Bu protokol, Moğol tıp teorisine dayanan depresyon için kronik öngörülemeyen hafif stres (CUMS) modelini ve davranışsal testleri doğrulama yöntemlerini ana hatlarıyla belirtir.
Depresyon yaygın bir duygusal bozukluktur ve küresel engelliliğin önde gelen bir nedenini oluşturur. Mevcut farmakolojik müdahalelerin sınırlamaları, bu duruma atfedilen önemli sağlık yüküne katkıda bulunmaktadır. Depresyonun altında yatan mekanizmaların daha derin bir şekilde anlaşılmasına acil bir ihtiyaç vardır ve bu da translasyon potansiyeline sahip klinik öncesi modelleri son derece değerli kılmaktadır. Geleneksel tıbbın bir alt kümesi olan Moğol tıbbı, hastalık oluşumunun rüzgar, safra ve balgam dengesine yakından bağlı olduğunu öne sürer. Bu çalışmada, sıçanlarda kronik öngörülemeyen hafif stres (CUMS) yöntemi için bir protokol sunuyoruz. Bu çerçevede, sıçanlar, insan depresyonunun patogenezini taklit eden depresyon benzeri bir fenotipi indüklemek için bir dizi dalgalı, hafif stresöre maruz bırakılır. Bu protokolde kullanılan davranışsal testler arasında, depresyonun temel bir belirtisi olan anhedoninin göstergesi olan sükroz tercih testi (SPT); kaygı düzeylerini ölçen açık alan testi (OFT); ve uzamsal hafızayı ve öğrenme yeteneklerini değerlendiren Morris su labirenti testi (MWM). CUMS yöntemi, anhedoniyi indükleme ve uzun vadeli davranışsal eksikliklere neden olma yeteneğini göstermektedir. Ayrıca, bu protokol Moğol tıp teorisi ile depresyon benzeri davranışları ortaya çıkarmak için tasarlanmış diğer hayvan modellerinden daha uyumludur. Bu hayvan modelinin geliştirilmesi ve müteakip araştırmalar, Moğol tıbbı alanında gelecekteki yenilikçi çalışmalar için sağlam bir temel oluşturmaktadır.
Majör depresif bozukluk (MDB), dünya çapında üçüncü önde gelen engellilik nedeni olarak sıralanan ve 300 milyondan fazla insanı etkileyen yaygın bir akıl hastalığıdır1,2,3. Özellikle, etkilenen bireylerin en az yarısının yeterli tedavi almadığı tahmin edilmektedir4. Bu boşluk göz önüne alındığında, hayvan modelleri depresyonun etiyolojisini araştırmak için çok önemli bir araç olarak hizmet vermektedir. Bugüne kadar, depresyon için 20’den fazla farklı hayvan modeli bulunmaktadır5. Bunlar arasında, 1987 yılında Paul Winer tarafından rafine edilen kronik öngörülemeyen hafif stres (CUMS) modeli en sık kullanılanıdır6. CUMS modeli, kemirgenleri çok çeşitli sosyo-çevresel stres faktörlerine maruz bırakmanın anksiyete, gerginlik ve depresyona benzer semptomlara yol açtığı öncülüyle çalışır. Metodoloji, hayvanları birkaç hafta boyunca çeşitli hafif stres faktörlerine maruz bırakmayı içerir ve bu da anhedoni ve depresif benzeri davranışlar da dahil olmak üzere bir dizi davranış değişikliğiyle sonuçlanır7,8. Bu değişikliklere, 5-HT’de bir azalma gibi endokrin ve nörotransmitter profillerindeki kaymalar eşlik eder9,10. Bu sonuçlar, MDB teşhisi konan insanlarda gözlemlenenleri yakından yansıtır ve böylece modelin faydasını doğrular. CUMS modeli, antidepresanları değerlendirmede, yüksek düzeyde yüzeysel, yapısal ve öngörücü geçerlilik gösteren etkinliği nedeniyle özellikle değerlidir11,12. Diğer modellerden farklı olarak, CUMS, monoaminerjik antidepresanların kronik uygulamasının etkilerine karşı hassastır. Örneğin, sitalopram, paroksetin ve fluoksetin gibi seçici serotonin