Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Biology

Genotyping מהיר של רקמות באמצעות עכבר חלץ-N-Amp רקמות סיגמא של ערכת ה-PCR

doi: 10.3791/636 Published: January 22, 2008

Summary

Genotyping המלא של מדגם זנב עכבר, כולל עיכול רקמות readout PCR, נעשה באחת וחצי שעות באמצעות SYBR Sigma גרין חלץ-N-Amp רקמות PCR הערכה.

Abstract

גילוי הגנום של דנ"א באמצעות הגברה PCR וזיהוי על ג'ל electrophoretic היא הדרך הסטנדרטית כי גנוטיפ של דגימת רקמה נקבע. הכנה קונבנציונלי של רקמות עבור ה-DNA PCR מוכנים לעתים קרובות להימשך מספר שעות עד ימים, בהתאם המדגם רקמות. גנוטיפ של המדגם ובכך עשויה להתעכב מספר ימים, אשר אינו אופציה עבור סוגים שונים של ניסויים. כאן אנו מדגימים את genotyping להשלים מדגם זנב עכבר, כולל עיכול רקמות readout PCR, באחת וחצי שעות באמצעות SYBR Sigma גרין חלץ-N-Amp רקמות PCR קיט. ראשית, אנו מדגימים את החילוץ של רבע שעה של ה-DNA מן המדגם רקמות. ואז, אנחנו מדגימים את הזמן האמיתי לקריאה מתוך הגברה PCR של המדגם, המאפשר זיהוי של מדגם חיובית זה להיות מוגבר. יחד, readout מהיר החילוץ בזמן אמת לאפשר זיהוי מהיר של גנוטיפ של מגוון סוגים שונים של רקמות באמצעות שיטת ה-PCR של אמין.

Protocol

אנא לחץ כאן כדי לראות את הפרוטוקול.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit Reagent Kit Sigma-Aldrich XNATG Includes: Extraction Solution Neutralization Solution B Tissue Preparation Solution Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

DOWNLOAD MATERIALS LIST

Genotyping מהיר של רקמות באמצעות עכבר חלץ-N-Amp רקמות סיגמא של ערכת ה-PCR
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).More

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter