Summary

Dissektion och gradering av äggstocksutveckling hos vilda honinsekter

Published: July 14, 2023
doi:

Summary

Protokollet demonstrerar en enkel och lätt dissektionsmetod, lämplig för vilda vandrande insekter som fångas med sökarljusfällor. Denna teknik kan avsevärt klargöra samma art genom att jämföra båda reproduktionsvävnaderna, nämligen parningssäcken och äggstocksutvecklingen hos vilda insekter.

Abstract

Migrerande skadeinsekter utgör allvarliga utmaningar för livsmedelsproduktionen och livsmedelssäkerheten över hela världen. De migrerande skadedjuren kan övervakas och fångas med hjälp av sökarfällor. En av de viktigaste teknikerna för prognoser för migrerande skadedjur är att identifiera de flyttande arterna. Men i de flesta fall är det svårt att få informationen bara genom utseendet. Att använda kunskap som förvärvats genom systematisk analys av det kvinnliga reproduktionssystemet kan därför bidra till att förstå den kombinerade anatomiska morfologin hos äggstockarnas parningssäck och äggstockarnas utvecklingsgradering hos vilda flyttande insekter som fångats med sökljusfällor. För att demonstrera tillämpbarheten av denna metod bedömdes äggstockarnas utvecklingsstatus och äggkornens utvecklingsstadier direkt i Helicoverpa armigera, Mythimna separata, Spodoptera litura och Spodoptera exigua för äggstockarnas anatomi, och äggstockarnas parningssäckar studerades i Agrotis ipsilon, Spaelotis valida, Helicoverpa armigera, Athetis lepigone, Mythimna separata, Spodoptera litura, Mamestra brassicae och Spodoptera exigua, för att utforska deras relationer. Detta arbete visar den specifika dissektionsmetoden för att förutsäga vilda flyttande insekter, genom att jämföra det unika reproduktionssystemet hos olika migrerande insekter. Därefter undersöktes båda vävnaderna, nämligen äggstocken och parningssäckarna, ytterligare. Denna metod hjälper till att förutsäga dynamiken och den strukturella utvecklingen av reproduktionssystem hos vilda flyttande insekter.

Introduction

Insekternas migration spelar en viktig roll i populationsdynamiken i den globala insektsutbredningen för insekter som Helicoverpa armigera – bomullsbollmasken, Mythimna separate – den orientaliska armémasken, Spodoptera litura – tarolarven, Spodoptera exigua – betarmémasken, som har rapporterats som allvarliga skadedjur i Kina 1,2,3,4 . De långa reseavstånden, säsongsrörelserna, den höga fruktsamheten hos migrerande skadedjur och ekologiska faktorer har medfört stora svårigheter när det gäller att förutsäga, prognostisera och kontrollera dessa skadedjur5. Övervakning av skadedjursmigration krävs för att avslöja anpassningsförmåga och beteendeförändringar som underlättar migrerande skadedjur enligt klimatförändringar eller cykler6. För att upprätthålla sin tillväxt, reproduktion och överlevnad har insekter förvärvat sekventiell anpassningsförmåga under evolutionen; Denna serie av adaptivt liv har genererat många förändringar i det reproduktiva systemet, såsom migrationsstrategi som leder till kontroll av äggstockarnas utveckling under den långa migrationsprocessen.

Äggstocksutveckling är vanligt hos migrerande skadedjur, vilket påverkar populationens tillväxt7. Därför har äggstockarnas utveckling länge varit ett hett ämne för forskning om migrerande skadegörare. En serie studier har lett till flera indikatorer och klassificeringsstrategier för äggstockarnas utveckling. Hittills har flera metoder använts för att analysera äggstockarnas utveckling, t.ex. Loxostege sticticalis – ängsfjärilens – äggstocksutveckling som inkluderar det inledande fjäderstadiet, den tidiga lekperioden, lekperioden och slutet av äggläggning8. Vissa forskare delar upp äggstocksnivåerna på grundval av äggulans färgutveckling hos migrerande fjärilsskadegörare, såsom S. exigua – betarmémasken, Pseudaletia unipuncta – den äkta armémasken, och Cnaphalocrocis medinalis – risbladsmappen, etc.9,10,11,12. I tidigare studier har äggstockarnas utvecklingsnivåer för skadegörare, såsom bomullsbollmask och risbladsrulle, delats in i fem stadier: guleavfällningsstadium, mognadsstadium för äggkorn, mognad i väntan på födsel, maximal ovogenesperiod och slutleksstadium13,14. Majsmottens äggstocksutveckling delades in i sex utvecklingsstadier: guleavlagring, äggmognad, disposition före ägg, toppleksstadium och slutleksstadium15.

Dessutom har insekter av samma släkte olika utvecklingsstadier, såsom äggstockarnas utvecklingsnivåer av Spodoptera frugiperda – höstarmémasken – delas in i fyra nivåer: guleavsättningsstadium, mogen väntan på leverans, toppäggspositivitet och slutleksstadium16. Å andra sidan har äggstocksutvecklingen hos Spodoptera exigua – betmalen – fem nivåer: transparent, vitellogenes, mognad av ägg, äggfrisättning och sen äggläggning nivåer17.

Tidigare studier kan endast klassificera utvecklingen från enstaka till flera äggstocksutvecklingsnivåer med hjälp av färgmognad hos äggula, äggläggning och äggutveckling, men klassificering kan inte göras baserat på reproduktionssystemets anatomi. Utvecklingen av en äggstock baserat på morfogenesens anatomi är ett mindre studerat område. Här utformades dissektionsmetoden för att förutsäga migrerande honor i populationen med hjälp av två äggstocksvävnadstyper, för att utveckla deras reproduktionsdynamik baserat på den anatomiska morfogenesen av -äggstockarnas utvecklingsstadium och parningssäck – vilket ger direkta bevis för att särskilja migrerande vildtypshonor.

Vissa studier har visat att migrerande insektsarter av Noctuidae ofta fångades av strålkastare18. Äggstockarna hos de flesta flyttande insektsarter av Noctuidae befinner sig i de tidiga utvecklingsstadierna under det inledande flyttningsstadiet och äggstockarna ökar i takt med att flytten fortskrider. I denna studie beskrivs dissektionsmetoden för äggstockarnas utvecklingsgrader, för att studera de två reproduktionsvävnaderna hos olika honor, fångade av sökljus. Denna metod främjar inte bara forskningen för att förstå migrationsdynamiken, utan också faciliteter inom insektsklassificering, insektsfysiologistudier, skadedjursförutsägelser och prognoser för kvinnliga skadedjursarter.

Protocol

OBS: Var uppmärksam på säkerhetsåtgärder innan du fångar vilda vandrande insekter, det rekommenderas att bära säkerhetsutrustning (handskar, långärmade skjortor och skyddsglasögon). Stäng också av fällan när den inte används för att undvika andra säkerhetsrisker och överhettning av ljuset. Det är viktigt att följa säkerhetsprotokollen före dissektion, som att bära handskar, skyddsglasögon och labbrock för att förhindra exponering för kroppsvätskor och kemikalier. <st…

Representative Results

Äggens utvecklingOvanstående protokoll tillämpades för att analysera utvecklingen av ägg i äggstocken. För detta ändamål klassificerades ägg i allmänhet i fyra stadier för att skilja tidiga och mogna stadier av äggutveckling bland alla arter, t.ex. bollmask, armémask, tarolarv och betmal. Här observerades det tidiga stadiet av fjäder (mjölkvitt genomskinligt stadium). Figur 2A visar att äggstockarna ännu inte har börjat utvecklas, äggstockskanalen ä…

Discussion

Äggstocksanalysmetoder används rutinmässigt inom växtskydd, för att belysa insektsflyktens och populationens rörelser för prognostiseringav 19,20,21 och för att utveckla de fysiologiska variationerna hos insekter. Det har noterats att den unika migrationen och den snabba spridningsförmågan hos vanliga skadegörare inom jordbruket, såsom bollmask, armémask, tarolarv och betmal, gör det svårt att förutsäga från an…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Denna studie stöddes av det stora vetenskapliga och tekniska innovationsprojektet (2020CXGC010802).

Materials

Digital camera Canon ( China ) co., LTD EOS 800D
Dropper Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD
Ethanol absolute (99.7%) Shanghai Hushi Laboratory Equipmentco., LTD
Forceps  Vetus Tools co., LTD ST-14
GT75 type halogen headlamp (1000 W) Shanghai Yadeng Industry co., LTD
Helicoverpa armigera, Mythimna separate, Spodoptera litura, Spodoptera exigua Jiyang district, Jinan city, Shandong province, China
Measuring cylinder, beaker, flask Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD
Net bag  Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD 0.5 m 
Net cages  Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD 30 cm x 30 cm
Petri dishes Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD  60 mm diameter

References

  1. Wu, K. Monitoring and management strategy for Helicoverpa armigera resistance to Bt cotton in China. Journal of Invertebrate Pathology. 95 (3), 220-223 (2007).
  2. Jiang, X., Luo, L., Zhang, L., Sappington, T. W., Hu, Y. Regulation of Migration in Mythimna separata (Walker) in China: A Review Integrating Environmental, Physiological, Hormonal, Genetic, and Molecular Factors. Environmental Entomology. 40 (3), 516-533 (2011).
  3. Su, J., Lai, T., Li, J. Susceptibility of field populations of Spodoptera litura (Fabricius) (Lepidoptera: Noctuidae) in China to chlorantraniliprole and the activities of detoxification enzymes. Crop Protection. 42, 217-222 (2012).
  4. Che, W., Shi, T. Insecticide Resistance Status of Field Populations of Spodoptera exigua (Lepidoptera: Noctuidae) From China. Journal of Economic Entomology. 106 (4), 1855-1862 (2013).
  5. Jiang, X., Luo, L. Regulation of Migration in Mythimna separata (Walker) in China: A Review Integrating Environmental, Physiological, Hormonal, Genetic, and Molecular Factors. Environmental Entomology. 40 (3), 516-533 (2011).
  6. Kiss, M., Nowinszky, L., Puskás, J. Examination of female proportion of light trapped turnip moth (Scotia segetum Schiff.). Acta Phytopathologica Et Entomologica Hungarica. 37, 251-256 (2002).
  7. Jiang, X. F., Luo, L. Z., Sappington, T. W. Relationship of flight and reproduction in beet armyworm, Spodoptera exigua (Lepidoptera: Noctuidae), a migrant lacking the oogenesis-flight syndrome. Journal of insect physiology. 56 (11), 1631-1637 (2010).
  8. Sun, Y., Chen, R., Wang, S., Bao, X. Morphological observation on the development of female reproductive system in meadow moth Loxostege sticticalis L. Acta Entomologica Sinica. 34, 248-249 (1991).
  9. Fu, X., Feng, H., Liu, Z., Wu, K. Trans-regional migration of the beet armyworm, Spodoptera exigua (Lepidoptera: Noctuidae), in North-East Asia. PLoS One. 12 (8), e0183582 (2017).
  10. Cusson, M., McNeil, J. N., Tobe, S. S. In vitro biosynthesis of juvenile hormone by corpora allata of Pseudaletia unipuncta virgin females as a function of age, environmental conditions, calling behaviour and ovarian development. Journal of Insect Physiology. 36 (2), 139-146 (1990).
  11. Fu, X. W., et al. Seasonal migration of Cnaphalocrocis medinalis (Lepidoptera: Crambidae) over the Bohai Sea in northern China. Bulletin of entomological research. 104 (5), 601-609 (2014).
  12. Telfer, W. H. Egg formation in Lepidoptera. Journal of Insect Science. 9, 1-21 (2009).
  13. Wu, K., Guo, Y., Wu, Y. Ovarian development of adult females of cotton bollworm and its relation to migratory behavior around Bohai bay of China. Acta Ecologica Sinica. 22 (7), 1075-1078 (2002).
  14. Wada, T., Ogawa, Y., Nakasuga, T. Geographical difference in mated status and autumn migration in the rice leaf roller moth, Cnaphalocrocis medinalis. Entomologia Experimentalis et Applicata. 46 (2), 141-148 (1988).
  15. Xingquan, K., Calvin, D. D. Female European corn borer (Lepidoptera: Crambidae) ovarian developmental stages: Their association with oviposition and use in a classification system. Journal of economic entomology. 97 (3), 828-835 (2004).
  16. Ge, S., et al. Potential trade-offs between reproduction and migratory flight in Spodoptera frugiperda. Journal of insect physiology. 132, 104248 (2021).
  17. Han, L. Z., Gu, H. N. Reproduction-Flight Relationship in the Beet Armyworm, Spodoptera exigua (Lepidoptera: Noctuidae). Environmental Entomology. 37 (2), 374-381 (2008).
  18. Zhou, Y., et al. Long-term insect censuses capture progressive loss of ecosystem functioning in East Asia. Science Advances. 9 (5), eade9341 (2023).
  19. Hu, G., Lim, K. S., Horvitz, N. Mass seasonal bioflows of high-flying insect migrants. Science. 354 (6319), 1584-1587 (2016).
  20. Hu, G., et al. Environmental drivers of annual population fluctuations in a trans-Saharan insect migrant. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 118 (26), e2102762118 (2021).
  21. Fu, X., Liu, Y., Li, C. Seasonal migration of Apolygus lucorum (Hemiptera: Miridae) over the Bohai Sea in northern China. Journal of Economic Entomology. 107 (4), 1399-1410 (2014).
  22. Fu, X., Liu, Y., Li, Y., Ali, A., Wu, K. Does Athetis lepigone Moth (Lepidoptera: Noctuidae) Take a Long-Distance Migration. Journal of Economic Entomology. 107 (3), 995-1002 (2014).
  23. Huang, J., et al. The Effect of Larval Diet on the Flight Capability of the Adult Moth (Athetis lepigone) (Möschler) (Lepidoptera: Noctuidae). Florida Entomologist. 105 (4), 287-294 (2023).
  24. Sun, X., Hu, C., Jia, H. Case study on the first immigration of fall armyworm, Spodoptera frugiperda invading into China. Journal of Integrative Agriculture. 20 (3), 664-672 (2021).
  25. Feng, H. Q., Wu, K. M., Cheng, D. F., Guo, Y. Y. Northward migration of Helicoverpa armigera (Lepidoptera: Noctuidae) and other moths in early summer observed with radar in northern China. Journal of Economic Entomology. 97 (6), 1874-1883 (2004).
  26. Ge, S. S., et al. Flight activity promotes reproductive processes in the fall armyworm, Spodoptera frugiperda. Journal of Integrative Agriculture. 20 (3), 727-735 (2021).
  27. Guerra, P. A., Pollack, G. S. Flight behaviour attenuates the trade-off between flight capability and reproduction in a wing polymorphic cricket. Biology Letters. 5 (2), 229-231 (2009).
  28. He, W., Zhao, X., Ge, S., Wu, K. Food attractants for field population monitoring of Spodoptera exigua (Hübner). Crop Protection. 145, 105616 (2021).
  29. He, L. M., et al. Adult nutrition affects reproduction and flight performance of the invasive fall armyworm, Spodoptera frugiperda in China. Journal of Integrative Agriculture. 20 (3), 715-726 (2021).
  30. Kongming, W., Yuyuan, G., Yan, W. Ovarian development of adult females of cotton bollworm and its relation to migratory behavior around Bohai Bay of China. Acta Ecologica Sinica. 22 (7), 1075-1078 (2002).
  31. Feng, H., Wu, X. Seasonal Migration of Helicoverpa armigera (Lepidoptera: Noctuidae) Over the Bohai Sea. Journal of Economic Entomology. 102 (1), 95-104 (2009).
  32. Miao, J., Guo, P., Li, H. Low Barometric Pressure Enhances Tethered-Flight Performance and Reproductive of the Oriental Armyworm, Mythimna separata (Lepidoptera: Noctuidae). Journal of Economic Entomology. 114 (2), 620-626 (2021).
  33. Fu, X., Zhao, X. Seasonal Pattern of Spodoptera litura (Lepidoptera: Noctuidae) Migration Across the Bohai Strait in Northern China. Journal of Economic Entomology. 108 (2), 525-538 (2015).
  34. Rhainds, M., Kettela, E. G. Oviposition threshold for flight in an inter-reproductive migrant moth. Journal of Insect Behavior. 26 (6), 850-859 (2013).
  35. Showers, W. B. Migratory ecology of the black cutworm. Annual review of entomology. 42, 393-425 (1997).
  36. Zhang, Z., et al. Morphological differences of the reproductive system could be used to predict the optimum Grapholita molesta (Busck) control period. Scientific Reports. 7 (1), 8198 (2017).
  37. Zheng, D. B., Hu, G., Yang, Ovarian development status and population characteristics of Sogatella furcifera (Horváth) and Nilaparvata lugens (Stål): implications for pest forecasting. Journal of Applied Entomology. 138 (1-2), 67-77 (2014).
  38. Wan, G. J., Jiang, S. L. Geomagnetic field absence reduces adult body weight of a migratory insect by disrupting feeding behavior and appetite regulation. Insect Science. 28 (1), 251-260 (2021).
  39. Laštůvka, Z. Climate change and its possible influence on the occurrence and importance of insect pests. Plant protection science. 45, S53-S62 (2009).
  40. Xu, R. B., Ge, S. S. Physiological and Environmental Influences on Wingbeat Frequency of Oriental Armyworm, Mythimna separata (Lepidoptera: Noctuidae). Environmental Entomology. 52 (1), 1-8 (2022).
  41. Jiang, X., Cai, B. Influences of temperature and humidity synthesize on flight capacity in the moth s of Oriental armyworm, Mythimna separata(Walker). Acta Ecologica Sinica. 23 (4), 738-743 (2003).
  42. Zhang, L., Luo, L., Jiang, X. Starvation influences allatotropin gene expression and juvenile hormone titer in the female adult oriental armyworm, Mythimna separata. Archives of Insect Biochemistry and Physiology. 68 (2), 63-70 (2008).

Play Video

Cite This Article
Sindhu, L., Guo, S., Song, Y., Li, L., Cui, H., Guo, W., Lv, S., Yu, Y., Men, X. Dissection and Grading of Ovarian Development in Wild-Type Female Insects. J. Vis. Exp. (197), e65644, doi:10.3791/65644 (2023).

View Video