Summary
Forekomsten av diabetes og fedme øker kontinuerlig over hele verden. Mekanismene mellom diabetes, fedme og tilhørende dødelighet og tilleggslidelser må undersøkes videre. Her presenterer vi en protokoll for ermet gastrektomi (SG) hos dyr som en ukomplisert preklinisk modell for bariatrisk kirurgi.
Abstract
Antall personer som er overvektige og overvektige øker kontinuerlig både i voksne og unge populasjoner. Dette sammenfaller med det økte universelle fenomenet type 2 diabetes (T2D) og andre metabolske problemer. Bariatrisk kirurgi, som SG, er for tiden en av de mest effektive og brukte langsiktige behandlingen for fedme og T2D, men sammenhengen mellom dem er ikke helt utforsket ennå. Mekanismene som ligger til grunn for resultatene sett etter bariatrisk kirurgi hos mennesker, kan undersøkes basert på prekliniske dyrestudier. SG reduserer kroppsvekt, glukosenivåer og mange metabolske parametere, og er lett å utføre med lav forekomst av komplikasjoner. Målet med dette arbeidet er å gi en enkel metode og en ukomplisert preklinisk modell for bariatrisk kirurgi hos dyr for forskere.
Introduction
Forekomsten av fedme har økt nesten tredoblet over hele verden siden 1975. I 2016 var mer enn 1,9 milliarder voksne eldre enn 18 år overvektige og over 650 millioner voksne var overvektige. Utbredelsen av T2D i den voksne befolkningen har også doblet seg fra 4,7% til 8,5% med antallet stiger fra 108 millioner til 422 millioner voksne mellom 1980 og 2014 globalt1. De fleste bariatriske operasjoner resulterer i betydelig vekttap, en reduksjon av kroppsfett, og forbedring i glukosetoleranse, insulinresistens og diabeteskontroll2. I tillegg til vekttap og remisjon av T2D, gir bariatrisk kirurgi ytterligere ekstra helsemessige fordeler som hypertensjonskontroll og en lavere forekomst av visse typer fedmerelatert kreftutvikling ogprogresjon 3. Bariatrisk kirurgi induserer også holdbar fullstendig, delvis remisjon av T2D, og reduserer risikoen for ti års stor koronar hjertesykdom (CHD) og en viss grad av cerebrovaskulær risiko. De underliggende mekanismene forstås imidlertid ikke helt4.
Det er flere prosedyrer for bariatrisk/metabolsk kirurgi. Både restriktive og gastrointestinale bypass operasjoner gir positive effekter på metabolisme5. Av de bariatriske kirurgiske modellene har SG og modifisert Roux-en-Y gastrisk bypass høyere suksess og lavere dødelighet og viser pålitelige restriktive og gastrointestinale bypass kirurgi modeller hos mus6. Selv om gastrointestinal bypass kirurgi gir mer vekttap og en betydelig forbedring av glukosetoleranse og leversteatose enn restriktiv prosedyre på lang sikt, SG produserer fortsatt god kontroll over kroppsvekt og glukosenivåer og er lett å utføre med lav forekomst av komplikasjoner6. Andelen SG økte fra 30% til 54% og Roux-en-Y gastrisk bypass kirurgi redusert fra 52% til 32% fra 2008 til 20147. Foreløpig er laparoskopisk SG den mest utførte bariatriske prosedyren på nasjonalt nivå innen akademiske sentre i USA8. Selv om det har vært mange publiserte rapporter om patofysiologiske prosesser mellom bariatrisk kirurgi, diabetes og fedme, trenger vi flere dyreforsøk for å utforske ukjente mekanismer ytterligere.
Denne protokollen tar sikte på å produsere en dyr metode for å undersøke mekanismene som ligger til grunn for resultatene sett etter bariatrisk kirurgi hos mennesker. Den nåværende oversettelsesstudien kan gi innsikt i mekanismen for fedme og T2D-behandling fra SG.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle prosedyrer for dyrebruk ble godkjent av National Yang-Ming University Institutional Animal Care and Use Committee og overholdt "Guide for omsorg og bruk av laboratoriedyr. 8th utgave, 2011 ". Bedøvelsesprosedyren ble utført i henhold til retningslinjen for smertekontroll, anestesi, preoperativ og postoperativ omsorg for de eksperimentelle dyrene fra National Yang Ming University, ICAUC-016, 2015, 1st utgave.
