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Biology

인터뷰 : 진화 Recombinase을 사용하여 HIV - 1의 DNA 절단 Proviral

doi: 10.3791/793 Published: June 16, 2008

Summary

현재 HIV - 1 전략은 바이러스 생활주기를 억제하지만, 효과적으로 감염을 근절하지 행동. 여기, 우리는 입증되는 감염된 세포의 게놈에서 설계 recombinase 수 효율적으로 소비세 통합 HIV - 1 proviral DNA.

Abstract

HIV - 1 감염 세포의 호스트 염색체에 통합과 긴 터미널 반복 둘러싸인 provirus로 지속. 현재 치료 전략은 주로 감염을 근절하지 않고 바이러스 효소 또는 바이러스 - 세포 융합, 억제 바이러스 생활주기를 대상으로. 통합 provirus가 이러한 방식을, HIV - 1의 새로운 내성 변종의 대상이 아니므로 등장 수도 있습니다. 여기서 우리는 설계 recombinase 트레가 (트레 recombinase, 뷰큘츠, F., 세포 생물학 및 유전학에 대한 최대 플랑크 연구소, 드레스덴의 분자 진화를 참조) 효율적으로 감염 세포의 게놈에서 통합 HIV - 1 proviral DNA를 excises 것을보고합니다. 우리는 바이러스 검사 및 감염 pseudotypes 헬라 세포를 포함하는 loxLTR을 생산 트레 recombinase는 HIV - 1 감염 인간 세포의 게놈에서 소비세 provirus 수 있는지 여부. 바이러스 입자 - 방출 셀 라인은 복제와 플라스미드 표현 트레 또는 보호자 제어 벡터와 transfected했다. Recombinase 활동 및 바이러스 생산을 감시했다. 모든 assays 보이는 세포 독성 효과없이 감염된 세포에서 provirus의 효율적인 삭제를 보여주었다. 이러한 결과는 특히 HIV - 1 LTR를 대상으로 recombinase를 발전 가능이 recombinase는 HIV - 1에 감염된 인간 세포의 게놈에서 HIV - 1 provirus을 절개 수있다는 것을 원칙의 증거로 제공하고 있습니다.

설계 recombinase가 치료 올라와있을 전에 그러나, 큰 장애물은 극복해야합니다. 가장 중요한 문제 중 우리가 얼굴 즉, 타겟 세포에 효율적이고 안전하게 전달 및 부작용의 부재입니다.

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관련 동영상받을 참조하십시오 특정 사이트 Recombinase (SSR) 기술의 원리트레의 Recombinase의 분자 진화를 특정 사이트 재조합 및 엔지니어링 recombinase 효소의 사이트 특이성에 대한 자세한 내용은.

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Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).More

Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).

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