Summary
Het huidige protocol beschrijft de draadmyograaftechniek voor het meten van vasculaire reactiviteit van de kransslagader van de rat.
Abstract
Als een belangrijke gebeurtenis van hart- en vaatziekten, coronaire hartziekte (CAD) is algemeen beschouwd als de belangrijkste boosdoener van atherosclerose, myocardinfarct en angina pectoris, die het leven en de gezondheid van mensen over de hele wereld ernstig bedreigen. Het vastleggen van de dynamische biomechanische kenmerken van geïsoleerde bloedvaten heeft mensen echter lang verbaasd. Ondertussen zijn nauwkeurige positionering en isolatie van kransslagaders om in vitro dynamische vasculaire spanningsveranderingen te meten een trend geworden in de ontwikkeling van CAD-geneesmiddelen. Het huidige protocol beschrijft de macroscopische identificatie en microscopische scheiding van de kransslagaders van ratten. De contractie- en verwijdingsfunctie van de kransslagaderring langs de diameter van het vat werd bewaakt met behulp van het gevestigde multi-myograafsysteem. De gestandaardiseerde en geprogrammeerde protocollen voor coronaire ringspanningsmeting, van bemonstering tot gegevensverzameling, verbeteren de herhaalbaarheid van de experimentele gegevens enorm, wat de authenticiteit van vasculaire spanningsrecords na fysiologische, pathologische en medicamenteuze interventie garandeert.
Introduction
Coronaire hartziekte (CAD) is algemeen erkend en bezorgd als een typische en representatieve hart- en vaatziekte, de belangrijkste doodsoorzaak in zowel ontwikkelde als ontwikkelingslanden 1,2. Als een bloed- en zuurstoftoevoerroute voor een normale cardiale fysiologische functie, komt circulerend bloed het hart binnen en voedt het het hart via twee hoofdkransslagaders en een bloed vasculair netwerk op het oppervlak van het myocard 3,4. Cholesterol- en vetafzettingen in de kransslagaders snijden de bloedtoevoer van het hart en de gewelddadige ontstekingsreactie van het vasculaire systeem af, waardoor atherosclerose, stabiele angina, onstabiele angina, myocardinfarct of plotselinge hartdood ontstaat 5,6. Als reactie op pathologische stenose van de kransslagaders, compenserende versnelde fysiologische hartslag voldoet aan de bloedtoevoer van het hart zelf of vitale organen van het lichaam door de output van de linker ventrikelte verhogen 7. Als langdurige coronaire stenose niet op tijd wordt verlicht, kunnen zich uitgebreide nieuwe bloedvaten ontwikkelen in bepaalde delen van het hart8. Op dit moment neemt de klinische behandeling van CAD vaak trombolyse of chirurgische mechanische trombolyse en een exogene bionische vasculaire bypass met frequente medicatie en grote chirurgische handicapaan 9. Daarom is het functionele onderzoek van de fysiologische activiteit van de kransslagader nog steeds een dringende doorbraak voor hart- en vaatziekten10.
Er zijn geen beschikbare technische middelen om coronaire fysiologische activiteit te detecteren, behalve draadloze telemetriesystemen, die dynamisch in vivo coronaire druk, vasculaire spanning, bloedzuurstofverzadiging en pH-waarden11 kunnen registreren. Daarom, gezien de textuurgeheim en complexiteit van kransslagaders, zijn nauwkeurige identificatie en isolatie van kransslagaders ongetwijfeld de beste keuzes voor het verkennen van meerdere mechanismen van CAD in vitro4.
Een serie multi-myograafsysteem, in het bijzonder een draadmicrograafmicrovasculaire spanningsdetector (zie Materiaaltabel), is een zeer volwassen verhandelbaar apparaat voor het registreren van in vitro weefselspanningsveranderingen van kleine vasculaire, lymfatische en bronchiale buizen met de kenmerken van hoge precisie en continue dynamische registratie12. Het genoemde systeem is op grote schaal gebruikt om in vitro weefselspanningskarakteristieken van holtestructuren met diameters van 60 μm tot 10 mm vast te leggen. De continue verwarmingskenmerken van het platform van de draadmicrograaf compenseren grotendeels de stimulatie van de ongunstige externe omgeving. Ondertussen stellen de constante input van het gasmengsel en de pH-waarden ons in staat om nauwkeurigere vasculaire spanningsgegevens te verkrijgen in een vergelijkbare fysiologische toestand13. Gezien de complexiteit van anatomische lokalisatie van kransslagaders van ratten (figuur 1), is de isolatie ervan echter verwarrend geweest en beperkt het de verkenning van gediversifieerde hart- en vaatziekten en medicijnontwikkeling door het mechanisme. Daarom introduceert het huidige protocol het anatomische locatie- en scheidingsproces van de kransslagader van de rat in detail, gevolgd door spanningsmeting op het platform van de draadmicrograaf14.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Het dierprotocol werd beoordeeld en goedgekeurd door het managementcomité van de Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (record nr. 2021-11). Mannelijke Sprague Dawley (SD) ratten (260-300 g, 8-10 weken oud) werden gebruikt voor de huidige studie. De ratten werden in een dierenkamer gehouden en waren vrij om te drinken en te eten tijdens het experiment.
1. Oplossingsvoorbereiding
- Bereid fysiologische zoutoplossing (PSS) door 118 mM NaCl, 4,7 mM K+, 2,5 mM CaCl2, 1,2 mM KH2PO4, 1,2 mM MgCl2∙6H2O, 25 mM NaHCO3, 11 mM D-glucose en 5 mM HEPES op te lossen (zie Materiaaltabel).
- Bereid een hoog K+ zoutoplossing door 58 mM NaCl, 60 mM K+, 2,5 mM CaCl2, 1,2 mM KH2PO4, 1,2 mM MgCl2∙6H2O, 25 mM NaHCO3, 11 mM D-glucose en 5 mM HEPES op te lossen.
- Verzadig de bovenstaande twee oplossingen en bel met een gemengd gas van 95% O2 en 5% CO2. Houd ondertussen de pH-waarden van de oplossing tussen 7,38 en 7,42 met 2 mM NaOH.
OPMERKING: Voor meer informatie over de bereiding van oplossingen, zie referentie15.
2. Rattenkransslagaderdissectie
- Verdoof de rat door inademing van 2% isofluraan. Bevestig diepe anesthesie door teenklem en dien, indien nodig, extra anesthetica toe. Open vervolgens onmiddellijk de thoracale holte om het hart bloot te leggen op de draagbare operatietafel na een eerder gepubliceerd rapport12.
- Na het dissociëren en verwijderen van het hart, draineert u het resterende bloed uit alle hartkamers door mild te knijpen met een medische plastic tang. Plaats het voorbewerkte hart snel in een petrischaaltje met 95% O2 + 5% CO2 verzadigd PSS bij 4 °C, met een pH-waarde van 7,40.
- Om de anatomische positie van de kransslagaders nauwkeurig te identificeren, past u de houding van het geïsoleerde hart onder de lichtmicroscoop aan volgens het schematische diagram (figuur 2A).
OPMERKING: Op het vooraanzicht bevonden de rechter oorschelp en de longslagader zich respectievelijk linksboven en rechtsboven.- Knip de linker en rechterventrikelholtes langs het interventriculaire septum uit de wortel van de longslagader met een chirurgische schaar en een pincet (figuur 2B).
- Om de linker- en rechterkransslagaders van het myocardiale weefsel te scheiden, ontleedt u de rechterkamer onder een optische anatomische microscoop om de rechter kransslagadertak grondig bloot te leggen. Identificeer vervolgens de positie van de linker kransslagader door het hartweefsel 45° met de klok mee te draaien (figuur 2D).
- Na het verwijderen van het omliggende kleverige myocardiale weefsel, onderscheidt u expliciet de pulserende linker (ongeveer 5 mm) en rechter (ongeveer 5 mm) kransslagaders. Scheid de kransslagaders in het midden onmiddellijk en dompel volledig onder in PSS bij 4 °C. Verkrijg een arteriële ring van ongeveer 2 mm door de losgemaakte slagader verticaal door te knippen met een anatomische schaar om de vasculaire spanning onder verschillende stimuli te registreren (figuur 2E).
3. Suspensie en fixatie van de arteriële ring
OPMERKING: Voor meer informatie over deze stap, zie referentie14.
- Bereid twee roestvrijstalen draden van 2 cm (zie materiaaltabel) en week voor in 4 °C PSS-oplossing verzadigd met 95% O2 + 5% CO2. Passeer beide draden parallel door de arteriële ring samen met de richting van het vat onder een optische anatomische microscoop en met draden van gelijke lengte blootgesteld aan beide uiteinden van de vasculaire holte.
- Bevestig de arteriële ring met de staaldraad voor- en achterkant in het bad van de draadmicrograaf gevuld met borrelende PSS met 95% O2 + 5% CO2. Draai de horizontale schroefknop voor een geschikte afstand voor en achter, zodat de twee draden horizontaal zijn en de arteriële ring zich in een natuurlijke staat van ontspanning bevindt.
- Nadat u het DMT-bad op het thermostatische apparaat hebt geïnstalleerd, opent u de software voor gegevensverzameling (zie Materiaaltabel) om ervoor te zorgen dat het bijbehorende padsignaal is opgenomen. Stel de volgende parameters in: oculairkalibratie (mm/div): 0,36; doeldruk (kPa): 13,3; IC1/IC100: 0,9; online gemiddelde tijd: 2 s; vertragingstijd: 60 s. De stappen van arteriële ringfixatie zijn weergegeven in figuur 3.
4. Standaardisatie van vasculaire spanning in de arteriële ring van ratten
OPMERKING: Voor verschillende holtemonsters was optimale initiële spanning nodig voor bloedvaten om uitzonderlijke activiteit in vitro te behouden. Zie voor meer informatie referentie15.
- Bereik de optimale initiële spanning van de arteriële ring door een redelijke spanning langs de diameter van het vat aan te brengen.
OPMERKING: Op basis van de vorige studie16 werd de maximale door agonisten geïnduceerde spanning bereikt bij de factor k-waarde van 0,90 met de initiële rekspanning van 1,16 ± 0,04 mN/mm (referentiewaarden voor verschillende vatmonsters: k-waarde, 0,90-0,95; beginspanning, 1,16-1,52 mN/mm). - Stel op dit punt de weergegeven vasculaire spanningswaarde in op nul. Breng daarna een trekprikkel van 3 mN aan op de arteriële ring door de spiraalas van het bad te draaien.
- Stel na incubatie gedurende 1 uur in zuurstofverzadigde PSS-buffer bij 37 °C, pH 7,40, de spanningswaarde opnieuw in op 0 mN op het spanningsbedieningspaneel van de draadmicrograaf. Het uithardingsproces van de initiële spanning van de arteriële ring is weergegeven in figuur 4.
5. Reactiviteit detectie van de kransslagaderring
- Voer de contractiele activiteit van de kransslagaderring uit met de draadmyograaftechniek14 en valideer in drie afzonderlijke bewerkingen door te stimuleren met 60 mM K + -oplossing gedurende elk 10 minuten.
- Spoel na elke stimulatie het bad met zuurstofverzadigd PSS totdat de vasculaire tonus terugkeert naar de oorspronkelijke toestand.
OPMERKING: Alleen wanneer de spanningsfluctuatie van de drie parallelle metingen minder dan 10% was en de amplitude van elke contractie groter was dan 1 mN/mm, konden gekwalificeerde en zeer actieve arteriële ringen worden gebruikt voor verdere experimenten. De activiteitsverificatie van de kransring van de rat is weergegeven in figuur 5.
6. Postoperatieve behandeling
- Na de operatie euthanaseer de dieren volgens institutioneel goedgekeurde protocollen.
