Summary

血管可視化のための二重ラスター走査光音響小動物イメージャー

Published: July 15, 2020
doi:

Summary

広視野イメージングとリアルタイムイメージングを統合したデュアルラスタースキャン光音響イメージャーが設計されました。

Abstract

小動物の血管ネットワークのイメージングは、生物医学の基礎研究において重要な役割を果たしてきました。光音響イメージング技術は、小動物の画像学に応用する大きな可能性を秘めています。小動物の広視野光音響イメージングは、高い時空間分解能、深い浸透、および複数のコントラストを持つ画像を提供することができます。また、リアルタイム光音響イメージングシステムは、小動物の血管系の血行力学的活性を観察することが望ましく、小動物の生理学的特徴の動的モニタリングを研究するために使用することができる。ここでは、デュアルラスタースキャン光音響イメージャーが提示され、切り替え可能なダブルモードイメージング機能を搭載しています。広視野のイメージ投射は2次元の電動翻訳段階によって駆動され、リアルタイムのイメージ投射はガルバノメーターによって実現される。異なるパラメータおよび撮像モードを設定することにより、小動物血管ネットワークの生体内可視化が行える。リアルタイムイメージングを用いて、薬物誘発の脈拍変化や血流変化などを観察することができる。広視野イメージングは、腫瘍血管系の成長変化を追跡するために使用することができる。これらは、基礎生物医学研究の様々な分野で容易に採用されます。

Introduction

基本的な生物医学分野では、小動物はヒトの生理機能をシミュレートすることができる。したがって、小動物イメージングは、ヒト相同病の研究を導き、有効な治療1を求める上で重要な役割を果たす。光音響イメージング(PAI)は、光学画像化と超音波画像2の利点を組み合わせた非侵襲的なイメージング技術である。光音響顕微鏡(PAM)は、小型動物3の基礎研究に有用なイメージング法である。PAMは、光学励起および超音波検出4に基づいて、高解像度、深浸透、高特異性および高コントラスト画像を容易に得ることができる。

特定の波長のパルスレーザーは、組織の内因性クロモフォアによって吸収されます。その後、組織の温度が上昇し、光誘導超音波の生成をもたらす。超音波は超音波トランスデューサで検出できます。信号取得と画像再構成後、吸収体の空間分布が5に得られる。一方で、全臓器血管ネットワークの可視化には広い視野が必要である。広視野スキャンのプロセスは、通常、高解像度6、7、8を確保するために長い時間がかかります。一方、小動物の血行力学的活動を観察するには、高速リアルタイムイメージングが必要です。リアルタイムイメージングは、リアルタイム9、10、11で小動物のバイタルサイン研究するのに有益です。リアルタイムイメージングの視野は、通常、高い更新率を確保するのに十分に小さいです。したがって、広い視野を達成することとリアルタイムイメージングを達成することとの間にはトレードオフが存在することが多い。以前は、2つの異なるシステムが、広視野イメージングまたはリアルタイムイメージングに別々に使用されていました。

この研究は、2次元電動変換ステージに基づく広視野イメージングと2軸ガルバノスキャナに基づくリアルタイムイメージングを統合した、二重ラスタスキャン光音響イメージャー(DRS-PAI)を報告しています。広視野イメージングモード(WIM)は、血管形態を示すために行われる。リアルタイムイメージングモード(RIM)では、現在2つの機能があります。まず、RIMはリアルタイムのB-スキャン画像を提供することができます。深さ方向に沿った脈管系の変位を測定することで、呼吸や脈拍の特性を明らかにすることができる。次に、RIM は、WIM イメージ内の特定の領域を定量的に測定できます。ローカル WIM リージョンの同等の画像を提供することで、ローカルの変更の詳細を正確に明らかにすることができます。このシステムは、血管可視化の広視野イメージングと局所的なダイナミックのリアルタイムイメージングとの間の柔軟な移行を設計します。このシステムは、小動物イメージングが必要な基礎生物医学研究において望ましい。

Protocol

すべての動物実験は、中国広州南華師範大学の機関動物管理および使用委員会が提供するガイドラインに従って行われた。 1. システムのセットアップ 光路 (図 1) システムレーザーソースとして532 nmパルスレーザーを使用します。レーザーの繰り返しレートを10kHzに、出力エネルギーを100%に、トリガ設定をユーザ定義プログラムを使用?…

Representative Results

DRS-PAI の概略を図 1に示します。このシステムは、RIM を使用した WIM 間の柔軟で繰り返し可能な切り替えを可能にします。取得したPA信号は、PA B-スキャンおよびMAP画像を生成するために迅速に処理されます。CCDカメラはサンプルの写真を提供することができます。 DRS-PAIのすべてのコンポーネントは、イメージャーのセットアップ(図2…

Discussion

ここでは、血管構造の構造と関連する血液の動的変化を捉えるために設計および開発された非侵襲的な血管視覚化のための二重ラスタースキャン光音響小動物イメージャーを発表した。DRS-PAIの利点は、WIMとRIMを1つのシステムに統合し、小動物の血管の動的および血管ネットワーク構造を研究しやすくすることです。システムは高解像広視野の脈管視覚化およびリアルタイムの血球の動態を?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者らは、中国国立自然科学財団(61822505;11774101;61627827;81630046)、中国広東省科学技術計画プロジェクト(2015B0233016)、広州科学技術プログラム(200010年)からの財政支援を認めたい。

Materials

12 bit multi-purpose digitizer Spectrum M3i.3221 Data acquisition card
A-line collected program National Instrument LabVIEW User-defined program
Amplifier RF Bay LNA-650 Amplifier
Depilatory Cream Veet 33-II Animal depilatory
Fiberport Coupler Thorlab PAF-X-7-A Fiber Coupler
Field Programmable Gate Array Altera Cyclone IV Trigger Control
Fixed Focus Collomation Packages Thorlabs F240FC-532 Fiber Collimator
Foused ultrasonic transducer Self-made
Graphics Processing Unit NVIDIA GeForce GTX 1060 Processing data
Holder Self-made Animal fixation
Laser control program National Instrument LabVIEW User-defined program
Mice Guangdong Medical Laboratory Animal Center BALB/c Animal Model
Microscope camera Mshot MS60 CCD camera
Microscope Objective Daheng Optics GCO-2111 Objective Lens
Mirror Daheng Optics GCC-1011 Moveable/Fixed Mirror
Moving Magnet Capacitive Detector Galvanometer Scanner Century Sunny S8107 real-time scanner
Mshot image analysis system Mshot Display software
Normal Saline CR DOUBLE-CRANE H34023609 Normal Saline
Ophthalmic Scissors SUJIE Scalp Remove
Planar ultrasonic transducer Self-made
Plastic Wrap HJSJLSL Polyethylene Membrane
Program Control Software National Instrument LabVIEW User-defined Program
Pulsed Q-swithched Laser Laser-export DTL-314QT 532-nm pulse Laser
Real-time imaging program National Instrument LabVIEW User-defined program
Ring-shaped white LED Self-made
Shaver Codos CP-9200 Animal Shaver
Single-Mode Fibers Nufern 460-HP Single-mode fiber
Surgical Blade SUJIE 11 Blade
Surgical Scalpel SUJIE 7 Scalp Remove
Translation Stage Jiancheng Optics LS2-25T wide-field scanning stage
Ultrasonic Transducer Self-made
Ultrasound gel GUANGGONG PAI ZC4252418 Acoustic Coupling
Urethane Tokyo Chemical Industry C0028 Animal Anestheized
Water tank Self-made
Wide-field imaging program National Instrument LabVIEW User-defined program
XY Translator Mount Self-made

References

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Cite This Article
Yang, F., Wang, Z., Yang, S. Dual Raster-Scanning Photoacoustic Small-Animal Imager for Vascular Visualization. J. Vis. Exp. (161), e61584, doi:10.3791/61584 (2020).

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