geri alım inhibitörlerinin (SSRI’lar) kronik stres koşulları altında anhedoniyi önlediği ve tersine çevirdiği gösterilmiştir12,13. Ek olarak, ketamin gibi yeni hızlı etkili antidepresanlar da bu modelde etkinlik göstermiştir14,15. Buna karşılık, zorla yüzme testi (FST) ve kuyruk süspansiyon testi (TST) gibi diğer testler, uzun vadeli davranış değişikliklerini modellemek için daha az güvenilirdir ve genellikle depresyon semptomlarına dayanmak yerine akut strese adaptasyonları yansıtır16. Bu özellikler, depresyon araştırmalarında CUMS modelinin sağlam geçerliliğinin altını çizmektedir. Klasik çalışmalarda yüksek güvenilirliği ile tanınan CUMS modelinin en göze çarpan özelliklerinden biri, anhedoni-günlük aktivitelerde zevk veya ilgi duyma yetersizliğidir17,18. Bu fenomen yaygın olarak sükroz tercih testleri kullanılarak değerlendirilir ve birçok antidepresanın azalmış sakaroz tüketimini tersine çevirdiği gösterilmiştir. CUMS literatüründe, istemli motor davranışı, keşif eğilimlerini ve gerginliği değerlendiren ve böylece depresyonun şiddetini ölçen açık alan testi (OFT) dahil olmak üzere bazı başka metrikler de yaygın olarak kullanılmaktadır19. Yükseltilmiş artı labirent (EPM) gibi diğer testler kaygı benzeri davranışları değerlendirir, Morris su labirenti testi (MWM) bilişsel işlevleri inceler20ve FST, olumsuz duygulara ve davranışsal umutsuzluğa duyarlılığı değerlendirir20. Ayrıca, insanları etkileyen stres faktörlerinin çoğu doğası gereği sosyaldir. Sınırlı sosyal aktiviteler, ağlar ve destek ile karakterize edilen optimal olmayan sosyal ilişkilere sahip bireyler, çeşitli hastalıklar için yüksek risk altındadır21,22. Bu aynı zamanda gruplar halinde yaşayan sosyal hayvanlar olan kemirgenler için de geçerlidir. Örneğin, tecrit altında barındırılan sıçanlar, sosyal strese neden olan ve depresyonun başlangıcını hızlandıran izolasyon sendromu olarak adlandırılan özelliklerin özelliklerini sergiler23.
Çin tıbbının önemli bir dalı olan Moğol tıbbı, hastalığın başlangıcının içsel ve dış faktörler arasında karmaşık bir etkileşim olduğunu öne sürüyor. Dört yardımcı koşul olarak adlandırılan bu dış faktörler, iklim değişikliği, diyet, yaşam tarzı ve enfeksiyonlar, şaşırtıcı olaylar ve psikolojik bozukluklar gibi ani olayları kapsar. Hastalık süreci, üç tip homor olarak adlandırılan üç unsur ile dört yardımcı koşulla uyum içinde Yedi Bedensel Bileşen arasında devam eden bir etkileşim olarak kavramsallaştırılır24. Moğol tıbbı, insan vücudunun, üç homor arasında göreceli bir denge ile sürdürülen entegre bir varlık olarak işlev gördüğünü savunur. Bu dengedeki bir bozulmanın hastalığın habercisi olduğu düşünülmektedir24. Hayvan deneylerinin geleneksel ve modern tıp arasında köprü kurmadaki önemli rolü göz önüne alındığında, Moğol tıbbı alanındaki araştırmalarla ilgili hayvan modelleri geliştirmek çok önemlidir. Buna göre, bu fizyolojik ve psikolojik stres faktörlerini simüle etmek için CUMS ile birlikte 28 günlük bir izolasyon metodolojisi kullandık. Dokuz spesifik öngörülemeyen stres faktörü seçtik ve bu modelleme yöntemini Moğol tıbbının Üç homor teorisi aracılığıyla desteklemeye çalıştık. Sağlam bir hayvan modeli oluşturmak, Moğol tıbbındaki temel araştırmaları ilerletmek için esastır ve temel çalışmalarına önemli ölçüde katkıda bulunacaktır.
Depresyon, düşük ruh hali, zevk eksikliği ve düşük enerji gibi semptomlarla karakterize zihinsel bir bozukluktur30. Depresyon araştırmaları alanında, terapötik müdahaleleri ilerletmek için güvenilir bir hayvan modelinin oluşturulması çok önemlidir. Çeşitli hayvan modelleri arasında, CUMS modeli, yüksek güvenilirliği, geçerliliği ve insan depresyonunun özellikleriyle uyumu nedeniyle özellikle dikkat çekicidir31. Çeşitli ortamlarda uzun bir sü…
The authors have nothing to disclose.
Sağlanan enstrümantasyon ve laboratuvar için minnettarız, Çin İç Moğol Tıp Üniversitesi’nin Moğol tıp fakültesine şükranlarımızı sunuyoruz.Bu çalışma, gerekli enstrümantasyon ve laboratuvar olanaklarını sağlamak için desteklenmiştir. Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı’ndan (Hibe No. 81760762) ve Çin İç Moğolistan Tıp Üniversitesi Projesi’nden (Hibe No. YKD2022MS074) ve İç Moğolistan, Çin’deki Yüksek Öğretim Bilimsel Araştırma Projesi (Hibe No. NJZY22661) ve İç Moğolistan Özerk Bölgesi, Çin’deki Çin ve Moğol Tıbbı Anahtar Laboratuvarı Açık Fon Projesi (Hibe No. MYX2023-K07).
1.5 mL centrifuge tube | service Biotechnology Co., Ltd | EP-150-M | |
1000 µL Pipette | service Biotechnology Co., Ltd | IC021198160223 | |
10 µL pipette tip | service Biotechnology Co., Ltd | IC012395160823 | |
10 µL pipette tip | service Biotechnology Co., Ltd | TP-10 | |
1250 µL pipette tip | service Biotechnology Co., Ltd | TP-1250 | |
2 mL centrifuge tube | service Biotechnology Co., Ltd | EP-200-M | |
200 µL pipette tip | service Biotechnology Co., Ltd | TP-200 | |
200 µL pipette tip | service Biotechnology Co., Ltd | IC021029160323 | |
300 µL Multi-Channel Pipette | service Biotechnology Co., Ltd | IC091006161022 | |
50 µL Pipette | service Biotechnology Co., Ltd | DS35110 | |
Automatic plate washing machine | rayto Life Sciences Co., Ltd | RT-3100 | |
Benchtop High-Speed Freezing Centrifuge | dalong construction Co., Ltd | D3024R | |
electronic balance | Mettler Toledo International Trade (Shanghai) Co., Ltd | ME203E/02 | |
Electrothermal blast drying oven | Labotery Experimental Instrument Equipment Co., Ltd | GEL-70 | |
Enzyme Label Detector | BioTeK Co., Ltd | Epoch | |
High Speed Tissue Grinder | service Biotechnology Co., Ltd | KZ--F | |
Horizontal Freezer | Mellow Group Co., Ltd | BCD-318AT | |
Laboratory Ultrapure Water Machine | Jinan Aiken Environmental Protection Technology Co., Ltd | AK-RO-C2 | |
Morris water maze video trail analysing system | Tai Meng Tech Co., Ltd | WMT-200 | |
Rat 5-HT ELISA Kit | Lian Ke bio Co., Ltd,China | 96T/48T | |
SPF grade Sprague Dawley (SD) rats | SPF (Beijing) Biotechnology Co | SCXK(JING)2019-0010 | |
Sprague Dawley rats | Beijing Biotechnology Co., Ltd, China | SCXK (JING) 2019-0010 | |
Vertical Refrigerated Display Cabinet | Xingx Group Co., Ltd | LSC-316C | |
video tracking system | Tai Meng Tech Co., Ltd | ZH-ZFT | |
vortex mixer | Servicebio technology Co., Ltd | MV-100 |