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지정된 체크리스트를 사용하여 돼지를 연구하는 농장 돼지의 전환 과 함께 리모콘 교육개시 - 개선 이니셔티브

Published: August 21, 2021 doi: 10.3791/62099
* These authors contributed equally

Summary

폴리머를 사용하여 표준화된 체크리스트와 양성 보강 교육을 도입하여 돼지 연구의 정제를 달성합니다. 이 작품은 샘플의 수집과 동물과 관련된 매일 집안일의 행동을 지원합니다.

Abstract

3R 이니셔티브의 구현이 중요합니다. 실험실 돼지의 수명을 개선하기 위해, 우리는 실험에 동물을 포함하기 전에 기간에 초점을 맞추었습니다. 우리는 개발 중에 체크리스트를 개선했습니다. 체크리스트를 사용 하 여 각 개별 돼지의 진행 상황을 문서화 했다. 이것은 간병인이 동물을 사회화하고 동물의 스트레스와 불안 수준을 제한하는 데 필요한 행동에 계속 초점을 맞출 수 있도록 돕습니다. 이 단계에서 돼지는 침착해지고 실험 기간 동안 스트레스를 더 제한하기 위해 추가 리머 훈련을 시작할 준비가됩니다. 돼지는 쉽게 식기 또는 고정없이 수집 할 수있는 기본 결과 조치를 허용합니다.

프로토콜은 두 개로 나뉩니다. 먼저 돼지가 연구 시설에 도착하면 시작되는 전환 단계. 간식을 소개하고 관리인에게 점차적으로 더 가까이 접촉하는 것이 첫 번째 단계입니다. 이어서, 관리인은 머리와 뒷자를 만질 수 있는 행동을 소개하고, 예를 들어 혈액 샘플을 채취하기 위해 귀를 조작하거나 뒷드를 사용하여 직장 온도를 얻을 수 있는 동작을 소개한다. 동물 관리인 관계에 강력한 기반이 세워지고 있으며, 이것은 도착 후 돼지가 표현하는 스트레스를 신속하게 최소화합니다. 둘째, 긍정적 인 보강 훈련은 스트레스를받지 않고 더 복잡한 작업을 수행하는 방법을 동물을 가르 치기 시작합니다. 리버튼은 보조 보강재로 도입됩니다.

시간, 구조, 교육 및 철저한 의사 소통은이 프로토콜의 적용에 성공하기 위해 가장 중요한 기준인 것 같습니다. 조용하고 규정을 준수하는 돼지를 갖는 것 외에도 관리인은 각 돼지에게 주는 데 허용되는 초점을 즐기고 전반적인 직무 만족도를 더한다고 보고합니다. 각 돼지의 전환 진전과 복지에 중점을 둔 관리인을 보유함으로써 부서의 치료 문화를 더욱 강화합니다.

Introduction

1959년 러셀과 버치가 논의한 3R(교체, 감축 및 정제)의 원칙은 실험목적으로 동물을 사용하는 것에 관한 높은 윤리적 기준을 위한 오늘날의 토대를 형성합니다. 전임상 실험실 동물 연구에 종사하는 생물 의학 연구 시설에서, 매우 중요한 개선 원리에 준수해야 합니다. "정제는 여전히 사용되어야하는 그 동물에 적용되는 비인도적 인 절차의 부각 또는 심각도의 감소를 의미합니다"1.

현대의 정의는 또한 "최신 생체 공학 기술을 활용하고 복지가 과학적 결과에 미치는 영향에 대한 이해를 향상시킴으로써 동물 복지에 대한 연구를 발전시키고있다"고말합니다 2. 이것은 오늘날의 개선 이니셔티브가 동물의 복지에 중요 할뿐만 아니라 과학적 결과가 이러한 이니셔티브 3의혜택을 누릴 수 있기 때문에 품질을 연구하는 데 중요하다는 것을 의미합니다.

고려해야 할 한 가지 개선 이니셔티브는 실험 동물을 사교하고 훈련시키는 것입니다. 그(것)들은 혈액 견본이 그려지는 동안 규모에 단계 또는 침착하게 행동하기 위하여 예를 들면, 특정 업무를 능력을 발휘하기 위하여 훈련될 수 있습니다. 일부 종은 다른 종 보다 훈련에 더 자연적으로 처분 될 수 있습니다 그리고이 훈련 실험실 동물 종에 대 한 전통에 영향을. 전통적으로, 개 훈련은 사냥에 개를 사용하기 위해 예를 들어, 수세기 동안 수행되었습니다. 이러한 역사적인 전통은 가장 확실히 생물 의학 연구 설정에서 개 훈련을 더 간단하게 만들었습니다. 비 인간 영장류와 함께, 실험실 개 훈련은 꽤 많은 시간 동안 논의하고착수했다4,5.

이 두 종 모두에 일반적인 그들은 "사회 동물 학 규모"에 높은 순위. 이 척도는 자신의 위치에 따라 동물을 순위와 인간 사회에서 사용 6. 높은 순위는 또한 가능한 한 인간적으로 동물을 치료하고 스트레스와 불안 수준을 제한하는 큰 대중의 요구를 전달합니다. 설치류는 개와 인간이 아닌 영장류와 는 달리 사회 동물학적 규모의 하한쪽에 배치됩니다. 그들은 동등한 대중의 관심과 배려를 받지 못했습니다. 역사적으로 그들은 덜 잘 치료되었습니다 - 아마도 생명을 위협하는 질병을 퍼뜨릴 수있는 능력 때문일 것입니다. 그러나, 지난 몇 년 동안 설치류의 훈련은 전임상 연구 설정에서 구현되었으며, 여기에 관련된 과학적 혜택은 주목하지 않았다. 쥐와 마우스 는 모두 흥미롭게도 아주 쉽게 훈련하고 훈련은 또한 그들의 긴장 반응을 제한하고 따라서 과학적 결과를 강화7,8.

실험실 동물 환경에서 돼지를 사교하고 훈련시키는 방법에 대한 보고는 우리의 지식이 부족한9입니다. 사회 동물학적 규모의 돼지는 개와 설치류 사이에 배치됩니다. 우리는 주로 음식 자원으로 종을 인식, 하지만 그럼에도 불구 하 고 돼지의 꽤 많은 수 생물 의학 연구에 사용 됩니다. EU에서만 2015-2017년 10년에는 약 75,000마리의 돼지가 과학적 목적으로 사용되었습니다. 이 숫자는 농장 돼지와 소형 돼지를 모두 포함합니다. 3R을 준수하기 위한 조치로 교육을 통해 이러한 동물의 삶을 개선하는 데 점점 더 초점을 맞추고 있습니다. 농장 돼지와 소형 돼지 는 실제로 11,12훈련을 받을 수 있지만 사회화 측면에서 그들의 출발점은 다양합니다. 미니어처 돼지는 연구를 위해 사육되고 초기 수명 동안 사회화됩니다. 그들은 차분한 성질을 가지고 사육된다. 농장 돼지는 소비를 위해 사육되며 종종 전혀 사교되지 않습니다. 덴마크에서 육류 생산을위한 피니셔 돼지는 일반적으로 무리의 계층 구조에서 위치를 얻기 위해 경쟁해야 15-25 돼지의 고밀도 그룹에 보관됩니다. 그들의 성질은 그 능력을 반영합니다. 종종, 그들은 밖으로 머킹의 워크로드를 제한하기 위해 부분적으로 예정된 바닥과 안정적인 시설에 보관됩니다. 체중 증가를 최적화하기 위해 자동화된 식품 및 물 전달 시스템을 통해 광고 리비도를 공급합니다. 따라서 농장 근로자와의 접촉은 제한적이며 처리 시 스트레스를 받을 수 있습니다. 이것은 동물이 연구 시설로 옮겨질 때 특정 도전을 제기합니다. 여기서 동물 복지, 축산 및 3R이 핵심 역할을합니다(13,14. 연구 관점에서, 각 개별 동물은 최상의 연구 결과를 얻기 위해 중요하다. 동물의 복지는 스트레스, 불안 및 두려움에 관한 낮은 동물 간 변화를 보장하는 것도 중요합니다. 이러한 이유로 "무리 동물"에서 "개인"으로의 전환에주의를 기울이는 것이 중요합니다. 도착 시 돼지는 새로운 향기, 새로운 음식, 동물 관리인과의 일상적인 접촉 및 종종 새로운 펜 메이트와 함께 새로운 환경에 들어갑니다. 돼지에, 변화는 매우 스트레스가 될 수 있으며 며칠의 적응 기간의 중요성은 실험실 동물 과학15에서인정된다.

적응 기간을 구조화하여 구조화단계 체크리스트를 사용하여 "전환 단계"라고 부르는 것을 만들었습니다. 체크리스트는 각 돼지가 충분한 관리인의 접촉을 받고 스트레스를받지 않고 검사 및 샘플 수집을위한 기본 처리를 허용하는 법을 배워야합니다. 이어서 각 특정 연구프로젝트(16,17)를대상으로 양성 보강 훈련을 사용하여 돼지를 양성하기 위한 지속적인 작업을 수행할 수 있다. 리포머는 원하는 동작이 수행될 때 음식 보상을 알리는 데 사용됩니다. 전환 단계의 단계를 돼지의 추가 리모콘 교육과 결합하면 동물에게 연구 시설에서 원활하게 정착할 수 있습니다. 그들은 침착하고 다루기 쉬워지고, 약간의 노력으로 혈액 샘플 수집과 같은 가만히 서 도록 가르칠 수 있습니다. 이러한 유형의 취급 프로토콜을 사용하여 동물 이나 올무의 체임과 같은 구식 기술이 대체됩니다. 모든 돼지가 충분히 처리되었는지 확인하기 위해 체크리스트가 채워져 있습니다.

