Summary

Fareler veya Genç Sıçanlar için Toplu Elektroakupunktur Operasyonu

Published: September 01, 2023
doi:

Summary

Burada, üç boyutlu (3D) baskılı bir tutucu kullanarak farelerde veya genç sıçanlarda verimli ve hızlı elektroakupunktur (EA) için bir protokol sunuyoruz. Bu teknik, birden fazla hayvan üzerinde aynı anda çalışmaya izin verir, zamandan tasarruf sağlar ve deneysel verimliliği artırır.

Abstract

Elektroakupunktur (EA), çeşitli sağlık durumlarını tedavi etmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, EA tedavisinin altında yatan mekanizma belirsizliğini korumakta ve bu da tanıtımını engellemektedir. Mekanik çalışma, bu sorunu çözmek için fare veya sıçan modelleri gerektirir. Bununla birlikte, bu hayvanlar zaman alıcı olan deneysel sürece itaatkar değildir. Bu sorunları çözmek için, EA’nın hayvan deneylerinin verimliliğini artırmak için 3D baskılı küçük hayvan vücudu toplu fiksatörü tasarladık. Bu videoda, farelerde veya genç sıçanlarda toplu EA gerçekleştirmek için fiksatörün nasıl kullanılacağı ayrıntılı olarak gösterilmektedir. Akupunktur noktalarının seçimi için, fiksasyon cihazının yüzüstü konumlandırma ve sırtüstü konumlandırma ile etkisini doğrulamak için verteks temporal (MS6 başı) ve Tianshu noktasının (ST25 göbek) anterior eğik çizgisi seçildi. 3D baskılı küçük hayvan tutucunun kullanılması, birden fazla kemirgenin aynı anda hareketsiz hale getirilmesine ve tedavi edilmesine olanak tanıyarak deney için gereken zamanı ve kaynakları azaltır. Bu teknik, farklı boyutlarda 3D baskı ile diğer hayvan modellerine uygulanabilir ve potansiyel olarak çeşitli sabitleme koşulları için kullanılabilir. Cihaz, EA’da deneysel bilimsel araştırmaların tanıtımı için faydalıdır.

Introduction

Elektroakupunktur (EA) tedavisi, akupunktur iğnelerinin kafa derisine sokulduğu ve belirli noktaları uyarmak için bir elektro makineye bağlandığı benzersiz bir yöntemdir1. Manuel stimülasyondan farklı olarak, EA, optimal terapötik etkiler elde etmek için belirli frekansları ve dalga formlarını stabilize ederek stimülasyonun daha iyi kontrol edilmesini sağlar2. Bir ankete göre, Çin’deki tıbbi kurumların %81.2’si serebral palsi, nevralji, yüz felci ve diğer durumları tedavi etmek için EA veya manuel akupunktur kullanıyor. Popülerliğine rağmen, EA’nın spesifik etkinlik mekanizması hala bilinmemektedir, bu da nörolojik hastalıkların rehabilitasyon tedavisinde tanıtımını ve uygulanmasını engellemiştir 1,2,3. EA’nın etkinlik mekanizmasını tam olarak anlamak ve nörolojik hastalıkların rehabilitasyon tedavisinde kullanımını teşvik etmek için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır.

Akupunkturun etkisi dünya çapında genişledikçe, birçok çalışma, sıçan veya fare modellerigibi kemirgen modellerinde gerçekleştirilen EA mekanizmalarını araştırmıştır 1,2,3. EA’nın kemirgen deneylerinde sıklıkla çeşitli sorunlarla karşılaşılır. Birincisi, uyanık denekler üzerinde yapılan akupunktur klinik uygulamayı daha iyi yansıttığından, kemirgenlerin anestezi olmadan nasıl hareketsiz hale getirileceğidir. Ek olarak, bazı deneyler tedavi etkilerini gözlemlemek için hayvanların uyanık olmasını gerektirir 2,3. Diğer bir zorluk, insanlardakilere karşılık gelen farelerde veya sıçanlarda akupunktur noktalarını doğru bir şekilde bulmaktır. Deneysel kemirgenlerde akupunktur noktalarının kesin lokalizasyonu şu anda birçok bilim adamı tarafından incelenmektedir 4,5. Bu protokolde, insan anatomik lokalizasyonunun dönüşümü ile kemirgenlerde açıkça tanımlanmış olan MS6 ve ST25 seçilmiştir. MS6, Parkinson hastalığı6 gibi bazı beyin hastalıklarının tedavisinde yaygın olarak kullanılır. ST25 genellikle ishal7 gibi gastrointestinal problemleri tedavi etmek için kullanılır. Bu iki akupunktur noktası, öncelikle kemirgenlerin hem sırtüstü hem de yüzüstü pozisyonlarda nasıl etkili bir şekilde hareketsiz hale getirilebileceğini göstermek için seçilmiştir. Ayrıca, bu akupunktur noktaları kapsamlı bir şekilde incelenmiştir ve araştırma amaçları için önemli bilgiler sunmaktadır 6,7.

Deneyler için tek bir fareyi hareketsiz hale getirmenin önceki yöntemi sadece zaman alıcı değil, aynı zamanda tek bir kişi tarafından idare edilmesi de zordur8. Ek olarak, hayvanların işbirliği yapmaması nedeniyle, pratikte başarı oranı nispeten düşüktür. Bu nedenle, deney verimliliğini artırmak için kararlı özelliklere sahip, kolayca kurulmuş bir hayvan modeli oluşturmaya kritik bir ihtiyaç vardır. Bu makalede, birden fazla kemirgeni kolayca hareketsiz hale getirebilen ve motor kısıtlamasına yol açabilen küçük hayvanlar için 3D baskılı bir tutucu tanıtıldı. Bu makalenin amacı, farelerin toplu olarak kısıtlanması, MS6 ve ST25 akupunktur noktalarının tanımlanması ve uyarılması stratejilerine odaklanarak, bir grup genç sıçan veya fareye EA tedavileri uygulamaktır.

Protocol

Bu çalışmadaki deneyler, hayvan etiğinin “3R” ilkesine uygundur ve Ordu Tıp Üniversitesi (AMUWEC20234543) Laboratuvar Hayvanları Refahı ve Etnik Komitesi tarafından onaylanmıştır. 1. Kemirgen vücut sabitleme cihazının hazırlanması Çin faydalı model patentine dayalı küçük bir hayvan tutucu tasarlayın9. Cihazı 3D baskı teknolojisi ile üretin. 2 m uzunluğunda bir ip hazırlayın ve 6 ipe bölün. Bu…

Representative Results

Tasarladığımız hayvan vücudu fiksatörünün kat planı Şekil 1’de gösterilmiştir. Ek olarak, tasarımın kapsamlı bir görünümünü sağlamak için bu fiksatörün bir 3D grafik modeli sunulmuştur (Ek Dosya 1). Bu, 3 kemirgenin hareketsiz hale getirilmesine ve aynı anda EA gerçekleştirmesine izin veren bir cihazdır. Sıçanlar ve fareler uyanık durumda fiksatörle sınırlıydı ve hem yüzüstü hem de sırtüstü pozisyonlar kemirgenlere zarar vermeden s?…

Discussion

Elektroakupunktur (EA), akupunktur iğneleri üzerinde elektriksel stimülasyonun kullanılmasını içeren bir akupunktur şeklidir11. Bu teknik, akupunktur noktalarını uyarmak ve gelişmiş terapötik etkiler elde etmek için belirli yoğunluk ve frekansta mikro darbe akımlarının kullanılmasını içerir3. Bununla birlikte, EA’nın iyileşme mekanizması sınırlıdır ve 1,2,3’ü<sup class="xref"…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Saha desteği için Ordu Tıp Üniversitesi İkinci Bağlı Hastanesi Beyin ve Sinir Cerrahisi Anabilim Dalı’na teşekkür ederiz. Finansman: Bu çalışma Çin Doğa Bilimleri Vakfı (82104696) tarafından desteklenmiştir.

Materials

3D printing batch mice fixator MESH INVENT Custom made The fixator produced by 3D printer. The printing method is called fused deposition modeling (FDM), also known as fused filament fabrication (FFF).  
Electroacupuncture instrument Hwato, Suzhou Medical Appliance Factory SDZ-III www.Hwato-med.com
Disposable sterile acupuncture needle Suzhou Medical Appliance Factory N/A 0.25 mm x 13 mm

