Summary
מאמר זה מדגים גישה extradural להשמיד את שק השפן גינאה endolymphatic ולפגוע צינור endolymphatic עם בוחר דק כדי לגרום הידרופס ניסיוני endolymphatic.
Abstract
הידרופס endolymphatic הוא התרחבות של מדיה scala כי הוא משויך לרוב עם מחלת מניפה, אם כי המנגנון הפתופיקולוגי (s) נשאר ברור. על מנת ללמוד כראוי את התכונות של הידרופס endolymphatic, כגון מקורותיה של אובדן שמיעה בתדר נמוך, מודל אמין נדרש. חזיר הניסיונות הוא מודל טוב כי הוא שומע באזורים בתדר נמוך כי הם מושפעים מושפע endolymphatic. מחקרים קודמים הראו כי הידרוps endolymphatic יכול להיגרם בניתוח באמצעות חוליות או extradural גישות המערבות קידוח על צינור האוורור endolymphatic. עם זאת, אם זה היה אפשרי ליצור הידרו מודל endolymphatic באמצעות גישה extradural כי נמנע קידוח מסוכן על צינור האוורור endolymphatic ו סאק לא היה ידוע. המטרה של מחקר זה היה להפגין גישה extradural מתוקנת כדי לגרום הידרו הניסוי endolymphatic ב 30 ימים פוסט הפעלה על ידי משמיד את הסאק endolymphatic ופצעו את צינור האוורור endolymphatic עם בוחר דק. גודל המדגם הורכב משבעה שרקנים. מדידות תפקודית של שמיעה נעשו עצמות הזמני נקצרו לאחר מכן ניתוח היסטולוגית. הגישה הייתה שיעור הצלחה של 86% בהשגת הידרו-משאבה. הסיכון של דליפת נוזל מוחי שדרתי היה מינימלי. לא אירעו מקרי מוות מופעיתים או פציעות לתעלה האחורי בחצי-עיגול שהתרחשה במדגם. השיטה המוצגת ממחישה דרך בטוחה ואמינה כדי לגרום הידרופס endolymphatic בנקודת זמן מהירה יחסית של 30 ימים. ההשלכות הקליניות הן כי השיטה המוצגת מספקת מודל אמין כדי לחקור עוד יותר את המקורות של אובדן שמיעה בתדר נמוך, כי יכול להיות משויך הידרוps endolymphatic.
Introduction
הידרו-משאבה מהווה הגדלה. של מדיית סקאלה ניתן למדוד את הנוכחות של הידרופס של endolymphatic באמצעות האזור הצולב של מדיה scala. הוא חשב כי הידרופס קליני endolymphatic יכול להיות קשור לאיבוד שמיעה בתדר נמוך, כמו זה נראה במחלה של מניפה. אבל המקור (ים) של אובדן השמיעה נשאר ברור. כדי ללמוד כראוי את מקורותיה של אובדן שמיעה בתדר נמוך הקשורים endolymphatic הידרופס, מודל אמין נדרש.
בשנת 1965, קימורה ושיבקרכט תיאר כיצד לגרום הידרוps endolymphatic בשפן הניסיונות באמצעות גישה חוליות1. הטכניקה שלהם מעורבת בגישה הגולגולת האחורי פוסות כדי לגשת הפעלה ו subarcuate פוסות. השלבים מעורבים בירי דורא, באמצעות המוח השני עם תמיסת כותנה ספוגה של הכפיל, וקידוח בצינור האוורור endolymphatic ואת החלק המתווך של שק endolymphatic. שעווה העצם הוצב אז לתוך הניתוח כדי להפריד את צינור האוורור endolymphatic מתוך השק המרוחק. הפגם בפתיחת הגולגולת נסגר על ידי הצבת אבקת ג'לטין שנספג (למשל, גלקצף) ומחדש את השרירים שמעליה. הראייה היסטולוגית של הידרופס של endolymphatic היה בעקביות נמצא בימים שלאחר הניתוח 1, 3, 7, 14, 21, ו 30, הוכחת כי הגישה חוליות היתה שיטה אמינה כדי לגרום היסטולוגית endolymphatic הידרופס. באמצעות אותה גישה חוליות כמו קימורה ושלבקרכט, אבל עם נקודות זמן שונות, מלח ודמוט אישר כי מדיה scala בסיבוב השני של שבלול היה מוגדל באופן משמעותי ביום 4 ומעבר ל2. בעוד התחלואה בפועל של גרימת נוזל שדרתי (שדרתי) דליפה באמצעות הגישה החוליות של קימורה ושלכוכט לא דווחה במחקר המקורי, הנוכחות של דליפת שדרתי יכול להגביר את הסיכון של דלקת קרום הראש. יש כבר הציע כי אובדן של שדרתי שלישי יכול להוביל לזרימה של הפריה, וכתוצאה מכך התרחבות זמנית בו של הנפח endolymphatic ב שפן הניסיונות3. גישה extradural לגרימת הידרו-משאבה. תהיה אפשרות בטוחה יותר
בשנת 1989, אנדרוז ובוגדמר תיאר שתי גישות כירורגיות extradural כדי להגיע שק endolymphatic וצינור, באמצעות גישה הגולגולת פוסות האמצעי או האחורי הגולגולת פוסה הגישה, כדי להשמיד את שק endolymphatic4. הם תיארו הסרת הפעלה עם תרגיל יהלום, ולאחר מכן לקדוח את החלק המתווך של שק endolymphatic או באמצעות לבחור קנס כדי לשבש את שק הצינור endolymphatic. בשנת 1993, לי, רייט, ומאירהוף תיאר גישה דומה, אשר כללה קידוח באמצעות שק הצינורות וצינור האוורור, אבל שונה בכך שהם גם מחסומים במקביל לאמת המים השבלול5. הם הפגינו נוכחות של הידרופס endolymphatic, כפי שמוערך באמצעות היסטולוגיה, בארבעה שבועות לאחר משמיד את השק endolymphatic והפרעה האמה שבלול. Megerian ואח ' היה הראשון לפרסם מאמר וידאו הממחיש את הextradural מחלת האשכים endolymphatic וצינור כי מעורב קידוח ישירות על החלק האמצעי של האופרציה להיכנס לתוך השק endolymphatic ו צינור6. הם הפגינו ראיות היסטולוגית של הידרוps endolymphatic ב שפן ניסיונות הוקרב ב 28 שבועות לאחר הניתוח, כמו גם אובדן שמיעהבאזור kHz16. בין אם היה אפשר לגרום לההידרופס היסטולוגית ואובדן שמיעה בתדר נמוך בנקודת זמן מוקדמת באמצעות extradural גישות לא היה ידוע.
המטרה הכוללת של דו ח זה היא להדגים גישה extradural כדי לגרום הידרו הניסוי endolymphatic ב 30 ימים לאחר הניתוח על ידי משמיד את הסאק endolymphatic ופצעו את צינור האוורור endolymphatic עם בוחר דק. הרציונל מאחורי השימוש בטכניקה זו הוא היתרון של הימנעות הצורך לקדוח על עצם הרקה הפטתית, ובכך להסיר את הסיכון של פגיעה בשוגג בדורא וגרימת דליפה מנוזל שדרתי, להפחית את האפשרות לפגוע בתעלת חצי-העיגול האחורי, ולצמצם את הסיכון לפציעה בסינוס החותם.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
כל ההליכים המפורטים להלן בסעיף הפרוטוקול נערכו כמתואר בפרוטוקולים שאושרו על-ידי אוניברסיטת וושינגטון בוועדת הטיפול והשימוש בבעלי חיים מוסדיים בסנט לואיס.
1. הרדמה וניטור של סימנים חיוניים
הערה: מחקר זה משמש פיגמנט NIH-זן שרקנים שהתקבלו ממושבה רבייה בבית.
- השתמש שרקנים של שני המין, במשקל לפחות 350 g.
- מניחים את השפן השפן בהתחממות התינוק ומעניקים לintraperitoneally תערובת קטמין/קסילטין (50 מ"ג/ק"ג ו -10 מ"ג/ק"ג) להרדמה השראה. שימו לב לשפן הניסיונות עד. שיאבד את רפלקס הבוהן
- פעם אחת הפסד של רפלקסים הבוהן-צביטה מתרחשת, לגלח את הצוואר האחורי ואת ראשו של חזיר גינאה עם קוצץ שיער בדרך כלל מפורסם לשימוש אנושי.
- הכנס לתוך החלק האחורי של החיה את התמיסה התת-עורית של 12 מ ל.
- מקום את השפן הניסיונות פרקדן על משטח התחממות עם הרגליים הרים והמקום 27.5 G פרפר המחט intraperitoneally. ודאו שמחט הפרפר נמצאת במצב הנכון בחלל התוך-הצפק, על-ידי הבטחת האוויר בלבד. אם הדם או הנוזלים מתים, יש חשש למסירה לתוך מערכת כלי הדם או המעיים. מחט פרפר משמש לניהול חוזר של הרדמה.
- הפוך את שפן הניסיונות אל התנוחה הנוטה ולאבטח את הראש למחזיק סטרטקטיקה.
- . לאבטח את הדופק ברגל אם באמצעות שרקנים פיגמנט, כפות פיגמנט יכול למנוע קריאת רוויית חמצן. לכן, מניחים את הדופק אוקסימטר על כל כפה כי הוא לא פיגמנט.
- הכנס בדיקה בטמפרטורה רקטלית כדי לפקח על טמפרטורת הגוף. בדיקה רקטלית היא חלק ממערכת שמיכה מחמם השומרת על טמפרטורת הגוף ב 38 ° c. אל תפעיל את השמיכה התחממות עד הבדיקה רקטלית היא במקום כדי למנוע התחממות יתר של שמיכת ההתחממות. אם יש קושי להציב את המקדח רקטלי, זה יכול להיות הניח לצד הגוף של חזיר גינאה.
- החלת חומר סיכה על שתי העיניים של חזיר הגינאה כדי למנוע שריטות הקרנית.
- לנהל חמצן משלים לפי הצורך באמצעות אבובים גומי ממוקם ליד האף כדי לשמור על רמת החמצן ברמות מעל 90%.
- תן enrofloxacin 0.5 מ"ג/ק"ג תת-עורי כריפוי אנטיביוטי מונע.
- תן 0.25 מ"ג/ק"ג bupi, עם 1:100,000 אדרנלין תת-עורי באתר החתך הצפוי עבור הרדמה מקומית ואפקטים vasoconstrictive.
- לספק הרדמה תחזוקה כל 20 דקות עבור 4 מחזורים ולאחר מכן רק לפי הצורך בהתבסס על סימנים חיוניים. מפקחים באופן שגרתי על עומק ההרדמה על-ידי טמפרטורת גוף, קצב נשימה, רוויית חמצן וקצב לב.
- נטר סימנים חיוניים כל 15 דקות (טמפרטורה, קצב נשימה, קצב לב ורוויית חמצן).
2. הכנה כירורגית
- לאחר ראש שפן גינאה ממוקם באופן מאובטח במחזיק סטרטקטיקה, מקום פיסת סרט מיסוך על הגב כדי לספק מתח מספיק לאורך העור על גבי occiput. אבטח את קצות הקלטת למחזיק הסטריאוטקטיקה.
- ליברלי להכין את העור על גבי הצוואר האחורי occiput עם הפתרון יוד ו 70% אתנול בצורה סטרילית שלוש פעמים.
