Mevcut protokol, bilinçli sıçanlarda böbrek kan akışının uzun süreli sürekli ölçümünü ve aynı anda implante edilmiş kateterlerle (sıvı dolu veya telemetri ile) kan basıncının kaydedilmesini açıklamaktadır.
Böbrekler, vücut sıvılarının homeostazını korumada çok önemli bir rol oynar. Böbrek kan akımının (RBF) düzenlenmesi, böbrek fonksiyonlarında filtrasyon ve metabolizmanın hayati fonksiyonları için gereklidir. Anestezi uygulanan hayvanlarda, böbrek perfüzyonunun düzenlenmesinden sorumlu mekanizmaları belirlemek için çeşitli koşullar altında RBF’yi ölçmek için birçok akut çalışma yapılmıştır. Bununla birlikte, teknik nedenlerden dolayı, RBF’yi uzun süreler boyunca kısıtlanmamış unnesthetize sıçanlarda sürekli olarak (24 saat / gün) ölçmek mümkün olmamıştır. Bu yöntemler, RBF’nin haftalar boyunca sürekli olarak belirlenmesini sağlarken, aynı zamanda implante edilmiş kateterlerle (sıvı dolu veya telemetri ile) aynı anda kan basıncını (BP) kaydeder. RBF izlemesi, çalışma boyunca sıçanın sınırsız hareketini sağlayan dairesel servo kontrollü bir sıçan kafesine yerleştirilen sıçanlarla gerçekleştirilir. Aynı zamanda, akış probu ve arteriyel kateterlerden gelen kabloların karışması önlenir. Sıçanlar ilk önce sol renal arter üzerine ultrasonik bir akış probu yerleşimi ve sağ femoral artere implante edilen bir arteriyel kateter ile alet edilir. Bunlar deri altından boynun ensesine yönlendirilir ve RBF ve BP’yi ölçmek için sırasıyla akış ölçere ve basınç dönüştürücüsüne bağlanır. Cerrahi implantasyonu takiben, sıçanlar en az bir hafta boyunca iyileşmek ve ultrasonik prob kayıtlarını stabilize etmek için hemen kafese yerleştirilir. İdrar toplama da bu sistemde mümkündür. Sürekli monitörizasyon için cerrahi ve cerrahi sonrası prosedürler bu protokolde gösterilmiştir.
Böbrekler vücut ağırlığının sadece% 0.5’idir, ancak kan akışı bakımından zengindir ve toplam kalp debisinin% 20-25’ini alır1. Renal kan akışının (RBF) düzenlenmesi böbrek fonksiyonu, vücut sıvısı ve elektrolit homeostazının merkezindedir. Kan akımının böbreğe düzenlenmesinin önemi, tek taraflı nefrektomi sonrası kalan böbrekte RBF’nin önemli ölçüde artması 2,3,4 ve böbrek yetmezliğinde ortaya çıkan RBF’nin azalması 5,6,7 ile güzel bir şekilde gösterilmiştir. RBF’deki bu tür değişikliklerin, böbrek fonksiyonundaki değişikliklere veya RBF’nin azalmasına bağlı olarak fonksiyondaki bir azalmaya yanıt olarak meydana gelip gelmediğini, anestezi ile cerrahi olarak hazırlanmış hayvanlarda veya insan deneklerde tespit etmek zor olmuştur. Olayların tanımlanmış bir değişiklikten önce ve sonra belirlenebildiği ve olayların ilerlemesi sırasında aynı hayvanda gözlemlenebildiği zamansal çalışmalara ihtiyaç vardır. Hayvan ve insan çalışmalarında, RBF dolaylı olarak para-amino hippurik asit (PAH) 8,9,10’un temizlenmesi ve daha yakın zamanda ultrason9,11,12, MRI 4,13 ve PET-CT14,15 gibi görüntüleme teknikleriyle tahmin edilmiştir. Her böbreğin yararlı anlık görüntülerini veren ve hastalığın ilerlemesini takip edebilen. Küçük hayvanlarda RBF’yi anestezi olmadan ultrason veya MRI taramaları ile değerlendirmek zordur. RBF’yi aynı sıçanda bilinçli koşullar altında uzun süreler boyunca sürekli olarak ölçmek imkansız olmuştur.
Bu nedenle, mevcut protokol, daha önce açıklandığı gibi serbest hareket eden sıçanlar için sürekli kan basıncı ölçüm yöntemleriyle birleştirilen RBF’nin eşzamanlı sürekli 24 saat / gün ölçümlerini sağlayan teknikler geliştirmiştir 16,17,18,19,20,21 . Bu teknoloji, gelecekte çeşitli böbrek bozukluklarında neden-sonuç ilişkilerini incelemek için çeşitli sıçan modellerinde RBF’nin zamansal olarak değerlendirilmesine izin verir.
Mevcut protokol, RBF ve arteriyel basıncı haftalar boyunca sürekli olarak kaydetmek için ticari olarak temin edilebilen enstrümantasyonu kullanan bir tekniği tanımlamaktadır. Ek olarak, idrar adım 1.1’de açıklanan cihaz kullanılarak toplanabilir. Ayrıca idrardaki metabolitleri değerlendirmek ve bir arteriyel kateter implante edildiğinde, analiz için kan örneklemesi yapmak için de kullanılabilir.
Geleneksel olarak, RBF ölçümleri cerrahi olarak hazırlanmış anestezi uygul…
The authors have nothing to disclose.
Bu çalışma bilimsel araştırma hibeleri ile desteklenmiştir (P01 HL116264, RO1 HL137748). Yazarlar, Theresa Kurth’a tavsiyeleri ve laboratuvar yöneticisi olarak deneysel ortamın korunmasındaki yardımları için teşekkür etmek istiyor.
1RB probe | Transonic | 1RB | ultrasonic flow probe |
Betadine | Avrio Health | povidone-iodine | |
Buprenorphine SR-LAB | ZooPharm | Buprenorphine | |
Cefazolin | APOTEX | NDC 60505 | Cefazolin |
Crile Hemostats | Fine Surgical Instruments | 13004-14 | Hemostats for blunt dissection |
Isoflurane | Piramal | NDC 66794 | Isoflurane |
Medium Clear PVC cement | Oatey | PVC cement | |
Mersilene polyester fiber mesh | Ethicon | polyester fiber mesh | |
MetriCide28 | Metrex | SKU 10-2805 | 2.5% glutaraldehyde |
Micro-Renathane 0.025 x 0.012 | Braintree Scientific | MRE 025 | use for catheter |
MINI HYPE-WIPE | Current Technologies | #9803 | 1% sodium hypochlorite |
Oatey Medium Clear PVC Cement | Oatey | #31018 | PVC cement |
PHD2000 syringe pump | Harvard apparatus | 71-2000 | syringe pump |
Ponemah software | DSI | recording software | |
Precision 3630 Tower | Dell | Computer for recording | |
Raturn Stand-Alone System | BASi | MD-1407 | a movement response caging system |
RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025 | Braintree Scientific | RPT 040 | use for catheter |
Silicone cuff | Transonic | AAPC102 | skin button |
Surgical lubricant sterile bacteriostatic | Fougera | 0168-0205-36 | gell for flow probe |
Tergazyme | Alconox | protease contained anionic detergent | |
TS420 Perivascular Flow Module | Transonic | TS420 | perivascular flow module |
Vetbond | 3M | 1469SB | tissue adhesive |
WinDaq software | DATAQ | recording software |