Summary
Mycobacterial रोगजनक रणनीति बुरा समझा रहते हैं. अधिकांश प्रजातियों की धीमी विकास दर है, सेल की दीवार के अभेद्य प्रकृति, और रोगज़नक़ों के साथ काम करने के खतरों माइक्रोबैक्टीरिया अध्ययन करने के लिए मुश्किल बनाने के लिए और हमारे इन जीवों के गरीब को समझने के लिए काफी हद तक जिम्मेदार हैं. इस वीडियो में हम electroporation की तकनीक है, जो एक संक्षिप्त उच्च विद्युत आवेग को subjecting कोशिकाओं को शामिल करने के लिए डीएनए के प्रवेश की अनुमति प्रदर्शन करेंगे. यह माइक्रोबैक्टीरियल कोशिकाओं में डीएनए को शुरू करने के लिए सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया विधि है.
Abstract
उच्च दक्षता परिवर्तन माइक्रोबैक्टीरिया के अध्ययन में एक प्रमुख सीमा है. जीनस माइकोबैक्टीरियम को बदलने के लिए मुश्किल हो सकता है, यह मुख्य रूप से मोटी और मोमी कोशिका दीवार से कारण होता है, लेकिन तथ्य यह है कि सबसे आणविक तकनीक Escherichia कोलाई और दण्डाणु subtilis के रूप में दूर से संबंधित प्रजातियों के लिए विकसित किया गया है द्वारा जटिल है. इन बाधाओं के बावजूद, माइक्रोबैक्टीरियल plasmids की पहचान की गई है और कई माइक्रोबैक्टीरियल प्रजातियों की डीएनए परिवर्तन अब वर्णित किया गया है है. माइक्रोबैक्टीरिया में डीएनए को शुरू करने के लिए सबसे सफल तरीका electroporation है. कई सफल परिवर्तन करने के लिए पैरामीटर योगदान, इन प्रजातियों / तनाव, बदलने डीएनए की प्रकृति, चयन इस्तेमाल किया मार्कर, मध्यम विकास, और electroporation नाड़ी के लिए शर्तों में शामिल हैं. दोनों धीमी गति से और तेजी से उत्पादक के परिवर्तन के लिए अनुकूलित विधियों यहाँ विस्तृत रहे हैं. अलग माइक्रोबैक्टीरियल प्रजातियों के लिए और विभिन्न चयन मार्कर के साथ परिवर्तन क्षमता रिपोर्ट कर रहे हैं.