동물들이 실제로 긍정적인 감정을 느끼고 동물과 함께 일할 때 초점을 맞추는 것이 부정적인 감정의 제거에만 있어서는 안 된다는 것이 널리 받아들여지고 있다(18). 관리인과의 훈련 세션은 긍정적 인 감정적 인 경험의 예입니다. 그것은 취급과 관심을 수신으로 돼지에 대 한 매우 즐거운. 시설에서 취급 스트레스와 두려움 관련 행동을 줄이는 이점 외에도 동물을 훈련시키는 것은 동물에게 긍정적 인 감정적 경험을 제공 할 수있는 기회를 제공합니다. 긍정적인 경험의 추가는 실험실 동물이 수행한 실험과 관련하여 만나는 부정적인 경험의 일부를 중화할 수 있고, 따라서 동물 복지 19,20을더욱 증가시킬 것이다.

돼지는 분명히 훈련 세션을 즐길 수 있지만, 세션은 동시에 관리인에게 각 개별 돼지에 대한 유대를 강화 할 수있는 기회를 제공합니다. 동물 관리인이되는, 동물의 주사와 같은 고통스러운 행동을 수행하는 것은 작업의 일부입니다. 그러나 동물을 훈련시키고 이러한 행동을 긍정적인 경험으로 바꿀 수 있다는 것은 그 자체로 보람있는 것입니다. 그것은관리인의 헌신을 증가시키고21,22,23의학과의 배려 문화를 강화하는 데 중요한 역할을합니다.

돼지는 동물 실험, 주거 및 축산에 관한 국가 법률을 의미하는 기관의 동물 복지 정책에 따라 보관되었습니다. 프로토콜은 모든 연령대의 개미 돼지에 적용 할 수 있습니다. 전환 체크리스트(도1)의개발을 위해 총 40마리의 암컷 교배농장 돼지(덴마크 랜드레이스-요크셔-듀록)가 35-80kg의 무게를 사용하였다(표1). 돼지는 도착 시간에 따라 그룹에 할당되었습니다. 돼지는 2020년 1월부터 9월까지 연구 안정시설에 보관되었습니다. 모든 농장 돼지는 전통적인 뿌리 농장에서 사육되고 약 15kg의 무게를 달을 때 협력 농장으로 옮겨질 것입니다. 생존 연구에 포함되기 전에 적어도 2 주, 돼지는 대학의 연구 안정 시설로 수송된다. 처음 2 주 동안 농장 돼지에서 연구 동물로의 전환이 일어난다. 프로토콜은 유해하지 않으며 긍정적인 행동으로 구성되므로 적응 기간의 일부로 즉시 시작할 수 있습니다.

돼지는 단단한 콘크리트 바닥에 3.4 ~ 6.8 m2 의 펜에 하나씩 보관되었으며 자동 급수를 통해 물에 접근 할 수 있습니다. 각 돼지에 대한 먹이 통이 있으며 이웃 펜으로 분리된 섹션이 하나 이상 있어 주미 접촉을 허용합니다. 돼지가 외과 적 개입을받거나 장비를 이식 할 예정인 경우 펜 메이트가 상처를 핥고 물고 임플란트를 꺼내는 것을 피하기 위해 혼자 보관됩니다. 침구 재료는 짚이며 동물은 철초와 로프, 공, 양동이, 플라스틱으로 만든 츄 스틱(그림 2)과같은 다른 활동 장난감으로 더욱 풍부합니다.

동물은 농장 돼지에 대한 국가 건강 모니터링 프로그램에 포함 된 무리에서 온, 즉 그들은 7 개의 병원체에 대 한 선별24 생산 환경에서 돼지에 영향을 미칠 수 있는. 연간 무작위 검사는 FELASA 권장 사항25,26에기초한 연구 무리에 대해 수행되며 예기치 않은 연구 결과로 인해 진단을 보증하는 돼지의 샘플도 수행됩니다. 이 프로젝트에 사용되는 돼지 중 일부는 돼지 생식 및 호흡기 증후군에 대한 혈청 양성이었다; 그러나 돼지 중 어느 것도 감염에 해당하는 임상 증상을 보이지 않았습니다. 폴리머라제 연쇄 반응을 사용하여 평가된 모든 샘플은 돼지가 건강한 상태에 있었다는 것을 확증하여 부정적이었습니다.

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Protocol

프로토콜을 검증하는 데 사용되는 돼지는 덴마크의 모든 동물 실험을 평가하고 승인하는 국가 정부 기관인 동물 실험 위원회가 승인한 연구의 일부였습니다. 위원회는 IACUC와 유사한 윤리적 검토를 수행합니다.

1. 연구시설 도착

  1. 먼저 돼지를 지정된 구역에 세척하여 철저한 육안 검사를 허용합니다. 제외 목록을 사용하여 상처, 귀 물린, 농양, 절름발이 등돼지를 제외하므로 임상적으로 건강한 것처럼 보이는 동물만 시설에 들어갈 수 있습니다.
  2. 세척 후, 색상 마크에 따라 그룹으로 돼지를 정렬합니다. 색상 표시는 공급 업체에서 펜 메이트 된 돼지를 나타냅니다. 돼지가 새로운 펜 메이트에게 소개될 때 계층 구조를 확립하기 위해 싸우기 때문에 이것은 중요합니다. 돼지와 함께 그룹으로 정렬 유지 그들은 이미 이 싸움을 상당히 제한에 익숙한.
  3. 그들은 매우 교통 후 스트레스를 받을 수 있기 때문에 도착 일의 나머지 부분에 대한 (그들은 오후에 먹이 때 제외) 방해받지 않고 돼지를 둡니다.

