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Biology

Genotipizzazione rapida del tessuto mouse utilizzando Sigma Extract-N-Amp PCR Tissue Kit

Published: January 22, 2008 doi: 10.3791/636

Summary

La genotipizzazione completa di un campione coda di topo, tra cui la digestione dei tessuti e la lettura della PCR, è fatto in un'ora e mezza con Sigma SYBR Green Extract-N-Amp PCR Tissue kit.

Abstract

Il rilevamento del DNA genomico tramite PCR e rivelazione su un gel elettroforesi è un metodo standard che il genotipo di un campione di tessuto è determinata. La preparazione tradizionale dei tessuti per PCR-ready DNA spesso richiedere diverse ore o giorni, a seconda del campione di tessuto. Il genotipo del campione può quindi essere ritardata per diversi giorni, che non è un'opzione per i diversi tipi di esperimenti. Qui mostriamo la genotipizzazione completa di un campione coda di topo, tra cui la digestione dei tessuti e la lettura di PCR, in un'ora e mezza con Sigma SYBR Green Extract-N-Amp PCR Tissue kit. In primo luogo, dimostriamo i quindici minuti di estrazione del DNA dal campione di tessuto. Poi, dimostriamo il tempo reale lettura della amplificazione del campione, che consente l'individuazione di un campione positivo in quanto è di essere amplificati. Insieme, la lettura rapida estrazione e in tempo reale permettono una immediata identificazione del genotipo di numerosi tipi differenti di tessuti attraverso il metodo affidabile di PCR.

Protocol

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Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit Reagent Kit Sigma-Aldrich XNATG Includes: Extraction Solution Neutralization Solution B Tissue Preparation Solution Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

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Tags

Protocolli di base Numero 11 genotipizzazione PCR estrazione del DNA Mice
Genotipizzazione rapida del tessuto mouse utilizzando Sigma Extract-N-Amp PCR Tissue Kit
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Doan, L., Monuki, E. S. RapidMore

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).

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