Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Immunoblot analyse

doi: 10.3791/759 Published: June 20, 2008

Summary

Immunoblotting (western blotting) is een snelle en gevoelige test voor de detectie en karakterisering van eiwitten die werkt door het benutten van de specificiteit die inherent zijn aan antigeen-antilichaam erkenning. Deze video bevat protocollen voor de scheiding van eiwitten, blotting eiwitten op membranen, immunoprobing, en visualisatie met behulp van chromogene of chemiluminescent substraten.

Abstract

Immunoblotting (western blotting) is een snelle en gevoelige test voor de detectie en karakterisering van eiwitten die werkt door het benutten van de specificiteit die inherent zijn aan antigeen-antilichaam erkenning. Het gaat om de solubilisatie en de elektroforetische scheiding van eiwitten, glycoproteïnen, of lipopolysacchariden door gelelektroforese, gevolgd door kwantitatieve overdracht en onomkeerbare binding aan nitrocellulose, PVDF, of nylon. De immunoblotting techniek is nuttig in het identificeren van specifieke antigenen herkend door polyklonale of monoklonale antistoffen en is zeer gevoelig (1 ng van het antigeen kan worden opgespoord). Dit apparaat biedt protocollen voor scheiding van eiwitten, blotting eiwitten op membranen, immunoprobing, en visualisatie met behulp van chromogene of chemiluminescent substraten.

Protocol

De volledige tekst protocol voor deze experimentele aanpak is beschikbaar in Current Protocols in Molecular Biology

Immunoblot analyse
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Gallagher, S., Chakavarti, D. Immunoblot Analysis. J. Vis. Exp. (16), e759, doi:10.3791/759 (2008).More

Gallagher, S., Chakavarti, D. Immunoblot Analysis. J. Vis. Exp. (16), e759, doi:10.3791/759 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter