Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Röportaj: Evolved Recombinase kullanarak HIV-1 Proviral DNA eksizyonu

doi: 10.3791/793 Published: June 16, 2008

Summary

Günümüzde HIV-1 stratejileri, viral bir yaşam döngüsü bastırmak için değil, etkili bir şekilde enfeksiyonu ortadan kaldırmak hareket ederler. Burada göstermektedir ki enfekte hücreleri genom bir mühendislik recombinase verimli tüketim entegre HIV-1 proviral DNA.

Abstract

HIV-1 enfekte hücreleri ev sahipliği kromozom entegre ve uzun terminal tekrarlar ile çevrili bir provirus olmaya devam etmektedir. Mevcut tedavi stratejileri, öncelikle enfeksiyonu ortadan kaldırılması olmadan, virüs enzimler ya da virüs-hücre füzyonu, viral yaşam döngüsü bastırmak hedef. Entegre provirus bu yaklaşımlar, HIV-1 yeni dirençli suşlar tarafından hedef olmadığı ortaya çıkabilir. Burada, mühendislik recombinase Tre (Moleküler evrim, Tre recombinase, Buchholz, F., Hücre Biyolojisi ve Genetik Max Planck Enstitüsü, Dresden) verimli bir şekilde enfekte olmuş hücreleri genom entegre HIV-1 proviral DNA maktu vergileri raporu. Incelemek için, viral pseudotypes ve enfekte HeLa hücreleri içeren loxLTR üretilen Tre recombinase HIV-1 ile enfekte insan hücreleri genom tüketim provirus belirtir. A virüsünün partikül bırakmadan hücre hattı klonlanmış ve plazmid bir ifade Tre ya da bir ebeveyn kontrol vektör ile transfekte edildi. Recombinase aktivite ve virüs üretimi takip edildi. Tüm testlerin görünür sitotoksik etki olmadan enfekte hücrelerden provirus verimli silme gösterdi. Bu sonuçlar, özellikle HIV-1 LTR hedef recombinase gelişmeye mümkündür ve bu recombinase, HIV-1 ile enfekte insan hücrelerinde genomu HIV-1 provirus eksize yeteneğine sahip olduğunu prensip kanıtı olarak hizmet vermektedir.

Mühendislik recombinase terapötik arenaya önce, ancak, önemli engelleri aşmak gerekir. En önemli konular arasında, insanlığın karşı karşıya olduğu, hedef hücrelere etkin ve güvenli bir şekilde teslim ve yan etkilerin olmaması.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Lütfen görüntülemek ilgili videoları başlıklı Site Özel Recombinase (SSR) Teknoloji İlkeleri ve Moleküler Evrim Tre Recombinase siteye özgü rekombinasyon ve mühendislik recombinase enzimlerin site özgüllüğü hakkında daha fazla bilgi için.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Röportaj: Evolved Recombinase kullanarak HIV-1 Proviral DNA eksizyonu
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).More

Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter