Summary
El laberinto acuático de Morris es una herramienta de gran aceptación para documentar la participación del hipocampo en una tarea de comportamiento.
Abstract
El laberinto acuático de Morris es ampliamente utilizado para estudiar la memoria espacial y el aprendizaje. Los animales se colocan en un charco de agua que es de color opaco con polvo de leche sin grasa o la pintura no tóxica al temple, en la que deben nadar hasta una plataforma de escape oculto. Porque están en el agua opaca, los animales no pueden ver la plataforma, y no puede basarse en el olor para encontrar la ruta de escape. En su lugar, debe confiar en exteriores / extra-laberinto de pistas. Como los animales se familiaricen más con la tarea, que son capaces de encontrar la plataforma con mayor rapidez. Desarrollado por Richard G. Morris en 1984, este paradigma se ha convertido en una de las "normas de oro" de la revista Behavioral Neuroscience.
Protocol
Configuración del laberinto de agua
- El principal componente del laberinto de agua establecido debe ser una piscina redonda, de unos 6 pies de diámetro y unos tres metros de profundidad. Si va a grabar la tarea con una cámara de vídeo, asegúrese de que todas las partes del laberinto está dentro del campo de la cámara de vista.
- Rellene el laberinto de agua con agua del grifo, que debe estar cerca de 26 ° C. Este proceso puede tardar varias horas, por lo que se debe hacer con mucha antelación. Revise periódicamente la temperatura del agua para que sea dentro de un grado de 26 ° C.
- Coloque la plataforma de escape en el centro de la piscina. Durante el entrenamiento, que debe ser expuesto, una pulgada por encima del agua. Esto le enseña a la rata que es una plataforma, y que es la manera de salir del agua. Más tarde, después que el animal está entrenado y listo para la prueba, la plataforma de escape será justo debajo de la superficie del agua, y no será visible debido a que el agua será opaca con leche o con pintura no tóxica.
Ahora, el laberinto de agua está listo para el entrenamiento de los animales.
Pre-entrenamiento para el laberinto de agua
- Para la formación laberinto de agua, la plataforma debe estar en el centro de la piscina y se expone una pulgada sobre la superficie, por lo que el animal sabe que está allí. El agua debe estar dentro de un grado de 26 ° C.
- Cada animal se someterá a tres pruebas consecutivas. Primero, coloque el animal en la plataforma durante veinte segundos.
- El laberinto de agua con 4 posiciones de partida: norte, sur, este u oeste. Llevar al animal a una de estas posiciones. Baja del animal en el agua mediante el apoyo con la mano y llevándolo suavemente hacia abajo en el agua de cola final primera. No estresar al animal por mojando en la cabeza primero.
- Dejar que la natación animal / búsqueda de la plataforma para un máximo de 60 segundos. En un primer momento, el animal puede nadar en el borde de la piscina en busca de una salida. Eventualmente, el animal aprende a buscar la plataforma y subir.
- Una vez que el roedor llega a la plataforma, detener el cronómetro, y registrar el tiempo. Si no encuentra la plataforma en 60 segundos, y luego registrar el tiempo de esta prueba de un minuto. No recoja a los animales en caso de no llegar a la plataforma. Enseñar a los animales que deben nadar hacia la plataforma. Por lo tanto, dirigen suavemente al animal a la plataforma con la mano. Deje que el animal se siente en la plataforma durante 15 segundos. Si se cae o salta, suavemente guiará de vuelta. Esto capacitará a los animales que deben permanecer en la plataforma para ser rescatado de la piscina.
- Repita el mismo procedimiento de dos pruebas más, a partir de una dirección diferente para cada ensayo.
- Una vez que el animal ha completado las tres pruebas, se seca con una toalla. Repita el proceso de formación de tres ensayos de todos los animales en forma consecutiva. Mantenga las instrucciones de la misma para todos ellos, y registro de los tiempos.
- Ahora que los animales son entrenados, que están listos para realizar la prueba del laberinto de agua.
Análisis del agua laberinto
- Para comenzar con los ensayos experimentales con el laberinto de agua, llenar el tanque para que la plataforma es de una pulgada por debajo de la superficie del agua. Use leche descremada en seco, o 125 mililitros de productos no tóxicos blanco pintura al temple, para que el agua opaca.
- La temperatura de la iluminación y el agua debe ser el mismo que en el proceso de formación. Cada animal se someterá a 12 pruebas, que serán tres ensayos para cada dirección de inicio. Cada ensayo tendrá una duración de 60 segundos. Antes de comenzar, elegir el orden de las direcciones de partida. No utilice la dirección de comienzo mismo dos veces seguidas, y no repetir el mismo orden para cualquiera de las direcciones
- Frente a la pared de la piscina, el operario cuidador colocará al animal en el agua, y luego va a renunciar a la piscina y se sientan en un lugar designado, mientras que el animal realiza la tarea del laberinto. Un sistema de seguimiento de la conducta animal, como el sistema SMART (San Diego instrumentos) se puede utilizar para controlar el camino, así como otras variables. Grabación en vídeo de cada ensayo es un menos costoso, y conviene perfectamente, alternativa.
- Vigilar el animal hasta que llega a la plataforma, y registrar el tiempo que tomó. Si el animal no llega a la plataforma en 60 segundos, el controlador que guía a la plataforma, como en la formación. De cualquier manera, que el animal repose durante 10 segundos, y luego séquelo y devolver el animal a la jaula de retención.
- Continuar con cada animal para los 12 ensayos, con el cuidador de animales que regresan al mismo lugar designado en cada ensayo. El orden de las pruebas debe ser: una prueba para todos los animales, el ensayo 2 para todos los animales, prueba de 3 para todos los animales, etc Debe haber un intervalo entre ensayos de al menos 2 minutos. Periódicamente, limpiar la piscina, asegúrese de que la plataforma está en su lugar, y comprobar que la temperatura del agua es la misma.
- Después de todos los animales han completado 12 ensayos, que cada uno lleve a cabo una prueba de la sonda, en el quICH de la plataforma se retira de la piscina. El juicio se lleva a cabo la sonda para verificar la comprensión de los animales de la localización de la plataforma, y observar la estrategia que sigue el animal cuando se descubre que la plataforma no está allí. El gestor liberar al animal a partir del norte. Anote el número de veces que el animal cruza el centro de la piscina durante los 30 segundos.
- Cuando todos los ensayos de exploración se completa, se secan los animales y vaciar la piscina.
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Discussion
La tarea del laberinto de agua de Morris fue el desarrollo 5. Esta tarea se puede modificar de varias maneras para investigar la memoria de trabajo, la memoria de referencia y la estrategia de la tarea 6. El procedimiento descrito aquí contiene dos variables críticas que representan una desviación de las otras versiones del laberinto de agua: pre-entrenamiento, y las pruebas en un solo día.
Antes de la formación - el hipocampo está implicado en la memoria espacial / relacional 7.8. El laberinto de agua específicamente las pruebas de memoria espacial 3. Sin embargo, hay numerosos otros componentes de la tarea que no tienen que ver con la memoria espacial: el stress de la tarea, la comprensión de las reglas de la tarea (que para "escapar", el animal debe encontrar una plataforma escondida y mantenerse en que para ser "rescatados"), y el entendimiento de que es un medio de escapar de la tarea 9. Indefensión aprendida también incluye un tanque de agua, pero las reglas (no hay vía de escape) son muy diferentes 10. Los tres ensayos antes de la formación "enseñar" a los animales de estas propiedades de la tarea. Se enteran de que van a ser colocados en una piscina de agua tibia y nadar alrededor de un minuto, pero después de ser removido. Se les enseña a encontrar la plataforma (ya que es visible) y que el permanecer en él llevará a su "escape" del laberinto. Y se les enseña que la tarea tiene un final. Por lo tanto, este aprendizaje en el hipocampo-independiente no confundir el análisis de los datos de prueba de agua laberinto.
Las pruebas en un solo día - Muy a menudo, las pruebas de agua se produce a través laberinto dos a cuatro días 3. De esta manera, la adquisición y la retención se puede evaluar. Sin embargo, en algunas poblaciones, esto no es una opción viable. Tal es el caso cuando la investigación de los mamíferos hembras. Roedores hembra, los seres humanos, primates, etc, todos tienen los cambios cíclicos en los niveles de la hormona esteroide 11-12. Estas hormonas tienen efectos profundos en el desempeño de tareas dependiente del hipocampo, la anatomía del hipocampo y la función de las células del hipocampo 13-14. Pruebas a través de varios días sería similar a las pruebas de un solo animal a través de numerosas condiciones de baja de estradiol y progesterona, estradiol y progesterona elevada, e intermedios estradiol y la progesterona. Para eliminar esta confundir, las pruebas se produce a través de un solo día.
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Acknowledgments
JLN fue apoyada por MH 68347.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| SMART System | San Diego Instruments | This system is not a requirement – there are many other behavioral systems on the market. |
References
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