Summary
Immunoblotting (Western Blot) ist ein schneller und empfindlicher Test für den Nachweis und Charakterisierung von Proteinen, die durch die Nutzung der Spezifität innewohnt Antigen-Antikörper-Erkennung funktioniert. Dieses Video stellt Protokolle für die Protein-Trennung, blotting Proteine auf Membranen, immunoprobing und Visualisierung mit Hilfe des chromogenen oder chemilumineszenten Substraten.
Abstract
Immunoblotting (Western Blot) ist ein schneller und empfindlicher Test für den Nachweis und Charakterisierung von Proteinen, die durch die Nutzung der Spezifität innewohnt Antigen-Antikörper-Erkennung funktioniert. Es geht um die Solubilisierung und elektrophoretische Trennung von Proteinen, Glycoproteinen, oder Lipopolysaccharide durch Gelelektrophorese, durch quantitative Transfer und irreversible Bindung an Nitrocellulose, PVDF oder Nylon gefolgt. Die Immunoblot-Technik wurde bei der Identifizierung von Antigenen durch polyklonalen oder monoklonalen Antikörpern erkannt nützlich und ist sehr empfindlich (1 ng des Antigens nachgewiesen werden können). Diese Einheit bietet Protokolle für die Protein-Trennung, blotting Proteine auf Membranen, immunoprobing und Visualisierung mit Hilfe des chromogenen oder chemilumineszenten Substraten.
Protocol
Der vollständige Text Protokoll für diesen experimentellen Ansatz ist erhältlich in Current Protocols in Molecular Biology
