Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

En reviderad kirurgisk metod för att inducera endolymphatic hydrops i marsvin

Published: June 4, 2020 doi: 10.3791/60597

Summary

Denna artikel visar en extradural strategi för att utplåna marsvin endolymphatic säcken och skada endolymphatic trumman med en fin plocka för att inducera experimentella endolymphatic hydrops.

Abstract

Endolymphatic hydrops är en utvidgning av scala media som oftast förknippas med Menieres sjukdom, även om pathophysiologic mekanismen (s) fortfarande oklart. För att på lämpligt sätt studera attributen för endolymphatic hydrops, såsom ursprunget till lågfrekvent hörselnedsättning, behövs en tillförlitlig modell. Marsvinet är en bra modell eftersom det hör i lågfrekventa regioner som är förmodat påverkas av endolymphatic hydrops. Tidigare forskning har visat att endolymphatic hydrops kan induceras kirurgiskt via intradural eller extradural metoder som innebär borrning på endolymphatic trumman och säcken. Men om det var möjligt att skapa en endolymphatic hydrops modell med hjälp av en extradural strategi som undvek farliga borrning på endolymphatic trumman och säcken var okänd. Syftet med denna studie var att visa en reviderad extradural strategi för att inducera experimentella endolymphatic hydrops vid 30 dagar postoperativt genom att utplåna endolymphatic säcken och skada endolymphatic trumman med en fin plocka. Urvalet storlek bestod av sju marsvin. Funktionella mätningar av förhandlingen gjordes och tidsmässiga ben skördades därefter för histologic analys. Tillvägagångssättet hade en framgång på 86% för att uppnå endolymphatic hydrops. Risken för ryggmärgsvätska läcka var minimal. Inga perioperative dödsfall eller skador på den bakre halvcirkelformade kanalen inträffade i provet. Den presenterade metoden visar ett säkert och tillförlitligt sätt att inducera endolymphatic hydrops vid en relativt snabb tidpunkt på 30 dagar. De kliniska konsekvenserna är att den presenterade metoden ger en tillförlitlig modell för att ytterligare utforska ursprunget till lågfrekvent hörselnedsättning som kan associeras endolymphatic hydrops.

Introduction

Endolymphatic hydrops är en utvidgning av scala media. Förekomsten av endolymphatic hydrops kan mätas med hjälp av tvärsnittsområdet scala media. Det är tänkt att kliniska endolymphatic hydrops kan associeras med lågfrekventa sensorineural hörselnedsättning, såsom den som ses i Meniere sjukdom. Men ursprunget (s) av hörselnedsättningen är fortfarande oklart. För att på ett adekvat sätt studera ursprunget till lågfrekvent hörselnedsättning i samband med endolymphatic hydrops, en tillförlitlig modell behövs.

År 1965 beskrev Kimura och Schuknecht hur man inducerar endolymphatic hydrops i marsvin med hjälp av en intradural strategi1. Deras teknik inblandade med hjälp av en bakre hjärnskålen fossa strategi för att komma åt operculum och subarcuate fossa. Stegen innebar att incising dura, dra in lillhjärnan med en Ringer lösning indränkt bomullstuss, och borrning över endolymphatic trumman och den mellanliggande delen av endolymphatic säcken. Ben vax placerades sedan i operculum att skilja endolymphatic trumman från distala endolymphatic säcken. Kraniotomy defekten stängdes genom att placera absorberbara gelatin pulver (t.ex. Gelfoam) och reapproximating överliggande muskler. Histologic bevis på endolymphatic hydrops hittades konsekvent på postoperativa dagar 1, 3, 7, 14, 21 och 30, visar att intradural metoden var en tillförlitlig metod för att inducera histologically-bekräftade endolymphatic hydrops. Med samma intradural strategi som Kimura och Schuknecht, men med olika tidpunkter, Salt och DeMott bekräftade att scala media i andra sväng av snäckan var betydligt utvidgas på dag 4 och därefter2. Medan den faktiska sjukligheten att inducera en cerebrospinalvätska (CSF) läcka med Kimura och Schuknecht s intradural strategi rapporterades inte i den ursprungliga studien, förekomsten av en CSF läcka kan öka risken för hjärnhinneinflammation. Det har föreslagits att förlust av CSF kan leda till ett utflöde av perilymph, vilket resulterar i en samtidig tillfällig expansion av den endolymphatic volymen i marsvin3. En extradural strategi för att inducera endolymphatic hydrops skulle vara ett säkrare alternativ.

