Bu protokol, fare ortotopik karaciğer transplantasyonunda manşet tekniği kullanılarak damar rekonstrüksiyonu için teknik bilgi sağlar.
Fare ortotopik karaciğer transplantasyonu, karaciğer iskemisi ve reperfüzyon hasarının altında yatan mekanizmaları araştırmak için etkili bir metodolojidir. Bununla birlikte, teknik zorluklar, bu değerli deneysel modelin kullanılmasının ve bu becerilerin gelecek nesillere aktarılmasının önünde bir engel teşkil etmektedir. Bu prosedürün en zorlu yönü, portal ven (PV), infrahepatik inferior vena kava (IHIVC) ve suprahepatik inferior vena kava dahil olmak üzere vasküler rekonstrüksiyondur. Sütürler yerine plastik manşetlerin kullanılması, daha düzgün PV ve IHIVC rekonstrüksiyonuna izin verir. Greft damarının ucuna intravenöz bir kateterden yapılmış bir manşet takılarak ve manşetin alıcı damara yerleştirilmesiyle damarlar yeniden yapılandırılır. En önemli iki husus, geminin iç lümenini düzgün bir şekilde görselleştirmek ve aşırı güç kullanımından kaçınmaktır. Amacımız, alıcı cerrahisinde manşet tekniği kullanılarak yapılan vasküler rekonstrüksiyonlara teknik bir bakış sağlamaktır. Manşet tekniği için bu teknik ipuçlarının, mikro cerrahların vasküler rekonstrüksiyonu kolaylaştırmasına ve araştırmalarını ilerletmesine yardımcı olması bekleniyor.
Fare ortotopik karaciğer nakli (MOLT) ilk olarak 1991 yılında bildirilen etkili bir deneysel yöntemdir1. Genetik olarak modifiye edilmiş fareler ve çeşitli araştırma reaktifleri kullanan bu deneysel model, sıcak ve soğuk iskemi ve reperfüzyon yaralanmalarının araştırılmasında çok önemli bir rol oynamıştır. Bununla birlikte, modelin yüksek teknik karmaşıklığı, karaciğer nakli için temel tıbbın geliştirilmesini engellemiştir2. MOLT üç ana adımı içerir: (1) karaciğerin donör fareden alınması, (2) arka masa cerrahisi ve (3) karaciğerin alıcıya implantasyonu. Bu alıcı prosedürler arasında vasküler anastomoz en büyük zorluğu oluşturmaktadır. Suprahepatik inferior vena kava anastomozu tipik olarak elle dikilerektamamlanırken, infrahepatik inferior vena kava (IHIVC) ve portal ven (PV) elle dikilen dikişler yerine plastik manşetler kullanılarak daha verimli bir şekilde yeniden yapılandırılabilir.
Anhepatik dönem, alıcının doğal karaciğerinin çıkarılması ile greft implantasyonu arasındaki süreyi ifade eder. Tutarlı sonuçlar elde etmek için, anhepatik süreyi 20 dakikadan daha az bir süre ile sınırlamak zorunludur. Sonuç olarak, bu modeli kullanan çalışmalar belirli kurumlarla sınırlandırılmıştır 3,4,5,6,7,8,9. MOLT’un çeşitli aşamaları arasında, anhepatik zamanı en aza indirmek ve başarılı bir transplantasyon sağlamak için düzgün PV ve IHIVC rekonstrüksiyonu elde etmek çok önemlidir.
PV ve IVC rekonstrüksiyonu genellikle vasküler manşetler kullanılarak gerçekleştirilir, çünkü manşet tekniği elle dikilen sütürlere kıyasla vasküler anastomozu basitleştirir 2,5,8. Vasküler manşetin hazırlanması ve manşetin güvenli bir şekilde takılmasında yer alan teknik, alıcı vasküler rekonstrüksiyonun karmaşıklığını önemli ölçüde etkiler. Amacımız, manşet yöntemiyle ilgili çok sayıda teknik ipucu için ayrıntılı görsel rehberlik sağlamak ve böylece öğrenme eğrisini azaltmaktır. Bu video klipler, alıcı cerrahisi sırasında manşetin damarlara nasıl takılacağının ve PV ve IHIVC’nin nasıl yeniden yapılandırılacağının net bir şekilde anlaşılmasını sağlayacaktır.
Vasküler rekonstrüksiyonu öğrenmek, başarılı MOLT’a ulaşmanın en zorlu yönüdür. Manşetin kalitesi, farelerin küçük boyutu göz önüne alındığında, rekonstrüksiyonun zorluğunu önemli ölçüde etkiler5. Bu makale, manşet hazırlığı, takılması ve rekonstrüksiyonu için ayrıntılı bir protokol sağlar.
Manşet hazırlığı ve bağlantı 2,5 ile ilgili önceki raporlardan büyük fa…
The authors have nothing to disclose.
Bu çalışma, 2022 JST temel araştırması (Japon Organ Nakli Derneği) tarafından desteklenmiştir.
16 G intravenous catheter | TERUMO | SR-FF2032 | IHIVC cuff |
20 G intravenous catheter | TERUMO | SR-FF1651 | PV cuff |
8-0 braid silk | Natsume Seisakusho | CR9-80B2 | 8-0 silk |
Belzer UW Cold Storage Solution | Astellas | Organ preservation fluid | |
Bulldog clamp | B BRAUN | FB329R | Bulldog clamp |
C57BL/6 mice | Oriental Bio Service | ||
Isoflurane inhalation solution | Viatris | Anesthesic | |
Micro Blunted Tips 0.1 mm x 0.06 mm | F.S.T | 11253-20 | Straight microforceps |
Micro Serrefine Clamp Applicator with Lock | F.S.T | 18056-14 | Vessel clip applicator |
Micro Serrefines | F.S.T | 18055-4 | Vessel clip |
No.11 Spare Blades | FEATHER Safety Razor | 11 | Blades |
Ophthalmic scissor, round handle | B BRAUN | FD103R | Microscissor |
Plastic rectangular-shaped container | Daiso | 10 cm long, 15 cm wide and 6 cm high | |
SuperGrip Tips | F.S.T | 00649-11 | Curved microforceps |
SZX7 | Olympus | SZX7 | Microscope |