2. 1부: 전환 단계(예상 시간 4-6일)

참고: 돼지는 전환 단계에서 수행되는 활동 중에 홈 펜에 머물러 있습니다. 우리는 각 치료 세션에 대한 반 사과를 사용합니다. 각 개별 돼지의 진행 은 전환 단계 진행 체크리스트(그림 1 및 보충 파일 1)에서 점수가 매겨지습니다.

  1. 도착 후 이틀 연속, 간식을 소개합니다.
    1. 던져는 돼지가 스스로 간식을 검색하고 펜 바로 바깥에 조용히 서 있을 수 있도록 하루에 두 번 펜에 한 번에 몇 개(사과 총의 절반)를 넣습니다. 간식에 익숙해지는 것 외에도, 목표는 동물이 치료와 관리인의 존재를 긍정적으로 연결하는 것입니다.
  2. 3일째와 연이은 날에는 돼지를 "관리인의 취급"으로 친숙해지게 합니다. 수유 중에 펜을 입력합니다.
    1. 먹는 동안 돼지에서 팔길이에 앉습니다(그림3). 침착하게 돼지쪽으로 손을 뻗어 등을 만지도록 합니다. 터치가 성공으로 계산되는 데 2초 이상이어야 합니다. 돼지가 음식에서 물러나면 천천히 손을 철회하십시오.
    2. 동물이 먹기 시작할 때까지 기다렸다가 다시 행동을 수행하십시오. 동물이 음식에서 다시 멀리 떨어져 있는 경우, 그것을 만지려고 중지하지만 트로프 옆에 펜 안에 남아 (세션에 대한 총 2-3 분).
  3. 돼지가 먹는 동안 뒷면에 만지는 것을 받아 들일 때 취급 절차에서 이동합니다. 이제 머리와 꼬리의 양방향으로 뒷면에 손을 움직입니다.
    1. 돼지가 그것을 받아 들인다면 머리와 귀를 만지세요. 언제든지 돼지는 동작에서 물러나지만 남은 시간 동안 펜 안에 남아 있습니다(세션의 경우 총 2-3분). 귀에 정맥 내 카테터에서 혈액 샘플링을 가능하게 하기 때문에 귀가 중요합니다.
    2. 두 번째 중요한 영역인 꼬리 부위를 만질 수 있도록 천천히 상승합니다. 서서 이동하는 것은 돼지에게 더 무서운 데, 이 단계가 독립적으로 득점되는 이유입니다. 돼지가 부위에 닿고 꼬리를 조작하는 것을 받아 들일 때, 직장 온도를 대부분의 연구 프로토콜을 지원하기 위해 취할 수 있습니다.
  4. 관리인과 동물 사이의 유대를 더욱 강화하기 위해 먹이 시간과는 별개로 두 세션 동안 펜에 들어갑니다. 펜 내부의 구석에 앉아있는 동안 두 세션 (각 2-3 분) 동안 돼지 간식 (한 번에 한 조각)을 제공합니다. 처음에는 팔이 뻗어 있는 간식을 제공하지만, 돼지가 보상을 얻기 위해 더 가까이 와야 하므로 점차 거리를 줄입니다.
  5. 전이 단계의 마지막 단계는 신체의 특정 영역에서 돼지를 만질 수 있고 그렇게 하기 위해 몇 가지 간식만 사용하는 것입니다. 펜을 입력하고 두 번째 관리인이 펜 바깥에 서서 돼지에게 간식을 제공합니다. 돼지가 침착하고 설명된 대로 만지고 동시에 네 발굽을 땅에 유지할 수 있는 것에 대해 보상하십시오 (펜의 울타리에 점프하지 않음).

3. 2부: 리모콘 교육 기만

참고: 전환 단계에 따라 동물은 리머 트레이닝을 시작할 준비가 되었습니다. 돼지가 훈련 세션이 시작될 것이라는 것을 인식하는 데 도움이되기 때문에 지정된 지역에서 훈련을 수행하는 것이 좋습니다. 하루에 몇 가지 짧은 세션은 하나의 긴 세션보다 낫다.

  1. 한 번에 한 마리의 돼지를 집 펜 밖에서 지정된 훈련 구역으로 가져가십시오. 사용된 지역이 돼지에게 참신하다면, 첫 번째 세션은 훈련없이 엄격하게 돼지 당 약 5-7 분 탐사 중에 몇 가지 간식으로 탐구해야합니다.
  2. 돼지의 손이 닿지 않는 간식으로 앉아 있거나 서있는 리모콘을 소개합니다. 돼지가 관심을 보이는 시기를 클릭하고 즉시 치료를 제공합니다. 돼지가 관심을 유지하면서 신속하게이 작업을 수행 합니다. 돼지가 관심을 잃으면 돼지가 다시 연락 할 때까지 클릭 앤 치료를 일시 중지합니다. 이 세션은 10분을 넘지 않아야 합니다.
  3. 돼지는 클릭을 빠르게 이해할 수 있지만 클릭과 치료 사이의 연관성을 매우 강하게 만드는 것이 중요합니다. 단계를 몇 번 연속으로 반복하여 클릭과 치료 간의 연결을 강력하게 만듭니다. 돼지가 한 번 클릭하여 돼지의 행동을 면밀히 모니터링하고 이를 따르지 않음으로써 클릭을 치료와 연관지는지 테스트합니다. 돼지가 치료를 기대하고 주위를 둘러보면 몇 가지 추가 세션을 수행하지 않으면 훈련이 완료됩니다.
  4. 클릭이 돼지에 의해 알려지면 대상 스틱을 소개합니다. 대상 스틱은 한쪽 끝에 표시된 영역이 있는 막대기입니다. 주전자 의 높이에서 대상 끝을 잡습니다. 어떤 시점에서, 돼지는 호기심에서 그것을 만질 것입니다. 돼지가 대상에 닿고 치료를 제공하는 바로 두 번째를 클릭합니다.
  5. 대상을 즉시 다시 제시하고 터치하면 다시 클릭하고 치료를 제공합니다. 돼지가 대상을 만진 것에 대한 보상을 받을 것이라는 것을 이해할 때까지 대상 훈련을 계속하십시오. 돼지가 대상에 도착하기 위해 더 이동해야 있도록 점차적으로 멀리 대상을 이동합니다.
  6. 돼지가 움직일 때 대상을 따라가면 오브젝트를 훈련 부위에 넣어 추가적인 과제를 추가하므로 돼지는 보상을 얻기 위해 대상 스틱 작업에 더 집중해야 합니다.

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Representative Results

프로토콜의 1부에 설명된 바와 같이 전이 단계를 적용하면 연구 시설에 농장 돼지를 원활하게 도입할 수 있습니다. 진정 돼지가 매일 집안일을 용이하게하고 마취 또는 고정없이 수행 할 수있는 사소한 절차와 샘플 복용을 할 수 있습니다.

전환 단계 동안 돼지의 진행 상황을 따라 체크리스트 (체크리스트 1)는 개별 돼지가 전환에 정의 된 단계에 도달 할 때 표시하기 위해 개발되었다. 돼지는 도착 후 2 주 이내에 연구 프로젝트에 참여할 예정이며 총 일 수는 전환의 성공을 보여주기 위해 선택된 측정값이었습니다.

체크리스트 1에 기초하여, 20마리의 돼지의 전이 단계는 2주 이내에 돼지를 농장 돼지에서 연구돼지로 전환할 수 있는지 확인하였다(그림4). 모든 돼지는 12일 이내에 목록을 완료하여 기간 설정이 충분하다는 것을 보여 주어 목록을 완성했습니다.

체크리스트 1은 첫 번째 경험에 따라 수정되었습니다. 새로운 엄격한체크리스트(체크리스트 2)가개발되었습니다. 전환을 개선하고 표준화하기 위해 주요 개정은 일일 세션 수를 늘리고 세션당 소요되는 시간을 제한했습니다. 두 체크리스트를 비교하면 체크리스트 2를 사용하여 전환된 돼지가 전환 첫 날에도 비슷한 진행을 한 반면, 이후 단계는 더 빨리 도달했습니다. 체크리스트 1과 체크리스트 2의 사용 사이의 비교는 그림 5에서볼 수 있습니다.

전이 단계가 완료된 후 동물은 수술 상처의 온도 및 검사와 같은 기본 결과 측정을 허용합니다. 돼지(여성)가 꼬리 부위의 만질 수 있도록 전환되면 소변 샘플은 항문 아래에 배치된 분뇨 봉투를 이용하여 수집될 수있다(도 6).

수집할 수 있는 데이터 결과의 또 다른 예는 혈액 샘플입니다. 우리의 시설에서 우리는 종종 수술 중 귀 정맥에 정맥 카테터를 배치합니다. 회복 후, 카테터는 근육 주사수를 줄이기 위해 약을 투여하는 데 사용할 수 있으며, 프로젝트를 지원하고 돼지의 정상 생리학복귀를 평가하기 위해 여러 혈액 샘플을 채취한다(도7).

전환 단계에서 이동하면 리머 교육은 처리 중에 추가이 이점을 허용하고 결과 데이터를 얻을 수 있도록 전환 단계에 기반을 두게 됩니다. 돼지를 따라 표적 스틱을 따라 훈련하면 간병인이 돼지를 스케일로 이동하여 체중(도8)또는 수송 상자(도9)로이동하여 돼지를 수술 또는 이미징 시설로 이송할 필요가 있는 경우 허용됩니다. 한 프로젝트의 경우, 돼지는 의학이 눈에 투여되는 동안 가만히 서도록 훈련받았다(그림10).

리머 트레이닝을 시작할 때 각 돼지가 고유하고 훈련에 다르게 반응한다는 것이 명백해집니다. 훈련 중에는 이 것을 인정하며 그에 따라 교육 세션이 수용됩니다. 일부 돼지는 연구 프로젝트를 지원하기 위해 특정 시점에서 특정 작업을 배워야 하는 경우 문제가 될 수 있는 동일한 작업을 배우기 위해 2~3배의 교육 세션이 필요합니다.

동물 데이터 체크리스트 1 (n=20) 업데이트된 체크리스트(n=20)
국산 돼지 (수스 스크로파 국산) 국산 돼지 (수스 스크로파 국산)
품종 (덴마크 랜드레이스 x 요크셔) x 듀록 (덴마크 랜드레이스 x 요크셔) x 듀록
여성 여성
무게 35-80kg(평균 47,5kg) 40-80kg(평균 62,5kg)
연령 10-22주 10-22주

표 1: 체크리스트를 평가하는 데 사용되는 돼지의 기본 특성입니다.

Figure 1
그림 1: 전환 단계 체크리스트입니다. 그림과 같이, 활동의 몇몇은 같은 날 그러나 다른 시간 간격에 일어난다. 3-5단계는 수유 중에 이루어지는 반면, 1-2 단계와 6-7단계는 낮에 정해진 시점부터 진행됩니다. 각 세션은 체크리스트 상단에 표시된 시간 동안 수행해야하지만 돼지 당 수행하는 데 약 2 분이 걸립니다. 그늘진 상자는 작업을 수행할 필요가 없음을 나타냅니다. 전체 체크리스트는 보충 파일 1에서 찾을 수 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

Figure 2
그림 2: 부서에서 사용되는 농축의 일부는이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

Figure 3
그림 3: 프로토콜의 2.2 및 2.3 단계에서 관리인의 위치그림입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

Figure 4
그림 4: 체크리스트 1을 사용하는 전환 단계의 타임라인입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

Figure 5
그림 5: 전환 단계의 진행. 체크리스트 1()을 이용한 전환 단계의 진행을 보여주는 Equation 2 산란도(θ). 각 플롯은 하나의 돼지에 대한 관찰에 해당합니다. 평균 및 SD는 오류 막대로 표시됩니다. y축은 일수입니다. x축에서 단계는 다음과 같이 언급됩니다. 손에서 사과. 2; 먹이를 주는 동안 돼지를 만지나. 3; 수유 중에 뒷과 꼬리를 만지다. 4; 간식을 주면서 뒷줄과 꼬리를 만지세요. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

Figure 6
그림 6: 먹이 주기 동안 외부 성기 주위에 배치 된 발진 가방을 통해 소변 샘플 수집. 돼지는 시술 중에 침착하고 발진 가방에 대한 통지가 없습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

Figure 7
그림 7: 전환 단계 후 먹이 주기 동안 정맥 투약. 관리인은 동물과 가까운 곳에 앉아서 약을 올바르게 주입하는 데 집중할 수 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

Figure 8
그림 8: 대상 스틱을 사용하여 스케일에 스테핑합니다. 돼지는 양성 보강 훈련으로 인해 대상 스틱을 따르고 싶어합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

Figure 9
그림 9: 다음 대상은 운송 상자에 스틱. 이 절차는 돼지를 화상 진찰 시설과 같은 것으로 운반해야 하는 경우에 유용합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

Figure 10
그림 10: 돼지는 홀더에 머리를 배치하고 앉아서 하지 않고 눈에 약을 제공 할 수 있도록 가만히 서 훈련. 약이 주어지면 돼지가 홀더에 머리를 놓고 육안 검사를 수행 할 수 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

보충 파일 1. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오. 전체 전환 단계 진행 체크리스트 즉시 인쇄할 수 있습니다. 도착 일자 필드의 변경은 시트의 날짜에 영향을 미칩니다.

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Discussion

1부, 전환단계 체크리스트 및 2부를 포함하는 프로토콜의 구현, 연속 리모콘 교육 프로그램은 확인된 성공이다. 상세한 체크리스트의 소개 및 사용은 연구 시설에 돼지의 도입을 구체화하는 방법을 제공했다. 구조화 된 전환 단계는 또한 연구 프로젝트에 포함되기 전에 돼지를 훈련하는 더 나은 기반을 만듭니다. 이 작업에 대한 관리인의 헌신이 증가하고 돼지가 경험하는 긍정적 인 감정이 일상 의 행동에 반영된다는 것을 알게된 것은 긍정적 인 놀라움이었습니다.