I 1989, Andrews och Bohmer beskrev två extradural kirurgiska metoder för att nå endolymphatic säcken och kanalen, via antingen en mellersta hjärnskålen fossa strategi eller bakre hjärnskålen fossa strategi, att utplåna endolymphatic sac4. De beskrev att ta bort operculum med en diamant borr, och sedan antingen borra bort den mellanliggande delen av endolymphatic säcken eller använda en fin plocka för att störa endolymphatic säcken och trumman. I 1993, Lee, Wright, och Meyerhoff beskrev ett liknande tillvägagångssätt, som inkluderade borrning genom den endolymphatic säcken och kanalen, men skilde sig i att de också samtidigt blockerade cochlear akvedukten5. De visade förekomsten av endolymphatic hydrops, som bedöms via histologi, vid fyra veckor efter utplåna endolymphatic säcken och hindrar cochlear akvedukten. Megerian et al. var den första att publicera en video artikel som visar en extradural obliteration av endolymphatic säcken och kanal som innebar borrning direkt på den mediala delen av operculum att gå in i endolymphatic säcken och kanal6. De visade histologic bevis på endolymphatic hydrops i ett marsvin offras vid 28 veckor efter operationen, samt hörselnedsättning i 16 kHz region6. Huruvida det var möjligt att inducera histologiskt bekräftade endolymphatic hydrops och lågfrekvent hörselnedsättning vid en tidig tidpunkt med extradural metoder var okänd.

Det övergripande målet med denna rapport är att visa en extradural strategi för att inducera experimentella endolymphatic hydrops på 30 dagar postoperativt genom att utplåna endolymphatic säcken och skada endolymphatic trumman med en fin plocka. Logiken bakom användningen av denna teknik är fördelen med att undvika behovet av att borra på petrous tinningben, vilket tar bort risken för att oavsiktligt skada dura och orsakar en CSF läcka, mildra möjligheten att skada den bakre halvcirkelformade kanalen, och minska risken för skador på sigmoid sinus.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alla förfaranden som anges omedelbart nedan i protokollet avsnitt genomfördes som beskrivs i protokoll som godkänts av Washington University i St Louis Institutional Animal Care and Use Committee.

1. Bedövningsinduktion och övervakning av vitala tecken

OBS: Denna studie använde pigmenterade NIH-stam marsvin som erhållits från en in-house avel koloni.

  1. Använd marsvin av båda könen och väger minst 350 g.
  2. Placera marsvinet i en neonatal uppvärmning isolette och ge en ketamin/xyazin blandning intraperitoneally (50 mg/kg ketamin och 10 mg/kg xyazine) för induktionsanestesi. Observera marsvinet tills det förlorar tå-nypa reflex.
  3. När förlust av tå-nypa reflexer inträffar, raka den bakre halsen och huvudet av marsvin med en hårtrimmer vanligtvis annonseras för humant bruk.
  4. Injicera en subkutan bolus på 12 ml lakterad Ringers lösning på djurets baksida.
  5. Placera marsvin supine på en värmande pad med ben upp och placera 27,5 G fjäril nål intraperitoneally. Kontrollera att fjärilsnålen är i rätt läge i det intraperitoneala utrymmet genom att säkerställa att endast luft sugs in. Om blod eller vätska sugs, det finns oro för leverans till kärl- eller tarmsystemet. Fjärilsnålen används för upprepad administrering av anestesi.
  6. Vänd marsvinet över till utsatt position och säkra huvudet till en stereotaktisk hållare.
  7. Säkra en pulsoximeter till foten. Om du använder pigmenterade marsvin, pigmenterade tassar kan förhindra att läsa syre mättnad. Placera därför pulsoximetern på någon tass som inte är pigmenterad.
  8. Sätt i en rektaltemperatursond för att övervaka kroppstemperaturen. Rektalsonden är en del av ett värmande filtsystem som håller kroppstemperaturen vid 38 °C. Slå inte på värmefilten förrän rektalsonden är på plats för att undvika överhettning av värmefilten. Om det har svårt att placera rektalsonden kan den läggas bredvid marsvinets kropp.
  9. Applicera smörjmedel på båda ögonen på marsvinet för att förhindra hornhinnans skrubbsår.
  10. Administrera extra syre efter behov via en gummislang placerad nära näsan för att upprätthålla syremättnad nivåer över 90%.
  11. Ge enrofloxacin 0,5 mg/kg subkutant som en antibiotisk profylax.
  12. Ge 0,25 mg/kg bupivacaine med 1:100,000 adrenalin subkutant vid den förväntade snittet plats för lokalbedövning och vasoconstrictive effekter.
  13. Ge underhållsanestesi var 20:e minut i 4 cykler och sedan endast efter behov baserat på vitala tecken. Övervaka rutinmässigt djupet av anestesi av kroppstemperatur, andningshastighet, syremättnad och hjärtfrekvens.
  14. Övervaka vitala tecken var 15:e minut (temperatur, andningsfrekvens, puls och syremättnad).

2. Kirurgisk förberedelse

  1. När marsvinets huvud är placerat säkert i en stereotaktisk hållare, placera en bit maskeringstejp över ryggen för att ge tillräcklig spänning längs huden överliggande occiput. Fäst bandets ändar på stereotaktshållaren.
  2. Frikostigt prep huden överliggande occiput och bakre hals med jod lösning och 70% etanol på ett sterilt sätt tre gånger.
  3. Vid denna punkt, använd sterila försiktighetsåtgärder och autoklaverade instrument. Placera sterila draperier över marsvinet.

3. Kirurgiskt ingrepp

  1. Använd en 15 blad, gör en liten, mittlinje snitt längs den bakre occiput sträcker sig ner i den bakre halsen. En gång under huden, använd iris sax för att lossa den högra bakre livmoderhalscancer muskler från occipital ben. Om någon blödning uppstår när du skär musklerna, kontrollera genom att tillämpa tryck med en steril bomullstuss.
  2. Med hjälp av en kombination av en #3 mm, #2 mm och #1 mm diamantgrader med en 5-0 sug- och steril bevattning, utför en kraniotomi som avgränsas av det yttre occipital crest, lamboidalåsen, occipitomastoidsuturlinjen och dorsalamarginalen för foramenmagnum.
    1. Placera försiktigt en liten bit saltlösningsfuktad bomullstuss under benet samtidigt som duparering av occipitalbenet separeras från duran.
  3. Skeletonize sigmoid sinus med en #0,5 mm diamant burr och försiktigt ta bort benet överliggande den.
  4. När sigmoid sinus exponeras, försiktigt dra tillbaka sigmoid sinus mediat med hjälp av en bomullstus och växla till att använda en 3-0 sug.
  5. Identifiera operculum som en slits som struktur som ligger inom petrous tinningben. Den subarcuate fossa kommer att ligga överlägsen och sigmoid sinus kommer att vara mediala till det. Den extra osseous delen av endolymphatic säcken visualiseras sedan som en klar säck in i operculum och fäst vid dura överliggande sigmoid sinus. Operculum är ovalt, ca 3 till 4 mm med 1,5 till 2 mm. Men sett från den kirurgiska vyn, verkar operculum som en ungefärlig 1 mm slits. Den synliga delen av säcken från den kirurgiska vyn är ungefär lika stor som den synliga delen av operculum, om inte mindre.
  6. Applicera mild upprullning på sigmoid sinus medialt för att tydligt visualisera den extra osseous delen av den endolymphatic säcken och öka spänningen mellan de extraosseous och intraosseous delarna av den endolymphatic säcken.
    1. Använd en fin vinklad plocka för att försiktigt utplåna den mellanliggande delen av endolymphatic säcken. Det är kritiskt att expungementprocessen inte lämnar någon synlig koppling mellan dura och operculum; sedan placera en fin plocka inuti operculum att i stort sett skrapa längs insidan av benet för att skada den.
    2. Vrid fina plocka i riktning mot endolymphatic trumman och blint störa fodret. Vid denna punkt kan viss blödning uppstå från ett kärl inom operculum. Den kan styras med en liten bit bomull.
  7. Torka den tomma operculum med en liten bit bomull. Använd 3-0 sug som behövs för att hålla bomullen torr.
  8. Få bendamm genom att använda en liten curette för att skrapa längs den squamosal delen av tinningbenet. Generöst packa operculum med bendamm. Använd en bomullstuss och sug för att hålla området torrt medan du packar det med bendamm.
  9. Applicera benvax på operculum för att försegla den. Se till att det inte finns något överskott av benvax som lossnat i skallen.
  10. Använd benvax för att täcka skalldefekten.
  11. Approximera de bakre livmoderhalsmusklerna med 4-0 flätade, absorberbara sutur i en avbruten mode.
  12. Utför en subkuticular stängning med en 4-0 flätad, absorberbar sutur.

4.

  1. Ta bort marsvin från den anpassade stereotaktiska innehavaren och överför till en värmande isolette.
  2. Ge 2 mg/kg Atipamezole och 24 ml lakterad Ringers lösning (subkutant bort från snittet). Ge lakterad Ringers lösning på grund av de urindrivande effekterna av xyyzin. Administrera 0,2 mg/kg meloxikam subkutant för postoperativ smärtstillande täckning.
  3. Få vitala tecken var 15: e minut tills marsvinet helt kommer ut ur anestesi.
  4. Ge ytterligare 12 ml vätska bolus av lakterad Ringer lösning ca 2 timmar från slutet av operationen under återhämtningsperioden.
  5. När marsvinet är alert, ambulating, makulerar, och med tarmrörelser, tillbaka marsvin till djuranläggningen. Cirka 2 till 4 timmar behövs för att marsvinet ska dyka upp helt från anestesi.
  6. Övervaka marsvin två gånger dagligen under de tre första postoperativa dagarna. Om tecken på obehag observeras, administrera 0,2 mg/kg meloxicam subkutant var 24:e timme efter behov. Alternativt kan buprenorfin (0,05 mg/kg) administreras subkutant om symtomen inte hanteras tillräckligt av meloxicam.
  7. Ge en 12 ml-vätska bolus av lakterad Ringers lösning subkutant två gånger om dagen i upp till tre dagar tills marsvinet når den föroperativa vikten. Om marsvinet når sin preoperativa vikt före den tredje postoperativa dagen, stoppa sedan vätskeboluss. Om marsvin fortsätter att gå ner i vikt efter de första tre dagarna, använda ett tillägg näringsskakning vanligtvis annonseras för konsumtion blandas med krossade marsvin mat pellets.
  8. Övervaka marsvin varje vecka fram till slutpunkten.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Den presenterade metoden används en extradural strategi för att utplåna endolymphatic säcken och skada endolymphatic trumman med en fin plocka i sju marsvin bestående av två hanar och fem honor. Den genomsnittliga varaktigheten av kirurgi var 2 timmar från snitt till stängning. Den totala borrtiden varierade från 5-10 minuter. Upp till 4 timmar behövdes för marsvinet att helt komma ut ur anestesi. Det fanns inga intraoperativa eller postoperativa dödsfall i provet. det fanns inga skador på den bakre halvcirkelformade kanalen eller dura i någon av marsvin. Skada till sigmoiden sinus uppstod i den en marsvin (uteslutet från dataanalysen).

Marsvinen genomgick ett andra förfarande på offerdagen (postoperativ dag 30) för att göra auditiva funktionsmätningar som inkluderade auditiva nervöverlappade Waveform (ANOW) och cochlear sammansatta åtgärder potentialer (CAPs). ANOW- och CAP-mätningar gjordes och analyser utfördes med metoder som beskrivits tidigare7,,8,9. ANOW är en rent neural mätning som kommer från neural excitation i den apikala cochlear halv7,8,9. Efter hörselfunktionens tester skördades öronen omedelbart och förbereddes för histologisk analys med metoder som tidigare beskrivits10. Framgångsrika histologiska beredning slutfördes i sex öron, men ett öra visade tårar i Reisner membran. Örat med tårar eliminerades från histologiska analys men hålls i fysiologisk analys. Det tvärsnittsareal område av scala media mättes med bildJ11. Histologic analys av temporala ben visade endolymphatic hydrops i sex av de sju marsvin i hela högra snäckan jämfört med den vänstra snäckan (Figur 1). I figur 1förstoras det halviska medietvärsnittsområdet på det manövrerade högra örat (rött) jämfört med det kontralaterala, vänstra örat (blått), vilket visar endolymphatic hydrops i höger öra. Tvärsnittsområdet för scala media över varje sväng kvantifierades också och jämfördes med kontrollförsökskaniner (figur 2). Åtgärder från ett öra ingick inte i figur 2 på grund av ett histologiskt preparatproblem som fick Reisners membran att riva. Kontroll marsvin hade antingen genomgått skenkirurgi (där de endolymphatic säckarna identifierades men inte störts) eller hade inte genomgått någon annan operation än den som behövs för att göra auditiva funktion åtgärder. Jämfört med kontrollen var tvärsnittsområdet i allmänhet större i öronen och överlevde 30 dagar efter utplåning av den endolymphatic säcken (figur 2). ANOW-trösklar (≤1 kHz) höjdes hos sex av sju marsvin som demonstrerade endolymphatic hydrops jämfört med kontrollförsöksvin, vilket visar förekomsten av lågfrekvent hörselnedsättning (figur 3). Våg 1 av den auditiva hjärnstammen svar, eller cochlear sammansatta åtgärder potential (CAP), trösklar var inom det normala intervallet vid frekvenser över 8 kHz i sex av de sju marsvin (Figur 3).

Figure 1
Figur 1: Histologic bilder av en mitten-modiolar snitt av marsvin cochlea. Detta marsvin överlevde 30 dagar efter utplåning av endolymphatic säcken med hjälp av en extradural strategi. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 2
Figur 2: Tvärsnittsområde av scala media som en funktion av cochlear längd. Åtgärder från sex av sju enskilda öron är i rött. Gråstreckade linjer representerar ±1 standardavvikelse för mått från kontrollöronen. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 3
Figur 3: Mätning av hörselfunktion (ANOW och CAP) mätt på postoperativ dag 30. ANOW-måtten är ≤1 kHz och åtgärder inom den gemensamma jordbrukspolitiken har vidtagits >1 kHz. Åtgärder från enskilda öron är i rött. Gråstreckade linjer representerar ±1 standardavvikelse för tröskelvärden för kontrollförsöksvin. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Den presenterade extradural metoden hade en framgång på 86% för att uppnå histologiskt bekräftade endolymphatic hydrops och lågfrekvent hörselnedsättning. Metoden uppnådde tillförlitligt histologiska bevis på endolymphatic hydrops av postoperativ dag 30, överensstämmer med tidigare studier som använde en intradural metod2. Metodens betydelse för befintliga metoder är att det inte krävs en GSR-läcka, vilket undanröjer en potentiell förvirrande variabel som har föreslagits för att leda till en kompensatorisk, tillfällig expansion av den endolymphatic volymen3. Sammantaget visar metoden ett snabbt, säkert och tillförlitligt sätt att inducera experimentella endolymphatic hydrops.

Den presenterade metoden har flera styrkor jämfört med tidigare studier. För det första var tillvägagångssättet extradural, minimera de potentiella sjuklighet och störande effekterna av en CSF läcka. För det andra, genom att använda en fin plocka i stället för en borr för att utplåna endolymphatic säcken och skada endolymphatic trumman, undviker metoden eventuella skador på den bakre halvcirkelformade kanalen. Ett kritiskt steg är att säkerställa någon synlig koppling mellan dura och operculum. För det tredje, med hjälp av en fin plocka i tinningbenet i stället för en borr, minimerade metoden risken för akustisktrauma som orsakas av borrning på petrous tinningben. Slutligen ger metoden ett optimerat perioperativt djurprotokoll för att säkerställa en snabb återhämtning och framgångsrik postoperativ kurs av marsvinen. En begränsning av metoden är användningen av ketamin/xyazin, som kan övervinnas med hjälp av en stereotaxisk anordning som tillåter isofluranleverans.

De vetenskapliga konsekvenserna av resultaten är utvecklingen av ett säkert och tillförlitligt sätt att inducera endolymphatic hydrops vid en relativt snabb tidpunkt på 30 dagar. De kliniska konsekvenserna är att metoden ger en tillförlitlig modell av endolymphatic hydrops för att ytterligare utforska ursprunget till den associerade lågfrekventa hörselnedsättning. Framtida tillämpningar av metoden kommer att användas för att ytterligare studera ursprunget (er) av lågfrekvent hörselnedsättning i samband med endolymphatic hydrops. Sammanfattningsvis är den presenterade metoden en modifierad occipital, extradural strategi som innebär utplånande av endolymphatic säcken och skadade endolymphatic trumman med en fin plocka att inducera experimentella endolymphatic hydrops vid 30 dagar postoperativt i marsvin.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna har inget att avslöja.

Acknowledgments

Vi tackar Shannon M. Lefler för hjälp med siffror och tabellen över material. Forskning som rapporterats i denna publikation stöddes av National Institute of Deafness and Other Communication Disorders inom National Institutes of Health, genom "Development of Clinician / Researchers in Academic ENT" utbildningsbidrag, tilldelning nummer T32DC000022 (C.V.V.) och av R01 DC014997 (J.T.L). Innehållet är enbart författarnas ansvar och representerar inte nödvändigtvis de officiella åsikterna hos National Institutes of Health.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
12 mL syringe Henke-Sass Wolf 5100-X00V0
1 mL and 3 mL syringe BD Precision(Ordered from Fischer Sci) 14-826-87 15859152
27.5 butterfly gauge needle Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson) 448407
4-0 suture McKesson 1034507
4 x 4 gauze sponges Dukal (Ordered form McKesson) 374454
60 mL syringe Fisher Sci 22-031-375
Anspach otologic drill Anspach SC2100
atipamezole Zoetis 107204-6
autoclave Fisher sci 15-103-0508
autoclave bags McKesson 524881
bayonet separator Olympus AL 130564
bupivicaine auro Medics Pharma 555150-169-10
clear sterile drape 3M 1020
cotton balls Fisherbrand (ordered from Fisher Sci) 22-456-885
cotton swabs McKesson 508716
diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm Anspach QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD
diaper pad McKesson 945330
disposable 15 blade Swann-Morton 0305
enrofloxacin Hospira 0409-4888-01
epinephrine McKesson 63739-0456
eye ointment Dechra Vet Products 17033-211-38
Freer elevator Grace Medical 215100FX
gelfoam Pfizer (Ordered from McKesson) 82830
hair trimmers Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon) 078400-020-000
iodine scrub Purdue Pharma (ordered from mcKesson) 521243
iris scissors Olympus CL-542114
ketamine Henry Schein Animal Health 55853
lactated ringers B. Braun Medical (ordered from McKesson) 186662
lancet knife by Rosen Grace Medical 151100FX referred to as curette in the text
lubricant Milex (ordered from Cooper Surgical) MX5030
masking tape 3M (ordered from fisher sci 19047259
metal rectangle basin Amazon B07NQDBC6T
needle holder Olympus CR 213015-ENT
needles: 27 gage, 18 gauge BD Precision(Ordered from Fischer Sci) 14-826-48 14-826-5D
neonatal warming isollete Air Borne Life Support Systems 731-1800
operating microscope Carl Zeiss OPMI pico
oxygen tank AirGas OX USP200
pulse ox CapnoTrue (Ordered from Medacx) M-3090112001
rectal probe with heating blanket Harvard Apparatus probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214
red body holder Lichtenhan Lab N/A In-house product
right angle Olympus BV-230337
rosen needle Olympus AM-130566 customized, it is the instrument I use to tear the sac
rubber tubing for O2 administration Fisher Sci 14-171-104
saran wrap Fisher Sci NC9617977
stereotactic head holder WUSTL Instrument Machine Shop N/A In-house product
sterile drapes Cardinal Health 7553
suction tube by Baron Grace Medical 034903FX 034905FX #3 and #5 Suction
tissue forceps adson brown Grace Medical 325112FX
Weitlander retractor Olympus Grace Medical BL200011 100313FX
xylazine Akorn 59399-110-20

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac. Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).
  2. Salt, A. N., DeMott, J. Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker. Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).
  3. Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study. Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).
  4. Andrews, J. C., Bohmer, A. The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig. American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).
  5. Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig. American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).
  6. Megerian, C. A., et al. Surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct. Journal of Visualized Experiments. (35), (2010).
  7. Lichtenhan, J. T., Cooper, N. P., Guinan, J. J. Jr A new auditory threshold estimation technique for low frequencies: proof of concept. Ear and Hearing. 34 (1), 42-51 (2013).
  8. Lichtenhan, J. T., Hartsock, J., Dornhoffer, J. R., Donovan, K. M., Salt, A. N. Drug delivery into the cochlear apex: Improved control to sequentially affect finely spaced regions along the entire length of the cochlear spiral. Journal of Neuroscience Methods. 273, 201-209 (2016).
  9. Lichtenhan, J. T., Hartsock, J. J., Gill, R. M., Guinan, J. J. Jr, Salt, A. N. The auditory nerve overlapped waveform (ANOW) originates in the cochlear apex. Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 15 (3), 395-411 (2014).
  10. Lichtenhan, J. T., Hirose, K., Buchman, C. A., Duncan, R. K., Salt, A. N. Direct administration of 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin into guinea pig cochleae: Effects on physiological and histological measurements. PloS One. 12 (4), e0175236 (2017).
  11. Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis. Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).

Tags

Neurovetenskap Endolymphatic hydrops endolymphatic sac obliteration endolymphatic sac ablation Audity Nerve Overlapped Waveform djurmodell av Meniere sjukdom extradural tillvägagångssätt
En reviderad kirurgisk metod för att inducera endolymphatic hydrops i marsvin
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Valenzuela, C. V., Lee, C., Buchman, More

Valenzuela, C. V., Lee, C., Buchman, C. A., Lichtenhan, J. T. A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig. J. Vis. Exp. (160), e60597, doi:10.3791/60597 (2020).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter