Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Biology

التنميط الجيني السريع من الأنسجة باستخدام الماوس سيغما استخراج - N - PCR الأمبير الأنسجة كيت

doi: 10.3791/636 Published: January 22, 2008

Summary

ويتم ذلك على التنميط الجيني الكامل للماوس عينة الذيل ، بما في ذلك هضم الأنسجة وقراءات PCR ، في واحدة ونصف الساعة باستخدام سيغما SYBR الاخضر المقتطف - N - PCR الأمبير الأنسجة عدة.

Abstract

الكشف عن الجينوم من الحمض النووي عبر تضخيم PCR والكشف على الجل هو طريقة الكهربي القياسية التي يتم تحديد النمط الجيني لعينة الأنسجة. إعداد التقليدية الأنسجة للPCR جاهزة الحمض النووي وعادة ما تستغرق عدة ساعات إلى أيام ، اعتمادا على عينة الأنسجة. وهكذا يمكن النمط الجيني للعينة يتم تأجيلها لعدة أيام ، وهي ليست خيارا لأنواع مختلفة من التجارب. نحن هنا لشرح التنميط الجيني الكامل للماوس عينة الذيل ، بما في ذلك هضم الأنسجة وقراءات PCR ، في واحدة ونصف الساعة باستخدام سيغما SYBR الاخضر المقتطف - N - PCR الأمبير الأنسجة كيت. أولا ، علينا أن نظهر استخراج خمسة عشر دقيقة من الحمض النووي من عينات الأنسجة. ثم ، علينا أن نظهر في الوقت الحقيقي للقراءة للخروج من التضخيم PCR من العينة ، والذي يسمح لتحديد عينة ايجابية كما أنه يجري تضخيمها. معا ، واستخراج قراءات في الوقت الحقيقي والسريع من أجل السماح الفوري لتحديد النمط الجيني لأنواع مختلفة ومتنوعة من الأنسجة من خلال طريقة موثوقة لPCR.

Protocol

الرجاء انقر هنا لعرض البروتوكول.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit Reagent Kit Sigma-Aldrich XNATG Includes: Extraction Solution Neutralization Solution B Tissue Preparation Solution Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

DOWNLOAD MATERIALS LIST

التنميط الجيني السريع من الأنسجة باستخدام الماوس سيغما استخراج - N - PCR الأمبير الأنسجة كيت
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).More

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter