Summary
Det nuvarande protokollet beskriver trådmyograftekniken för att mäta vaskulär reaktivitet hos råttans kranskärl.
Abstract
Som en viktig händelse av hjärt-kärlsjukdomar har kranskärlssjukdom (CAD) allmänt betraktats som den främsta boven i åderförkalkning, hjärtinfarkt och angina pectoris, som allvarligt hotar människors liv och hälsa över hela världen. Men hur man registrerar de dynamiska biomekaniska egenskaperna hos isolerade blodkärl har länge förbryllat människor. Samtidigt har exakt positionering och isolering av kranskärl för att mäta in vitro dynamiska vaskulära spänningsförändringar blivit en trend i CAD-läkemedelsutveckling. Detta protokoll beskriver den makroskopiska identifieringen och mikroskopiska separationen av råtta kranskärl. Sammandragnings- och utvidgningsfunktionen hos kranskärlsringen längs kärldiametern övervakades med hjälp av det etablerade multimyografsystemet. De standardiserade och programmerade protokollen för mätning av kranskärlsringspänning, från provtagning till datainsamling, förbättrar enormt repeterbarheten hos experimentella data, vilket säkerställer äktheten hos vaskulära spänningsregister efter fysiologisk, patologisk och läkemedelsintervention.
Introduction
Kranskärlssjukdom (CAD) har varit allmänt erkänd och oroad som en typisk och representativ hjärt-kärlsjukdom, som är den ledande dödsorsaken i både utvecklade länder och utvecklingsländer 1,2. Som en blod- och syretillförselväg för normal hjärtfysiologisk funktion kommer cirkulerande blod in i och ger näring åt hjärtat genom två huvudsakliga kranskärl och ett blodkärlsnätverk på ytan av myokardiet 3,4. Kolesterol- och fettavlagringar i kranskärlen skär av hjärtats blodtillförsel och det våldsamma inflammatoriska svaret i kärlsystemet, vilket orsakar åderförkalkning, stabil angina, instabil angina, hjärtinfarkt eller plötslig hjärtdöd 5,6. Som svar på patologisk stenos i kransartärerna uppfyller kompensationsaccelererad fysiologisk hjärtslag blodtillförseln i hjärtat själv eller vitala organ i kroppen genom att öka utmatningen från vänster ventrikel7. Om långvarig kranskärlsstenos inte lindras i tid kan omfattande nya blodkärl utvecklas i vissa delar av hjärtat8. För närvarande antar den kliniska behandlingen av CAD ofta läkemedelstrombolys eller kirurgisk mekanisk trombolys och en exogen bionisk vaskulär bypass med frekvent medicinering och stor kirurgisk funktionsnedsättning9. Därför är den funktionella undersökningen av kranskärlens fysiologiska aktivitet fortfarande ett brådskande genombrott för hjärt-kärlsjukdomar10.
Det finns inga tillgängliga tekniska medel för att detektera koronar fysiologisk aktivitet, förutom trådlösa telemetrisystem, som dynamiskt kan registrera in vivo kranskärlstryck, vaskulär spänning, syremättnad i blodet och pH-värden11. Därför, med tanke på kranskärlens texturhemlighet och komplexitet, är korrekt identifiering och isolering av kranskärl utan tvekan de bästa valen för att utforska flera mekanismer för CAD in vitro4.
Ett serie multimyografsystem, i synnerhet en mikrovaskulär spänningsdetektor för trådmikrografer (se materialtabell), är en mycket mogen säljbar anordning för registrering av vävnadsspänningsförändringar in vitro av små vaskulära, lymfatiska och bronkialrör med egenskaperna hos hög precision och kontinuerlig dynamisk inspelning12. Det nämnda systemet har använts i stor utsträckning för att registrera in vitro-vävnadsspänningsegenskaper hos hålrumsstrukturer med diametrar på 60 μm till 10 mm. De kontinuerliga uppvärmningsfunktionerna hos plattformen för trådmikrografen kompenserar till stor del stimuleringen av den negativa yttre miljön. Under tiden tillåter de konstanta ingångarna av gasblandningen och pH-värdena oss att erhålla mer exakta vaskulära spänningsdata i ett liknande fysiologiskt tillstånd13. Men med tanke på komplexiteten i anatomisk lokalisering av råtta kranskärl (figur 1) har dess isolering varit förvirrande och begränsat mekanismens utforskning av diversifierad hjärt-kärlsjukdom och läkemedelsutveckling. Därför introducerar detta protokoll den anatomiska platsen och separationsprocessen för råttans kranskärl i detalj, följt av spänningsmätning på plattformen för trådmikrografen14.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Djurprotokollet granskades och godkändes av förvaltningskommittén från Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (rekord nr 2021-11). Manliga Sprague Dawley (SD) råttor (260-300 g, 8-10 veckor gamla) användes för den aktuella studien. Råttorna hölls i en djurkammare och var fria att dricka och äta under experimentet.
1. Beredning av lösning
- Förbered fysiologisk saltlösning (PSS) genom att lösa upp 118 mM NaCl, 4,7 mM K+, 2,5 mM CaCl2, 1,2 mM KH2PO4, 1,2 mM MgCl2∙6H2O, 25 mM NaHCO3, 11 mM D-glukos och 5 mM HEPES (se materialtabell).
- Förbered hög K + saltlösning genom att lösa upp 58 mM NaCl, 60 mM K +, 2,5 mM CaCl2, 1,2 mM KH2PO4, 1,2 mM MgCl2∙6H2O, 25 mM NaHCO3, 11 mM D-glukos och 5 mM HEPES.
- Mätt ovanstående två lösningar och bubbla med en blandad gas på 95% O2 och 5%CO2. Under tiden bibehålla lösningens pH-värden mellan 7,38 och 7,42 med 2 mM NaOH.
OBS: För mer information om lösningsberedning, se referens15.
2. Råtta kranskärlsdissektion
- Bedöva råttan genom inandning av 2% isofluran. Bekräfta djupbedövning genom att nypa i tån och vid behov administrera ytterligare anestetika. Öppna sedan omedelbart brösthålan för att exponera hjärtat på det bärbara operationsbordet efter en tidigare publicerad rapport12.
- Efter dissociering och avlägsnande av hjärtat, dränera det återstående blodet från alla hjärtkamrar genom att lätt klämma med medicinska plasttångar. Placera snabbt det förbehandlade hjärtat i en petriskål som innehåller 95 % O2 + 5 %CO2-mättad PSS vid 4 °C, med ett pH-värde på 7,40.
- För att exakt identifiera kransartärernas anatomiska position, justera det isolerade hjärtats hållning under ljusmikroskopet enligt det schematiska diagrammet (Figur 2A).
OBS: På framsidan var höger aurikel och lungartär uppe till vänster respektive uppe till höger.- Skär vänster och höger ventrikelhålighet längs interventrikulär septum från lungartärens rot med kirurgisk sax och pincett (Figur 2B).
- För att dissociera vänster och höger kranskärl från myokardvävnaden, dissekera höger kammare under ett optiskt anatomiskt mikroskop för att noggrant exponera den högra kranskärlsgrenen. Identifiera sedan positionen för den vänstra kransartären genom att rotera hjärtvävnaden 45 ° medurs (figur 2D).
- Efter att ha tagit bort den omgivande klibbiga myokardvävnaden, urskilja uttryckligen de pulserande vänster (ca 5 mm) och höger (ca 5 mm) kranskärlen. Separera kranskärlen i mitten omedelbart och sänk ner helt i PSS vid 4 °C. Skaffa en arteriell ring på cirka 2 mm genom att vertikalt skära den fristående artären med anatomisk sax för att registrera kärlspänningen under olika stimuli (Figur 2E).
3. Suspension och fixering av arteriell ring
OBS: För mer information om detta steg, se referens14.
- Förbered två 2 cm rostfria ståltrådar (se materialtabell) och blötlägg i 4 °C PSS-lösning mättad med 95 % O2 + 5 % CO2. För båda trådarna parallellt genom artärringen tillsammans med kärlets riktning under ett optiskt anatomiskt mikroskop och med ledningar av samma längd exponerade i båda ändarna av kärlhålan.
- Fäst artärringen med ståltråden fram och bak i badet på trådmikrografen fylld med bubblande PSS med 95% O2 + 5% CO2. Vrid den horisontella skruvvredet för ett lämpligt avstånd fram och bak så att de två ledningarna är horisontella och artärringen är i ett naturligt tillstånd av avkoppling.
- När du har installerat DMT-badet på den termostatiska apparaten öppnar du datainsamlingsprogramvaran (se materialtabell) för att säkerställa att motsvarande vägsignal spelades in. Ställ in följande parametrar: okularkalibrering (mm / div): 0,36; måltryck (kPa): 13,3; IC1/IC100: 0,9; online medelvärdestid: 2 s; fördröjningstid: 60 s. Stegen för arteriell ringfixering visas i figur 3.
4. Standardisering av vaskulär spänning i råtta arteriell ring
OBS: För olika hålrumsprover var optimal initial spänning nödvändig för att kärlen skulle kunna upprätthålla exceptionell aktivitet in vitro. För närmare uppgifter, se referens15.
- Uppnå den optimala initialspänningen hos artärringen genom att applicera en rimlig spänning längs kärlets diameter.
OBS: Baserat på den tidigare studien16 uppnåddes den maximala agonistinducerade spänningen vid faktor k-värdet 0,90 med den initiala sträckspänningen på 1,16 ± 0,04 mN / mm (referensvärden för olika kärlprover: k-värde, 0,90-0,95; initial spänning, 1,16-1,52 mN / mm). - Ställ nu in det visade vaskulära spänningsvärdet till noll. Applicera sedan en 3 mN dragstimulans på artärringen genom att rotera badets spiralaxel.
- Efter inkubation i 1 timme i syremättad PSS-buffert vid 37 °C, pH 7,40, ställ in spänningsvärdet till 0 mN igen på trådmikrografens spänningskontrollpanel. Inställningsprocessen för den initiala spänningen hos artärringen visas i figur 4.
5. Reaktivitetsdetektering av kranskärlsring
- Utför den kontraktila aktiviteten hos kranskärlsringen med trådmyograftekniken14 och validera i tre separata operationer genom att stimulera med 60 mM K + -lösning i 10 minuter vardera.
- Efter varje stimulering, spola badet med syremättad PSS tills vaskulär ton återgår till sitt ursprungliga tillstånd.
OBS: Endast när spänningsfluktuationerna för de tre parallella mätningarna var mindre än 10%, och amplituden för varje sammandragning var större än 1 mN / mm, kunde kvalificerade och mycket aktiva arteriella ringar användas för ytterligare experiment. Aktivitetsverifieringen av råttans koronarring visas i figur 5.
6. Postkirurgisk behandling
- Efter operationen, avliva djuren enligt institutionellt godkända protokoll.
OBS: För den aktuella studien avlivades djuren genom inandning av överskott av isofluran.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Anatomiskt placerade, råtta kranskärl fördelade och dolda djupt i myokardiell vävnad var inte lätt igenkända. Genom att jämföra kranskärlen hos människor (figur 1A) och råttor (figur 1B) genomfördes snabb och exakt separation av råttans kranskärl enligt provtagningsprocessen i figur 2. Efter att exakt ha lokaliserat den högra öronen, lungartären och toppen framifrån under ett optiskt mikroskop dissekerades myokardiet längs den solida svarta linjen som visas i figur 2A. Cirka 5 mm av kransartärens interventrikulära gren var tydligt utsatt för vår syn. Efter en fin separation av det klibbiga myokardiet som omger den ventrikulära septalartären användes en 2 cm tråd för att korsa en 2 mm slinga av kransartären i riktning mot vaskulär inriktning. Omedelbart fixerades sedan den fristående 2 mm koronarringen ordentligt i DMT-badet, som visas i figur 3. Efter att en initial 3 mN spänning applicerats på artärringen (figur 4) översteg dess spänning mer än 2 mN genom att applicera 60 mM K+ parallellt tre gånger (figur 5). Således hade procedurerna ovan resulterat i en isolerad koronarring med utmärkt fysiologisk aktivitet.
Kumulativ K+ (20, 28, 39, 55, 77 och 108 mM) eller U46619 (0,01, 0,03, 0,1, 0,3 och 1 μM) tillsattes till badet med DMT 620M, vilket resulterade i en koncentrationsberoende ökning av vaskulär ton in vitro. Nästa koncentration av K+ eller U46619 (en tromboxan A2 (TP)-receptoragonist)15 tillsattes när vasokonstriktionseffekten nådde en platå. De experimentella resultaten visas i figur 6A,B. För isolerade kranskärlsringar som trängdes ihop av K+ (60 mM) och U46619 (0,3 μM) orsakade testläkemedlet apigenin (1, 3, 10, 30 och 100 μM) vasodilatation på ett överraskande koncentrationsberoende sätt (figur 6C).
Figur 1: Frihandsteckningar av kranskärl för människor och råttor.(A) presenterar egenskaperna hos den ytliga fördelningen av vänster och höger kranskärl från framsidan av det mänskliga hjärtat och känns lätt igen med blotta ögat. (B) visar råttans vänstra och högra kranskärl djupt inne i myokardiet och deras förgrenande interventrikulära septum. Förkortningar: RCA = höger kranskärl; LCA = vänster kranskärl; ISB = interventrikulär septumgren. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2: Diagram över kranskärlsseparation hos råttor. (A) Råtthjärtats högra aurikel, lungartär, topp och anatomiska linje observerades från framsidan under ett ljusmikroskop. (B) Vänster och höger ventrikellumen anslogs längs septum från lungartärens rot. (C) Anatomisk placering av vänster och höger kranskärl och deras interventrikulära septalgren. (D) En 2 mm ring i artären. (E) Artärringen fixeras med tråd längs kärlets riktning. Förkortningar: RA = höger aurikel; PA = lungartär; RCA = höger kranskärl; ISB = interventrikulär septumgren; LCA = vänster kranskärl. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3: Ett schema över arteriell montering. Artärringen med tråd överfördes till (A) och klämdes fast på DMT-badet (B). Ståltråden fixerades och skruvades medurs uppe till vänster (C) och nedre vänstra (D). (E) Isär käftarna skruvades för att ge plats för att låta den andra tråden passera genom artärringen. (F) Den andra tråden var parallell genom artärringen. Ståltråden fixerades och skruvades medurs uppe till höger (G) och nedre högra (H). (I) Isär käkarna skruvades löst för att lämna artärringen i sitt naturliga tillstånd. De gröna linjerna representerar ledningarna och de orange cylindrarna representerar 2 mm isolerad arteriell ring. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4: Normaliseringsförfarande för arteriell ring. Efter att spänningen hos den fasta isolerade arteriella ringen återgått till 0 mN applicerades en 3 mN dragkraft på artärringen på en gång. Efter 5 min minskade kärlspänningen till 2,5 mN. Genom att öka spänningen till 3 mN och hålla den stadig i 5 min initierades spänningen i kranskärlsringen till 0 mN och vilade i 1 h för efterföljande studier av vaskulär spänning av olika stimuli. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 5: Testning av vaskulär reaktivitet. Tre applikationer på 60 mM K + stimulerade spänningen i den isolerade kranskärlsringen till mer än 2 mN och de tre mätningarna var mindre än 10%, vilket tyder på en överlägsen vaskulär aktivitet. Efter varje stimulering spolades badet försiktigt med en 37 °C syremättad PSS-lösning tills spänningen var 0 mN. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 6: Representativt spårämne för kumulativ doskontraktion av råtta kranskärl via K+ eller U46619. När dosen K+ (A) och U46619 (B) ökade ökade kraften dosberoende. (C) hänvisade till den avslappnande effekten av apigenin på 60 mM K+- och 0,3 μM U46619-kontrakterad arteriell ring på ett koncentrationsberoende sätt. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Störningen av koronar mikrocirkulation, som involverar ett brett spektrum av patienter med CAD, har gradvis erkänts och berört grunden för adekvat myokardiumperfusion. Med tanke på de allvarliga komplikationerna av plötslig kranskärlssjukdom och hjärt-kärlsjukdom är snabb läkemedelsförebyggande och behandling extremt viktigt för en klinisk individ med CAD17. Oundvikligen har hemligheten för kranskärlsanatomi och komplexiteten i dess fysiologiska struktur allvarligt begränsat den rationella och vetenskapliga utvärderingen av effektiviteten av läkemedel och behandlingar för CAD 18,19,20,21,22,23,24,25 . Utan tvekan är noggrann lokalisering och isolering av aktiva kranskärl en förutsättning för att främja utforskningen av patologiska mekanismer och utvärdering av förebyggande och behandlingsåtgärder av CAD-relaterade sjukdomar. Trådmikrografens plattform är lämplig för att oavbrutet registrera in vitro-vävnadsspänning med ringformiga och hålrumsstrukturer, som sträcker sig i diameter från 60 μm till 10 mm. Kranskärlsringen kan fästas i kammaren med två ledningar med konstant temperatur och syrekontroll. Data om vasokonstriktion och avslappning efter tillsats av olika läkemedel matas in i datorn via spänningssensorn, med data kontinuerligt förvärvade och dokumenterade14.
Denna artikel beskriver huvudsakligen råttans kranskärls konkreta position och separationsprocess. Och den dynamiska processen med kranskärlsspänningsförändringar hos råttor mättes av trådmikrografsystemet. Med tanke på heterogeniteten hos mänskliga och råtta arter måste vi vara medvetna om dessa skillnader när vi letar efter och isolerar råtta kranskärl. Råttans kransartärer är uppdelade i vänster och höger artärer med en oberoende interventrikulär septalgren. De mänskliga kranskärlen ligger på ytan av hjärtat, medan råttans kranskärl är något djupare. Vid mätning av arteriell ringspänning mättades all buffrad lösning och bubblades med 95% O2 + 5%CO2 vid 37 °C, pH = 7,40. Den fasta processen för artärringen med två ledningar introducerades i detalj. Artären i kroppen är i ett tillstånd av mikroförträngning snarare än ett tillstånd av fullständig avkoppling. Och artärens kontraktila funktion är nära besläktad med den dragkraft som appliceras på dem i viss utsträckning. Därför är det nödvändigt att standardisera artärringen så att den är i ett optimalt förinstallerat tillstånd för att upprätthålla överlägsen vaskulär fysiologisk aktivitet i det efterföljande experimentet. Eftersom högt K + -tillstånd (60 mM) kan depolarisera cellmembranet och aktivera spänningsstyrda Ca2+ kanaler, orsakar detta tillströmningen av extracellulär Ca2+ och arteriell sammandragning26.
