Burada, kapalı başlı hafif travmatik beyin hasarı (mTBI) sıçan modelini ve akut ve subakut evrelerdeki davranışsal belirtiler açısından insan mTBI'sına dikkate değer benzerlik gösteren doğrulamasını sunuyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Kapalı Kafa Hafif Travmatik Yaralanmanın Sıçan Modeli ve Validasyonu
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Hayvan modelleri, hafif travmatik beyin hasarı (mTBI) anlayışımızı ilerletmek ve klinik araştırmalara rehberlik etmek için çok önemlidir. Anlamlı içgörüler elde etmek için istikrarlı ve tekrarlanabilir bir hayvan modeli geliştirmek çok önemlidir. Bu çalışmada, modelleme etkisini doğrulamak için kapalı başlı bir mTBI modelinin ayrıntılı bir tanımını ve Sprague-Dawley sıçanlarını kullanan temsili bir doğrulama yöntemini sunuyoruz. Model, 550 g'lık bir kütle ağırlığını 100 cm yükseklikten doğrudan tahrip edilebilir bir yüzey üzerinde bir sıçanın kafasına düşürmeyi ve ardından 180 derecelik bir dönüşü içerir. Yaralanmayı değerlendirmek için sıçanlar, yaralanmadan 10 dakika sonra, bilinç kaybı zamanı, ilk arama davranışı süresi, kaçış yeteneği ve ışın dengesi yetenek testi dahil olmak üzere bir dizi nörodavranışsal değerlendirmeye tabi tutuldu. Yaralanmayı takip eden akut ve subakut aşamalarda, motor koordinasyon yeteneğini (Işın görevi), anksiyeteyi (Açık Alan testi) ve öğrenme ve hafıza yeteneklerini (Morris Su Labirenti testi) değerlendirmek için davranış testleri yapıldı. Kapalı kafa mTBI modeli, minimum mortalite ve çoğaltılmış gerçek yaşam durumları ile tutarlı bir yaralanma yanıtı üretti. Doğrulama yöntemi, model geliştirmeyi etkili bir şekilde doğruladı ve modelin kararlılığını ve tutarlılığını sağladı.
Giriş
Hafif travmatik beyin hasarı (mTBI) veya beyin sarsıntısı, en yaygın yaralanma türüdür ve çeşitli kısa süreli ve kronik semptomlara yol açabilir1. Bu semptomlar, diğerlerinin yanı sıra baş dönmesi, baş ağrısı, depresyon ve anhedoniyi içerebilir ve mTBI2'den etkilenen bireyler için önemli acılara yol açabilir. Çoğu mTBI'ye künt kuvvet travması3 neden olduğundan, bu tür yaralanmaları doğru bir şekilde taklit eden hayvan modelleri geliştirmek zorunlu hale gelir. Bu modeller, yaralanmayı ve altında yatan mekanizmaları daha iyi anlamak için gereklidir ve insan çalışmalarına kıyasla daha az değişkenlik ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Hayvan deneyleri, Central South Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı. Tüm çalışmalar laboratuvar hayvanlarının refahı ve etik ilkeleri doğrultusunda yürütülmüştür.
1. Hayvan besleme ve anestezi prosedürü
- 280-320 g Sprague-Dawley erkek sıçanlarını gruplandırın ve onları yiyecek ve suya erişim ile 12 saat / 12 saat aydınlık/karanlık döngüsünde tutun. Sıçanlar 6 gün boyunca iklime alıştıktan sonra çalışmayı gerçekleştirin.
- Sıçanı, pençe veya kuyruk sıkışmasına yanıt vermeyene kadar bir indüksiyon kutusunda 0.6 L / dak hava akışında% 3 izofluran ile uyuşturun. Akış hızını 30 saniye kor....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Bu çalışmada kullanılan aparat, Kane modelinin ve Richelle Mychasiuk'un pediatrik modelinin değiştirilmiş bir versiyonuydu11,12. Bu çalışmada, SD sıçanlar sahte ve mTBI gruplarına ayrıldı. Bu modelin tekrarlanabilirliğini göstermek için, her deneyde 8-12 sıçan içeren akut nörodavranışsal değerlendirme ile birlikte bu modelin üç bağımsız kopyasını gerçekleştirdik. Bu çalışmada 30'dan fazla mTBI sıçan kullandık ve 2 sıçan anesteziye.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu model, kafa derisi kesisine veya kafatası açılmasına gerek kalmadan kapalı başlı bir mTBI'yi başarılı bir şekilde simüle ederek, insan vakalarında gözlemlenen etki senaryosunun daha doğru bir temsilini sağlar. Kafa derisi insizyonundan kaçınmak, gerçek durumla uyumlu olmayabilecek enflamatuar yanıtların önlenmesine yardımcı olur. Richelle Mychasiuk'un pediatrik modeli12 ile karşılaştırıldığında, bu çalışmada kullanılan model, 280-320 g ağırlığındaki yetişkin sıçanlar için özel olarak uyarlanmış.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların ifşa edecek herhangi bir mali çıkarı yoktur.
Teşekkürler
Central South Üniversitesi Laboratuvar Hayvanları Bölümü'ndeki tüm bursiyerlere teşekkür etmek istiyoruz. Bu çalışma Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No. 81971791) tarafından desteklenmiştir; Şangay Adli Tıp Anahtar Laboratuvarı, Adli Bilimler Anahtar Laboratuvarı, Adalet Bakanlığı, Çin (Adli Bilimler Akademisi) (No. KF202104).
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Akrilik kutu | Kurum İçi | N/A | 15 cm x 22 cm x 43 cm |
| Anestezi Makinesi | RWD Life Science Co. | R540 Fareler ve Sıçan Hayvan Anestezi Makinesi | |
| Kaskı | Şirket İçi | N / A | 10 mm çapında ve 3 mm kalınlığında paslanmaz çelik disk |
| Morris su labirenti | RWD Life Science Co. | Çap 150 cm, yükseklik 50 cm, platform çapı 35 cm | |
| Açık alan | RWD Life Science Co. | 63007 | Genişlik 100 cm, yükseklik 40 cm |
| Panlab SMART V3.0 | RWD Life Science Co. | SMART v3.0 | |
| Delikli ağırlık | Şirket içi | N/A | 550 g ağırlık ve 18 mm çap |
| Yastık | Şirket içi | N/A | Farenin başının altına yerleştirmek için kama şeklinde sünger |
Kaynaklar
- Silverberg, N. D., Duhaime, A. C., Iaccarino, M. A. Mild traumatic brain injury in 2019-2020. JAMA. 323 (2), 177-178 (2020).
- Kim, K., Priefer, R. Evaluation of current post-concussion protocols. Biomedicine & Pharmacotherapy. 129, 110406(2020).
- Peeters, W., et al.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
