Detta protokoll visar steg-för-steg-detaljer om hur man extraherar den mandibulära första molaren i musen. Det ger en alternativ metod för forskare som fokuserar på käkbenläkning och regenerering.
Denna studie introducerar utvecklingen av en molär extraktionsmodell i murin underkäke för att ge en praktisk modell för att studera alveolär benregenerering och intramembranös benbildning. C57 / J6-möss användes för att extrahera den mandibulära första molaren för att etablera denna modell. De avlivades och de bilaterala mandiblarna skördades vid 1 vecka respektive 4 veckor efter operationen. Efterföljande seriell stereoskopisk skörd, histologisk bedömning och immunofluorescensfärgning utfördes för att visa framgångsrik operation. Omedelbart efter operationen visade de stereoskopiska bilderna ett tomt extraktionsuttag. Hematoxylin och eosin (H&E) vid 1 vecka och Massonfärgning vid 4 veckor efter operationen visade att området för den ursprungliga roten var delvis respektive helt fylld med bentrabeculae. Immunofluorescensfärgningen visade att jämfört med homeostassidan ökade Sp7-uttrycket vid 1 vecka efter operationen, vilket tyder på kraftig osteogenes i den alveolära fossan. Alla dessa resultat visade en praktiskt genomförbar murin tanduttag socket healing modell. Kommande studier som avslöjar mekanismerna för läkning av käkbendefekter eller socketläkning kan anta denna metod.
Socketläkning efter tanduttag är ett vanligt kliniskt scenario, vilket kan leda till obehagliga komplikationer som sockelblödning, torr socket eller till och med käkosteomyelit under oönskad läkning 1,2,3. Dessa comorbiditeter kan försämra patienternas livskvalitet och, ännu värre, utmana protesrehabilitering på grund av massiv benförlust4. Även om sockelläkningsstadierna har belysts är de otillräckliga för att styra klinisk vård efter tanduttagskirurgi när de stöter på olika prognosutmaningar4.
Flera studier baserade på djurmodeller har genomförts för att få en bättre förståelse för de underliggande mekanismerna i socketläkningsprocessen och avvärja ovanstående situationer. Sp7 är en huvudregulator inom osteoblastdifferentiering och spelar en viktig roll i skelettutveckling, benhemostas och benregenerering 5,6. Rationella socketläkningsmodeller kan visa redundansen av Sp7 posttraumatisk vid benregenerering. Dessutom, till skillnad från läkning av långa benfrakturer, involverar endast en enda osteogen process, intramembranös benbildning, läkningsprocessen för extraktionsuttaget7. Detta gör djurtanduttagsmodellen optimal för att studera implantatbaserade terapier, eftersom implantatosseointegration följer samma osteogena regel8.
I årtionden har tanduttagsmodellen utförts hos råttor, kaniner och hundar, eftersom dessa arter har stora tänder som är praktiska att använda på 9,10,11. Men med tanke på de blomstrande kraven på genetisk modifiering och som en mer adaptiv genetisk bakgrund för människor används möss alltmer för att etablera en tanduttagsmodell. Därefter kunde forskare avslöja en specifik cellpopulations roll i socketläkningsprocessen med hjälp av genommodifierade möss istället för att observera fenotyper endast12. Bland hylsmodeller för utsugning av murina tänder har tidigare studier visat etablering och läkningsprocess av murina maxillära tand- och framtändextraktionsuttag13,14,15,16. Prognosens läkningsmönster och detektiv- och observativa tidpunkter kan dock skilja sig åt mellan protokoll. Detta vädjar till ett universellt kriterium för forskare att upprätta en murin socket healing modell.
Denna studie syftade till att utgöra en praktiskt genomförbar murin socket healing modell för ovanstående frågor. Mandible molars hos möss har distinkta morfologiska egenskaper jämfört med maxillära molar och snedställningar, vilket ger unika fördelar och nackdelar. Eftersom modellerna som fokuserar på murin underkäke för närvarande är vakuumbaserade, försökte detta protokoll tillhandahålla en fulländad metod för att extrahera den mandibulära första molaren i möss. Vi hoppas att detta protokoll kommer att upplysa grundforskare med nya idéer för att avslöja underliggande mekanismer för socketläkning och indikera klinisk vård.
Murina socket healing modellen är en viktig metod för att avslöja de underliggande mekanismerna i benläkning och regenerering, vilket i slutändan löser kliniska utmaningar. Befintliga studier har visat möjligheten av framtändernas extraktionsmodell och den maxillära molära extraktionsmodellen, medan studier inte har använt den mandibulära första molära modellen13,17,18. Framtänder är dock avgörande för gnagarli…
The authors have nothing to disclose.
Detta arbete stöds av National Natural Science Foundation of China 81825005 (L.Y.), 82201045 (F.Y.) och 82100982 (F.L.), och av Sichuanprovinsens vetenskaps- och teknikprogram 2021JDRC0144 (F.L.), 2022JDRC0130 (F.Y.).
23/25/26 G needle | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD. | SB1-074(IV) | |
C57/B6J | Gempharmatech Experimental Animals Company, Chengdu, China | C57/B6J | |
DAPI Staining Solution | Beyotime | Cat#C1005 | |
Embedding Cassettes | CITOTEST Scientific | 80106-1100-16 | |
Hematoxylin and Eosin Stain Kit | Biosharp | BL700B | |
Isoflurane | RWD Life Science Co.,Ltd | R510-22-10 | |
Masson’s Trichrome Stain Kit | Solarbio | G1340 | |
Microtome | Leica | RM2235 | |
Pentobarbital Sodium | Huaxia Chemical Reagent Co., Ltd | 2018042001 | |
Rabbit polyclonal | anti-Sp7 | Abcam Cat# ab22552 | |
Tweezers | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD. | SB2-115 |