OPMERKING: Voor de huidige studie werden de dieren geëuthanaseerd door het inademen van overtollig isofluraan.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Anatomisch gepositioneerd, rat kransslagaders verdeeld en diep verborgen in myocardiaal weefsel waren niet gemakkelijk te herkennen. Door de kransslagaders van mensen (figuur 1A) en ratten (figuur 1B) te vergelijken, werd een snelle en nauwkeurige scheiding van de kransslagaders van ratten uitgevoerd volgens het bemonsteringsproces in figuur 2. Na het nauwkeurig lokaliseren van de rechter oorschelp, longslagader en top van voren onder een optische microscoop, werd het myocard ontleed langs de vaste zwarte lijn in figuur 2A. Ongeveer 5 mm van de interventriculaire tak van de kransslagader was duidelijk blootgesteld aan ons zicht. Na een fijne scheiding van het kleverige myocardium rond de ventrikelseptumslagader, werd een draad van 2 cm gebruikt om een lus van 2 mm van de kransslagader in de richting van vasculaire uitlijning te doorkruisen. Onmiddellijk werd de losgemaakte 2 mm coronaire ring vervolgens stevig bevestigd in het DMT-bad, zoals te zien is in figuur 3. Nadat een initiële spanning van 3 mN op de arteriële ring was uitgeoefend (figuur 4), overschreed de spanning meer dan 2 mN door driemaal 60 mM K+ parallel toe te passen (figuur 5). De bovenstaande procedures hadden dus geresulteerd in een geïsoleerde coronaire ring met uitstekende fysiologische activiteit.
Cumulatieve K+ (20, 28, 39, 55, 77 en 108 mM) of U46619 (0,01, 0,03, 0,1, 0,3 en 1 μM) werden toegevoegd aan het bad van DMT 620M, wat resulteerde in een concentratieafhankelijke toename van de in vitro vasculaire tonus. De volgende concentratie van K+ of U46619 (een tromboxaan A2 (TP) receptoragonist)15 werd toegevoegd toen het vasoconstrictie-effect een plateau bereikte. De experimentele resultaten zijn weergegeven in figuur 6A,B. Voor geïsoleerde coronaire ringen vernauwd door K+ (60 mM) en U46619 (0,3 μM) veroorzaakte het testgeneesmiddel apigenine (1, 3, 10, 30 en 100 μM) vaatverwijding op een verrassend concentratieafhankelijke manier (figuur 6C).
Figuur 1: Tekeningen uit de vrije hand van menselijke en rattenkransslagaders. (A) presenteert de kenmerken van de oppervlakkige verdeling van linker en rechter kransslagaders vanuit het vooraanzicht van het menselijk hart en is gemakkelijk te herkennen door het blote oog. (B) toont de linker en rechter kransslagaders van de rat diep in het myocardium en hun vertakkende interventriculaire septum. Afkortingen: RCA = rechter kransslagader; LCA = linker kransslagader; ISB = interventriculaire septumtak. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 2: Diagram van de scheiding van de kransslagader bij ratten. (A) De rechter oorschelp, longslagader, top en anatomische lijn van het rattenhart werden waargenomen vanuit het vooraanzicht onder een lichtmicroscoop. (B) De linker en rechter ventriculaire lumens werden ingesneden langs het septum van de wortel van de longslagader. (C) Anatomische locatie van de linker en rechter kransslagaders en hun interventriculaire septumtak. (D) Een ring van 2 mm van de slagader. (E) De arteriële ring wordt met draad langs de richting van het vat bevestigd. Afkortingen: RA = rechter oorschelp; PA = longslagader; RCA = rechter kransslagader; ISB = interventriculaire septumtak; LCA = linker kransslagader. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 3: Een schema van de arteriële montageprocedure. De arteriële ring met draad werd overgebracht naar (A) en op het DMT-bad (B) geklemd. De staaldraad werd bevestigd en met de klok mee geschroefd linksboven (C) en linksonder (D). (E) De kaken uit elkaar werden geschroefd om ruimte te maken om de tweede draad door de arteriële ring te laten gaan. (F) De tweede draad liep evenwijdig door de arteriële ring. De staaldraad werd bevestigd en met de klok mee geschroefd rechtsboven (G) en rechtsonder (H). (I) De kaken uit elkaar werden losjes geschroefd om de arteriële ring in zijn natuurlijke staat te laten. De groene lijnen vertegenwoordigen de draden en de oranje cilinders vertegenwoordigen een geïsoleerde arteriële ring van 2 mm. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 4: Normalisatieprocedure van arteriële ring. Nadat de spanning van de vaste geïsoleerde arteriële ring was teruggekeerd naar 0 mN, werd in één keer een trekkracht van 3 mN op de arteriële ring uitgeoefend. Na 5 min nam de vasculaire spanning af tot 2,5 mN. Door de spanning te verhogen tot 3 mN en deze gedurende 5 minuten stabiel te houden, werd de spanning van de kransslagaderring geïnitialiseerd tot 0 mN en gedurende 1 uur uitgerust voor vervolgonderzoeken naar vasculaire spanning van verschillende stimuli. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 5: Het testen van vasculaire reactiviteit. Drie toepassingen van 60 mM K+ stimuleerden de spanning van de geïsoleerde kransslagaderring tot meer dan 2 mN en de drie metingen waren minder dan 10%, wat wijst op een superieure vasculaire activiteit. Na elke stimulatie werd het bad voorzichtig gespoeld met een 37 °C zuurstofverzadigde PSS-oplossing totdat de spanning 0 mN was. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 6: Representatieve tracer van cumulatieve dosiscontractie van rattenkransslagader via K+ of U46619. Naarmate de dosis K+ (A) en U46619 (B) toenam, nam de kracht dosisafhankelijk toe. C) verwezen naar het relaxerende effect van apigenine op 60 mM K+- en 0,3 μM U46619-gecontracteerde arteriële ring op een concentratieafhankelijke manier. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
De verstoring van de coronaire microcirculatie, waarbij een breed scala aan patiënten met CAD betrokken is, is geleidelijk erkend en betrof de basis voor adequate myocardumperfusie. Gezien de ernstige complicaties van plotselinge coronaire hartziekten en hart- en vaatziekten, zijn tijdige preventie en behandeling van geneesmiddelen uiterst belangrijk voor een klinisch persoon met CAD17. Onvermijdelijk hebben de geheimhouding van de anatomie van de kransslagader en de complexiteit van de fysiologische structuur ervan de rationele en wetenschappelijke evaluatie van de effectiviteit van geneesmiddelen en behandelingen voor CAD 18,19,20,21,22,23,24,25 ernstig beperkt. . Ongetwijfeld is nauwkeurige lokalisatie en isolatie van actieve kransslagaders een voorwaarde voor het bevorderen van de verkenning van pathologische mechanismen en evaluatie van preventie- en behandelingsmaatregelen van CAD-gerelateerde ziekten. Het platform van de draadmicrograaf is geschikt voor het onophoudelijk registreren van in vitro weefselspanning met ringvormige en holtestructuren, variërend in diameter van 60 μm tot 10 mm. De kransslagaderring kan met twee draden aan de kamer worden bevestigd met een constante temperatuur- en zuurstofregeling. De gegevens van vasoconstrictie en ontspanning na het toevoegen van verschillende geneesmiddelen worden via de spanningssensor in de computer ingevoerd, waarbij gegevens continu worden verkregen en gedocumenteerd14.
Dit artikel beschrijft voornamelijk de concrete positie en het scheidingsproces van de kransslagader van de rat. En het dynamische proces van coronaire spanningsveranderingen bij ratten werd gemeten door het draadmicrografiesysteem. Gezien de heterogeniteit van mens- en rattensoorten, moeten we ons bewust zijn van deze verschillen bij het zoeken naar en isoleren van kransslagaders van ratten. De kransslagaders van ratten zijn verdeeld in linker- en rechterslagaders met een onafhankelijke interventriculaire septale tak. De menselijke kransslagaders bevinden zich op het oppervlak van het hart, terwijl de kransslagaders van ratten iets dieper zijn. Bij het meten van de arteriële ringspanning was alle gebufferde oplossing verzadigd en gebubbeld met 95% O2 + 5% CO2 bij 37 °C, pH = 7,40. Het vaste proces van de arteriële ring door twee draden werd in detail geïntroduceerd. De slagader in het lichaam bevindt zich in een staat van microvernauwing in plaats van een staat van volledige ontspanning. En de contractiele functie van de slagader is nauw verbonden met de trekkracht die tot op zekere hoogte op hen wordt uitgeoefend. Daarom is het noodzakelijk om de arteriële ring te standaardiseren, zodat deze zich in een optimale vooraf geladen toestand bevindt voor het handhaven van superieure vasculaire fysiologische activiteit in het daaropvolgende experiment. Aangezien een hoge K+ conditie (60 mM) het celmembraan kan depolariseren en voltage-gated Ca2+ kanalen kan activeren, veroorzaakt dit de instroom van extracellulaire Ca2+ en arteriële contractie26.
