Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

诱导大鼠心肌梗死的半微创方法及独立工作心脏系统对心脏功能的评估

Published: June 11, 2020 doi: 10.3791/61033

Summary

本文提出了一种使用微创方法在大鼠中进行心肌缺血和随后的慢性再灌注的有效方法。此外,通过回声心动图和孤立的工作心脏方法评估大鼠左心室造影功能。

Abstract

心肌梗死(MI)仍然是全世界发病率和死亡率的主要原因。因此,对本课题的研究是强制性的。需要一个容易和高度可重复的MI诱导程序,以获得进一步的洞察力和更好的理解潜在的病理变化。该程序还可用于评估急性MI、后续重塑和心力衰竭(HF)中新的和有前途的治疗(作为药物或干预)的效果或效力。在动物的插管和术前准备后,进行了异物动物的麻醉方案,并迅速进行了外科手术。使用微创方法,左前前下降动脉 (LAD) 被连接定位并阻塞。闭塞可以急性进行后续再灌注(缺血/再灌注损伤)。或者,可以永久连接容器,以调查慢性MI、重塑或HF的发展。尽管存在常见的陷阱,但辍学率很小。各种治疗,如远程缺血性调理,可以检查其心脏保护潜力前,内部和术后。手术后恢复迅速,麻醉被精确控制,手术持续时间短。术后性麻醉三天。微创手术可降低感染和炎症的风险。此外,它促进快速恢复。"工作心"测量在活体前进行,能够精确控制预载荷、后载和流量。此过程需要特定的设备和培训,以获得足够的性能。本手稿提供了进行这些测量的详细分步介绍。

Introduction

虽然发病率持续下降,但急性心肌梗死(MI)仍然是造成全世界发病率和死亡率的主要原因1。在评估潜在治疗作为预防和治疗急性MI的药物或外科手术的疗效方面有限制。在人类检查其效果之前,必须提前测试这些治疗方法的风险,包括动物体内检查。没有比在体内学习病理学更好的机会了。因此,在大鼠或小鼠,甚至大型动物模型(猪或羊)中引入MI,可以调查冠状动脉和周围心肌缺血引起的短(急性)和长期(慢性)变化,以及心脏功能受损引起的系统变化。梗死大小以前是主要目标,但最近随后在急性MI或缺血/再灌注损伤以及连续心力衰竭(HF)中的心脏重塑过程变得非常令人感兴趣。因此,需要一种可比较且易于重现的方法,才能达到一致的结果。

虽然使用低温消融来获得MI已经报告2,我们的方法建立在其他研究的基础上,调查人员通过单缝结扎遮挡左前部下降动脉(LAD)。与(中)切除术程序相比,本文将介绍的微创方法允许更快的术后恢复,并显著缩短手术时间。其他外科手术的一个常见步骤是从胸腔抬起心脏进行心脏缝合3。此方法的方法使此步骤变得没有必要。根据协议,可以执行两种不同的程序:使用游环在规定时间内诱导缺血/再灌注的临时遮挡;或通过固定连结永久阻塞动脉。闭塞的成功可以通过心电图(ECG)和左心室(LV)的宏观变化及其苍白来评估。

手术前的另一个重要步骤是插管。虽然在大多数情况下,插管是通过气管切开或通过口腔插入视力下的管通过皮肤切口在喉咙,这个协议描述了麻醉动物的内切管插管,减少呼吸困难或感染术后44,55。为了避免术后并发症,在关闭胸部之前,通过注射器从胸部排出空气。

