Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

インタビュー:進化リコンビナーゼを用いたHIV - 1プロウイルスDNAの切り出し

doi: 10.3791/793 Published: June 16, 2008

Summary

現在のHIV - 1の戦略は、ウイルスのライフサイクルを抑制する働きが効果的に感染を根絶することはありません。ここで、我々は人工リコンビナーゼは、感染細胞のゲノムから効率的に切り出す統合されたHIV - 1プロウイルスDNAができることを示している。

Abstract

HIV - 1は感染細胞の宿主染色体に統合し、長い末端反復配列に挟まれたプロウイルスとして持続します。現在の治療戦略は、主に感染症を根絶することなく、ウイルスの酵素やウイルスの細胞融合、抑制するウイルスのライフサイクルを対象としています。統合されたプロウイルスは、これらの手法によって対象とされていないため、HIV - 1の新たな耐性菌が出現する可能性があります。ここで、我々は人工リコンビナーゼトレは(トレリコンビナーゼ、バックホルツ、F.、細胞生物学および遺伝学のマックスプランク研究所、ドレスデンの分子進化を参照)効率的に感染細胞のゲノムから統合されたHIV - 1プロウイルスDNAを消費税と報告している。我々は、トレリコンビナーゼは、HIV - 1感染ヒト細胞のゲノムから切り出すプロウイルスをできるかどうかを調べるためにloxLTR含むウイルス疑似型と感染したHeLa細胞を作り出した。ウイルス粒子放出細胞株をクローニングし、発現プラスミドトレでまたはペアレンタルコントロールのベクターでトランスフェクトした。リコンビナーゼ活性とウイルス産生をモニターした。すべてのアッセイは、目に見える細胞傷害作用することなく感染細胞からプロウイルスの効率的な削除を示した。これらの結果は、それが具体的にHIV - 1 LTRをターゲットにリコンビナーゼを進化させることが可能であり、このリコンビナーゼは、HIV - 1感染ヒト細胞のゲノムからHIV - 1プロウイルスを切り出すことが可能であることを原理の証明として役立つ。

設計リコンビナーゼは、治療の分野に入ることができる前に、しかし、重大な障害が克服される必要があります。最も重要な問題の中で、我々が直面している、標的細胞への効率的かつ安全に配信して副作用のないことです。

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

と題する関連動画を表示してください部位特異的リコンビナーゼ(SSR)技術の原理トレリコンビナーゼの分子進化部位特異的組換えとエンジニアリングリコンビナーゼ酵素の部位特異性の詳細については、を。

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

インタビュー:進化リコンビナーゼを用いたHIV - 1プロウイルスDNAの切り出し
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).More

Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter