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Biology

抗酸菌のエレクトロポレーション

Published: May 23, 2008 doi: 10.3791/761

Summary

マイコバクテリア病原性戦略は、あまり理解のまま。ほとんどの種の低成長率、細胞壁の不可解な性質、および病原体を扱うの危険性は、勉強する抗酸菌が困難になるとこれらの生物の我々の理解不足の主な原因です。このビデオでは、DNAのエントリを可能にする簡単な高い電気的インパルスに供する細胞を含むエレクトロポレーションの技術を、デモンストレーションを行います。それは、マイコバクテリアの細胞にDNAを導入するための最も広く使用されている方法です。

Abstract

高効率変換は、マイコバクテリアの研究における主要な制限です。属マイコバクテリウムは、変換することが困難な場合がありますが、これは主に厚いと蝋状の細胞壁が原因で発生しますが、ほとんどの分子技術は、大腸菌や枯草菌などの遠縁の種のために開発されているという事実によって複雑になります。これらの障害にもかかわらず、マイコバクテリアのプラスミドが同定されており、多くのマイコバクテリア種のDNA形質転換について説明されています。抗酸菌にDNAを導入するための最も成功した方法は、エレクトロポレーションです。多くのパラメータが正常に変換するために貢献し、これらは種/系統、形質転換DNAの性質、使用する選択マーカー、増殖培地、およびエレクトロポレーションパルスのための条件が含まれています。低速と高速の栽培者の両方の変換用に最適化された方法はここに詳しく説明されています。別のマイコバクテリア種のための、様々な選択可能マーカーを有する形質転換効率が報告されています。

Tags

微生物学、問題15、シュプリンガープロトコル、マイコバクテリア、エレクトロポレーション、細菌形質転換、形質転換効率、細菌、結核、M.スメグマチス、シュプリンガープロトコル
抗酸菌のエレクトロポレーション
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PDF DOI

Cite this Article

Goude, R., Parish, T.More

Goude, R., Parish, T. Electroporation of Mycobacteria. J. Vis. Exp. (15), e761, doi:10.3791/761 (2008).

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