本文的第二个任务是通过一个孤立的工作心脏实验模型来评价血液动力学功能,它如何用于我们研究所66、77的其他项目。虽然超声心动图、心脏磁共振成像(MRI)和压力体积回路的侵入性定量是评估体内心脏功能的众所周知和广泛使用的方法,但已知有一些局限性。侵入性方法,如使用导管检查心脏的全球功能或特定参数,是常用的,代表了心脏测量的黄金标准。相比之下,由于心脏器械的复杂性和成本,它很少使用。有许多重要的方面,从渗透的混合物到心脏的充分罐能,这对成功评估至关重要。分离的工作心脏器械最初由奥斯卡·兰根多夫于1897年8月8日描述,近几十年来进行了9次修改。今天,有两种型号使用:朗根多夫 (LD) 模式和工作心 (WH) 模式。在我们的研究中,LD模式用于使心脏适应其新环境(约15分钟)。在这种模式下,心脏通过主动脉进行可孵性,冠状动脉经产前渗透,充分供应心肌。在 LD 模式下,心脏不执行任何压力体积工作。相比之下,在WH模式下,左中庭通过肺静脉进行缓冲,通过肺静脉使渗透进入左中庭。心脏然后泵这个渗透生理对预定义的后负荷。通过增加后载物,可以持续测量心脏功能。可以测量冠状动脉流、心脏输出 (CO)、中风体积 (SV) 和工作、心房流和 LV 收缩和舒张压力等参数。各种治疗的影响直接和单独对心脏可以调查6,6,10。廖和波德瑟9日的一篇评论介绍了该方法在评价药理作用对心脏功能和新陈代谢以及探索MI、HF、肥胖症和糖尿病等多种疾病的广泛使用。

总之,该协议提出了一种可重复的方法,用于在体内执行MI或心肌缺血/再灌注(MIR)损伤。此外,它允许在MI之后对孤立的大鼠心脏进行LV(dys-)功能的表征。该协议提出了治疗和分析的独特组合。

Protocol

提供本文所述结果的实验议定书已获得维也纳医科大学实验室动物实验区域伦理委员会和奥地利联邦教育、科学与研究部(BMWFW-66.009/0023-WF/V/3b/2016)的批准。所有实验都符合美国国家卫生研究院出版的《实验室动物护理和使用指南》(NIH第85-23号出版物,1996年修订)。

注:使用10-12周大的雄性斯普拉格道利大鼠,体重250~300克(BW)。由于以下程序和治疗是在手术室 (OR) 的无菌环境中进行的,因此在处理动物时要佩戴磨砂、手套、面罩和罩头。在进入 OR 之前,请确保洗手和消毒。如果打算在手术中对几只动物进行手术,要么清洗和消毒,要么在手术之间高压灭菌。这些卫生指南对于协议部分中介绍的所有程序都有效。

1. 术前准备和麻醉

  1. 通过注射辛(4毫克/千克BW)和氯胺酮(100毫克/千克BW)的混合物,启动术前麻醉。
  2. 用 14 G 管和音量控制通风的大鼠进行插管,混合 O2、空气和西氟拉涅 (1⁄2.5%)在 75×85 冲程/分钟,100 mL/描边/BW(图 1A)。如有必要,为了在插管时获得更好的视野:通过棉质毛尖在下咽部上涂抹 Xylocain,以实现局部放松。
  3. 将大鼠放在加热的操作台上,放在一个下部位置,用胶带固定前肢(图1B)。
  4. 使用探头测量直肠温度。
    注:应保持在37.5~38.5°C之间。
  5. 剃剃胸,用防腐性povidone碘溶液清洁手术区域。给老鼠涂上眼药膏,防止眼睛干燥。
  6. 通过注射皮里替米德(0.1 mL/kg BW)在腹内施用术中性性性肛门。
  7. 将心电图探头放在动物的四肢下。
  8. 在开始外科手术之前检查尾部和脚趾反射。

2. 外科手术~心肌缺血诱导

  1. 使用手术刀进行皮肤切口。确保在第 3 个空间间空间的级别左胸开始 2 mm 准骨,并继续到第 5 个间腔间空间级别的前前部前部线(图 1C)。
  2. 轻轻更换表面的肌肉,使肋骨可见(图1D)。
  3. 在轻微出血的情况下,使用烧灼土抹掉或断开周围的组织。
  4. 在第4个间隔空间的水平上进行胸科切除术,并插入一个缩影器,以获得心脏和肺的可见度(图1E)。小心地打开胸膜以避免出血。
  5. 使用游环暂时遮挡LAD,在规定时间内诱导缺血/再灌注(MIR);或永久 (MI) 使用 6-0 缝合线进行 6-7 节关闭连接(图 1F,G),从而将其遮挡。
    注:LAD 的遮挡的右侧位置位于心脏腹腔/左侧边距左尿室下方约 2⁄3 mm。成功的遮挡与 ECG 变化(ST 段高程)和 LV 中的宏观变化作为苍白相关。
  6. 在缺血/再灌注模型的情况下,在30分钟的闭塞后,通过去除曲解来重新打开LAD。
  7. 使用 4-0 单个单单丝缝合线关闭胸部(图 1H)。在拧紧最后缝合线之前,用10 mL注射器从胸部排出任何残余空气,以防止肺气肿(图1I)。
  8. 重新定位肌肉并关闭挥发性麻醉。
  9. 使用 4-0 缝合缝合皮肤(图 1J)。
  10. 施用防腐喷雾剂,防止大鼠感染和咬牙缝合。

3. 术后治疗和排除标准

  1. 把老鼠放在加热台上,直到它们醒来。大鼠一开始自发地呼吸就排泄。
  2. 将排泄的老鼠放在加热灯下的笼子里,以防止它们冷却。
  3. 当大鼠开始正常时,在标准化的条件下将大鼠送回动物舍。
  4. 在术后性甘痛症中加入2个半核糖和30 mL5%葡萄糖,用于术后性甘痛症的250mL水。
  5. 检查大鼠的健身和行为与清单和排除标准(表1)。在接下来的一周里,每天观察动物两次,然后每周观察两次。
    注:根据国际标准,向兽医出示任何受难动物或在检查表评估中获得最多6分的动物,以便兽医做出与治疗相关的决定。任何获得7分或以上的动物必须立即牺牲过量的氯胺酮和木拉辛。
考试 观察 得分
体重 稳定 0
10% 损失 4
48 h 的 15% 损耗 7
18% 损失 7
正常(涂层平和有光泽) 0
外部外观 皮洛勃兰 1
血肿 2
皮肤伤口/割伤/咬痕 2
严重减少梳妆 4
(不洁/凝固或潮湿) 7
严重的皮肤刺激或伤口 7
驼背姿势 >2 h 7
显著的腹部扩张(腹水) 7
行为 正常(睡眠,好奇,社会接触,接触时反应) 0
异常行为,例如活动受损 2
自我隔离、明显多动或立体 4
莱哈尔吉亚为 <6 h 4
嗜痛 6 小时到 8 小时 7
冷漠 >8 h 7
立体状态不间断为 >10 分钟,并在 2 小时后仍然存在 7
触摸时疼痛迹象 7
自动残割 7
消化 正常 0
腹泻(软粪便) 3
腹泻 72 小时或水性 7
血腥的凳子 7

表1:清单和排除标准。此表包含必须遵守的考试和相应的分数。因此,必须调整动物的术后治疗,或必须咨询兽医。

4. 回声心动测量

注:回声心动图通常进行两次,在MI诱导之前和器官收获之前。

  1. 注射大鼠体内的木拉辛(4毫克/千克BW)和氯胺酮(100毫克/千克BW)的混合物。
  2. 将大鼠置于加热托盘上的上位。将回声凝胶涂在胸部,帮助超声波更好地传播,减少信号干扰。
  3. 在毛细管肌肉水平上获取 LV 腔的准轴视图。
  4. 执行 M 模式回声心动图,以测量左心室弹出分数和形态。

5. 器官采集(无工作心脏)

  1. 在器官采集前,在腹内施用辛(4毫克/千克BW)和氯胺酮(100毫克/千克BW)。确保反射为负。
    注:无需插管,因为该过程不会持续超过 1 分钟。
  2. 使用手术刀在xiphoid下进行皮肤切口,并用剪刀平行地延伸到两侧的肋骨上。
  3. 切肋骨在前部草线,抓住西福举起胸部(图2A)。
  4. 通过用两对钳子小心地破坏组织,去除解剖或纤维化组织粘附。
  5. 用5 mL注射器从维纳卡瓦劣质的静脉注射血液样本(用于血气评估或分子分析)。
  6. 在入口和出口水平执行整个心脏的切除(图2B)。如有必要,按照第 6 节所述进行工作心脏评估。
  7. 收获器官,在液氮中结霜,储存在-80°C内,用于进一步分子分析,或以甲醛的形式用于组织学目的。

6. 通过工作心脏系统进行前活体血液动力学测量

注: 设备的总体设置和部件之前已描述11。以下协议描述了动物心脏的处理以及评估LV功能的必要步骤。

  1. 麻醉大鼠,如步骤5.1所述,并静脉注射200IU肝素(股骨静脉)。
  2. 用手术刀在成本拱门下方的切口打开胸腔,用剪刀将其延伸到前前刀线,并提升胸骨。
  3. 将大容器靠近出口或入口到心脏,以将其切除(图2B)。
  4. 将心脏浸入冰冷的Krebs-Henseleit缓冲液中,并通过调节主声将其安装在红细胞渗透的隔离心脏系统上(图3A)。
  5. 从 LD 模式开始,恒定后负载为 60 mmHg(稳定期)。
  6. LD 模式 15 分钟后,切换到 WH 模式。因此,通过肺静脉对左中庭进行缓冲(图3B)。然后,通过打开遮挡心房管的剪辑来更改系统中的流方向。这导致左中庭灌注和左心11的生理血流。
  7. 在 WH 模式下记录 20 分钟的血液动力学测量。
  8. 用2 mL注射器收集冠状动脉的血滴,每5分钟测量一次冠状动脉流量(CF,mL/min)。
    注:CF 测量为左心房流 (LAF) 和主动脉流 (AF) 之间的差异。
  9. 使用流量探头对 LAF(相当于心脏输出)和自动对焦进行连续测量。
    注:探头通过WH设备插入LV。所有数据都不断注册。
  10. 如果正在进行的协议要求,通过主动脉瓣逆行插入高保真导管到LV并测量左心室收缩压 (LVSP)。
  11. 要评估每分钟执行的压力体积工作,计算中风体积作为心脏输出除以心率。
  12. 根据以下公式计算外部心脏工作 (EHW): CO x LVSP(g x m/min) 与心脏重量正常化。

Representative Results

Pilz等人已经发表了以下结果。通过这种精确的外科手术,可以研究远程缺血性调理(RIPerc)的心肌保护作用。这是一种潜在的新疗法,患者患有急性MI或MIR和随后的心室重塑,在许多情况下导致连续HF。 模仿MI/MIR的病理生理变化是评估治疗的强制性步骤,因为体外或活体研究不能提供生理环境。在该协议中,动物受到30分钟的LAD遮挡,然后再灌注(即MIR)。

为了证明手术的可重复性,进行了组织切割和污渍(图4A)。显然,MIR_RIPerc治疗动物的纤维化疤痕与沙姆动物的疤痕形成相当,而Sham和MIR组之间的纤维化比较是显著的(图4B)。此外,与MIR处理的动物相比,MIR_RIPerc处理过的动物纤维化显著减少。然而,代表组织图像澄清了这种外科手术的效力,因为梗死在MIR组中显式维持(图4A)。使用体内电谱法谱、喷射分数、LV端二分和末核收缩直径(LVEDD和LVESD)进行了测量,并显示由于MIR治疗,心脏功能显著降低,而血液动力学参数则由RIPerc保留(图4C+F)。−F外活体血液动力学数据显示了手术的有效性,因为MIR组显示LVSP、心脏输出(CO)、中风体积(SV)和外部心脏工作(EHW)显著下降(5A+G)。

关于这种外科手术的文献检索报告没有负面或不满意的评论和结果,当它得到充分执行。然而,在介绍和讨论中提到的陷阱需要防止,培训是强制性的,以获得稳定的业绩水平,并获得类似的结果。

Figure 1
图1:术前准备和外科手术. ( A ) 使用14 G管对动物进行插管. (A)(B) 手术场的苏菲定位和消毒。(C) 皮肤切口(左胸的2毫米准骨,位于第3层空间的水平)。切口必须到达第 5 个成本空间水平的前共通线。(D) 取代肌肉,使肋骨可见。(E) 胸腔的开口。(F) 使用 6⁄7 节永久遮挡 LAD。(G) 使用游环的 LAD 瞬态遮挡。(H) 心肌缺血和再灌注后,在肋骨周围放置三个单结缝合线,从而封闭胸部。(I) 正确关闭胸部。使用 10 mL 注射器在紧紧固定最后一个结之前,从胸部排出任何残余空气。这是防止肺尘埃莫托的一部分。(J) 皮肤缝合。请点击此处查看此图形的较大版本。

Figure 2
图2:器官采集。A) 用子十六号切口打开胸部,并延伸到两条中间的警戒线。进一步切开肋骨,以方便抬升胸骨。(B) 心脏切除。请点击此处查看此图形的较大版本。

Figure 3
图3:隔离心脏器械。A) 朗根多夫模式。心脏通过主声的罐式安装到WH仪器上。(B) 工作心脏模式。系统可以切换到WH模型,通过调节左侧中庭来评估心脏功能。请点击此处查看此图形的较大版本。

Figure 4
图4:远程缺血调节对疤痕形成、左心室功能和重塑的影响。A) 在心肌再灌注后第 14 天收获的组织学 LV 切片。(B) 在条形图中量化纤维化的结果。(C) 代表 M 模式超声心动图。(D) 在条形图中量化的弹出分数 (EF)。(E) LV 端收缩直径 (LVESD) 在条形图中量化。(F) LV 端分直径 (LVEDD) 在条形图中量化。MIR,心肌缺血-再灌注;RIPerc,远程缺血性调理。数据表示为平均值 = SEM.*p < 0.01;p < 0.001.经埃尔塞维尔许可,从Pilz等人6号转载。请点击此处查看此图形的较大版本。

Figure 5
图5:RIPerc对LV血液动力学功能的影响。(A) LV收缩压 (LVSP),B ) 心脏输出 (CO) 和 (C) 中风体积 (SV) 结果在心肌后灌注后的第 14 天从孤立的工作心脏获得。(D) CO 被描绘成后载函数;(F) 外部心脏工作作为后载函数,量化结果在条形图 (EG) 中。数据表示为均值 = SEM 和 n = 每个组 4+7。*p < 0.05;*p < 0.01;p < 0.001.MIR,心肌缺血/再灌注;RIPerc,远程缺血预置;EHW,外心工作;SV,笔画体积;AUC,曲线下的区域。经埃尔塞维尔许可,从Pilz等人6号转载。请点击此处查看此图形的较大版本。

Discussion

后MI的不良改造被认为是心力衰竭发展的关键机制。因此,为了保证心血管研究的连续性,实验程序和技术应该是可重复的。可理解且定义明确的实验协议是可重复性的基本要素。可重复性是指多个科学家可以重复并在实验室中验证的结果。这项研究旨在提出一种半微创方法,以诱导慢性或重新渗透的MI,并评估大鼠的心脏血液动力学功能。

这些结果和进一步公布的数据表明,这种手术方法具有很高的效力,在MI、改造和HF研究中的重要性。虽然缺血/再灌注损伤可用于了解MI的变化和随后的再灌注,但永久的闭塞可以进一步了解心肌的短期和长期重塑过程。其他手术方法导致更多的组织损伤,动物表现出更高的感染和肺气肿的风险,导致更高的辍学率。相反,此程序旨在通过设置和处理的具体改进来降低死亡率。此外,它们显示由于不稳定的 LAD 遮挡而纤维化疤痕扩张的变化。

我们的协议提供了一种简单的插管方法,这是整个过程最关键的步骤之一。与其他几本出版物12相比,气管切开手术在我们的过程中不进行。这增强了动物术后的觉醒和康复,导致在动物进行术后测量之前,这种手术所打算的病理生理学变化的发展。显然,如果它是非生存协议,气管切开术是在视力下进行的,因此更容易执行。此外,在生存协议中关闭气管切开术是不适用的。如果胸腔被打开,必须给肺部通风以防止崩溃。因此,大鼠在手术前插管。微创方法不会切割肋骨或胸骨,从而保持胸部的紧凑性和稳定性。因此,动物的恢复得到改善,自发性肺气肿或出血的风险相对较低。

如上所述,虽然插管具有明显的优势,但很难执行,并且可能导致在实验开始时的辍学率较高。通过培训和一些解剖学知识可以缓解这个问题。重要的是要插入管在直角和伸展动物的身体,直到光线通过声唇闪耀,然后管可以轻轻地向前推。小心不要伤害声唇,因为这可能导致肿胀,随后的粘液和窒息。

LAD 正确连接也很重要。小手术窗口、快速跳动的心脏和通风的肺(避免尽可能多接触它,因为每次接触都可能导致肺部出血),使血管无法明显可见。因此,解剖学知识是不可或缺的。左尿柱对于帮助使危险区域标准化以及围绕 LAD 定位连接是必不可少的。缝合需要在室内进行,而不是在LV中进行,因为这可能导致LV腔室直径和体积的减少,这不是由于病理过程造成的。成功的遮挡与心电图上存在风险的心肌区青紫和ST段的升高有关。此过程的主要限制是缝合的正确定位。要达到可比的结果,缝合必须在同一水平,需要使用同样量的组织。这需要高水平的训练,必须考虑动物的不同重量。需要考虑的另一点是,在闭合舱内空间之前,适当去除肺尘埃。如果不精确执行,动物将表现出呼吸困难,因为左肺的通货膨胀将受到肺气肿的阻碍。如上所述,通过使用注射器从胸部去除任何残留空气,可以减轻这种情况。

目前,这种MI程序是一种常用的方法,如果高精度地执行关键步骤,保证结果相当,存活率高。未来项目的各种治疗,设备或药物在MI,HF或心脏重塑可以通过执行这种微创技术进行评估。

如上所述,WH 测量不常使用,因为它的维护和处理需要特定的设备和知识。为了获得具有代表性和可比性的数据,必须避免陷阱。最关键的步骤是心脏的安装和从 D 模型切换到 WH 模式。如果心脏没有充分切除,安装可能很困难,因为需要足够的主动脉组织长度来固定心脏到仪器上。连接到 LD 模式后不久,心脏频率可能会因冷缓冲液的洗涤、其生理刺激在体内的断开或设备与另一物种的血液重新灌注而降低。在这种情况下,必须应用起搏器来恢复和保持生理频率。这确保了所有动物的可比结果。由于仪器内的血液体积是大鼠生理体积的倍数,因此使用Krebs-Henseleit缓冲悬浮液中的牛红血球。

从 LD 模式切换到 WH 模式是从被动心脏工作切换到主动心脏工作的同义词。LD 模式用于使心脏适应其新环境。在WH模式下,心脏必须执行其生理弹出功能。因此,在评估前需要短的适应阶段,通过增加后载量。

另一个经常被遗忘的关键步骤是仪器和渗透的充分准备和维护。必须混合每个化合物的精确体积,并且必须控制和调整系统内的温度。然而,WH是一种优雅的方法,用于同时评估心脏输出、中风体积、左心室收缩压力和冠状动脉流动。

这种诱导MI的高度可重复的过程和WH设备获取的表示数据正在证明它们本身的能力。半微创方法、LAD遮挡和插管方法有助于快速恢复和梗死尺寸的低变异性。此外,在隔离的工作心脏的心脏功能分析提供了宝贵的血液动力学结果。

Disclosures

作者没有什么可透露的。

Acknowledgments

作者感谢生物医学研究中心的运营剧团和技术人员的贡献、技术援助、宝贵的意见和建议。这些项目由路德维希·博尔茨曼心血管研究集群(REM项目)资助。

Materials

Name Company Catalog Number Comments
ANAESTHESIA & ANALGESIA
Isoflurane Zoetis TU061219 / 8-00487
Ketamine Dr. E. Gräub AG 100 mg/kg of bodyweight
Piritramide Hameln-Pharma Plus GmbH 2 ampulles with 30 ml of Glucose 5% in 250ml water
Xylazine Bayer 4 mg/kg of bodyweight
INTUBATION
Air
Oxygen (pure)
Ventilation machine Hugo Sachs Electronics UGO Basile S.R.L. Respirator
14-gauge tube Dickinson and Company BD Venflon
PREPARATION
Anti-septic povidine iodine solution  Mundipharma Betaisodona solution
Eye ointment  Fresenius Kabi Austria Oleovital with Vitamin A + Dexpanthenol
Shaver
SURGICAL INSTRUMENTS
Anatomical forceps Martin 12-272-15
Anatomical forceps small Martin 24-386-16
Anatomical forceps thin Odelga RU4042-15
Cautery Fine Tip High Temp bvi-Accu-Temp
Cup (small, for liquids) Martin 56-231/11
Mensur MTI 29-260/25
Mosquito clamps MTI 05-055/12
Needleholder short Martin 20-658-14
Needleholder thin Martin
Round hook BT-190
Scalpell size 3 Swann Morton No.10, 0301
Scissors for tissue preparation Aesculap BC259R
Sharp scissors MTI 01-010/10
Small retractor Alm AM.416.10
Surcigal forceps Martin 12-321-13
Surgical scissors
SUTURES
PermaHand Silk 4-0 Johnson & Johnson Medical Products GmbH K891H
Vicryl 4-0 Johnson & Johnson Medical Products GmbH JV2024 single monofil suture 
Vicryl 6-0 Johnson & Johnson Medical Products GmbH V301G polyethylene suture 
COMPUTER PROGRAMS & APPARATUS
Labchart 7 Pro ADInstruments v7.3.2 Labchart Software
PowerLab System  ADInstruments Powerlab 8/30
EX VIVO HEMODYNAMICS
Flowmeter Narcomatic RT-500 Narco Bio-Systems flow probe 
Isolated heart apparatus  Hugo Sachs Electronics
Labchart 7 Pro ADInstruments GmbH v7.3.2 Labchart Software
Millar SPR-407 Millar Instruments Inc. 840-4079 high-fidelity MicroTip catheter 
Needle electrodes via Animal bio Amp ADInstruments GmbH MLA1203
Physiological Pressure Transducer (MLT844) with Clip-on BP Domes  ADInstruments GmbH MLT844
PowerLab System  ADInstruments GmbH Powerlab 8/30

