Summary

Mikrobiologisk rask evaluering på stedet for lungeinfeksjonssykdommer

Published: March 01, 2024
doi:

Summary

Protokollen her demonstrerer en rask og standardisert arbeidsflyt for mikrobiologisk rask evaluering på stedet (M-ROSE), inkludert tre trinn: lysbildefremstilling, farging og tolkning. Denne protokollen vil hjelpe leger med å ta raske kliniske beslutninger.

Abstract

Rask oppstart av empirisk anti-infeksjonsbehandling er avgjørende hos pasienter med uforklarlig lungeinfeksjon. Selv om bildeinnsamling er relativt enkel i klinisk praksis, krever mangelen på spesifisitet ofte ytterligere tidkrevende tester som sputumkultur, bronkoalveolær skyllevæskekultur eller genetisk sekvensering for å identifisere den underliggende etiologien til sykdommen nøyaktig. Videre kan den begrensede effekten av empirisk antiinfeksjonsbehandling bidra til misbruk av antibiotika. Nylige fremskritt innen tolkning av mikrobiell bakgrunn på ROSE-lysbilder (rapid on-site evaluation) har gjort det mulig for klinikere å raskt innhente prøver gjennom bronkoskopi (f.eks. alveolær skylling, slimhinnebørsting, vevsklemme), noe som letter farging og tolkning ved sengen som gir viktig mikrobiell bakgrunnsinformasjon. Følgelig etablerer dette et grunnlag for å utvikle målrettet anti-infeksjonsbehandling og individualiserte medikamentelle terapiplaner. Med en bedre forståelse av hvilke patogener som forårsaker infeksjoner i sanntid, kan leger unngå unødvendige bredspektrede antibiotika som bidrar til antibiotikaresistens. Etablering av en rask og standardisert M-ROSE-arbeidsflyt innen respirasjonsmedisinske avdelinger eller intensivavdelinger vil i stor grad hjelpe leger med å formulere nøyaktige behandlingsstrategier for pasienter, noe som har betydelige kliniske implikasjoner.

Introduction

Teknikken for rask evaluering på stedet (ROSE) er en svært effektiv metode som brukes innen lungesykdomsprosedyrer. Det muliggjør prøvetaking i sanntid og diagnostisk intervensjon, noe som letter umiddelbar cytologisk analyse1. Denne innovative tilnærmingen innebærer å trykke en del av vevsprøven på et objektglass samtidig som integriteten bevares. En av de viktigste fordelene med ROSE ligger i dens evne til å legge til rette for rask tolkning av klinisk informasjon gjennom spesialiserte mikroskopiteknikker. Dette omfatter analyse av cellemorfologi, klassifisering, kvantifisering, bestemmelse av bestanddeler, vurdering av arrangement, korrelasjonsanalyse, evaluering av bakgrunn og identifikasjon av fremmedlegemer. Ved å integrere alle disse dataene med pasientens kliniske informasjon, spiller ROSE en sentral rolle i å evaluere prøvetakingstilstrekkelighet og veilede intervensjonsprosedyrer og teknikkeri sanntid 2.

Som et datterselskap av ROSE-teknologien, fokuserer M-ROSE-teknologien først og fremst på å tilegne seg den mikrobiologiske bakgrunnen til mållesjoner i stedet for å skjelne mellom godartede og ondartede celler 3,4. På den ene siden muliggjør M-ROSE mikroskopisk identifikasjon av patogener som Aspergillus, Cryptococcus, Pneumocystis og Candida5. På den annen side har den betydelige veiledende implikasjoner for å vurdere kvaliteten på respiratoriske prøver, skille smittsomme fra ikke-smittsomme sykdommer, skille infeksjon fra kontaminering, samt evaluere infeksjonens alvorlighetsgrad og prognose 6,7. For eksempel, i en luftveisprøve, indikerer sameksistensen av bakterier som viser identisk morfologi sammen med infiltrerende inflammatoriske celler en infeksjon; Omvendt antyder tilstedeværelsen av flere morfologisk forskjellige bakterier ledsaget av epitelceller forurensning. Kapasiteten til omfattende analyse av klinisk informasjon og forutsi utfall gjør M-ROSE til et uvurderlig verktøy i lungesykdomsprosedyrer.

