Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Mikobakteriler, Elektroporasyon

Published: May 23, 2008 doi: 10.3791/761

Summary

Mikobakteriyel patojenik stratejileri tam olarak anlaşılamamıştır. Çoğu türlerin yavaş büyüme hızı, hücre duvar aşılmaz doğa ve patojenler ile çalışan tehlikeleri mikobakteriler zor çalışma yapmak ve bu organizmalar bizim kötü anlamak için büyük ölçüde sorumludur. Bu video, DNA girişi sağlamak için kısa bir yüksek elektrik uyarısı konusu hücreler içerir elektroporasyon tekniği, gösterecektir. Mikobakteriyel hücrelerin içine DNA tanıtmak için en yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir.

Abstract

Yüksek verimlilik dönüşümü mikobakterilerin çalışma önemli bir sınırlama yoktur. Cinsi, Mycobacterium dönüştürmek için zor olabilir; özellikle kalın ve mumsu bir hücre duvarı neden olduğu, ancak en moleküler teknikler, Escherichia coli ve Bacillus subtilis olarak uzaktan ilgili türler için geliştirilmiştir sahip olduğu gerçeği ile birleşir. Bu engellere rağmen, mikobakteriyel plazmid tespit edilmiştir ve birçok mikobakteriyel türlerin DNA dönüşüm tarif edilmiştir. Mikobakteriler içine DNA tanıtmak için en başarılı yöntem elektroporasyon. Birçok parametreler başarılı bir dönüşüme katkıda bulunur; bu türlerin / gerilme, dönüştürücü DNA doğa, seçilebilir marker kullanılan, besi ve elektroporasyon darbe için gerekli koşulları içerir. Hem yavaş ve hızlı-yetiştiricisi dönüşümü için optimize edilmiş yöntemler burada ayrıntılı olarak açıklanmıştır. Dönüşüm verimliliği, farklı mikobakteriyel türler için ve çeşitli seçilebilir işaretleri ile rapor edilir.

Tags

Mikrobiyoloji Sayı 15 Springer Protokolleri Mikobakteriler Elektroporasyon Bakteriyel Dönüşüm Dönüşüm Verimlilik Bakteri Tüberküloz M. Smegmatis Springer Protokolleri
Mikobakteriler, Elektroporasyon
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Goude, R., Parish, T.More

Goude, R., Parish, T. Electroporation of Mycobacteria. J. Vis. Exp. (15), e761, doi:10.3791/761 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter