פרוטוקול זה מדגים שלב אחר שלב פרטים כיצד לחלץ את הטוחנת הראשונה המנדיבולרית בעכבר. הוא מספק שיטה חלופית לחוקרים המתמקדים בריפוי והתחדשות עצם הלסת.
מחקר זה מציג את הפיתוח של מודל מיצוי מולארי בלסת התחתונה כדי לספק מודל מעשי לחקר התחדשות עצם מכתשית ו ossification intramembranous. עכברי C57/J6 שימשו כדי לחלץ את הטוחנת המנדיבולרית הראשונה כדי לבסס מודל זה. הם הומתו והלסת הדו-צדדית נקטפה, שבוע וארבעה שבועות לאחר הניתוח, בהתאמה. לאחר מכן בוצעו קציר סטריאוסקופי סדרתי, הערכה היסטולוגית וצביעה אימונופלואורסצנטית כדי להדגים ניתוח מוצלח. מיד לאחר הניתוח, התמונות הסטריאוסקופיות הציגו שקע חילוץ ריק. המטוקסילין והאוזין (H&E) בשבוע אחד וצביעת מאסון בשבוע 4 לאחר הניתוח הראו כי אזור השורש המקורי היה מלא באופן חלקי ומלא בטרבקולה של העצם, בהתאמה. צביעת האימונופלואורסנציה הראתה כי בהשוואה לצד ההומאוסטזיס, ביטוי Sp7 גדל שבוע לאחר הניתוח, מה שמרמז על אוסטאוגנזה נמרצת בפוסה הנאדית. כל התוצאות הללו הדגימו מודל מעשי לריפוי ארובת שן מורין. מחקרים עתידיים שיחשפו את המנגנונים של ריפוי פגמים בעצם הלסת או ריפוי ארובות עשויים לאמץ שיטה זו.
ריפוי מכתשית לאחר עקירת שן הוא תרחיש קליני נפוץ, אשר יכול לגרום לסיבוכים בלתי הפיכים כגון דימום במכתשית, מכתשית יבשה, או אפילו אוסטאומיאליטיס בלסת תחת ריפוי לא רצוי 1,2,3. תחלואה נלווית זו עלולה לפגוע באיכות החיים של החולים, ואף גרוע מכך, לאתגר באופן חיוני את שיקום התותבות עקב אובדן עצם מסיבי4. למרות ששלבי ריפוי המכתשית הובהרו, הם אינם מספיקים כדי לכוון טיפול קליני לאחר ניתוח עקירת שן כאשר נתקלים באתגרי פרוגנוזה שונים4.
מחקרים רבים המבוססים על מודלים של בעלי חיים נערכו כדי להשיג הבנה טובה יותר של המנגנונים הבסיסיים בתהליך ריפוי השקע ולמנוע את המצבים הנ”ל. Sp7 הוא וסת ראשי בהתמיינות אוסטאובלסט, הממלא תפקיד חיוני בהתפתחות השלד, המוסטאזיס עצם והתחדשות עצם 5,6. מודלים רציונליים של ריפוי שקעים יכולים להציג את היתירות של Sp7 פוסט טראומטית בהתחדשות עצם. בנוסף, להבדיל מריפוי שבר עצם ארוך, רק תהליך אוסטאוגני אחד, אוסיפיקציה תוך ממברנית, כרוך בתהליך הריפוי של שקע המיצוי7. זה הופך את מודל עקירת השיניים של בעלי חיים לאופטימלי לחקר טיפולים מבוססי שתלים, מכיוון שאוסאואינטגרציה של השתל מצייתת לאותו כלל אוסטאוגני8.
במשך עשרות שנים, מודל עקירת השיניים בוצע בחולדות, ארנבות וכלבים, שכן למינים אלה יש שיניים גדולות ונוחות לניתוח ב 9,10,11. עם זאת, בהתחשב בדרישות המשגשגות לשינוי גנטי וכרקע גנטי מסתגל יותר לבני אדם, עכברים משמשים יותר ויותר לביסוס מודל עקירת שיניים. לאחר מכן, חוקרים יוכלו לפענח את תפקידה של אוכלוסיית תאים מסוימת בתהליך ריפוי הארובה באמצעות עכברים שעברו שינוי גנומי במקום לצפות בפנוטיפיםרק 12. בין המודלים של עקירת ארובות שן מורין, מחקרים קודמים הדגימו את תהליך ההקמה והריפוי של ארובות עקירת שן מקסילרית מוריןוחותכות 13,14,15,16. עם זאת, דפוס הריפוי של הפרוגנוזה, ונקודות הזמן הבלשיות והתצפיתניות, עשויים להיות שונים בין פרוטוקולים שונים. זה פונה לקריטריון אוניברסלי עבור חוקרים כדי לבסס מודל ריפוי ארובת מורין.
מחקר זה נועד להוות מודל מעשי לריפוי ארובת מורין עבור הנושאים הנ”ל. לטוחנות מנדבליות בעכברים תכונות מורפולוגיות ייחודיות בהשוואה לטוחנות וחותכות מקסילריות, המביאות יתרונות וחסרונות ייחודיים. מכיוון שהמודלים המתמקדים בלסת התחתונה המורין מבוססים כיום על ואקום, פרוטוקול זה ניסה לספק שיטה מוצלחת לחילוץ הטוחנת הראשונה של המנדיבולרית בעכברים. אנו מקווים שפרוטוקול זה יאיר את עיני החוקרים הבסיסיים עם רעיונות חדשים לחשוף מנגנונים בסיסיים של ריפוי ארובתות ולהצביע על טיפול קליני.
מודל ריפוי ארובת המורין הוא שיטה חשובה לפענוח המנגנונים הבסיסיים בריפוי והתחדשות עצם, ובסופו של דבר לפתרון אתגרים קליניים. מחקרים קיימים הוכיחו את האפשרות של מודל מיצוי החותכת ומודל המיצוי המולרי המקסילרי, בעוד שמחקרים לא השתמשו במודל הטוחנת הראשונה של המנדיבולרית13,17,18</su…
The authors have nothing to disclose.
עבודה זו נתמכת על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין 81825005 (L.Y.), 82201045 (F.Y.) ו- 82100982 (F.L.), ועל ידי תוכנית המדע והטכנולוגיה של מחוז סצ’ואן 2021JDRC0144 (F.L.), 2022JDRC0130 (F.Y).
23/25/26 G needle | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD. | SB1-074(IV) | |
C57/B6J | Gempharmatech Experimental Animals Company, Chengdu, China | C57/B6J | |
DAPI Staining Solution | Beyotime | Cat#C1005 | |
Embedding Cassettes | CITOTEST Scientific | 80106-1100-16 | |
Hematoxylin and Eosin Stain Kit | Biosharp | BL700B | |
Isoflurane | RWD Life Science Co.,Ltd | R510-22-10 | |
Masson’s Trichrome Stain Kit | Solarbio | G1340 | |
Microtome | Leica | RM2235 | |
Pentobarbital Sodium | Huaxia Chemical Reagent Co., Ltd | 2018042001 | |
Rabbit polyclonal | anti-Sp7 | Abcam Cat# ab22552 | |
Tweezers | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD. | SB2-115 |