- בשלב זה, השתמש באמצעי זהירות סטריליים ובמכשירים אוטוקליים. מניחים וילונות סטריליים. על שפן הניסיונות
3. נוהל כירורגי
- באמצעות להב 15, לעשות חתך קטן, קו האמצע לאורך הocciput האחורי הארכת לתוך הצוואר האחורי. לנתק את השרירים האחוריים. הימניים מעצם העורף אם מתרחשת דימום כלשהו במהלך חיתוך השרירים, שליטה על ידי הפעלת לחץ עם כדור כותנה סטרילי.
-
באמצעות שילוב של #3 mm, #2 מ"מ, ומ#1 בר יהלום מילימטר עם יניקה 5-0 והשקיה סטרילית, לבצע פיום הגולגולת כי הוא מוגבל על ידי הסמל העורף החיצוני, הרכס הלבואידית, קו תפר occipitomastoid, ואת השוליים העליונים של מגנום foramen.
- מניחים בעדינות חתיכה קטנה של כדור כותנה מלוחים הלחלח מתחת לעצם תוך הפרדת עצם העורף מתוך הדורא.
- ששלד את הסינוס סיגמואיד עם בור #0 0.5 מ"מ היהלום ובזהירות להסיר את העצם על גבי זה.
- לאחר הסינוס החותם נחשף, בעדינות לבטל את הסינוס סיגמואיד באמצעות כדור כותנה ולעבור באמצעות שאיבה 3-0.
- לזהות את האופרנה כמו מבנה החריץ כמו ממוקם בתוך עצם הרקה הפטתית. הsubarcuate פוסות יהיה ממוקם בניצב והסינוס הסיגמואלי יהיה האמצעי אליו. Osseous החלק הנוסף של הצ האנדולימפ הוא לאחר מכן מדמיין כמו שק ברור הנכנסים האופרטיות ומחובר לדורא על גבי הסינוס סיגמואיד. המבצע הוא בצורת אליפסה, כ 3 עד 4 מ"מ על ידי 1.5 כדי 2 מ"מ. עם זאת, כפי שנראה מהנוף הכירורגי, הפעולה מופיעה כ-1 מ"מ בקירוב. החלק הנראה של השק מהתצוגה הכירורגית הוא בערך בגודל זהה לחלק הנראה של האופרנה, אם לא קטן יותר.
-
להחיל את הנסיגה העדינה על הסינוס סיגמואיד מדיה כדי להמחיש בבהירות את החלק הנוסף osseous של שק endolymphatic ולהגדיל את המתח בין extraosseous ו intraosseous חלקים של שק endolymphatic.
- השתמש זווית דק לקטוף למחוק בעדינות את החלק המתווך של השק endolymphatic. חשוב להניח כי התהליך הexpungement אינו מותיר קשר גלוי בין הדורא לבין הפעלה; לאחר מכן מניחים לבחור מצוין בתוך הפעולה לגרד באופן נרחב לאורך החלק הפנימי של העצם כדי לפצוע אותו.
- להפוך את הבחור היפה לכיוון של צינור endolymphatic ולשבש בעיוורון את רירית. בשלב זה עלול להתרחש דימום מכלי קיבול בתוך הפעולה. ניתן לשלוט בו. עם פיסת כותנה קטנה
- יבש את המבצע הריק עם פיסת כותנה קטנה. באמצעות שאיבה 3-0 כנדרש כדי לשמור את הכותנה יבשה.
- להשיג אבק העצם באמצעות מכוש קטן לגרד לאורך החלק הsquamosal של עצם הרקה. לארוז בנדיבות את. המבצע עם אבק העצמות השתמש כדור כותנה ויניקה כדי לשמור על האזור יבש תוך אריזת זה עם אבק העצם.
- החלת שעוות עצם על המבצע כדי לאטום אותו. ודא שאין שעווה בעצם עודפת לתוך הגולגולת.
- להשתמש בשעווה העצם כדי לכסות את המום הגולגולת.
- משוער את שרירי צוואר הרחם האחורי עם 4-0 קלועה, תפר נספג בצורה הופסקה.
- בצע סגירה תת-מולקולרית באמצעות תפר מ4-0, שנספג בתפרים.
4. טיפול פוסט-procedure
- הסירו את שפן הניסיונות מבעל הסטריאוטקטיקה המותאם אישית והעבירו לאויולט מחממת.
- תנו 2 מ"ג/ק"ג אטיפיאזול ו -24 מ ל של תמיסת הרטמן (תת-עורי הרחק מהחתך). החלק את התמיסה של הכפיל בגלל השפעות השתן של קסילטין. ניהול 0.2 מ"ג/ק"ג מלוקסיאם תת-עורי לכיסוי כאבים שלאחר הניתוח.
- השיגו סימנים חיוניים כל 15 דקות. עד שהשפן המלא עולה מהרדמה
- תנו לעירוי נוזלים של 12 מ ל נוספים של התמיסה במשך שעתיים מסוף הניתוח במהלך תקופת ההחלמה.
- לאחר שחזיר גינאה הוא התראה, ambulating, ולאחר מכן, ולאחר תנועות המעי, להחזיר את השפן גינאה למתקן החי. בערך 2 עד 4 שעות דרושים חזיר גינאה להגיח לחלוטין מן ההרדמה.
- נטר שרקנים פעמיים ביום במשך שלושת הימים הראשונים שלאחר הניתוח. אם סימנים של אי נוחות נצפו, ניהול 0.2 מ"ג/ק"ג מלוקסיאם תת-עורי כל 24 שעות לפי הצורך. לחילופין, בופרנורפין (0.05 מ"ג/ק"ג) עשוי להיות מנוהל תת-עורי אם הסימפטומים אינם מנוהלים בצורה מספקת על ידי מלוקסיאם.
- תנו לעירוי נוזלים של 12 מ ל בתמיסה של התת-עורי פעמיים ביום עד שלושה ימים עד שהשפן הניסיונות יגיע למשקל שלפני הניתוח. אם חזיר הניסיונות מגיע למשקל טרום הניתוח שלה לפני היום השלישי שלאחר הניתוח, לאחר מכן להפסיק בולרו נוזלים. אם חזיר גינאה ממשיך לרזות לאחר שלושת הימים הראשונים, להשתמש תוספת לנער תזונה בדרך כלל מפורסם עבור צריכת האדם מעורב עם כדורי מאכל חזיר מעוך.
- לנטר שרקנים שבועיים. עד לנקודת הסיום
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
השיטה המוצגת השתמשה גישה extradural להשמיד את השק endolymphatic ולפגוע צינור endolymphatic עם בוחר יפה שבעה חזירים גינאה המורכב של שני זכרים וחמש נקבות. משך הניתוח הממוצע היה 2 שעות מחתך לסגר. זמן התרגיל הכולל נע בין 5-10 דקות. עד 4 שעות היה צורך החזיר הניסיונות לצאת לגמרי מן ההרדמה. לא היו מקרי מוות פנים-תפעוליים. או שלאחר הניתוח במדגם לא היו פציעות בתעלת החצי-עיגול האחורי או בדורא שבאחד משרקנים. הפגיעה בסינוס הסיגרית התרחשה בשפן הניסיונות היחיד (לא נכלל בניתוח הנתונים).
שרקנים עברו הליך נוסף ביום ההקרבה (יום לאחר הניתוח 30) כדי לבצע מדידות פונקציה שמיעתי שכללו את עצב השמיעה חופף צורת גל (ANOW) ו מתחם שבלול פוטנציאל פעולה (CAPs). מדידות anow וכובע נעשו, וניתוחים שבוצעו, שימוש בשיטות שתוארו בעבר7,8,9. ה-anow הוא מדידה עצבית גרידא, שמקורה בעירור העצבי בשבלולהשביעי, חצי 7,8,9. בעקבות בדיקות תפקוד השמיעה, האוזניים היו שנקטפו מיד והכין ניתוח היסטולוגית בשיטות שתוארו בעבר10. הכנה מוצלחת היסטולוגית הושלמה בשש אוזניים, אבל אוזן אחת הראה דמעות בקרום של רייזנר. האוזן עם דמעות חוסלה מניתוח היסטולוגית אבל נשמר בניתוח פיזיולוגי. האזור הצולב של מדיית סקאלה נמדד באמצעות ImageJ11. ניתוח היסטולוגית של עצמות הזמן חשף הידרופים endolymphatic ב -6 מתוך שבעה שרקנים ברחבי שבלול הנכון לעומת שבלול שמאל (איור 1). באיור 1, מדיה סקאלה לחצות את האזור על המופעל, האוזן הימנית (אדום) מוגדל לעומת הצלעות, האוזן השמאלית (כחול), הדגמת endolymphatic הידרופס באוזן הימנית. האזור הצולב של מדיה סקאלה בכל סיבוב היה גם כימות ולעומת שליטה שרקנים (איור 2). מדדים מאוזן אחת לא נכללו באיור 2 בשל בעיית הכנה היסטולוגית שגרמה לקרום של רייזנר להיקרע. שליטה שרקנים שעברו ניתוח מזויף (שבו שקי endolymphatic זוהו אך לא מופרע) או לא עברו ניתוח אחר מאשר זה צריך לעשות צעדים פונקציה שמיעתי. בהשוואה לשליטה, האזור החוצה חתך היה בדרך כלל גדול יותר באוזניים ששרדו 30 ימים לאחר החלת מחלת האשכים של endolymphatic (איור 2). ספי ANOW (≤ 1 kHz) גדלו בשש מתוך שבעה שרקנים שהפגינו הידרו הידרופס של endolymphatic לעומת לשלוט שרקנים, הפגנת נוכחות של אובדן שמיעה בתדר נמוך (איור 3). גל 1 של התגובה השמיעה גזע שמיעתי, או הפעולה המתחם שבלול פוטנציאל (CAP), ספי היו בתוך טווח נורמלי על תדרים מעל 8 kHz בשש מתוך שבעה חזירים גינאה (איור 3).
איור 1: תמונות היסטולוגית של חתך אמצע מודיאולאר של שבלול חזיר גינאה. זה חזיר שפן שרדה 30 ימים לאחר מחלת ה, של הצ endolymphatic באמצעות גישה extradural. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 2: האזור הצולב של מדיה scala כפונקציה של אורך שבלול. מדדים שישה מתוך שבעה אוזניים נפרדות באדום. קווים מקווקווים אפורים מייצגים סטיית תקן של ± 1 של מדדים מאוזני הבקרה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 3: מדידות פונקציה שמיעתי (ANOW ו-CAPs) נמדד ביום שלאחר הניתוח 30. מדדים ANOW הם ≤ 1 kHz ו-CAP נעשו > 1 kHz. מדדים מאוזניים בודדות באדום. קווים מקווקווים אפורים מייצגים סטיית תקן של ± 1 של ספי עבור שליטת שרקנים. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
השיטה המוצגת extradural היה שיעור הצלחה של 86% בהשגת הידרופס היסטולוגית endolymphatic ואובדן שמיעה בתדר נמוך. השיטה באופן מהימן השיגה ראיות היסטולוגית של הידרופס של endolymphatic על ידי יום שלאחר הניתוח 30, עקבי עם מחקרים קודמים שהשתמשו בגישה חוליות2. משמעות השיטה ביחס לשיטות הקיימות היא שדליפת נוזל שדרתי אינה נדרשת, ובכך הסרת משתנה מייסד פוטנציאלי שהוצע לגרום לפיצוי, התרחבות זמנית של אמצעי האחסון האנדוליטיים3. בסך הכל, השיטה ממחישה דרך מהירה, בטוחה ואמינה כדי לגרום הידרופס ניסיוני endolymphatic.
לשיטה המוצגת מספר עוצמות בהשוואה ללימודים קודמים. ראשית, הגישה הייתה מextradural, מזעור התחלואה הפוטנציאלית והשפעות מייסדים של דליפת שדרתי. שנית, באמצעות לבחור בסדר במקום מקדחה למחוק את השק endolymphatic ולפצוע את צינור האוורור endolymphatic, השיטה מונעת כל פציעה פוטנציאלית לתעלה האחורי חצי עגול. צעד קריטי אינו מבטיח שום קשר גלוי בין הדורא לבין הפעולה. שלישית, באמצעות בוחר משובח בעצם הרקה במקום בתרגיל, השיטה ממזערת את הפוטנציאל לטראומה אקוסטית שנגרמה על-ידי קידוח על עצם הרקה הפטתית. לבסוף, השיטה מספקת פרוטוקול בעלי חיים אופטימיזציה פרי ממוטב כדי להבטיח התאוששות מהירה ומוצלחת שלאחר הניתוח מסלול של שרקנים. מגבלה של השיטה היא השימוש בקטמין/xylazine, אשר ניתן להתגבר על ידי שימוש במכשיר סטריאוטקאלי המאפשר משלוח של isofלוריאן.
ההשלכות המדעיות של התוצאות הן התפתחות של דרך בטוחה ואמינה כדי לגרום הידרופס endolymphatic בנקודת זמן מהירה יחסית של 30 ימים. ההשלכות הקליניות הן כי השיטה מספקת מודל אמין של הידרופס endolymphatic כדי לחקור עוד יותר את מקורותיה של אובדן שמיעה הקשורים בתדר נמוך. היישומים העתידיים של השיטה ישמשו לחקר נוסף את המקור (עם) של אובדן שמיעה בתדר נמוך הקשורים endolymphatic הידרופס. לסיכום, השיטה המוצגת היא שונה העורף, גישה extradural שמערבת משמיד את השק endolymphatic ופצעו את צינור האוורור endolymphatic עם להרים קנס כדי לגרום הידרופס ניסיוני endolymphatic ב 30 ימים פוסט-הפעלה של חזיר גינאה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
. למחברים אין מה לגלות
Acknowledgments
אנו מודים לשאנון מ. לפלר לקבלת סיוע באיורים וברשימת החומרים. מחקר שדווח בפרסום זה נתמך על ידי המכון הלאומי של חירשות והפרעות תקשורת אחרות בתוך המוסדות הלאומיים לבריאות, באמצעות "פיתוח של המרפאה/חוקרים האקדמית" מענק הכשרה, הפרס מספר T32DC000022 (C.V.V.) ועל ידי R01 DC014997 (J. T. L). התוכן הינו באחריות המחברים בלבד ואינו מייצג בהכרח את ההשקפות הרשמיות של המכון הלאומי לבריאות.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 12 mL syringe | Henke-Sass Wolf | 5100-X00V0 | |
| 1 mL and 3 mL syringe | BD Precision(Ordered from Fischer Sci) | 14-826-87 15859152 | |
| 27.5 butterfly gauge needle | Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson) | 448407 | |
| 4-0 suture | McKesson | 1034507 | |
| 4 x 4 gauze sponges | Dukal (Ordered form McKesson) | 374454 | |
| 60 mL syringe | Fisher Sci | 22-031-375 | |
| Anspach otologic drill | Anspach | SC2100 | |
| atipamezole | Zoetis | 107204-6 | |
| autoclave | Fisher sci | 15-103-0508 | |
| autoclave bags | McKesson | 524881 | |
| bayonet separator | Olympus | AL 130564 | |
| bupivicaine | auro Medics Pharma | 555150-169-10 | |
| clear sterile drape | 3M | 1020 | |
| cotton balls | Fisherbrand (ordered from Fisher Sci) | 22-456-885 | |
| cotton swabs | McKesson | 508716 | |
| diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm | Anspach | QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD | |
| diaper pad | McKesson | 945330 | |
| disposable 15 blade | Swann-Morton | 0305 | |
| enrofloxacin | Hospira | 0409-4888-01 | |
| epinephrine | McKesson | 63739-0456 | |
| eye ointment | Dechra Vet Products | 17033-211-38 | |
| Freer elevator | Grace Medical | 215100FX | |
| gelfoam | Pfizer (Ordered from McKesson) | 82830 | |
| hair trimmers | Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon) | 078400-020-000 | |
| iodine scrub | Purdue Pharma (ordered from mcKesson) | 521243 | |
| iris scissors | Olympus | CL-542114 | |
| ketamine | Henry Schein Animal Health | 55853 | |
| lactated ringers | B. Braun Medical (ordered from McKesson) | 186662 | |
| lancet knife by Rosen | Grace Medical | 151100FX | referred to as curette in the text |
| lubricant | Milex (ordered from Cooper Surgical) | MX5030 | |
| masking tape | 3M (ordered from fisher sci | 19047259 | |
| metal rectangle basin | Amazon | B07NQDBC6T | |
| needle holder | Olympus | CR 213015-ENT | |
| needles: 27 gage, 18 gauge | BD Precision(Ordered from Fischer Sci) | 14-826-48 14-826-5D | |
| neonatal warming isollete | Air Borne Life Support Systems | 731-1800 | |
| operating microscope | Carl Zeiss | OPMI pico | |
| oxygen tank | AirGas | OX USP200 | |
| pulse ox | CapnoTrue (Ordered from Medacx) | M-3090112001 | |
| rectal probe with heating blanket | Harvard Apparatus | probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214 | |
| red body holder | Lichtenhan Lab | N/A | In-house product |
| right angle | Olympus | BV-230337 | |
| rosen needle | Olympus | AM-130566 | customized, it is the instrument I use to tear the sac |
| rubber tubing for O2 administration | Fisher Sci | 14-171-104 | |
| saran wrap | Fisher Sci | NC9617977 | |
| stereotactic head holder | WUSTL Instrument Machine Shop | N/A | In-house product |
| sterile drapes | Cardinal Health | 7553 | |
| suction tube by Baron | Grace Medical | 034903FX 034905FX | #3 and #5 Suction |
| tissue forceps adson brown | Grace Medical | 325112FX | |
| Weitlander retractor | Olympus Grace Medical | BL200011 100313FX | |
| xylazine | Akorn | 59399-110-20 |
References
- Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac. Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).
- Salt, A. N., DeMott, J. Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker. Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).
- Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study. Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).
- Andrews, J. C., Bohmer, A. The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig. American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).
- Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig. American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).
- Megerian, C. A., et al. Surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct. Journal of Visualized Experiments. (35), (2010).
- Lichtenhan, J. T., Cooper, N. P., Guinan, J. J. Jr A new auditory threshold estimation technique for low frequencies: proof of concept. Ear and Hearing. 34 (1), 42-51 (2013).
- Lichtenhan, J. T., Hartsock, J., Dornhoffer, J. R., Donovan, K. M., Salt, A. N. Drug delivery into the cochlear apex: Improved control to sequentially affect finely spaced regions along the entire length of the cochlear spiral. Journal of Neuroscience Methods. 273, 201-209 (2016).
- Lichtenhan, J. T., Hartsock, J. J., Gill, R. M., Guinan, J. J. Jr, Salt, A. N. The auditory nerve overlapped waveform (ANOW) originates in the cochlear apex. Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 15 (3), 395-411 (2014).
- Lichtenhan, J. T., Hirose, K., Buchman, C. A., Duncan, R. K., Salt, A. N. Direct administration of 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin into guinea pig cochleae: Effects on physiological and histological measurements. PloS One. 12 (4), e0175236 (2017).
- Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis. Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).