새로운 돼지의 도착과 연구 돼지에 원활한 전환은 오랫동안 초점의 영역이었지만 변화는 도입하기 어려웠다. 작업 개요와 이점에 대한 개요를 만들려면 체크리스트를 사용하여 우선 순위가 지정된 단계의 효과를 모니터링하기로 결정했습니다. 체크리스트 1에서 단계는 전환에 가장 큰 영향을 미칠 것으로 예상되는 작업을 기반으로 했습니다. 20마리의 돼지의 전환은 체크리스트 1을 사용하여 득점및 평가되었다. 그런 다음 문제가 발생한 문제를 제거하기 위해 목록을 조정했습니다. 이들은 주로 오해와 일관성없는 보고와 관련이 있습니다. 중요한 단계는 각 단계의 해석과 단계가 관련된 행동을 하는 것이었습니다. 따라서 각 단계에 대한 설명이 정교하고 체크리스트가 보다 직관적으로 수정되었습니다. 돼지를 만졌을 때 성공과 실패의 구별을 단순화하기 위해 한 단계가 제거되었습니다. 단계가 수행되었는지 여부를 명확히 하기 위해 Equation 1 () 돼지가 동작(+)을 수행하거나 동작(÷)을 수행하지 않았는지 진술하는 상자에 추가하였다. 수정을 지원하기 위해 체크리스트 2의 사용을 훈련시키기 위해 추가 시간이 할당되었습니다. 이 토론은 각 단계를 논의하고 성공 기준에 동의하는 것을 목표로 그룹으로 진행되었습니다. 실질적인 실행과 관련하여 중요한 문제가 제기되었습니다. 예를 들어, 돼지가 관리인과 간식에 사용될 때, 그들은 협박하고 관리인에게 위험할 수 있는 매우 방해가 될 수 있습니다. 마지막 수정으로 각 돼지를 가진 세션의 수는 각 세션에 소요되는 시간이 감소하는 동안 증가되었습니다.

체크리스트 2를 평가하기 위해 돼지 20마리가 포함되었습니다. 4단계의 데이터는 수의사와 관리인 간의 잘못된 의사 소통으로 인해 돼지 3마리에 대해 누락되어 의사 소통의 필요성을 강조합니다. 매일 사용되는 시간은 동일할 것으로 추정되지만 돼지는 더 적은 수의 날에 전환 단계를 완료합니다. 단계를 수행해야 하는 하루 동안 특정 시간 슬롯을 정의한 결과 일부 일상 루틴의 변경이 요구되었습니다. 단계를 준비하고 수행하는 데 필요한 총 시간과 함께 구현에서 가장 큰 제한 사항이었습니다. 체크리스트에는 각각 7단계가 포함되어 있지만 목록 수정으로 인해 그림 3의 비교가 4개의 유사한 단계로 줄어듭니다. 전환 단계에서 철저한 구조를 구현하면 인식이 생기고 바쁜 연구 시설에서 개선 이니셔티브를 우선 순위로 만듭니다.

구조화 된 체크리스트를 구현하면 개별 돼지 사이의 변동에 대한 평가가 가능해졌습니다. 일부 돼지의 경우 치료가 치료완료에 비해 종종 더 높다는 것을 알게 되었습니다. 또 다른 흥미로운 관찰은 기꺼이 만질 의향이 다소 갑작스러운 변화였습니다. 한 세션에서돼지는 즉시 물러나고, 다음 세션에서는 불과 몇 시간 후에 돼지가 장시간(한 번에 1분 이상)을 만질 수 있었습니다.

연구 프로젝트에 돼지를 더욱 준비하기 위해, 양성 보강 훈련은 전환 단계에 따라 시작된다. 리머 트레이닝 프로그램을 권장합니다. 그것은 교대에 있는 몇몇 간병인이 동물의 훈련에 참여하는 것을 허용합니다. 리포머를 사용하면 보상 신호가 동일하게 유지되므로 관리인 간의 이동이 용이합니다. 리머 트레이닝이 시작되면 각 돼지가 독특하고 훈련에 다르게 반응한다는 것이 분명해집니다. 그러나 몇 세션 내에 모든 동물은 훈련 세션에 참여하고 관리인과 함께 보낸 시간을 완전히 즐기고 싶어합니다. 돼지 를 훈련 하는 리모콘 은 힘을 사용 하지 않고 수행 될 연구 프로젝트와 관련 된 특정 작업을 할 수 있습니다. 또한 걸음걸이 분석과 같은 일부 프로젝트에서 볼 수 있는 동물 간 변이를 줄입니다. 돼지가 연구 시설 내에서 이동하거나 무게를 측정할 때와 같은 일일 집안일에 큰 도움이 될 수 있습니다. 리머 트레이닝의 중요한 단계는 리머가 도입될 때 돼지와 관리인 간의 신뢰 수준입니다. 돼지는 가까이 와야하지만 관리인 대신 작업에 초점을 유지해야하기 때문에 관리인을 신뢰해야합니다. 또 다른 중요한 단계는 치료의 선택입니다. 동물은 그것을 보상으로 인식해야 합니다. 때때로 우리는 사과맛을 찾지 못하는 돼지를 우연히 발견하고 사과와 같은 날짜 나 자두 조각으로 사과를 교환합니다. 특히 훈련 환경에서 흥분할 때 큰 돼지와 함께 작업할 때 위험을 고려하는 것이 중요합니다. 그들은 강력한 물린, 그리고 그들은 예기치 않은 시간 지점에서 치료에 도달 하기 위해 시도에 점프수 있습니다. 이러한 위험을 상쇄하기 위해, 대상 스틱을 사용하여 트레이너로부터 주의를 끌고, 치료가 명확하게 닿지 않는 상태로 유지하고, 짧은 세션에서 작업하고, 치료가 부족하지 않는 것을 고려하십시오.