I testet av vasokonstriktion och dilatation undersöktes kontraktileffekten av K+ eller U46619 på råttans kranskärl. I resultaten kan K + eller U46619 stadigt begränsa kranskärlen hos råttor på ett koncentrationsberoende sätt genom att verka på jonkanaler eller specifika receptorer. K+ förtränger kärl främst genom att depolarisera cellmembran och öppna L-typ Ca2+ kanaler27. Under tiden U46619, en analog av TXA2, förtränger kärl främst genom att aktivera cirkulära nukleotid-gated kanaler och TXA2-receptorer. Apigenin, en slags flavonoid, finns allmänt i frukt, grönsaker och traditionella kinesiska läkemedel (Semen plantaginis och kinesisk starjasmin)28. Resultaten förklarade att apigenin kunde koncentrationsberoende utvidga sammandragningen av kranskärl för 60 mM K + och 0,3 μM U46619 stimuli. I slutet av experimentet validerades koronarringen med gynnsam aktivitet igen genom att tillsätta 60 mM K+, vilket orsakade vasokonstriktion liknande den för den ursprungliga stimuleringen. Även om studien huvudsakligen fokuserade på kranskärl, var trådmikrografsystemet också tillämpligt på andra extremt små vävnadskärl, lymfatiker och bronkus. Sammanfattningsvis beskrev denna artikel huvudsakligen placeringen och isoleringen av råtta kranskärl. Under tiden mättes dess spänningsförändringar med hjälp av trådmikrografsystemplattformen, vilket gav en exakt och reproducerbar metod för CAD-utforskning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inget att avslöja.
Acknowledgments
Detta arbete stöddes av Key R&D-projektet i Sichuan Provincial Science and Technology Plan (2022YFS0438), National Natural Science Foundation of China (82104533), China Postdoctoral Science Foundation (2020M683273) och Science &Technology Department of Sichuan Province (2021YJ0175).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Apigenin | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | 150731 | |
| CaCl2 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A501330 | |
| D-glucose | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A610219 | |
| HEPES | Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China | S3872 | |
| KCl | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100395 | |
| KH2PO4 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100781 | |
| LabChart Professional version 8.3 | ADInstruments, Australia | — | |
| MgCl2·6H2O | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100288 | |
| Multi myograph system | Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark | 620M | |
| NaCl | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100241 | |
| NaHCO3 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100865 | |
| Steel wires | Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark | 400447 | |
| U46619 | Sigma, USA | D8174 |
References
- Malakar, A. K., et al. A review on coronary artery disease, its risk factors, and therapeutics. Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 16812-16823 (2019).
- Murray, C., et al. national age-sex specific all-cause and cause-specific mortality for 240 causes of death, 1990-2013: A systematic analysis for the global burden of disease Study 2013. The Lancet. 385 (9963), 117-171 (2015).
- Zhang, Y., et al. Adenosine and adenosine receptor-mediated action in coronary microcirculation. Basic Research in Cardiology. 116 (1), 22 (2021).
- Allaqaband, H., Gutterman, D. D., Kadlec, A. O. Physiological consequences of coronary arteriolar dysfunction and its influence on cardiovascular disease. Physiology. 33 (5), 338-347 (2018).
- Minelli, S., Minelli, P., Montinari, M. R. Reflections on atherosclerosis: Lesson from the past and future research directions. Journal of Multidisciplinary Healthcare. 13, 621-633 (2020).
- Alvarez-Alvarez, M. M., Zanetti, D., Carreras-Torres, R., Moral, P., Athanasiadis, G. A survey of sub-saharan gene flow into the mediterranean at risk loci for coronary artery disease. European Journal of Human Genetics. 25 (4), 472-476 (2017).
- LaCombe, P., Tariq, M. A., Lappin, S. L. Physiology, Afterload Reduction. StatPearls [Internet]. , StatPearls Publishing. Treasure Island (FL). (2022).
- Gutterman, D. D., et al. The human microcirculation: regulation of flow and beyond. Circulation Research. 118 (1), 157-172 (2016).
- Wang, G., Li, F., Hou, X. Complementary and alternative therapies for stable angina pectoris of coronary heart disease: A protocol for systematic review and network meta-analysis. Medicine. 101 (7), 28850 (2022).
- Markousis-Mavrogenis, G., et al. Coronary microvascular disease: the "meeting point" of cardiology. European Journal of Clinical Investigation. 52 (5), 13737 (2021).
- Allison, B. J., et al. Fetal in vivo continuous cardiovascular function during chronic hypoxia. The Journal of Physiology. 594 (5), 1247-1264 (2016).
- Wenceslau, C. F., et al. Guidelines for the measurement of vascular function and structure in isolated arteries and veins. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 321 (1), 77-111 (2021).
- Liu, L., et al. Comparison of Ca2+ handling for the regulation of vasoconstriction between rat coronary and renal arteries. Journal of Vascular Research. 56 (4), 191-203 (2019).
- Sun, J., et al. Isometric contractility measurement of the mouse mesenteric artery using wire myography. Journal of Visualized Experiments. (138), e58064 (2018).
- Guo, P., et al. Coronary hypercontractility to acidosis owes to the greater activity of TMEM16A/ANO1 in the arterial smooth muscle cells. Biomedicine & Pharmacotherapy. 139, 111615 (2021).
- Ping, N. N., Cao, L., Xiao, X., Li, S., Cao, Y. X. The determination of optimal initial tension in rat coronary artery using wire myography. Physiological Research. 63 (1), 143-146 (2014).
- Niccoli, G., Scalone, G., Lerman, A., Crea, F. Coronary microvascular obstruction in acute myocardial infarction. European Heart Journal. 37 (13), 1024-1033 (2016).
- Mumma, B., Flacke, N. Current diagnostic and therapeutic strategies in microvascular angina. Current Emergency and Hospital Medicine Reports. 3 (1), 30-37 (2015).
- Lanza, G. A., Parrinello, R., Figliozzi, S. Management of microvascular angina pectoris. American Journal of Cardiovascular Drugs. 14 (1), 31-40 (2014).
- Zhu, T. Q., et al. Beneficial effects of intracoronary tirofiban bolus administration following upstream intravenous treatment in patients with ST-elevation myocardial infarction undergoing primary percutaneous coronary intervention: The ICT-AMI study. International Journal of Cardiology. 165 (3), 437-443 (2013).
- Huang, D., et al. Restoration of coronary flow in patients with no-reflow after primary coronary intervention of acute myocardial infarction (RECOVER). American Heart Journal. 164 (3), 394-401 (2012).
- Fu, W. J., et al. Anti-atherosclerosis and cardio-protective effects of the Angong Niuhuang Pill on a high fat and vitamin D3 induced rodent model of atherosclerosis. Journal of Ethnopharmacology. 195, 118-126 (2017).
- Li, J., et al. Chinese medicine She-Xiang-Xin-Tong-Ning, containing moschus, corydalis and ginseng, protects from myocardial ischemia injury via angiogenesis. The American Journal of Chinese Medicine. 48 (1), 107-126 (2020).
- Wu, W., et al. Three dimensional reconstruction of coronary artery stents from optical coherence tomography: Experimental validation and clinical feasibility. Scientific Reports. 11 (1), 1-15 (2021).
- Liu, M., et al. Janus-like role of fibroblast growth factor 2 in arteriosclerotic coronary artery disease: Atherogenesis and angiogenesis. Atherosclerosis. 229 (1), 10-17 (2013).
- Hu, G., Li, X., Zhang, S., Wang, X. Association of rat thoracic aorta dilatation by astragaloside IV with the generation of endothelium-derived hyperpolarizing factors and nitric oxide, and the blockade of Ca2+ channels. Biomedical reports. 5 (1), 27-34 (2016).
- Guo, Y., et al. Anticonstriction effect of MCA in rats by danggui buxue decoction. Frontiers in Pharmacology. 12, 749915 (2021).
- Jing, Y., et al. Apigenin relaxes rat intrarenal arteries, depresses Ca2+-activated Cl− currents and augments voltage-dependent K+ currents of the arterial smooth muscle cells. Biomedicine & Pharmacotherapy. 115, 108926 (2019).
