Summary
Immunoblotting (western blot) é um ensaio rápido e sensível para a detecção e caracterização de proteínas que funciona através da exploração da especificidade inerente reconhecimento antígeno-anticorpo. Este vídeo fornece protocolos para separação de proteínas, proteínas blotting em membranas, immunoprobing e visualização usando substratos cromogênicos ou quimioluminescente.
Abstract
Immunoblotting (western blot) é um ensaio rápido e sensível para a detecção e caracterização de proteínas que funciona através da exploração da especificidade inerente reconhecimento antígeno-anticorpo. Envolve a solubilização e separação eletroforética de proteínas, glicoproteínas, ou lipopolissacarídeos por eletroforese em gel, seguido por transferência quantitativa e irreversível ligação a nitrocelulose, PVDF, ou nylon. A técnica de immunoblotting foi útil na identificação de antígenos específicos reconhecidos por anticorpos monoclonais ou policlonais e é altamente sensível (1 ng de antígeno pode ser detectado). Esta unidade fornece protocolos para separação de proteínas, proteínas blotting em membranas, immunoprobing e visualização usando substratos cromogênicos ou quimioluminescente.
Protocol
O protocolo de texto completo para essa abordagem experimental está disponível em protocolos atuais em Biologia Molecular
