Bu protokol, faredeki mandibular ilk azı dişinin nasıl çıkarılacağına dair adım adım ayrıntıları gösterir. Çene kemiği iyileşmesi ve yenilenmesine odaklanan araştırmacılar için alternatif bir yöntem sunar.
Bu çalışma, alveoler kemik rejenerasyonu ve intramembranöz ossifikasyonu incelemek için uygulanabilir bir model sağlamak için murin mandibulada bir molar ekstraksiyon modelinin geliştirilmesini tanıtmaktadır. Bu modeli oluşturmak için mandibular ilk azı dişini çıkarmak için C57 / J6 fareleri kullanıldı. Ötanazi yapıldı ve bilateral mandibulalar sırasıyla ameliyattan 1 hafta ve 4 hafta sonra toplandı. Daha sonra seri stereoskopik hasat, histolojik değerlendirme ve immünofloresan boyama başarılı cerrahi göstermek için yapıldı. Ameliyattan hemen sonra, stereoskopik görüntüler boş bir ekstraksiyon soketi gösterdi. 1 haftada hematoksilin ve eozin (H&E) ve ameliyat sonrası 4 haftada Masson boyaması, orijinal kökün alanının sırasıyla kısmen ve tamamen kemik trabekülleri ile dolu olduğunu göstermiştir. İmmünofloresan boyama, homeostaz tarafı ile karşılaştırıldığında, Sp7 ekspresyonunun ameliyattan 1 hafta sonra arttığını ve alveoler fossada güçlü osteogenezi düşündürdüğünü göstermiştir. Tüm bu sonuçlar uygulanabilir bir murin diş çekimi soketi iyileştirme modeli göstermiştir. Çene kemiği defekti iyileşmesi veya soket iyileşmesi mekanizmalarını ortaya koyan yeni çalışmalar bu yöntemi benimseyebilir.
Diş çekimi sonrası soket iyileşmesi, istenmeyen iyileşme altında soket kanaması, kuru soket ve hatta çene osteomiyeliti gibi istenmeyen komplikasyonlara neden olabilen yaygın bir klinik senaryodur 1,2,3. Bu komorbiditeler hastaların yaşam kalitesini bozabilir ve daha da kötüsü, masif kemik kaybı nedeniyle protez rehabilitasyonunu hayati derecede zorlayabilir4. Soket iyileşme aşamaları aydınlatılmış olmasına rağmen, çeşitli prognoz zorluklarıyla karşılaşıldığında diş çekimi sonrası cerrahi sonrası klinik bakımı yönlendirmede yetersiz kalmaktadır4.
Soket iyileşme sürecinde altta yatan mekanizmaları daha iyi anlamak ve yukarıdaki durumları önlemek için hayvan modellerine dayalı çok sayıda çalışma yapılmıştır. Sp7, osteoblast farklılaşmasında ana düzenleyicidir ve iskelet gelişimi, kemik hemostazı ve kemik rejenerasyonunda hayati bir rol oynar 5,6. Rasyonel soket iyileşme modelleri, Sp7’nin travma sonrası kemik rejenerasyonundaki fazlalığını gösterebilir. Ek olarak, uzun kemik kırığı iyileşmesinden farklı olarak, sadece tek bir osteojenik süreç, intramembranöz ossifikasyon, ekstraksiyon soketinin iyileşme sürecini içerir7. Bu, hayvan dişi çekimi modelini implant tabanlı tedavileri incelemek için en uygun hale getirir, çünkü implant osseointegrasyonu aynı osteojenik kural8’e uyar.
On yıllar boyunca, diş çekme modeli sıçanlarda, tavşanlarda ve köpeklerde gerçekleştirilmiştir, çünkü bu türler 9,10,11 üzerinde çalışmaya uygun büyük dişlere sahiptir. Bununla birlikte, genetik modifikasyon için gelişen talepler ve insanlara daha uyarlanabilir bir genetik arka plan olarak, fareler bir diş çekme modeli oluşturmak için giderek daha fazla kullanılmaktadır. Daha sonra, araştırmacılar fenotipleri sadece12 gözlemlemek yerine, genomu değiştirilmiş fareleri kullanarak soket iyileşme sürecinde belirli bir hücre popülasyonunun rolünü çözebilirler. Murin diş çekimi soket modelleri arasında, önceki çalışmalar murin maksiller diş ve kesici diş ekstraksiyon soketlerinin kuruluş ve iyileşme sürecini göstermiştir13,14,15,16. Bununla birlikte, prognozun iyileşme paterni ve dedektif ve gözlemsel zaman noktaları, protokoller arasında farklılık gösterebilir. Bu, akademisyenlerin bir murin soketi iyileştirme modeli oluşturmaları için evrensel bir kritere hitap etmektedir.
Bu çalışmada yukarıdaki konular için uygulanabilir bir murin soket iyileştirme modeli oluşturulması amaçlanmıştır. Farelerdeki mandibula azı dişleri, maksiller azı dişleri ve kesici dişlere kıyasla ayırt edici morfolojik özelliklere sahiptir ve benzersiz avantajlar ve dezavantajlar getirir. Murin mandibulasına odaklanan modeller şu anda vakum bazlı olduğundan, bu protokol farelerde mandibular ilk azı dişini çıkarmak için başarılı bir yöntem sağlamaya çalıştı. Bu protokolün, soket iyileşmesinin altında yatan mekanizmaları ortaya çıkarmak ve klinik bakımı belirtmek için temel araştırmacıları yeni fikirlerle aydınlatacağını umuyoruz.
Murin soket iyileştirme modeli, kemik iyileşmesi ve rejenerasyonunda altta yatan mekanizmaları çözmek ve sonuçta klinik zorlukları çözmek için önemli bir yöntemdir. Mevcut çalışmalar kesici diş ekstraksiyon modeli ve maksiller molar ekstraksiyon modelinin olasılığını gösterirken, çalışmalar mandibular birinci molar model13,17,18’i kullanmamıştır. Bununla birlikte, kesici dişler kemirgen yaşamı içi…
The authors have nothing to disclose.
Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı 81825005 (LY), 82201045 (F.Y.) ve 82100982 (F.L.) ve Sichuan Eyaleti Bilim ve Teknoloji Programı 2021JDRC0144 (F.L.), 2022JDRC0130 (F.Y.) tarafından desteklenmektedir.
23/25/26 G needle | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD. | SB1-074(IV) | |
C57/B6J | Gempharmatech Experimental Animals Company, Chengdu, China | C57/B6J | |
DAPI Staining Solution | Beyotime | Cat#C1005 | |
Embedding Cassettes | CITOTEST Scientific | 80106-1100-16 | |
Hematoxylin and Eosin Stain Kit | Biosharp | BL700B | |
Isoflurane | RWD Life Science Co.,Ltd | R510-22-10 | |
Masson’s Trichrome Stain Kit | Solarbio | G1340 | |
Microtome | Leica | RM2235 | |
Pentobarbital Sodium | Huaxia Chemical Reagent Co., Ltd | 2018042001 | |
Rabbit polyclonal | anti-Sp7 | Abcam Cat# ab22552 | |
Tweezers | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD. | SB2-115 |