References

  1. Lee, S., Kim, S. N. The effect of acupuncture on modulating inflammatory cytokines in rodent animal models of respiratory disease: A systematic review and meta-analysis. Frontiers in Immunology. 13, 878463 (2022).
  2. Xin, Y. Y., Wang, J. X., Xu, A. J. Electroacupuncture ameliorates neuroinflammation in animal models. Acupuncture in Medicine: Journal of the British Medical Acupuncture Society. 40 (5), 474-483 (2022).
  3. Mengzhu, S., et al. Electroacupuncture at Tianshu (ST25) and Zusanli (ST36) alleviates stress-induced irritable bowel syndrome in mice by modulating gut microbiota and corticotropin-releasing factor. Journal of traditional Chinese medicine. 42 (5), 732-740 (2022).
  4. Xu, D. S., et al. A new attempt of re-mapping acupoint atlas in the rat. Acupuncture Research. 44 (1), 62-65 (2019).
  5. Yin, C. S., et al. A proposed transpositional acupoint system in a mouse and rat model. Research in Veterinary Science. 84 (2), 159-165 (2008).
  6. Cao, L., et al. The effectiveness of acupuncture for Parkinson’s disease: An overview of systematic reviews. Complementary Therapies in Medicine. 50, 102383 (2020).
  7. Yang, L., et al. Effect of warming moxibustion Tianshu (ST 25, bilateral) and Qihai (CV 6) for the treatment of diarrhea-dominant irritable bowel syndrome: a patient-blinded pilot trial with orthogonal design. Journal of Traditional Chinese Medicine. 37 (4), 538-545 (2017).
  8. Delcour, M., et al. Early movement restriction leads to maladaptive plasticity in the sensorimotor cortex and to movement disorders. Scientific Reports. 8 (1), 16328 (2018).
  9. Zhifeng, W. A fixing device for mice body. China Patent. , (2023).
  10. Ismail, K. I., Yap, T. C., Ahmed, R. 3D-printed fiber-reinforced polymer composites by fused deposition modelling (FDM): Fiber length and fiber implementation techniques. Polymers. 14 (21), 4659 (2022).
  11. Lu, C., et al. Efficacy of electroacupuncture with different frequencies in the treatment of chemotherapy-induced peripheral neuropathy: A study protocol for a randomized controlled trial. Frontiers in Neurology. 13, 843886 (2022).
  12. Zhang, L., et al. Modulation of colonic function in irritable bowel syndrome rats by electroacupuncture at ST25 and the neurobiological links between ST25 and the colon. Frontiers in Neuroscience. 16, 930489 (2022).
  13. Wang, J. H., et al. Anti-inflammation mechanism of electro-scalp acupuncture in treatment of ischemic stroke based on IL-12 mediated JAK/STAT signaling pathway. Chinese Acupuncture & Moxibustion. 42 (10), 1137-1144 (2022).
  14. Ren, D., et al. A novel design of a plate for posterolateral tibial plateau fractures through traditional anterolateral approach. Scientific Reports. 8 (1), 16418 (2018).
  15. Wu, L., Dong, Y., Zhu, C., Chen, Y. Effect and mechanism of acupuncture on Alzheimer’s disease: A review. Frontiers in Aging Neuroscience. 15, 1035376 (2023).
  16. Wu, L. Electroacupuncture for spinal cord injury: A scientific study of traditional medicine. Neurospine. 19 (3), 770-772 (2022).
  17. Gozzi, A., Zerbi, V. Modeling brain dysconnectivity in rodents. Biological Psychiatry. 93 (5), 419-429 (2023).
  18. Denic, A., Macura, S. I., Mishra, P., Gamez, J. D., Rodriguez, M., Pirko, I. MRI in rodent models of brain disorders. Neurotherapeutics. 8 (1), 3-18 (2011).
  19. Cong-hui, Q., et al. Efficacy observation of long-retaining scalp acupuncture plus interactive training for upper-extremity dysfunction after cerebral stroke. Journal of Acupuncture and Tuina Science. 19, 43-48 (2021).
  20. Kvist, L. J., Hall-Lord, M. L., Rydhstroem, H., Larsson, B. W. A randomised-controlled trial in Sweden of acupuncture and care interventions for the relief of inflammatory symptoms of the breast during lactation. Midwifery. 23 (2), 184-195 (2007).
  21. Boram, L., Chan-Young, K., Sun Haeng, L. Effectiveness and safety of auriculotherapy for breastfeeding: a systematic review. Journal of Traditional Chinese Medicine. 40 (5), 721-737 (2020).

Play Video

Cite This Article
Yao, S., Wei, Y., Zhang, Y., Yang, X., Wu, Z. Bulk Electroacupuncture Operation for Mice or Young Rats. J. Vis. Exp. (199), e65648, doi:10.3791/65648 (2023).

View Video