Özet

Bilinçli Kısıtlanmış Tavşanlarda Nöbet, Aritmi ve Apnelerin Tanımlanması için Çok Sistemli İzleme

Published: March 27, 2021
doi:

Özet

Eşzamanlı video-EEG-EKG-oksimetre-kapnografi kullanarak, tavşan modellerinin kışkırtılmış aritmiler ve nöbetler geliştirme duyarlılığını değerlendirmek için bir metodoloji geliştirdik. Bu yeni kayıt sistemi, terapötiklerin etkinliğini ve güvenliğini test etmek için bir platform oluşturur ve ani ölümle sonuçlanan çok sistemli olayların karmaşık basamaklarını yakalayabilir.

Abstract

İyon kanalopatisi olan hastalarda nöbet ve ölümcül kardiyak aritmi gelişme riski yüksektir. Epilepsili kişilerde (yani epileptik kalp) kalp hastalığı ve aritmi prevalansı daha yüksektir. Ayrıca nöbetleri çevreleyen kardiyak ve otonomik rahatsızlıklar bildirilmiştir. 1:1.000 epilepsi hastası/yılı epilepside (SUDEP) ani beklenmedik bir ölümle ölür. SUDEP mekanizmaları eksik anlaşılmaktadır. Elektroensefalogramlar (EEG) ve elektrokardiyogramlar (EKG), klinik ortamda nöbetler ve aritmiler için substratları/tetikleyicileri tespit etmek ve incelemek için rutin olarak kullanılan iki tekniktir. Bu metodolojinin birçok çalışması ve tanımı kemirgenlerde olsa da, kardiyak elektriksel aktiviteleri insanlardan önemli ölçüde farklıdır. Bu makalede, bilinçli tavşanlarda eşzamanlı video-EEG-EKG-oksimetre-kapnografi kaydetmek için invaziv olmayan bir yöntemin açıklaması sağlanmalıdır. Kardiyak elektrik fonksiyonu tavşanlarda ve insanlarda benzer olduğundan, tavşanlar çevirisel tanı ve terapötik çalışmaların mükemmel bir modelini sağlar. Veri toplama metodolojisini özetlemenin yanı sıra, tavşanlarda nöro-kardiyak elektrik fonksiyonu ve patolojisini incelemek için analitik yaklaşımları tartışıyoruz. Bu, aritmi tespitini, EEG spektral analizini ve kısıtlanmış tavşanlar için geliştirilen bir nöbet ölçeğini içerir.

Introduction

Elektrokardiyografi (EKG), kardiyak elektrik iletiminin dinamiklerini ve elektriksel aktivasyon-geri kazanım sürecini değerlendirmek için klinik ortamda rutin olarak kullanılmaktadır. EKG, aritmi, iskemi ve enfarktüs riskini tespit etmek, lokalize etmek ve değerlendirmek için önemlidir. Tipik olarak, kalbin üç boyutlu bir görünümünü sağlamak için hastanın göğsüne, kollarına ve bacaklarına elektrotlar yapıştırır. Miyokard depolarizasyonunun yönü elektrota doğru olduğunda pozitif saptırma, miyokard depolarizasyonunun yönü elektrottan uzak olduğunda ise negatif sapma üretilir. Kardiyak döngünün elektrografik bileşenleri arasında atriyal depolarizasyon (P dalgası), atriyal-ventrikül iletimi (P-R aralığı), ventriküler ekssitasyon (QRS kompleksi) ve ventrikül repolarizasyonu (T dalgası) sayılır. İnsanlar, tavşanlar, köpekler, kobaylar, domuzlar, keçiler ve atlar dahil olmak üzere birçok memelide EKG ve eylem potansiyeli önlemlerinde büyük benzerlikler vardır1,2,3.

Tavşanlar kardiyak çeviri araştırmaları için ideal bir modeldir. Tavşan kalbi, iyon kanalı bileşimi ve eylem potansiyeli özellikleri açısından insan kalbine benzer2,4,5. Tavşanlar, kalp hastalığı 2 ,4,6,7,8’ingenetik, edinilmiş ve ilaca bağlı modellerinin üretimi için kullanılmıştır. kardiyak EKG ve insanlarda ve tavşanlarda ilaçlara etki potansiyeli tepkisinde büyük benzerlikler vardır7,10,11.

Kalp hızı ve kardiyak elektriksel aktivasyon-geri kazanım süreci kemirgenlerde tavşanlara, insanlara ve diğer büyük memelilere kıyasla çok farklıdır12,13,14. Kemirgen kalbi insanlardan 10 kat daha hızlı atar. Buna karşılık, insan ve tavşan EKG’lerinde izo-elektrik ST segmentine göre, kemirgenlerde14 , 15,16ST segmenti yoktur. Ayrıca, kemirgenler ters T dalgası14 , 15,16ile QRS-r’ dalga formuna sahiptir. QT aralığının ölçümleri kemirgenlerde insanlara ve tavşanlara karşı çok farklıdır14,15,16. Ayrıca, normal EKG değerleri insanlarda kemirgenlere karşı çok farklıdır12,15,16. EKG dalga formlarındaki bu farklılıklar, eylem potansiyeli morfolojislerindeki farklılıklara ve kardiyak repolarizasyonu yönlendiren iyon kanallarındaki farklılıklara bağlanabilir9,14. Geçici dış potasyum akımı kemirgenlerde kısa (kubbe dışı) kardiyak etki potansiyeli morfolojisinde ana repolarizasyon akımı iken, insanlarda ve tavşanlarda eylem potansiyeli üzerinde büyük bir faz-2 kubbe vardır ve gecikmiş doğrultucu potasyum akımları (IKr ve IKs)insanlarda ve tavşanlarda büyük repolarizasyon akımlarıdır4,9,13,17. Daha da önemlisi, IKr ve IKs ekspresyasyonu kemirgenlerde yoktur / minimaldir ve IKr ve IKs’nin zamansal aktivasyon kinetiği nedeniyle kardiyak etki potansiyeli morfolojisinde bir rolü yoktur9,13. Bu nedenle, tavşanlar ilaca bağlı, edinilmiş ve kalıtsal EKG anormallikleri ve aritmileri 4,7,13mekanizmalarını değerlendirmek için daha çevirisel bir model sağlar. Daha sonra, çok sayıda çalışma primer kardiyak (Uzun QT Sendromu18 , 19,20) veya nöronal hastalıklarda (epilepsi21,22,23,24)hem nöronal hem de kardiyak elektriksel anormalliklerin varlığınıgösterdiğinden,insan fizyolojisini yakından üreten bir hayvan modelinde alttaki mekanizmaların incelenmesi önemlidir. Kemirgenler insan beynini modellemek için yeterli olsa da, kemirgenler insan kardiyak fizyolojisinin ideal bir modeli değildir7.

Elektroensefalografi (EEG), kortikal elektrik fonksiyonunu kaydetmek için genellikle kafa derisine veya intrakranially’ye yerleştirilen elektrotları kullanır. Bu elektrotlar, serebral korteks25’tekiyakındaki piramital nöron gruplarının atış hızındaki ve eşzamanlılığındaki değişiklikleri tespit edebilir. Bu bilgiler serebral fonksiyonu ve uyanık/uyku durumunu değerlendirmek için kullanılabilir. Ayrıca, EEG’ler epileptik aktiviteyi lokalize etmek ve epileptik nöbetleri epileptik olmayan olaylardan (örneğin psikojenik epileptiform olmayan aktivite ve kardiyojenik olaylar) ayırt etmek için yararlıdır. Epilepsi tipini, kışkırtıcı faktörleri ve nöbetin kökenini teşhis etmek için epilepsi hastaları nöbete neden olabilecek çeşitli manevralara maruz kalırlar. Çeşitli yöntemler arasında hiperventilasyon, fotik stimülasyon ve uyku yoksunluğu saydır. Bu protokol, tavşanlarda EEG sapmalarını ve nöbetlerini teşvik etmek için fotik stimülasyonun kullanımını göstermektedir26,27,28,29.