In de test van vasoconstrictie en verwijding werd het contractiele effect van K+ of U46619 op de kransslagaders van ratten onderzocht. In de resultaten kan K + of U46619 de kransslagaders van ratten gestaag vernauwen op een concentratieafhankelijke manier door in te werken op ionkanalen of specifieke receptoren. K+ vernauwt vaten voornamelijk door celmembranen te depolariseren en L-type Ca2+ kanalen27 te openen. Ondertussen vernauwt U46619, een analoog van TXA2, bloedvaten voornamelijk door circulaire nucleotide-gated kanalen en TXA2-receptoren te activeren. Apigenine, een soort flavonoïde, komt veel voor in fruit, groenten en traditionele Chinese medicijnen (Sperma plantaginis en Chinese starjasmine)28. De resultaten verklaarden dat apigenine concentratieafhankelijk de samentrekking van kransslagaders voor 60 mM K + en 0,3 μM U46619-stimuli kon verwijden. Aan het einde van het experiment werd de coronaire ring met gunstige activiteit opnieuw gevalideerd door 60 mM K + toe te voegen, waardoor vasoconstrictie ontstond die vergelijkbaar was met die van de oorspronkelijke stimulatie. Hoewel de studie zich voornamelijk richtte op kransslagaders, was het draadmicrografiesysteem ook van toepassing op andere extreem kleine weefselvaten, lymfevaten en bronchus. Concluderend beschreef dit artikel voornamelijk de locatie en isolatie van de kransslagaders van ratten. Ondertussen werden de spanningsveranderingen gemeten met behulp van het draadmicrograafsysteemplatform, wat een nauwkeurige en reproduceerbare methodologie voor CAD-verkenning biedt.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De auteurs hebben niets te onthullen.
Acknowledgments
Dit werk werd ondersteund door het Key R&D-project van Sichuan Provincial Science and Technology Plan (2022YFS0438), de National Natural Science Foundation of China (82104533), de China Postdoctoral Science Foundation (2020M683273) en de Afdeling Wetenschap &Technologie van de provincie Sichuan (2021YJ0175).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Apigenin | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | 150731 | |
| CaCl2 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A501330 | |
| D-glucose | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A610219 | |
| HEPES | Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China | S3872 | |
| KCl | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100395 | |
| KH2PO4 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100781 | |
| LabChart Professional version 8.3 | ADInstruments, Australia | — | |
| MgCl2·6H2O | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100288 | |
| Multi myograph system | Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark | 620M | |
| NaCl | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100241 | |
| NaHCO3 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100865 | |
| Steel wires | Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark | 400447 | |
| U46619 | Sigma, USA | D8174 |
References
- Malakar, A. K., et al. A review on coronary artery disease, its risk factors, and therapeutics. Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 16812-16823 (2019).
- Murray, C., et al. national age-sex specific all-cause and cause-specific mortality for 240 causes of death, 1990-2013: A systematic analysis for the global burden of disease Study 2013. The Lancet. 385 (9963), 117-171 (2015).
- Zhang, Y., et al. Adenosine and adenosine receptor-mediated action in coronary microcirculation. Basic Research in Cardiology. 116 (1), 22 (2021).
- Allaqaband, H., Gutterman, D. D., Kadlec, A. O. Physiological consequences of coronary arteriolar dysfunction and its influence on cardiovascular disease. Physiology. 33 (5), 338-347 (2018).
- Minelli, S., Minelli, P., Montinari, M. R. Reflections on atherosclerosis: Lesson from the past and future research directions. Journal of Multidisciplinary Healthcare. 13, 621-633 (2020).
- Alvarez-Alvarez, M. M., Zanetti, D., Carreras-Torres, R., Moral, P., Athanasiadis, G. A survey of sub-saharan gene flow into the mediterranean at risk loci for coronary artery disease. European Journal of Human Genetics. 25 (4), 472-476 (2017).
- LaCombe, P., Tariq, M. A., Lappin, S. L. Physiology, Afterload Reduction. StatPearls [Internet]. , StatPearls Publishing. Treasure Island (FL). (2022).
- Gutterman, D. D., et al. The human microcirculation: regulation of flow and beyond. Circulation Research. 118 (1), 157-172 (2016).
- Wang, G., Li, F., Hou, X. Complementary and alternative therapies for stable angina pectoris of coronary heart disease: A protocol for systematic review and network meta-analysis. Medicine. 101 (7), 28850 (2022).
- Markousis-Mavrogenis, G., et al. Coronary microvascular disease: the "meeting point" of cardiology. European Journal of Clinical Investigation. 52 (5), 13737 (2021).
- Allison, B. J., et al. Fetal in vivo continuous cardiovascular function during chronic hypoxia. The Journal of Physiology. 594 (5), 1247-1264 (2016).
- Wenceslau, C. F., et al. Guidelines for the measurement of vascular function and structure in isolated arteries and veins. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 321 (1), 77-111 (2021).
- Liu, L., et al. Comparison of Ca2+ handling for the regulation of vasoconstriction between rat coronary and renal arteries. Journal of Vascular Research. 56 (4), 191-203 (2019).
- Sun, J., et al. Isometric contractility measurement of the mouse mesenteric artery using wire myography. Journal of Visualized Experiments. (138), e58064 (2018).
- Guo, P., et al. Coronary hypercontractility to acidosis owes to the greater activity of TMEM16A/ANO1 in the arterial smooth muscle cells. Biomedicine & Pharmacotherapy. 139, 111615 (2021).
- Ping, N. N., Cao, L., Xiao, X., Li, S., Cao, Y. X. The determination of optimal initial tension in rat coronary artery using wire myography. Physiological Research. 63 (1), 143-146 (2014).
- Niccoli, G., Scalone, G., Lerman, A., Crea, F. Coronary microvascular obstruction in acute myocardial infarction. European Heart Journal. 37 (13), 1024-1033 (2016).
- Mumma, B., Flacke, N. Current diagnostic and therapeutic strategies in microvascular angina. Current Emergency and Hospital Medicine Reports. 3 (1), 30-37 (2015).
- Lanza, G. A., Parrinello, R., Figliozzi, S. Management of microvascular angina pectoris. American Journal of Cardiovascular Drugs. 14 (1), 31-40 (2014).
- Zhu, T. Q., et al. Beneficial effects of intracoronary tirofiban bolus administration following upstream intravenous treatment in patients with ST-elevation myocardial infarction undergoing primary percutaneous coronary intervention: The ICT-AMI study. International Journal of Cardiology. 165 (3), 437-443 (2013).
- Huang, D., et al. Restoration of coronary flow in patients with no-reflow after primary coronary intervention of acute myocardial infarction (RECOVER). American Heart Journal. 164 (3), 394-401 (2012).
- Fu, W. J., et al. Anti-atherosclerosis and cardio-protective effects of the Angong Niuhuang Pill on a high fat and vitamin D3 induced rodent model of atherosclerosis. Journal of Ethnopharmacology. 195, 118-126 (2017).
- Li, J., et al. Chinese medicine She-Xiang-Xin-Tong-Ning, containing moschus, corydalis and ginseng, protects from myocardial ischemia injury via angiogenesis. The American Journal of Chinese Medicine. 48 (1), 107-126 (2020).
- Wu, W., et al. Three dimensional reconstruction of coronary artery stents from optical coherence tomography: Experimental validation and clinical feasibility. Scientific Reports. 11 (1), 1-15 (2021).
- Liu, M., et al. Janus-like role of fibroblast growth factor 2 in arteriosclerotic coronary artery disease: Atherogenesis and angiogenesis. Atherosclerosis. 229 (1), 10-17 (2013).
- Hu, G., Li, X., Zhang, S., Wang, X. Association of rat thoracic aorta dilatation by astragaloside IV with the generation of endothelium-derived hyperpolarizing factors and nitric oxide, and the blockade of Ca2+ channels. Biomedical reports. 5 (1), 27-34 (2016).
- Guo, Y., et al. Anticonstriction effect of MCA in rats by danggui buxue decoction. Frontiers in Pharmacology. 12, 749915 (2021).
- Jing, Y., et al. Apigenin relaxes rat intrarenal arteries, depresses Ca2+-activated Cl− currents and augments voltage-dependent K+ currents of the arterial smooth muscle cells. Biomedicine & Pharmacotherapy. 115, 108926 (2019).