돼지의 집중된 전환과 훈련으로 일하면서 관리인 직원의 열정이 커졌습니다. 양성 강화 교육 분야의 교육이 우선 순위였으며 관리인이 연구 프로젝트에 대한 더 강한 헌신을 경험한다는 사실을 얻었습니다. 연구원 및 수의학 직원과의 대화에서 새로운 프로젝트의 실습 계획에 관리인의 참여는 교육이 연구 결과와 동물 복지를 지원할 수있는 방법에 대한 자격을 갖춘 제안을 제공 할 수 있습니다. 해를 끼치지 않고 각 돼지에서 더 많은 데이터를 수집하는 것은 3R의 초석 중 하나입니다. 전환과 훈련에 초점을 맞춘 주간 회의는 각 개별 돼지에 초점을 증가하고 치료의 부서의 문화를 향상시켰습니다. 그들이 훈련 세션을 시작하려고 할 때 돼지를 보는 것은 그 자체로 보람, 그리고 그 이상의 행동은 돼지가 세션을 즐길 것을 제안보다 더 많은. 특정 프로젝트에 대한 돼지 훈련을 계획할 때 돼지는 훈련 루틴에 익숙해지면 흥분의 상태에 들어갈 것이라는 점을 명심하십시오. 이 에 대응하기 위한 아이디어는 다음과 같습니다. 가능하면 샘플을 채취해야 하는 곳을 훈련하지 마십시오. 그래서 홈 펜에서 혈액 샘플을 할 계획이라면 다른 곳에서 훈련을하십시오. 돼지는 일상을 알 수 있으므로 가능하면 일반적으로 훈련이 수행되지 않는 시점에서 샘플을 채취할 계획입니다. 교육이 샘플을 수집해야 하는 경우, 돼지가 교육 또는 데이터 수집 프로토콜을 시작하기 전에 매번 설정된 분 수의 영역을 탐색하도록 하십시오.

우리의 전환 단계에 구조를 배치하는 것은 전반적으로 긍정적 인 이니셔티브였습니다. 도착 직후 돼지의 스트레스감소와 펜을 돌진하기보다는 관리인의 회사를 즐기는 돼지를 갖는 빠른 전환이 분명합니다. 우리는 그들이 단지 추가 작업을 보았다 보기의 관점에서 직원의 턴어라운드를 경험했다, 그들은 체크 리스트를 사용하여 돼지를 전환의 이점을 볼 수있는 지점에. 이 프로토콜은 엄청난 응용 프로그램 잠재력을 가지고 있으며 연구 돼지와 관련된 거의 모든 설정에서 중요한 도구로 적용 할 수 있습니다. 우리는 지금 농장 돼지와 미니돼지둘 다 전환하는 것을 이용하고 심장 혈관 과학, 신경 과학 및 안과와 같은 프로젝트에서 더 많은 리모콘 훈련을 구현하는 것을 목표로합니다. 학과의 일반적인 태도와 배려의 문화가 제기되고 연구와 동물 복지를 지속적으로 병합하고 3Rs를 적용하기 위해 이러한 새로운 경험을 더 추진하기위해 열망과 열망이 있습니다.

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Disclosures

저자는 공개가 없습니다.

Acknowledgments

베아트리체 체르닝 올레센, 카롤린 야콥센, 틴 비요른홀트 구스타프센, 헬레나 셀린 크예르 바이엘, 키라 소니첸 그라헤드는 체크리스트를 설계하고 일상 업무에 사용하는 데 큰 노력과 피드백, 도움을 준 공로를 인정받고 있습니다. 의학 일러스트레이터 켄 크라그스펠트는 피규어 3를 설명하는 전문적인 도움으로 인정받았습니다.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Wrap, e-power, blå, 7,5cm E-vet A/S, Ole Rømers Vej 26 A, DK-6100 Haderslev 203165B Adhesive wrap used to wrap around the end of a stick to make a target stick. It is an advantage that it can be changed as it will get dirty quite quickly.
Apples Varius Uknown Used as treats
Klikker (Clicker) E-vet A/S, Ole Rømers Vej 26 A, DK-6100 Haderslev TX2289 Clicker used in training

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행동 문제 174 돼지 돼지 3Rs 정제 훈련 사회화 습관 적응
지정된 체크리스트를 사용하여 돼지를 연구하는 농장 돼지의 전환 과 함께 리모콘 교육개시 - 개선 이니셔티브
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Thomsen, A. F., Kousholt, B. S.More

Thomsen, A. F., Kousholt, B. S. Transition of Farm Pigs to Research Pigs using a Designated Checklist followed by Initiation of Clicker Training - a Refinement Initiative. J. Vis. Exp. (174), e62099, doi:10.3791/62099 (2021).

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