1. Dyreforberedelse
- Få 20 8 uker gamle villtype C57BL/6 hannmus fra National Laboratory Animal Center (NLAC) som veier rundt 16-18 gram. Tilordne disse musene tilfeldig inn i SG eller sham-operasjonsgruppen med 10 mus hver.
- Start musene på chow eller et fettrikt kosthold (se Tilleggsfil) før bariatriske eller sham operasjoner9. Produser diettindusert fedme med minst 2 preoperative uker av HFD.
- Hus musene i National Yang-Ming University Laboratory Animal Center under en lys-mørk syklus på 12:12 med lys utbruddet kl 07:00 A.M. og tillate gratis fôring til standard gnager chow og vann.
- Begrens alle dyr fra mat, men gi gratis tilgang til vann natten før operasjonen.
2. Generell preoperativ forberedelse
- Rask musene i minst 6 timer før operasjonen. Induser anestesi i et induksjonskammer med 5 % isofluran og oksygen (begge 3-4 l/min).
- Kontroller dybden av anestesi som sikrer at klemmestimulering (stump buet taggete glatte mikro-tang) av bakpoten, forsagen og øret fremkaller ingen motorrefleks. Administrer antibiotika (25 mg/kg cefazolin) via subkutane injeksjoner før operasjonen.
- Tilordne en bestemt arbeidssone for kirurgiske prosedyrer. Rengjør operasjonsområdet og spray det kirurgiske bordet med 75% alkoholoppløsning før en operasjon.
- Plasser musen i nesekjeglen og vedlikehold anestesi med 2% isofluran (2 L / min) og oksygen (4 L / min).
- For ermet gastrektomi og sham operasjon, etter å ha bekreftet riktig dybde av anestesi ved tåstimulering, bruk 0,2% Karbomer øyegel på musens øyne for å forhindre tørre øyne.
- Bruk en elektrisk barberhøvel til å barbere håret fra magen til brystbenet. Fjern og rengjør det gjenværende håret med en hårfjerningskrem. Plasser og fest musen på det kirurgiske bordet i liggende stilling.
- Desinfiser bukveggen av musen med povidon-jodløsninger vekslende med 75% alkohol for 3 applikasjoner.
3. Ermet gastrektomi og sham prosedyrer
- Median laparotomi
- Bruk en mikrosaks til å lage et 1-1, 5 cm langt mellomlinjesnitt i overlivet.
- Eksternisering av mage og tarm
- Utfør SG-prosedyren ved hjelp av et forstørrelsesforstørrelsesspisse mikroskop eller forstørrelsesprogram etter behov for å forhindre uforutsigbar blødning og hypovolemisk sjokk.
- Bruk to buede, glatte taggete mikrot tang for å forsiktig bevege magen og fullstendig eksternisere den.
- Del forsiktig det gastrospleniske ligamentet som forbinder venstre mage til milten ved hjelp av en bomullstippet sonde og elektrocautery etter behov, og dermed dissekere mage fundus fra den omkringliggende milten og andre indre organer.
4. Mageisolasjon og klipp
MERK: SG for mus ble utført ved hjelp av den nye clip applier teknikken som tidligere publisert10.
- Strekk fundus og pylorus i magen forsiktig og lateralt med tang, identifiser midtlinjen (figur 1 og figur 2), og påfør forsiktig kirurgiske klips til halvparten av den mediale siden av magen midtlinjen fra gastroøsofaguskrysset dårligere og den nedre polen overlegent. Klem og ekskluder rundt 75-80% av magen, og dermed skape hele lateral ermet i magen (Figur 1 og Figur 2).
- Flytt tarmen til den nakne huden på siden og dekk den med en varmoppdrik gasbind og utfør intraperitoneal hydrering etter behov for å forhindre dehydrering og hypotermi.
- Resect lateral klippet mage, fjerne den ekskluderte ermet i magen med mikroscissors og sterilisere deretter den kuttede kanten av magen med povidone-jodløsning.
- Oversew klemmelinjen med en 5-0 monofilament ikke-absorberbar sutur for å sikre ingen lekkasje. Knut endene av suturen og anker til klipsene i hver ende.
- Returner mage og tarm til riktig posisjon i bukhulen og lukk magen med en løpende 5-0 monofilament ikke-absorberbar kontinuerlig og seponerlig sutur til fascia og bukveggen.
- Administrer analgetika med ketoprofen (2-5 mg/kg) og antibiotika med cefazolin (25 mg/kg) intraperitonealt etter hele prosedyren.
5. Sham prosedyre av SG
- Utfør en lignende prosedyre som beskrevet tidligere med en midline laparotomi, og eksternisere tarmen og magen ved hjelp av 37 ° C våt varm saltvann gasbind dekning i 5 min.
- Returner mage og tarm til de riktige stedene i disse indre organene.
- Lukk bukveggen forsiktig som tidligere beskrevet med 2 lag med kontinuerlig og seponerlig lukking til fascia og hud ved hjelp av langsomme eller ikke-absorberbare monofilamentsuger. Administrer analgetika med ketoprofen (2-5 mg/kg) og antibiotika med cefazolin (25 mg/kg) intraperitonealt etter hele prosedyren.
6. Generell postoperativ omsorg
- Stopp isofluran og fortsett med en luftstrøm på 3-5 l/min til musen er helt våken.
- Fortsett å se på musen mens den gjenvinner mobilitet og begynner å gå rundt i buret.
- Plasser musen i en 30 °C uavhengig inkubator i 5 dager. Pass på at det bare er en mus per bur for å hindre musene i å skade hverandre.
- Returner gratis tilgang til en gel diett mat (fettfattig gel diett: 10% smult, 10% flytende sukker, 57% vann) i 3 dager etter operasjonen og gjeninnføre den tidligere tildelte dietten 3 dager etter operasjonen.
- Subkutant eller intraperitoneally injisere ketoprofen (2-5 mg/kg), og cefazolin (25 mg/kg) i 1 dag etter operasjonen.
- Vurder musens kroppsvekt ukentlig gjennom hele studieperioden. Gi ketoprofen (2-5 mg/kg) ved intraperitoneal injeksjon for smertekontroll én gang daglig etter behov hvis dyret er i nød etter operasjonen.
MERK: Her var overlevelsesraten til SG 90% etter læringsperioden.
7. Metabolsk parametervurdering
- Raske mus i 6 timer, og ta blodprøver ved baseline (0 min). Få alle blodprøver fra spissen av halevenen av fritt bevegelige mus11,12.
- Lever 1 mg/g 50 % dekstrose ved intraperitoneal injeksjon til glukosetoleransetesten.
- Mål blodsukkeret fra spissene av haleårene til fritt bevegelige mus ved 0, 5, 15, 30, 60 og 120 min etter glukoseadministrasjon på dupliserte prøver ved hjelp av glukometre og teststrimler.
- Hold hele blodprøven (n = 10 for hver gruppe) ved romtemperatur med koagulering i 30 minutter.
- Sentrifuger blodprøven ved 3000 x g i 10 minutter ved 4 °C.
- Overfør plasmaet til separate rør uten å forstyrre blodpropper og oppbevares ved -80 °C.
- Studer plasmaprøvene på slutten av studien ved hjelp av kommersielle mus ELISA-sett for hemoglobin A1c (HBA1c), glukose, kolesterol og insulinnivåer i henhold til produsentens retningslinjer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Resultatene av operasjonen er vist i figur 3 og figur 4. Overlevelsesraten for studien var 90%. En mus døde i sham-gruppen på grunn av svakhet og en annen mus døde i SG-gruppen den tredje dagen etter operasjonen av ukjente grunner. Resultater oppnådd på vekttap ( figur3A) etter operasjon (ved uke 3) på HFD matet mus var ganske lik de som er observert hos mennesker, med et endelig vekttap på ca 15-20%13. Studien viste også at kolesterolnivået (figur 3B) gikk betydelig ned etter SG-kirurgi i HFD-matet mus.
Bedre insulinfølsomhet og glukosetoleranse ble observert kort tid etter operasjonen av en intraperitoneal glukosetoleransetest (IPGTT). I den nåværende studien viste vi at HFD-indusert fedme fremkalte insulinresistens og glukoseintoleranse hos ville type C57BL/6-mus og kan korrigeres av SG. Etter SG forbedret insulinresistens-, glukose- og lipidnivåene alle i denne studien.