Avslutningsvis fungerer ROSE som en avgjørende cytologisk bærer som betydelig forbedrer effektiviteten og presisjonen ved diagnostisering av lungesykdommer. Dens mangefasetterte evner bidrar til forbedrede pasientresultater ved å sikre rettidig intervensjon og legge til rette for nøyaktig diagnose gjennom prøvetaking i sanntid og diagnostiske intervensjonsteknikker. Det er imidlertid viktig å merke seg at disse fremskrittene er avhengige av å skaffe kvalifiserte prøver. Her presenterer vi en standardisert M-ROSE-protokoll som omfatter klargjøring av lysbilder, fargeteknikker og retningslinjer for tolkning. Denne protokollen fungerer som en uvurderlig referanse for klinikere for å etablere nøyaktige evaluerings- og behandlingsplaner samtidig som den letter beslutningstaking angående påfølgende håndtering av målprøver.

Protocol

Den kliniske studien er godkjent av godkjenningskomiteen ved Chongqing Hospital of Traditional Chinese Medicine (nr. 2022-ky-31). Det typiske tilfellet involverte en pasient diagnostisert med Pneumocystis pneumoni, og informert samtykke ble innhentet fra pasienten. 1. Utstyrs- og materialkrav for ROSE Utstyr: Se materialfortegnelsen file for utstyret som brukes i denne protokollen.MERK: Det er viktig å bruke et dedikert cytologisk mikroskop og g…

Representative Results

I et typisk tilfelle kom en 63 år gammel mann til sykehuset med hoste, feber og brystsmerter. Pasienten var tidligere diagnostisert med nefrotisk syndrom, preget av proteinuri og ødem, og fikk behandling med prednison og takrolimus i lang tid. De første laboratoriefunnene viste et antall hvite blodlegemer på 10,49 x 109/L, nøytrofiltall på 8,87 x 109/L, C-reaktivt protein i fullblod og (1-3)-β-D-glukankonsentrasjoner på 155,81 mg/L og 249,7 pg/ml. CT-undersøkelsen av thorax viste mattglasso…

Discussion

Intervensjonell pulmonologi er en verdifull gren av moderne luftveissykdommer; Spesielt har det blitt mye brukt i diagnostisering av lungesykdommer 8,9. De siste årene har diagnostisk intervensjonspulmonologi blomstret på grunn av økt forekomst av ondartede lungesvulster, mer medikamentresistente patogeninfeksjoner som forekommer i nedre luftveier, og krevende forespørsler om diagnostisering av forvirrende og kritiske luftveissykdommer

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Vi setter pris på Chongqing Scientific Research-institusjonens resultatinsentiv- og veiledningsprosjekt (jxyn-2021-1-15 og jxyn-2021-2-6) for økonomisk støtte.

Materials

Cytological microscope Olympus Corporation CX43
Diff Quik (DQ) staining solutions Besso Biotechnology Co. LTD G1541
Disposable 2.5-5 mL syringe needles Shandong Zhu Pharmaceutical Group 20183150304
Powder-free latex gloves Henan Yadu Industrial Co., LTD 20182140728
Sterile cell culture slides Jinan Preret industry and trade Co., LTD 7101

References

  1. Zhang, S., et al. Diagnostic value of endoscopic ultrasound-guided fine needle aspiration with rapid on-site evaluation performed by endoscopists in solid pancreatic lesions: A prospective, randomized controlled trial. J Gastroenterol Hepatol. 37 (10), 1975-1982 (2022).
  2. Bruno, P., et al. Efficacy and cost effectiveness of rapid on site examination (ROSE) in management of patients with mediastinal lymphadenopathies. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 17 (11), 1517-1522 (2013).
  3. Li, T., et al. Microbiology rapid on-site evaluation: a better method for Mucoid Pseudomonas Aeruginosa diagnosis in bronchiectasic patients. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 26 (5), 1738-1742 (2022).
  4. Tao, Y., et al. Application of microbiological rapid on-site evaluation in respiratory intensive care units: a retrospective study. Ann Transl Med. 10 (1), 7 (2022).
  5. Yan, P., et al. The value of microbiology rapid on-site evaluation of sepsis caused by pulmonary infection. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 27 (12), 5862-5868 (2023).
  6. Muri, R., Trippel, M., Borner, U., Weidner, S., Trepp, R. The impact of rapid on-site evaluation on the quality and diagnostic value of thyroid nodule fine-needle aspirations. Thyroid. 32 (6), 667-674 (2022).
  7. Wang, Z., Shi, Y. Application of rapid on-site evaluation in contemporary pediatric interventional respiratory diseases. Chinese Journal of Practical Pediatrics. 12, 470-475 (2019).
  8. Shah, P. L., Herth, F. J. F. Progress in interventional pulmonology. Respiration. 95 (5), 287-288 (2018).
  9. Hsia, D., Musani, A. I. Interventional pulmonology. Med Clin North Am. 95 (6), 1095-1114 (2011).
  10. Moore, A. J., Mercer, R. M., Musani, A. I. Advances in interventional pulmonology. Clin Chest Med. 39 (1), 271-280 (2018).
  11. Majid, A., Fernandez-Bussy, S., Folch, E. Interventional pulmonology and solitary pulmonary nodule. Arch Bronconeumol. 54 (10), 497-498 (2018).
  12. Ali, M. S., Sorathia, L. Palliative care and interventional pulmonology. Clin Chest Med. 39 (1), 57-64 (2018).
  13. Czarnecka, K., Yasufuku, K. Interventional pulmonology: focus on pulmonary diagnostics. Respirology. 18 (1), 47-60 (2013).
  14. Schacht, M. J., et al. Endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration: performance of biomedical scientists on rapid on-site evaluation and preliminary diagnosis. Cytopathology. 27 (5), 344-350 (2016).
  15. Pearson, L., et al. Rapid on-site evaluation of fine-needle aspiration by non-cytopathologists: A systematic review and meta-analysis of diagnostic accuracy studies for adequacy assessment. Acta Cytol. 62 (4), 244-252 (2018).
  16. Arimura, K., et al. Cryobiopsy with endobronchial ultrasonography using a guide sheath for peripheral pulmonary lesions and DNA analysis by next generation sequencing and rapid on-site evaluation. Respir Investig. 57 (2), 150-156 (2019).
  17. Gianella, P., et al. Utility of rapid on-site cytologic evaluation during endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration in malignant and nonmalignant disease. Acta Cytol. 62 (5-6), 380-385 (2018).
  18. Natella, V., Cozzolino, I., Sosa Fernandez, L. V., Vigliar, E. Lymph nodes fine needle cytology in the diagnosis of infectious diseases: clinical settings. Infez Med. 20, 12-15 (2012).
  19. Baughman, R. P., Spencer, R. E., Kleykamp, B. O., Rashkin, M. C., Douthit, M. M. Ventilator associated pneumonia: quality of nonbronchoscopic bronchoalveolar lavage sample affects diagnostic yield. Eur Respir J. 16 (6), 1152-1157 (2000).
  20. Petrone, M. C., et al. Does cytotechnician training influence the accuracy of EUS-guided fine-needle aspiration of pancreatic masses. Dig Liver Dis. 44 (4), 311-314 (2012).

Play Video

Cite This Article
Weng, X., Sun, W., Luo, Z., Zhou, Y., An, X. Microbiological Rapid On-Site Evaluation for Pulmonary Infectious Diseases. J. Vis. Exp. (205), e66059, doi:10.3791/66059 (2024).

View Video