجا هذا الخنزير الغيني بعد 30 يوما من طمس الكيس اللمفاوي اللافي باستخدام نهج خارج الدورة. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2: منطقة مقطعية من وسائط سكالا كدالة لطول القوقعة. التدابير من ستة من سبعة آذان فردية باللون الأحمر. تمثل الخطوط الرمادية المتقطعة ± 1 الانحراف المعياري للمقاييس من آذان التحكم. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3: قياسات الوظائف السمعية (ANOW وCAPs) مقاسة في يوم ما بعد الجراحة 30. تدابير ANOW هي ≤ 1 كيلو هرتز واتخذت تدابير CAP > 1 كيلو هرتز. التدابير من آذان فردية باللون الأحمر. خطوط رمادية متقطعة تمثل ± 1 الانحراف المعياري للعتبات للسيطرة الخنازير غينيا. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
وكان الأسلوب خارج الدورة المقدمة معدل نجاح 86٪ في تحقيق الهيدروبس اللافاوفي المؤكد بشكل النسيجي وفقدان السمع منخفضة التردد. حققت الطريقة بشكل موثوق الأدلة النسيجية من الهيدروكالتيك اللافي ة الاندانية بحلول يوم ما بعد الجراحة 30 ، بما يتفق مع الدراسات السابقة التي استخدمت نهج ًا intradural2. أهمية الأسلوب فيما يتعلق بالأساليب القائمة هو أن تسرب CSF غير مطلوب ، وبالتالي إزالة متغير محير محتمل تم اقتراحه ليؤدي إلى توسع تعويضي مؤقتللحجماللمفاوي 3 . بشكل عام ، توضح الطريقة طريقة سريعة وآمنة وموثوقة للحث على الهيدروبس الليمفاوي ة اللافاوفية التجريبية.
الأسلوب المعروض لديه العديد من نقاط القوة مقارنة مع الدراسات السابقة. أولاً، كان النهج خارج الدورة، مما يقلل من المراضة المحتملة والآثار المربكة لتسرب CSF. ثانيا، باستخدام اختيار غرامة بدلا من الحفر لمحو الكيس اللمفاوي ة اللانهاية وإصابة القناة اللافاوفية، الأسلوب يتجنب أي إصابة محتملة للقناة نصف دائرية الخلفي. خطوة حاسمة هي ضمان عدم وجود اتصال مرئي بين الدورة وoperculum. ثالثاً، باستخدام اختيار ناعم في العظم الصدغي بدلاً من الحفر، قللت الطريقة من احتمال حدوث صدمة صوتية ناجمة عن الحفر على العظم الصدغي البوبطرسي. وأخيرا، توفر هذه الطريقة بروتوكول الحيوان المحيط بالجراحة الأمثل لضمان الانتعاش السريع ومسار ناجح بعد الجراحة من الخنازير غينيا. الحد من الأسلوب هو استخدام الكيتامين / xylazine، والتي يمكن التغلب عليها باستخدام جهاز ستيريوتاكسي الذي يسمح تسليم الايفلوران.
الآثار العلمية للنتائج هي تطوير طريقة آمنة وموثوقة للحث على الهيدروكالية اللافاوتيكية في نقطة زمنية سريعة نسبيا من 30 يوما. الآثار السريرية هي أن الأسلوب يوفر نموذجا موثوقا من الهيدروكالتيك اللافية من أجل مزيد من استكشاف أصول فقدان السمع منخفضة التردد المرتبطة بها. سيتم استخدام التطبيقات المستقبلية للطريقة لمزيد من الدراسة لأصل (أو أصل) فقدان السمع منخفض التردد المرتبط بالمياه المائية اللافاوفية. في الختام ، فإن الطريقة المعروضة هي نهج عوكلي معدل خارج الدورة ينطوي على طمس الكيس اللمفاوي اللافطي وإصابة القناة اللمفاوية اللافية بانتقاء دقيق للحث على الهيدروبس اللافي الليمفاوي التجريبي في 30 يومًا بعد الجراحة في خنزير غينيا.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.
Acknowledgments
نشكر شانون م. ليفلر على المساعدة في الأرقام وجدول المواد. تم دعم الأبحاث الواردة في هذا المنشور من قبل المعهد الوطني للصمم واضطرابات الاتصال الأخرى داخل المعاهد الوطنية للصحة ، من خلال منحة تدريب "تطوير الطبيب / الباحثين في ENT الأكاديمية" ، رقم الجائزة T32DC000022 (C.V.V.) وR01 DC014997 (J.T.L). المحتوى هو مسؤولية المؤلفين فقط ولا يمثل بالضرورة وجهات النظر الرسمية للمعاهد الوطنية للصحة.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 12 mL syringe | Henke-Sass Wolf | 5100-X00V0 | |
| 1 mL and 3 mL syringe | BD Precision(Ordered from Fischer Sci) | 14-826-87 15859152 | |
| 27.5 butterfly gauge needle | Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson) | 448407 | |
| 4-0 suture | McKesson | 1034507 | |
| 4 x 4 gauze sponges | Dukal (Ordered form McKesson) | 374454 | |
| 60 mL syringe | Fisher Sci | 22-031-375 | |
| Anspach otologic drill | Anspach | SC2100 | |
| atipamezole | Zoetis | 107204-6 | |
| autoclave | Fisher sci | 15-103-0508 | |
| autoclave bags | McKesson | 524881 | |
| bayonet separator | Olympus | AL 130564 | |
| bupivicaine | auro Medics Pharma | 555150-169-10 | |
| clear sterile drape | 3M | 1020 | |
| cotton balls | Fisherbrand (ordered from Fisher Sci) | 22-456-885 | |
| cotton swabs | McKesson | 508716 | |
| diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm | Anspach | QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD | |
| diaper pad | McKesson | 945330 | |
| disposable 15 blade | Swann-Morton | 0305 | |
| enrofloxacin | Hospira | 0409-4888-01 | |
| epinephrine | McKesson | 63739-0456 | |
| eye ointment | Dechra Vet Products | 17033-211-38 | |
| Freer elevator | Grace Medical | 215100FX | |
| gelfoam | Pfizer (Ordered from McKesson) | 82830 | |
| hair trimmers | Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon) | 078400-020-000 | |
| iodine scrub | Purdue Pharma (ordered from mcKesson) | 521243 | |
| iris scissors | Olympus | CL-542114 | |
| ketamine | Henry Schein Animal Health | 55853 | |
| lactated ringers | B. Braun Medical (ordered from McKesson) | 186662 | |
| lancet knife by Rosen | Grace Medical | 151100FX | referred to as curette in the text |
| lubricant | Milex (ordered from Cooper Surgical) | MX5030 | |
| masking tape | 3M (ordered from fisher sci | 19047259 | |
| metal rectangle basin | Amazon | B07NQDBC6T | |
| needle holder | Olympus | CR 213015-ENT | |
| needles: 27 gage, 18 gauge | BD Precision(Ordered from Fischer Sci) | 14-826-48 14-826-5D | |
| neonatal warming isollete | Air Borne Life Support Systems | 731-1800 | |
| operating microscope | Carl Zeiss | OPMI pico | |
| oxygen tank | AirGas | OX USP200 | |
| pulse ox | CapnoTrue (Ordered from Medacx) | M-3090112001 | |
| rectal probe with heating blanket | Harvard Apparatus | probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214 | |
| red body holder | Lichtenhan Lab | N/A | In-house product |
| right angle | Olympus | BV-230337 | |
| rosen needle | Olympus | AM-130566 | customized, it is the instrument I use to tear the sac |
| rubber tubing for O2 administration | Fisher Sci | 14-171-104 | |
| saran wrap | Fisher Sci | NC9617977 | |
| stereotactic head holder | WUSTL Instrument Machine Shop | N/A | In-house product |
| sterile drapes | Cardinal Health | 7553 | |
| suction tube by Baron | Grace Medical | 034903FX 034905FX | #3 and #5 Suction |
| tissue forceps adson brown | Grace Medical | 325112FX | |
| Weitlander retractor | Olympus Grace Medical | BL200011 100313FX | |
| xylazine | Akorn | 59399-110-20 |
References
- Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac. Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).
- Salt, A. N., DeMott, J. Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker. Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).
- Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study. Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).
- Andrews, J. C., Bohmer, A. The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig. American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).
- Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig. American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).
- Megerian, C. A., et al. Surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct. Journal of Visualized Experiments. (35), (2010).
- Lichtenhan, J. T., Cooper, N. P., Guinan, J. J. Jr A new auditory threshold estimation technique for low frequencies: proof of concept. Ear and Hearing. 34 (1), 42-51 (2013).
- Lichtenhan, J. T., Hartsock, J., Dornhoffer, J. R., Donovan, K. M., Salt, A. N. Drug delivery into the cochlear apex: Improved control to sequentially affect finely spaced regions along the entire length of the cochlear spiral. Journal of Neuroscience Methods. 273, 201-209 (2016).
- Lichtenhan, J. T., Hartsock, J. J., Gill, R. M., Guinan, J. J. Jr, Salt, A. N. The auditory nerve overlapped waveform (ANOW) originates in the cochlear apex. Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 15 (3), 395-411 (2014).
- Lichtenhan, J. T., Hirose, K., Buchman, C. A., Duncan, R. K., Salt, A. N. Direct administration of 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin into guinea pig cochleae: Effects on physiological and histological measurements. PloS One. 12 (4), e0175236 (2017).
- Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis. Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).