Eşzamanlı video-EEG-EKG kayıtları, insanlarda ve kemirgenlerde, ictal öncesi, ictal ve post-ictal durumlar sırasında davranışsal, nöronal ve kardiyak aktiviteyi değerlendirmek için yaygın olarak kullanılmıştır30. Çeşitli çalışmalar tavşanlarda ayrı ayrı EEG ve EKG kayıtları yürütmüş olsa da4,31,32,33, bilinçli kısıtlanmış tavşanda eşzamanlı video-EEG-EKG elde etmek ve analiz etmek için bir sistem iyi kurulmamıştır34. Bu makalede, nöro-kardiyak elektrik ve solunum fonksiyonlarını değerlendirmek için bilinçli tavşanlarda eşzamanlı video-EEG-EKG -capnography-oksimetre verilerini kaydedebilen bir protokolün tasarımı ve uygulanması açıklanmaktadır. Bu yöntemden elde edilen sonuçlar aritmiler, nöbetler, solunum bozuklukları ve fiziksel belirtiler arasındaki duyarlılığı, tetikleyicileri, dinamikleri ve uyumları gösterebilir. Deneysel sistemimizin bir avantajı, yatıştırıcıya ihtiyaç duymadan bilinçli kayıtlar elde etmemizdir. Tavşanlar, minimum hareketle ≥5 saat boyunca kısıtlayıcılarda kalır. Anestezik pertürb nöronal, kardiyak, solunum ve otonomik fonksiyon olarak, bilinçli durum sırasında kayıtlar en fizyolojik verileri sağlar.

Bu kayıt sistemi sonuçta epilepside (SUDEP) ani beklenmedik ölüm için nörolojik, kardiyak ve solunum mekanizmalarının anlaşılmasını ilerletmek için ayrıntılı içgörüler sağlayabilir. Yukarıdaki nörolojik ve kardiyak izlemeye ek olarak, son kanıtlar solunum yetmezliğinin nöbet sonrası ani ölüme potansiyel bir katkı olarak rolünü de desteklemektedir35,36. Tavşanların solunum durumunu izlemek için, nöbet öncesi, sırasında ve sonrasında solunum sisteminin durumunu değerlendirmek için oksimetre ve kapnografi uygulandı. Burada sunulan protokol farmakolojik ve fotik-uyaran kaynaklı tavşan nöbetleri için eşiği değerlendirmek amacıyla tasarlanmıştır. Bu protokol, fiziksel belirtilerle sonuçlanamayan ince EEG ve EKG anormalliklerini tespit edebilir. Ek olarak, bu yöntem yeni ilaçların ve cihazların kardiyak güvenliği ve anti-aritmik etkinlik testi için kullanılabilir.

Protocol

Tüm deneyler Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) yönergelerine ve Upstate Tıp Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi’ne (IACUC) uygun olarak gerçekleştirildi. Ayrıca, şekil 1 ‘de bu protokolün ana hatları verilmiştir. 1. Kayıt ekipmanının hazırlanması Bilgisayarı 64 pinli bir kafa kutusuyla bir amplifikatöre bağlayın.NOT: Her hayvanda başın 4 çeyreğinden EEG’ler için dört düz deri altı pi…

Representative Results

Yukarıda açıklanan yöntem, beynin ve kalbin elektrik iletim sistemindeki anormallikleri ve solunum bozukluklarını tespit edebilir. EkG morfolojisini değerlendirmek ve anormal kalp atışlarını, iletim bozukluklarını veya EKG ritimlerini (atriyal/ventriküler ektopik atımlar ve brady-/tachy-aritmiler) tespit etmek için bir veri toplama yazılımı kullanılır (Şekil 6). EKG morfolojisini görselleştirmenin yanı sıra, izler RR aralığı, kalp…

Discussion

Bu deneysel kurulum, tavşanlarda, özellikle kardiyak ve/veya nöronal hastalık modellerinde ayrıntılı eşzamanlı video-EEG-EKG-oksimetre-kapnografi kayıtlarını ve analizlerini kolaylaştırır. Bu makalenin sonuçları, bu yöntemin nöbetleri ve aritmileri tespit edebildiğini ve bunları elektrografik eserlerden ayırabildiğini göstermektedir. Tavşanlara prokonvülsan verirken beklenen sonuçlar elde edildi ve bu da nöbetlere neden oldu. Video-EEG kayıtlarından elde edilen veriler, gönüllü hareketler…

Açıklamalar

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Yazarlar bu çalışmanın Amerikan Kalp Derneği, Amerikan Epilepsi Derneği ve SUNY Upstate Farmakoloji Bölümü’nün hibeleriyle desteklendiğini kabul ediyor.