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. WHO. Global Health Estimates 2015: Deaths by Cause, Age, Sex, by Country and by Region, 2000-2015. World Health Organization. , (2016).
  2. Jaquet, K., et al. Reduction of myocardial scar size after implantation of mesenchymal stem cells in rats: what is the mechanism. Stem Cells and Development. 14 (3), 299-309 (2005).
  3. Liu, P., Xu, B., Cavalieri, T. A., Hock, C. E. Age-related difference in myocardial function and inflammation in a rat model of myocardial ischemia-reperfusion. Cardiovascular Research. 56 (3), 443-453 (2002).
  4. Kolk, M. V. V., et al. LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction. Journal of Visualized Experiments. (32), e1438 (2009).
  5. Lugrin, J., Parapanov, R., Krueger, T., Liaudet, L. Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery. Journal of Visualized Experiments. (150), e59591 (2019).
  6. Pilz, P. M., et al. Remote ischemic perconditioning attenuates adverse cardiac remodeling and preserves left ventricular function in a rat model of reperfused myocardial infarction. International Journal of Cardiology. 285, 72-79 (2019).
  7. Santer, D., et al. In vivo and ex vivo functional characterization of left ventricular remodelling after myocardial infarction in mice. ESC Heart Failure. 2 (3), 171-177 (2015).
  8. Langendorff, O. Untersuchungen am überlebenden Säugetierherzen II. Über den Einfluss von Wärme und Kälte auf das Herz der warmblütigen Tiere. Pflügers Archiv für die gesamte Physiologie des Menschen und der Tiere. 66 (67-68), 355-400 (1897).
  9. Liao, R., Podesser, B. K., Lim, C. C. The continuing evolution of the Langendorff and ejecting murine heart: new advances in cardiac phenotyping. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 303 (2), 156-167 (2012).
  10. Podesser, B. K., et al. The erythrocyte-perfused "working heart" model: hemodynamic and metabolic performance in comparison to crystalloid perfused hearts. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 41 (1), 9-15 (1999).
  11. Kiss, A., et al. Argon preconditioning enhances postischaemic cardiac functional recovery following cardioplegic arrest and global cold ischaemia. European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 54 (3), 539-546 (2018).
  12. Kiss, A., et al. Vagal nerve stimulation reduces infarct size via a mechanism involving the alpha-7 nicotinic acetylcholine receptor and downregulation of cardiac and vascular arginase. Acta Physiologica. 221 (3), 174-181 (2017).

Tags

医学, 问题 160, 心肌梗死, 缺血/再灌注, 重塑, 工作心脏, 血动力学, 大鼠
诱导大鼠心肌梗死的半微创方法及独立工作心脏系统对心脏功能的评估
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Pilz, P. M., Lang, M., Hamza, O.,More

Pilz, P. M., Lang, M., Hamza, O., Szabo, P. L., Inci, M., Kramer, A. M., Koch, M., Huber, J., Podesser, B. K., Kiss, A. Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System. J. Vis. Exp. (160), e61033, doi:10.3791/61033 (2020).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter