Summary
Presentert her er en protokoll for registrering av muskelhastighet utvinning sykluser (MVRCs), en ny metode for å undersøke muskelmembran egenskaper. MVRCs muliggjør in vivo vurdering av muskelmembran potensial og endringer i muskel ion kanal funksjon i forhold til patologi, og det muliggjør demonstrasjon av muskel depolarisering i nevrogene muskler.
Abstract
Selv om konvensjonelle nerveledningsstudier (NCS) og elektromyografi (EMG) er egnet for diagnostisering av nevromuskulære lidelser, gir de begrenset informasjon om muskelfibermembranegenskaper og underliggende sykdomsmekanismer. Muskelhastighet utvinning sykluser (MVRCs) illustrere hvordan hastigheten på en muskel handling potensial avhenger av tiden etter en foregående handling potensial. MVRCer er nært knyttet til endringer i membranpotensialet som følger et handlingspotensial, og gir dermed informasjon om muskelfibermembranegenskaper. MVRCer kan registreres raskt og enkelt ved direkte stimulering og opptak fra multifiberbunter in vivo. MVRCs har vært nyttig i å forstå sykdomsmekanismer i flere nevromuskulære lidelser. Studier hos pasienter med kanalatier har vist de forskjellige effektene av spesifikke ionkanalmutasjoner på muskelspenning. MVRCer har tidligere blitt testet hos pasienter med nevrogene muskler. I denne foregående studien ble muskelrelativ brytningsperiode (MRRP) forlenget, og tidlig supernormalitet (ESN) og sen supernormalitet (LSN) ble redusert hos pasienter sammenlignet med sunne kontroller. Dermed kan MVRCs gi in vivo bevis på membrandepolarisering i intakte menneskelige muskelfibre som ligger til grunn for deres reduserte spenning. Protokollen som presenteres her beskriver hvordan du registrerer MVRCer og analyserer opptakene. MVRCs kan tjene som en rask, enkel og nyttig metode for å avsløre sykdomsmekanismer på tvers av et bredt spekter av nevromuskulære lidelser.
Introduction
Nerveledningsstudier (NCS) og elektromyografi (EMG) er de konvensjonelle elektrofysiologiske metodene som brukes til diagnose av nevromuskulære lidelser. NCS muliggjør påvisning av aksonalt tap og demyelinasjon i nervene1, mens EMG kan skille om myopati eller nevrogene endringer er tilstede i muskelen på grunn av nerveskader. Men, NCS eller EMG gi begrenset informasjon om muskelfiber membran egenskaper og underliggende sykdom mekanismer. Denne informasjonen kan oppnås ved hjelp av intracellulære elektroder i isolerte muskler fra muskelbiopsier2,3,4. Det er imidlertid av klinisk betydning å bruke metoder ved hjelp av opptak fra intakte muskler hos pasienter.
Hastigheten på en annen muskelfiber handling potensielle endringer som en funksjon av forsinkelsen etter de første5,og denne hastigheten utvinning funksjon (eller utvinning syklus) har vist seg å endre i dystrofiske eller denervated muskler. Utbyttet av slike opptak fra enkeltmuskelfibre var imidlertid for lav til å være til nytte som et klinisk verktøy6. Imidlertid fant Z'Graggen og Bostock senere at multifiberopptak, oppnådd ved direkte stimulering og opptak fra samme bunt av muskelfibre, gir en rask og enkel metode for å skaffe slike opptak in vivo7. En sekvens av sammenkoblede puls elektriske stimuli med varierende interstimulus intervaller (ISIer) brukes i denne metoden7,8,9,10,11.
De evaluerte MVRC-parametrene inkluderer følgende: 1) muskelrelativ ildfast periode (MRRP), som er varigheten etter et muskelhandlingspotensial til neste handlingspotensial kan fremkalles; 2) tidlig supernormalitet (ESN); og 3) sen supernormalitet (LSN). ESN og LSN er periodene etter ildfaste perioden der handlingspotensialene utføres langs muskelmembranen raskere enn normalt. Depolariserende etterpotensial, og kaliumakkumulering i t-tubuli av muskelen henholdsvis, er hypotetisk som hovedårsakene til de to perioder med supernormalitet.
Den brede anvendelsen av MVRCer til muskelforstyrrelser har blitt vist i å oppdage membran depolarisering i iskemi7,10,12 og nyresvikt13,samt gi informasjon om muskelmembran abnormiteter i kritisk sykdom myopati14 og inkludering kroppen myositt15. Frekvensrampe og intermitterende simuleringsprotokoller på 15 Hz og 20 Hz har siden blitt introdusert. MVRCer, sammen med disse tilleggsprotokollene, har vist de forskjellige effektene på muskelmembranspenning knyttet til tap av funksjon eller funksjonsvinningikodi16, myotonisk dystrofi17, Andersen-Tawil syndrom18, og myotonicongenita19,20).
I en nylig studie ble anvendelsen av MVRCer til nevrogene muskler vist for første gang. Begrepet "nevrogen muskel" refererer til de sekundære endringene i skjelettmuskulatur som utvikler seg som denervation og reinnervation etter skade på fremre hornceller eller motoraksoner. Denervation er karakterisert i EMG som spontan aktivitet (dvs. fibrillasjoner [fibs] og positive skarpe bølger [psws]), mens store motorenhet potensialer med langvarig varighet og økt amplitude nåværende reinnervation21. EMG endringer er tydelig i bulkvated muskler, men de underliggende cellulære endringer i muskelfiber membran potensialer har bare blitt demonstrert i eksperimentelle studier på isolert muskelvev2,3,4. MVRCs gir ytterligere innsikt i in vivo menneskelige muskelmembranegenskaper om denervation prosessen.
Dette papiret beskriver metodikken til MVRCer i detalj. Det oppsummerer også endringene i nevrogene muskler i en undergruppe av pasienter fra en tidligere rapportert studie22 og friske kontrollpersoner som muliggjør bestemmelse av om metoden er hensiktsmessig for en planlagt studie.
Opptakene utfører ved hjelp av en opptaksprotokoll som er en del av et program. Annet utstyr som brukes er en isolert lineær bipolar konstant strøm stimulator, 50 Hz støyeliminator, isolert elektromyografiforsterker og analog-til-digital omformer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle må gi skriftlig samtykke før eksamen, og protokollen må godkjennes av det aktuelle lokale etiske gjennomgangsrådet. Alle metoder som er beskrevet her ble godkjent av Regional Scientific Ethical Committee og Danish Data Protection Agency.
1. Utarbeidelse av motivet
- Vurder forsøkspersonenes medisinske historie for å sikre at de ikke har andre sykdommer i nervesystemet enn sykdomsgruppen som skal undersøkes.
- Informer emnet i detalj om eksamener og be om skriftlig samtykke.
- Informer motivet om innsetting av to nåler i en benmuskel og at muskelfibrene vil bli stimulert med svak strøm.
- Forklar at følelsen kan føles litt ubehagelig.
- Informer motivet om at stimuleringen kan slås av umiddelbart når som helst under opptaket i tilfelle ubehag.
- Rengjør motivets underben med alkohol.
- Sett den stimulerende monopolarnåleelektroden (25 mm x 26 G) over fremre tibiale muskel- og selvklebende overflateelektrode som anoden 1 cm distal til monopolnålen (Figur 1).
- Plasser en bakkeelektrode distale til anoden.
- Sett inn den konsentriske kanyleelektroden (25 mm x 30 G) ca. 2 cm proksimal til den stimulerende monopolnåleelektroden langs muskelfibrene (figur 1).
- Koble den konsentriske kanylen og bakkeelektrodene til forforsterkeren.
- Be faget om å være stille og unngå bevegelse under undersøkelsen.
- Null utgangen av stimulatoren og koble de stimulerende elektrodene til stimulatoren (figur 1).
- Opprettholde hudtemperaturen mellom 32–36 °C ved hjelp av en oppvarmingslampe.
2. Opptak av MVRCene
- Start den halvautomatiske opptaksprogramvaren ved hjelp av muskelavgiftsopptaksprotokollen og slå på stimulatoren. Stimuleringer starter på 2,5 mA med 1 Hz.
- Øk stimulansintensiteten manuelt ved å trykke på Sett inn-tasten til et svar registreres (maks = 10 mA).
- Juster stimulerende og opptaknåler om nødvendig, til du registrerer en akseptabel respons med en stimulansintensitet på mindre enn 10 mA. Formen på muskelhandlingpotensialet bør være triphasic, om mulig, og stabil. Unngå store rykninger av hele muskelen.
- Inverter muskelhandlingpotensialet ved å treffe minustasten (-) hvis potensialet vises opp ned.
MERK: En vannrett tonelinje vises på skjermen som angir bredden på handlingspotensialet.
- Juster posisjonen og lengden på magentalinjen ved å dra linjen med musen. Den grønne vannrette linjen representerer grunnlinjen.
- Klikk OK for å starte opptaket av MVRCene.
- Velg et stimulansresponsforhold fra hovedalternativene.
- Øk stimulansintensiteten ved å trykke inn sett nøkkelen til maksimalt 10 mA eller utholdelig.
- Klikk OK for å begynne å synke ned stimulansresponskurven.
- Klikk OK når teststimulansen når null.
- Sett stimulansintensiteten til nivå for stabil ventetid.
- Klikk OK for å gå tilbake til hovedmenyen.
- Velg alternativet 2/2/5 kondisjoneringsstims for RC.
- Velg en protokoll fra alternativer for gjenopprettingssyklus (f.eks. start hurtiggjenopprettingssyklusen [hopp over alternative forsinkelser]), som er standard.
MERK: Opptaket fortsetter automatisk i 34 trinn med avtagende intervaller (IS- og mellomstimulans). - Kontroller at muskelhandlingspotensialet er stabilt under opptaket og at nålen ikke har beveget seg. Skjermen endres automatisk til hovedalternativer når de 34 trinnene er fullført.
- Klikk på Fullfør opptak | Lukk fil | OK, med mindre en opptrappingsfrekvens eller 20 Hz s opptak utføres.
- Fullfør opptaket og lagre dataene ved å klikke lukk filen og lagre data knapp.
3. MVRC-analyser
- Start analyseprogrammet for å utføre analysen frakoblet.
- Velg opptaket som skal analyseres, og klikk på OK-knappen.
- Klikk på Last inn parametere fra Filer-menyen.
- Velg MANAL9-alternativet for analysen. Hvis dette ikke finnes på listen, klikker du på Bla gjennom for å finne denne filen. Klikk OK for å fortsette.
- Når en beskrivelse av MAnal9 muskel spenning analyse vises, klikk OK for å fortsette.
- Inverter muskelhandlingspotensialet ved å skrive MM-1 hvis potensialet vises opp ned.
- Høyreklikk musen for å gjøre magentalinjen synlig. Sett vinduet til bunnen av toppresponsen og med en bredde som tilsvarer bredden på handlingspotensialet i den høyden. Dra med musen for å justere vinduet. Vinduet bestemmer ventetidene der høyden og ventetiden måles, som angitt av de lyseblå linjene, og den grønne linjen angir grunnlinjen. Klikk OK for å fortsette.
- Klikk OK for å måle latencies og topper. Dette vil bli gjort automatisk.
MERK: I visningen av de målte ventetidene måles ventetidene til kortere forsinkelser enn originale. Dette er fordi svarene på kondisjonering stimuli alene ble trukket fra svar på condition pluss testen. Dette sikrer at kondisjonering stimuli ikke forstyrrer ventetidmålinger. Som det er angitt i hurtigboksen, kan enkle dårlige punkter elimineres ved å plassere markøren (vertikal rød linje) over punktet og trykke på ~ -tasten. Det dårlige punktet erstattes med verdimiddel på hver side i samme kanal. Hvis det ikke er noen dårlige punkter, sett DE (display end) til like etter siste ventetid som kreves. - Klikk OK for å opprette en RMC-fil.
- Ignorer de fleste alternativene som vises i skjemaet "Opprett RCC eller RMC", siden disse er opptatt av målinger av C-fiber i stedet for MVRCer. Klikk lagre og avslutt for å fortsette. Når du har lagret RMC-filen, gir hurtigboksen forskjellige alternativer
- Hvis frekvensrampe og/eller repeterende stimuleringsdata er registrert, følger du instruksjonene for å analysere disse. Ellers velger du Gå rett for å opprette MEM-filalternativ for å opprette en MEM-fil. Klikk OK for å fortsette.
- Klikk lagre og avslutt for å fortsette.
- Klikk OK for å legge til RMC-data i MEM-filen.
- Klikk Legg til fra Inndata RMC-fil for å legge til disse dataene i MEM-filen, og endre deretter katalogen for å lagre den sammensatte MEM-filen. Klikk deretter Lagre og avslutt for å lagre den.
- Klikk OK for å lagre den målte QZD-filen for å tillate differensiering fra den opprinnelige QZD-filen ved hjelp av et # tegn.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Følgende resultater ble oppnådd i en undergruppe av pasienter fra en nylig studie22, der det var fibs / psws på alle steder som viser rikelig denervation aktivitet. Resultatene viste at endringer i muskelfibre etter denervation ble vurdert in vivo ved hjelp av MVRC-teknikken som er beskrevet i denne protokollen. MVRCs viste endringer i samsvar med depolarisering av hvilemembranpotensialet i nevrogene muskelfibre.
Fjorten pasienter ble sammenlignet med 29 friske forsøkspersoner. Emnedemografi vises i tabell 1. Figur 2 illustrerer opptak fra et sunt emne og pasient. Figur 3 og tabell 2 illustrerer sammenligning en av pasientenes MVR-er med friske forsøkspersoner. MRRP ble forlenget, og ESN og LSN ble redusert hos pasienter sammenlignet med sunne kontroller (Tabell 2, Figur 3).
Figur 1: Bilde av MVRCer oppsett. (A) Isolert lineær bipolar konstant-strøm stimulator, (B) 50 Hz støyeliminator, (C) isolert EMG forsterker, og (D) analog-til-digital omformer. Vennligst klikk her for å vise en større versjon av dette tallet.
Figur 2: Eksempler på MVRC-opptak. Opptak etter en kondisjoneringsstimulans (rød), to kondisjoneringsstimuli (grønn) og fem kondisjoneringsstimuli (blå) fra a (A) sunt emne og (B) pasient med L5 radikulopati. Vennligst klikk her for å vise en større versjon av dette tallet.
Figur 3: MVRCer med en, to og fem kondisjoneringsstimuli. (A) MVRCer hos 14 pasienter (grå linjer) sammenlignet med gjennomsnittlig verdi på 29 sunne kontroller (fylte svarte firkanter). Grafisk representasjon av prosentvis endring i ventetid er plottet mot IS fra 2–1000 ms (logaritmisk skala). (B, C): Samme som (A), men med to og fem condition stimuli. Vennligst klikk her for å vise en større versjon av dette tallet.
| Sunne kontroller (n=29) |
Pasienter (n=14) |
|
| Alder (år) | 55,7 ± 14,9 | 58,9 ± 16,3 |
| Kjønn (M/F) | 14/15 | 9/5 |
| Sykdomsvarighet (måneder) | - | 3,4 ± 2,7 |
| MRC score | - | 3,0 ± 1,1 |
| Etiologi | - | Peronal nevropati (9) L5 rot afflication |
Tabell 1: Demografi og kliniske egenskaper. Verdier er oppført som betyr ± standardavvik. Denne tabellen er endret fra Witt et al.22.
| Sunne kontroller (n=29) |
Pasienter (n=14) |
p-verdi for t-test | |
| MRRP (ms) | 3,5 ± 0,4 | 7,6 ± 3,1 | p = 6,8-8 |
| ESN (%) | 11,3 ± 2,1 | 7,6 ± 2,3 | p = 5,5-5 |
| Esn (ms) | 7,8 ± 1,3 | 12,7 ± 2,5 | p = 1,6-8 |
| 5ESN (%) | 13,7 ± 2,5 | 1,0 ± 0,6 | p = 9,3-10 |
| LSN (%) | 4,1 ± 1,4 | 2,8 ± 1,7 | P = 0,017 |
| XLSN (%) | 2,9 ± 0,7 | 1,0 ± 1,6 | p = 1,8-10 |
| 5XLSN (%) | 8,0 ± 1,4 | 2,8 ± 1,6 | p = 2,2-11 |
Tabell 2: Sammenligning av MVRC-parametere mellom sunne kontroller og pasienter. MRRP = muskel relativ brytningsperiode; ESN (%) = ventetidreduksjon av muskelhandlingspotensial etter en kondisjoneringsstimulans som prosentandel av ubetinget stimulans ved ISI på <15 ms. ESN (ms), ISI tilsvarende ESN (%). 5ESN = topp tidlig overnormalitet etter fem kondisjoneringsstimuli. LSN (%) = ventetidreduksjon av muskelhandlingspotensial etter en kondisjoneringsstimulans som prosentandel av ubetinget stimulans ved ISI mellom 100–150 ms. XLSN (%) = ventetidreduksjon av muskelhandlingspotensial etter to kondisjoneringsstimuli i prosent av én kondisjoneringsstimulans ved ISI mellom 100–150 ms. 5XLSN (%) = ventetidreduksjon av muskelhandlingspotensial etter fem kondisjoneringsstimuli i prosent av én kondisjoneringsstimulans ved ISI mellom 100–150 ms. Verdier er oppført som betyr ± standardavvik.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
MVRCer, som programmert i opptaksprogramvaren, er en svært automatisert prosedyre, men forsiktighet er nødvendig for å oppnå pålitelige resultater. I opptaksstadiet, mens du justerer nålene, er det viktig å unngå å stimulere endeplatesonen eller nerven. Dette fører vanligvis til store rykninger av hele muskelen, noe som øker risikoen for forskyvning av stimulering og / eller opptaknål under opptak av MVRCer. Til dags dato har metoden blitt brukt på flere muskler som har bedre beskrevet sluttplatesone; Imidlertid kan sluttplatene bli spredt (dvs. i den motfølgende tibiale muskelen). Derfor er spesiell oppmerksomhet nødvendig.
For å unngå stimulering av endeplaten eller nerven i stedet for muskelfibre, bør det tas hensyn når du observerer muskelen for rykninger. Den stimulerende monopolnålen bør flyttes, samt opptakkonsentrisk nål, for å finne et nettsted som ikke forårsaker rykninger. I tillegg bør fagene bli spurt om de føler smerte eller ikke. MVRC-opptak forårsaker ingen ubehagelighet, med mindre sluttplatesonen eller nerven stimuleres i stedet for muskelfibre.
En begrensning av MVRCs metoden utfører opptaket i bare ett nettsted og undersøkelse av bare noen få muskelfibre, som ikke nødvendigvis representerer hele muskelen. Denne begrensningen er spesielt viktig i lidelser der patologien ikke er diffus. En tidligere studie fant overraskende ingen forskjell mellom pasienter med amyotrofisk lateral sklerose og sunne kontroller til tross for bulket muskler. Dette var sannsynligvis fordi denervation aktivitet ikke ble registrert på stedet der MVRCs ble registrert23. Det kan heller ikke utelukkes at nålen kunne ha blitt justert til et sunnere sted med en mer optimal respons.
En annen begrensning av MVRCs er at man kan ha en tendens til å oppdage de sunne muskelfibrene mens du justerer opptaksnålen for å oppnå en stabil respons for målinger. En måte å overvinne denne begrensningen kan være å gjøre opptakene fra polyphasic potensialer. Dette kan imidlertid skape problemer for å bestemme en nøyaktig ventetid hvis det er udifferensierte topper. I tillegg, selv om vi har tenkt å stimulere og registrere fra samme bunt av muskelfibre, kan disse ikke være nøyaktig det samme. Den stimulerte bunten kan inneholde forskjellige fibre under pågående eksperiment24.
MVRCer gir informasjon som ikke kan oppnås ved de konvensjonelle elektrofysiologiske metodene. Dermed er det ingen annen metode i nåværende bruk som kan sammenlignes med MVRCer. Den tidligere rapporten6, ved hjelp av enkelt fiber nål elektroder for å registrere på to steder fra samme muskelfiber, var mye vanskeligere. Gode opptak ble bare hentet fra 43 av 118 muskelfiberstudier, og denne metoden har ikke blitt vedtatt i forskningslaboratorier eller klinikker. En annen lignende, men uautomatisert tilnærming brukte åtte forskjellige IS-er fra 20 ms til 2 ms25. Forfatterne rapporterte at et opptak tok 20-60 min, mens denne metoden registrerer MVRCer med 34 IS-er på ca 10 min. Analysen er også rask og svært automatisert.
Til slutt er MVRCs en metode som kan gi uvurderlig informasjon for å forstå de underliggende mekanismene for nevromuskulære lidelser. For pasienter der en mutasjon i et ionkanalgen er identifisert, gir denne metoden også data om effekten av de spesifikke mutasjonene på muskelmembranspenning i vivo. Dette, sammen med in vitro uttrykksstudier, muliggjør en mer nøyaktig forståelse av muskel patofysiologi hos disse pasientene. Denne metoden har potensial til å gi innsikt i rollen til disse kanalene i normal muskelfysiologi, og dermed forbedre forståelsen av muskelsykdom generelt. Videre studier med andre pasientgrupper og større grupper er nødvendige. Studier som registrerer MVRCer i forskjellige muskler er også berettiget.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
H.B. mottar royalties fra UCL for salg av sin Qtrac programvare som brukes i denne studien. De andre forfatterne har ingen potensielle interessekonflikter. Alle forfattere har godkjent den endelige artikkelen.
Acknowledgments
Denne studien ble økonomisk støttet hovedsakelig av de to bevilgningene fra Lundbeck Foundation (Tilskuddsnummer R191-2015-931 og Tilskuddsnummer R290-2018-751). I tillegg ble studien økonomisk støttet av Novo Nordisk Foundation Challenge Programme (Grant nummer NNF14OC0011633) som en del av International Diabetic Neuropathy Consortium.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 50 Hz Noise Eliminator | Digitimer Ltd | Humbug | |
| Analogue-to-Digital Converter | National Instruments | NI-6221 | |
| Analysing software program | Digitimer Ltd (copyright Institute of Neurology, University College, London) | QtracP, MANAL9 | |
| Disposable concentric needle electrode, 25 mm x 30G | Natus | Dantec DCN | |
| Disposable monopolar needle electrode, 25 mm x 26G | Natus | TECA elite | |
| Isolated EMG amplifier | Digitimer Ltd | D440 | |
| Isolated linear bipolar constant-current stimulator | Digitimer Ltd | DS5 | |
| Software and recording protocol | Digitimer Ltd (copyright Institute of Neurology, University College, London) | QtracW software, M3REC3 recording protocol written by Hugh Bostock, Istitute of Neurology, London, UK) |
References
- Tankisi, H., et al. Pathophysiology inferred from electrodiagnostic nerve tests and classification of polyneuropathies. Suggested guidelines. Clinical Neurophysiology. 116 (7), 1571-1580 (2005).
- Gregorio, C. C., Hudecki, M. S., Pollina, C. M., Repasky, E. A. Effects of denervation on spectrin concentration in avian skeletal muscle. Muscle and Nerve. 11 (4), 372-379 (1988).
- Kotsias, B. A., Venosa, R. Role of sodium and potassium permeabilities in the depolarization of denervated rat muscle fibers. Journal of Physiology. 392, 301-313 (1987).
- Kirsch, G. E., Anderson, M. F. Sodium channel kinetics in normal and denervated rabbit muscle membrane. Muscle and Nerve. 9 (8), 738-747 (1986).
- Stalberg, E. Propagation velocity in human muscle fibers in situ. Acta Physiologica Scandinava Supplementum. 287, 1 (1966).
- Mihelin, M., Trontelj, J. V., Stalberg, E. Muscle fiber recovery functions studied with double pulse stimulation. Muscle and Nerve. 14 (8), 739-747 (1991).
- Z'Graggen, W. J., Bostock, H. Velocity recovery cycles of human muscle action potentials and their sensitivity to ischemia. Muscle and Nerve. 39 (5), 616-626 (2009).
- Bostock, H., Tan, S. V., Boerio, D., Z'Graggen, W. J. Validity of multi-fiber muscle velocity recovery cycles recorded at a single site using submaximal stimuli. Clinical Neurophysiology. 123 (11), 2296-2305 (2012).
- Z'Graggen, W. J., Troller, R., Ackermann, K. A., Humm, A. M., Bostock, H. Velocity recovery cycles of human muscle action potentials: repeatability and variability. Clinical Neurophysiology. 122 (11), 2294-2299 (2011).
- Lee, J. H. F., Boland-Freitas, R., Ng, K. Sarcolemmal excitability changes in normal human aging. Muscle and Nerve. 57 (6), 981-988 (2018).
- Lee, J. H. F., Boland-Freitas, R., Ng, K. Physiological differences in sarcolemmal excitability between human muscles. Muscle and Nerve. 60 (4), 433-436 (2019).
- Humm, A. M., Bostock, H., Troller, R., Z'Graggen, W. J. Muscle ischaemia in patients with orthostatic hypotension assessed by velocity recovery cycles. Journal of Neurology, Neurosurgery and Psychiatry. 82 (12), 1394-1398 (2011).
- Z'Graggen, W. J., et al. Velocity recovery cycles of human muscle action potentials in chronic renal failure. Clinical Neurophysiology. 121 (6), 874-881 (2010).
- Z'Graggen, W. J., et al. Muscle membrane dysfunction in critical illness myopathy assessed by velocity recovery cycles. Clinical Neurophysiology. 122 (4), 834-841 (2011).
- Lee, J. H., Boland-Freitas, R., Liang, C., Ng, K. Sarcolemmal depolarization in sporadic inclusion body myositis assessed with muscle velocity recovery cycles. Clinical Neurophysiology. 19 (31205-2), 1388 (2019).
- Tan, S. V., Z'Graggen, W. J., Hanna, M. G., Bostock, H. In vivo assessment of muscle membrane properties in the sodium channel myotonias. Muscle and Nerve. 57 (4), 586-594 (2018).
- Tan, S. V., et al. In vivo assessment of muscle membrane properties in myotonic dystrophy. Muscle and Nerve. 54 (2), 249-257 (2016).
- Tan, S. V., et al. Membrane dysfunction in Andersen-Tawil syndrome assessed by velocity recovery cycles. Muscle and Nerve. 46 (2), 193-203 (2012).
- Tan, S. V., et al. Chloride channels in myotonia congenita assessed by velocity recovery cycles. Muscle and Nerve. 49 (6), 845-857 (2014).
- Boland-Freitas, R., et al. Sarcolemmal excitability in the myotonic dystrophies. Muscle and Nerve. 57 (4), 595-602 (2018).
- Stalberg, E., et al. Standards for quantification of EMG and neurography. Clinical Neurophysiology. 130 (9), 1688-1729 (2019).
- Witt, A., et al. Muscle velocity recovery cycles in neurogenic muscles. Clinical Neurophysiology. 130 (9), 1520-1527 (2019).
- Kristensen, R. S., et al. MScanFit motor unit number estimation (MScan) and muscle velocity recovery cycle recordings in amyotrophic lateral sclerosis patients. Clinical Neurophysiology. 130 (8), 1280-1288 (2019).
- Marrero, H. G., Stalberg, E. V. Optimizing testing methods and collection of reference data for differentiating critical illness polyneuropathy from critical illness MYOPATHIES. Muscle and Nerve. 53 (4), 555-563 (2016).
- Allen, D. C., Arunachalam, R., Mills, K. R. Critical illness myopathy: further evidence from muscle-fiber excitability studies of an acquired channelopathy. Muscle and Nerve. 37 (1), 14-22 (2008).