Figur 1: Kirurgiske prosedyrer for SG.
(A)Den 5 mm kirurgiske klipsen som brukes i denne eksperimentelle modellen. (B)Kontroller dybden av anestesi med klype stimulering. (C, D) Påfør klippet på halvparten av medial side av magen midtlinjen fra gastroøsofageal krysset dårligere og nedre pol overlegent. (E) Steriliser og suturer den kuttede kanten av magen for å sikre ingen lekkasje. (F-H) Hydrer musene med varm saltvann, returner mage og tarm tilbake til riktig sted i bukhulen. Lukk bukhulen nøye. Gjenopprett fra bedøvelsesstatusen i induksjonskammeret og gå tilbake til buret når tilstanden var fullstendig gjenopprettet og stabilisert. Vennligst klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 2: Steder for kirurgisk klippbruk til magen. Vennligst klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 3: Effekten av SG på (A) ukentlige kroppsvektendringer og (B) kolesterolnivå.
Data representeres som gjennomsnittet ± SD. *P < 0,05; **P < 0,001. Vennligst klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 4: Effekten av SG på (A) IPGTT (B) Hba1c og (C) HOMA-IR på slutten av studien.
(n = 5 VSG; n = 7 sham); Data representeres som gjennomsnittet ± SD. *P < 0,05; **P < 0,001. Vennligst klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
De fleste av de prospektive kohortstudiene har bekreftet at å øke kroppsmasseindeksen er relatert til å øke dødeligheten. Fedme er forbundet med en høyere risiko for diabetes, hjerte-og karsykdommer (CVD), og død hos begge kjønn. De spesifikke patologiske prosessene har etablert en sammenheng mellom diabetes, fedme og dødelighet14. De systematiske oversiktene indikerer fordelene med bariatrisk kirurgi i å redusere risikofaktorer for CVD med bevis for ventrikulær hypertrofi regresjon og forbedret diastolisk funksjon samt15. Bariatrisk/metabolsk kirurgi kan forbedre tradisjonelle CVD risikofaktorer hos overvektige diabetikere, og 10-års CHD og dødelig CHD risiko har vist seg å bli redusert med opptil 50% etter ulike bariatriske / metabolske kirurgiske prosedyrer hos overvektige pasienter med T2D4.
Bariatrisk kirurgi er den mest effektive langsiktige terapeutiske strategien for fedme. De betydelige forbedringene av metabolske parametere fra bariatrisk kirurgi som lipidprofil, inflammatoriske biomarkører, blodtrykk og hjertesvikt er også notert spesielt i den uventede type 2 diabetisk kontroll. SG har redusert og modifisert fettvevbetennelse og utvikling og har muligens redusert ateroskleroserisikoen.
Endringer av gastro-tarmhormoner kan spille en rolle i langsiktig vektkontroll16,17. SG har også redusert kaloriinntaket og normalisert glykemisk kontroll18. Gastrisk bypass kirurgi relatert glykemisk toleranse effekter er relatert til foregut hormonelle effekter fremkalt ved å omgå proksimal tarm fra dagens teorier19. SG har imidlertid vist den sammenlignbare antidiabetiske effekten, noe som tyder på ytterligere ikke-omgåelsesrelaterte ukjente mekanismer selv utover effekten av glukagonlignende peptid 1reseptor 16,20. Lopez et al. har vist at SG fremmer vekttap, forbedrer kolesterol- og glukoseprofilen, leptinufølsomhet og reduserer insulinresistens, som er uavhengig av ghrelinnivåendringene i overvektige Zucker rotter21. Alle disse ovennevnte problemene trenger ytterligere dyrestudier for å avklare sammenhengen med diabetes, fedme og sykdommer. SG er en bariatrisk prosedyre som ikke involverer intestinal bypass, som har blitt stadig mer populært de siste tiårene i USA og globalt på grunn av lave langsiktige komplikasjoner22.
Den bariatriske kirurgiske prosedyren er teknisk vanskelig og tidkrevende med høy kirurgisk dødelighet og langsiktig komplikasjon og er det viktigste kritiske trinnet for små dyreforsøk. SG er for tiden den mest brukte operasjonen for vektreduksjon i USA fordi det er en enkel prosedyre med høy effektivitet, lav tilleggslidelse og lav dødelighet. Denne protokollen har lignende fordeler etterligne vektreduksjon og metabolske operasjoner praktisert rutinemessig hos mennesker. Generelt er kirurgiske teknikker ganske vanskelige hos mus på grunn av den lille kroppsstørrelsen, og et dissekerende mikroskop er ofte nødvendig med høy kirurgisk dødelighet.
Schlager et al. har utviklet en musemodell av SG med en kirurgisk klipsapplikasjon i stedet for en håndsydd lukking for magen. Denne dyremodellen har vist lignende effekter av kroppsvektreduksjon og glukosekontroll, men har ikke klart å avsløre signifikant spredning av bukspyttkjertelceller10. Denne effekten på stoffskiftet fra denne mus modellen ligner på den menneskelige bariatriske / metabolske kirurgi med en svært lav operativ dødelighet.
Denne nåværende studien viser konstant vektreduksjon etter SG i HFD matet mus med forbedret glykosert hemoglobin, IPGTT, HOMA-IR (homeostatisk modellvurdering for insulinresistens) og kolesterolnivå. Denne kirurgiske prosedyren er trygg og enkel å utføre hos mus.
Den kirurgiske overlevelsesraten til denne protokollen i vårt laboratorium er rundt 90% etter en læringsperiode, og prosedyren tar mindre enn 15 minutter. Denne protokollen kan gi betydelig verdi i fremtidige små gnagerstudier med kirurgisk gjennomførbarhet, sikkerhet, reproduserbarhet og klinisk relevans. Denne metoden kan også brukes til å markere fysiologiske endringer observert etter bariatrisk kirurgi hos mennesker. Vanskeligheten med SG kirurgi spiller en viktig faktor i suksessen til dyrestudier. Denne protokollen er lett å utføre, og imiterer SG som vanlig praktisert i andre dyre- og menneskestudier.
Denne dyremodellen kan undersøke den kliniske relevansen av diabetes og fedme ved hjelp av en kort kirurgisk prosedyre med ermet gastrektomi. Disse prosedyrene kan forkorte operasjonstiden og forbedre den kirurgiske overlevelsesraten. Den største fordelen med denne studien er å etterligne de kliniske resultatene av bariatrisk kirurgi hos menneskelige pasienter ved hjelp av en enkel kirurgisk modell.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne erklærer ingen interessekonflikt.
Acknowledgments
Vi takker miss Isabelle Lu for den engelske fortellingen.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.9% normal saline | China Chemical & Pharmaceutical Co., Ltd. | ||
| 5-0 monofilament suture | Shineteh Inc. Taiwan | Ethicon | |
| Alm | Shineteh Inc. Taiwan | ST-A072PK | UNIK |
| Animal Anesthesia | Step Technology | 0712VAP11076 | Matrx |
| Barraqer-Troutman forceps | Shineteh Inc. Taiwan | ST-N309(H-4410) | UNIK |
| cefazolin | Taiwan veteran pharmacy company | ||
| Chow diet | Research Diets | ||
| Glucose strips and glucometer | BeneCheck | BKM13-1 | BeneCheck |
| HbA1c kit | Level | OKEH00661 | |
| Hematology system | Fuji | FUJI DRI-CHEM 4000i | Europe |
| High Fat diet | Research Diets | 1810724 | LabDiet |
| Iris Forceps | Shineteh Inc. Taiwan | ST-1210 | UNIK |
| Iris Scissors | Shineteh Inc. Taiwan | ST-S011 | UNIK |
| Isoflurane | Panion & BF biotech INC | 8547 | Panion & BF |
| Ketoprofen | Sigma | 22071154 | Sigma-Aldrich |
| Stereo microscope | MicroTech | SZ-5T | MicroTech |
| Surgical clip (M) | Echicon Inc., Somerville, NJ | Size M, 5mm | |
| Vidisic gel | Dr. Gerhard Mann Chem.-pharm. Fabrik GmbH |
References
- WHO. Obesity and overweight. WHO. , (2018).
- Buchwald, H., et al. Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis. Journal of the American Medical Association. 292 (14), 1724-1737 (2004).
- Schauer, D. P., et al. Bariatric Surgery and the Risk of Cancer in a Large Multisite Cohort. Annals of Surgery. 269 (1), 95-101 (2019).
- Wei, J. H., et al. Metabolic surgery ameliorates cardiovascular risk in obese diabetic patients: Influence of different surgical procedures. Surgery for Obesity and Related Diseases. 14 (12), 1832-1840 (2018).
- Lee, W. J., Aung, L. Metabolic Surgery for Type 2 Diabetes Mellitus: Experience from Asia. Diabetes & Metabolism. 40 (6), 433-443 (2016).
- Yin, D. P., et al. Assessment of different bariatric surgeries in the treatment of obesity and insulin resistance in mice. Annals of Surgery. 254 (1), 73-82 (2011).
- Abraham, A., et al. Trends in Bariatric Surgery: Procedure Selection, Revisional Surgeries, and Readmissions. Obesity Surgery. 26 (7), 1371-1377 (2016).
- Varela, J. E., Nguyen, N. T. Laparoscopic sleeve gastrectomy leads the U.S. utilization of bariatric surgery at academic medical centers. Surgery for Obesity and Related Diseases. 11 (5), 987-990 (2015).
- Surwit, R. S., Kuhn, C. M., Cochrane, C., McCubbin, J. A., Feinglos, M. N. Diet-induced type II diabetes in C57BL/6J mice. Diabetes. 37 (9), 1163-1167 (1988).
- Schlager, A., et al. A mouse model for sleeve gastrectomy: applications for diabetes research. Microsurgery. 31 (1), 66-71 (2011).
- Pressler, J. W., et al. Vertical sleeve gastrectomy restores glucose homeostasis in apolipoprotein A-IV KO mice. Diabetes. 64 (2), 498-507 (2015).
- Williams, L. M., et al. The development of diet-induced obesity and glucose intolerance in C57BL/6 mice on a high-fat diet consists of distinct phases. PLoS One. 9 (8), 106159 (2014).
- Huang, R., Ding, X., Fu, H., Cai, Q. Potential mechanisms of sleeve gastrectomy for reducing weight and improving metabolism in patients with obesity. Surgery for Obesity and Related Diseases. 15 (10), 1861-1871 (2019).
- Bender, R., Zeeb, H., Schwarz, M., Jockel, K. H., Berger, M. Causes of death in obesity: relevant increase in cardiovascular but not in all-cancer mortality. Journal of Clinical Epidemiology. 59 (10), 1064-1071 (2006).
- Vest, A. R., Heneghan, H. M., Agarwal, S., Schauer, P. R., Young, J. B. Bariatric surgery and cardiovascular outcomes: a systematic review. Heart. 98 (24), 1763-1777 (2012).
- Ionut, V., Burch, M., Youdim, A., Bergman, R. N. Gastrointestinal hormones and bariatric surgery-induced weight loss. Obesity (Silver Spring). 21 (6), 1093-1103 (2013).
- Arble, D. M., Sandoval, D. A., Seeley, R. J. Mechanisms underlying weight loss and metabolic improvements in rodent models of bariatric surgery. Diabetologia. 58 (2), 211-220 (2015).
- Schneck, A. S., et al. Effects of sleeve gastrectomy in high fat diet-induced obese mice: respective role of reduced caloric intake, white adipose tissue inflammation and changes in adipose tissue and ectopic fat depots. Surgical Endoscopy. 28 (2), 592-602 (2014).
- Rubino, F., R'Bibo, S. L., del Genio, F., Mazumdar, M., McGraw, T. E. Metabolic surgery: the role of the gastrointestinal tract in diabetes mellitus. Nature Reviews Endocrinology. 6 (2), 102-109 (2010).
- Wilson-Perez, H. E., et al. Vertical sleeve gastrectomy is effective in two genetic mouse models of glucagon-like Peptide 1 receptor deficiency. Diabetes. 62 (7), 2380-2385 (2013).
- Lopez, P. P., Nicholson, S. E., Burkhardt, G. E., Johnson, R. A., Johnson, F. K. Development of a sleeve gastrectomy weight loss model in obese Zucker rats. Journal of Surgical Research. 157 (2), 243-250 (2009).
- Koch, T. R., Shope, T. R. Laparoscopic Vertical Sleeve Gastrectomy as a Treatment Option for Adults with Diabetes Mellitus. Advances in Experimental Medicine and Biology. , (2020).