Materials

0.9% Sodium Chloride Irrigation, USP – Flexible Container PFIZER (HOSPIRA) 7983-09 Dilutant
10cc Luer Lock syringe with 20G x 1" Needle Sur-Vet SS-10L2025 Used as a flush after drug injection
4×4 gauze sponges Fisher Scientific 22-415-469 Rolled in a tube to splint ear with angiocatheter
Apple Sauce Kirkland 897971 Vehicle for oral medications
Computer Dell Optiplex 5040 Acquisition computer
E-4031 Tocris 1808 Agent known to prolong the QT interval
ECG Electrode RhythmLink RLSND116-2.5 13mm 35-degree bent (0.4 mm diameter) subdermal pin electrodes
EEG Electrode RhythmLink RLSP513 5-twist 13mm straight (0.4mm diameter) subdermal pin electrodes
EEGLAB (2020) Swartz Center for Computational Neuroscience Open Access Can perform spectral analysis of EEG
Ethernet-to-ethernet adapter Linksys USB3G16 Adapter for connecting the camera to the computer
Euthanasia-III Solution Med-Pharmex ANADA 200-280 Contains pentobarbital sodium and phenytoin sodium, controlled substance
Foam padding Generic N/A Reduces pressure applied to the neck of small rabbits by the restrainer in order to prevent the adverse cardiorespiratory effects of neck compression
Heparin Lock Flush Medline EMZ50051240 To maintain patency of angiocatheter
IR Light Bosch EX12LED-3BD-8W Facilitates recordings in the dark
LabChart Pro (2019, Version 8.1.16) ADInstruments N/A ECG Analysis
JELCO PROTECTIV Safety I.V. Catheters, 25 gauge Smiths Medical 3060 Used to catherize marginal ear vein
MATLAB (R2019b, Update 5) MathWorks N/A Required to run EEGLAB
Microphone Sony Stereo ECM-D570P Recording of audible manifestions of seizures
Micropore Medical Tape, Paper, White 3M 1530-1 Used to secure wires and create ear splint
Natus NeuroWorks Natus LC101-8 Acquisition and review software
Pentylenetetrazol (1 – 10 mg/kg always in 1mL volume) Sigma-Aldrich 88580 Dilutions prepared in saline
Photic Stimulator Grass PS22 Stimulator to control frequency, delay, duration, intensity of the light pulses
Plastic wire organizer / bundler 12Vwire.com LM-12-100-BLK Bundle wires to cut down on noise
PS 22 Photic Stimulator Grass Instruments BZA641035 Strobe light with adjustable flash frequency, delay, and intensity
PVC pipe Generic N/A Prevents small rabbits from kicking their hind legs and causing spinal injury
Quantum Amplifier Natus 13926 Amplifier / digitizer
Quantum HeadBox Amplifier Natus 22134 64-pin breakout box
Rabbit Restrainer Plas-Labs 501-TC Various size rabbit restrainers are available. 6" x 18" x 6" in this study.
Rubber pad (booster) Generic N/A Raises small rabbits up in the restrainer to prevent neck compression
SpO2 ear clip NONIN 61000 PureSAT/SpO2
SpO2 sensor adapter NONIN 13931 XPOD PureSAT/SpO2
SRG-X120 1080p PTZ Camera with HDMI, IP & 3G-SDI Output Sony SRG-X120 Impela Camera
Terumo Sur-Vet Tuberculin Syringe 1cc 25G X 5/8" Regular Luer Sur-Vet 13882 Used to inject intravenous medications
Veterinary Injection Plug Luer Lock Sur-Vet SRIP2V Injection plug for inserting the needle for intravenous medication
Webcol Alcohol Prep, Sterile, Large, 2-ply Covidien 5110 To prepare ear vein before catheterization

Referanslar

  1. Kaese, S., et al. The ECG in cardiovascular-relevant animal models of electrophysiology. Herzschrittmacherther Elektrophysiology. 24 (2), 84-91 (2013).
  2. Pogwizd, S. M., Bers, D. M. Rabbit models of heart disease. Drug Discovery Today: Disease Models. 5 (3), 185-193 (2008).
  3. O’Hara, T., Rudy, Y. Quantitative comparison of cardiac ventricular myocyte electrophysiology and response to drugs in human and nonhuman species. American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 302 (5), 1023-1030 (2012).
  4. Brunner, M., et al. Mechanisms of cardiac arrhythmias and sudden death in transgenic rabbits with long QT syndrome. Journal of Clinical Investigation. 118 (6), 2246-2259 (2008).
  5. Lengyel, C., et al. Pharmacological block of the slow component of the outward delayed rectifier current (I(Ks)) fails to lengthen rabbit ventricular muscle QT(c) and action potential duration. British Journal of Pharmacology. 132 (1), 101-110 (2001).
  6. Baczko, I., Hornyik, T., Brunner, M., Koren, G., Odening, K. E. Transgenic rabbit models in proarrhythmia research. Frontiers in Pharmacology. 11, 853 (2020).
  7. Rudy, Y., et al. Systems approach to understanding electromechanical activity in the human heart: a national heart, lung, and blood institute workshop summary. Circulation. 118 (11), 1202-1211 (2008).
  8. Zhu, Y., Ai, X., Oster, R. A., Bers, D. M., Pogwizd, S. M. Sex differences in repolarization and slow delayed rectifier potassium current and their regulation by sympathetic stimulation in rabbits. Archives. 465 (6), 805-818 (2013).
  9. Nerbonne, J. M., Nichols, C. G., Schwarz, T. L., Escande, D. Genetic manipulation of cardiac K(+) channel function in mice: what have we learned, and where do we go from here. Circulation Research. 89 (11), 944-956 (2001).
  10. Eckardt, L., et al. Drug-related torsades de pointes in the isolated rabbit heart: comparison of clofilium, d,l-sotalol, and erythromycin. Journal of Cardiovascular Pharmacology. 32 (3), 425-434 (1998).
  11. Baczko, I., Jost, N., Virag, L., Bosze, Z., Varro, A. Rabbit models as tools for preclinical cardiac electrophysiological safety testing: Importance of repolarization reserve. Progress on Biophysics and Molecular Biology. 121 (2), 157-168 (2016).
  12. Richig, J. W., Sleeper, M. M. . Electrocardiography of Laboratory Animals. , (2019).
  13. Edwards, A. G., Louch, W. E. Species-dependent mechanisms of cardiac arrhythmia: A cellular focus. Clinical Medicine Insights. Cardiology. 11, 1179546816686061 (2017).
  14. Salama, G., London, B. Mouse models of long QT syndrome. Journal of Physiology. 578, 43-53 (2007).
  15. Zhang, Y., Wu, J., King, J. H., Huang, C. L., Fraser, J. A. Measurement and interpretation of electrocardiographic QT intervals in murine hearts. American Journal of Physiology. Heart and Circulation Physiology. 306 (11), 1553-1557 (2014).
  16. Auerbach, D. S., et al. Altered cardiac electrophysiology and SUDEP in a model of dravet syndrome. PLoS One. 8 (10), 15 (2013).
  17. Aiba, T., Tomaselli, G. F. Electrical remodeling in the failing heart. Current Opinion in Cardiology. 25 (1), 29-36 (2010).
  18. Auerbach, D. S., et al. Genetic biomarkers for the risk of seizures in long QT syndrome. Neurology. 87 (16), 1660-1668 (2016).
  19. Anderson, L. L., et al. Antiepileptic activity of preferential inhibitors of persistent sodium current. Epilepsia. 55 (8), 1274-1283 (2014).
  20. Johnson, J. N., et al. Identification of a possible pathogenic link between congenital long QT syndrome and epilepsy. Neurology. 72 (3), 224-231 (2009).
  21. Devinsky, O., Hesdorffer, D. C., Thurman, D. J., Lhatoo, S., Richerson, G. Sudden unexpected death in epilepsy: epidemiology, mechanisms, and prevention. Lancet Neurology. 15 (10), 1075-1088 (2016).
  22. Bagnall, R. D., et al. Exome-based analysis of cardiac arrhythmia, respiratory control, and epilepsy genes in sudden unexpected death in epilepsy. Annals in Neurology. 79 (4), 522-534 (2016).
  23. Frasier, C. R., et al. Channelopathy as a SUDEP biomarker in dravet syndrome patient-derived cardiac myocytes. Stem Cell Reports. 11 (3), 626-634 (2018).
  24. Glasscock, E. Genomic biomarkers of SUDEP in brain and heart. Epilepsy and Behavior. 38, 172-179 (2014).
  25. Olejniczak, P. Neurophysiologic basis of EEG. Journal of Clinical Neurophysiology. 23 (3), 186-189 (2006).
  26. Gastaut, H., Hunter, J. An experimental study of the mechanism of photic activation in idiopathic epilepsy. Electroencephalography and Clinical Neurophysiology. 2 (3), 263-287 (1950).
  27. Fisher, R. S., et al. Photic- and pattern-induced seizures: A review for the Epilepsy Foundation of America Working Group. Epilepsia. 46 (9), 1426-1441 (2005).
  28. Specchio, N., et al. Diagnosing photosensitive epilepsy: fancy new versus old fashioned techniques in patients with different epileptic syndromes. Brain Development. 33 (4), 294-300 (2011).
  29. Kasteleijn-Nolst Trenite, D., et al. Methodology of photic stimulation revisited: updated European algorithm for visual stimulation in the EEG laboratory. Epilepsia. 53 (1), 16-24 (2012).
  30. Mishra, V., Gautier, N. M., Glasscock, E. Simultaneous video-EEG-ECG monitoring to identify neurocardiac dysfunction in mouse models of epilepsy. Journal of Visualized Experiments. (131), e57300 (2018).
  31. Green, J. D., Maxwell, D. S., Schindler, W. J., Stumpf, C. Rabbit EEG “theta” rhythm: Its anatomical source and relation to activity in single neurons. Journal of Neurophysiology. 23 (4), 403-420 (1960).
  32. Petersen, J., Diperri, R., Himwich, W. A. The comparative development of the EEG in rabbit, cat and dog. Electroencephalography and Clinical Neurophysiology. 17, 557-563 (1964).
  33. Strain, G. M., Van Meter, W. G., Brockman, W. H. Elevation of seizure thresholds: a comparison of cerebellar stimulation, phenobarbital, and diphenylhydantoin. Epilepsia. 19 (5), 493-504 (1978).
  34. Cheng, Y., et al. Effectiveness of retigabine against levobupivacaine-induced central nervous system toxicity: A prospective, randomized animal study. Journal of Anesthesia. 30 (1), 109-115 (2016).
  35. Nascimento, F. A., et al. Pulmonary and cardiac pathology in sudden unexpected death in epilepsy (SUDEP). Epilepsy and Behavior. 73, 119-125 (2017).
  36. Buchanan, G. F. Impaired CO2-Induced Arousal in SIDS and SUDEP. Trends in Neuroscience. 42 (4), 242-250 (2019).
  37. Van Egmond, P., Binnie, C. D., Veldhuizen, R. The effect of background illumination on sensitivity to intermittent photic stimulation. Electroencephalography and Clinical Neurophysiology. 48 (5), 599-601 (1980).
  38. Harding, G. F., Fylan, F. Two visual mechanisms of photosensitivity. Epilepsia. 40 (10), 1446-1451 (1999).
  39. Kuwada, S., Stanford, T. R., Batra, R. Interaural phase-sensitive units in the inferior colliculus of the unanesthetized rabbit: effects of changing frequency. Journal of Neurophysiology. 57 (5), 1338-1360 (1987).
  40. Kalume, F., et al. Sudden unexpected death in a mouse model of Dravet syndrome. Journal of Clinical Investigation. 123 (4), 1798-1808 (2013).
  41. Xiang, C., et al. Threshold for maximal electroshock seizures (MEST) at three developmental stages in young mice. Zoology Research. 40 (3), 231-235 (2019).
  42. Ross, K. C., Coleman, J. R. Developmental and genetic audiogenic seizure models: behavior and biological substrates. Neuroscience and Biobehavior Reviews. 24 (6), 639-653 (2000).
  43. Faingold, C. L., Randall, M., Tupal, S. DBA/1 mice exhibit chronic susceptibility to audiogenic seizures followed by sudden death associated with respiratory arrest. Epilepsy and Behavior. 17 (4), 436-440 (2010).

Play Video

Bu Makaleden Alıntı Yapın
Bosinski, C., Wagner, K., Zhou, X., Liu, L., Auerbach, D. S. Multi-system Monitoring for Identification of Seizures, Arrhythmias and Apnea in Conscious Restrained Rabbits. J. Vis. Exp. (169), e62256, doi:10.3791/62256 (2021).

View Video