Standartlaştırılmış Bir Domuzdan Makak Heterotopik Kalbe Ksenotransplantasyon Modeli

Kalp ksenotransplantasyonu, nakil gerektiren ancak donör sıkıntısı nedeniyle uygun bir donör organ alamayan son dönem kalp yetmezliği olan hastalar için yeni bir umut sunuyor. Klinik öncesi değerlendirme çalışmalarında, yaşamı destekleyen kalp ksenotransplantasyonu, insan klinik deneylerini başlatmak için gereken etkinlik kriterlerini karşılayarak dokuz aya kadar hayatta kalma sürelerine ulaşmıştır¹. Bu bulgulara dayanarak, Amerika Birleşik Devletleri Gıda ve İlaç Dairesi (FDA), genetiği değiştirilmiş donör kalpleri kullanılarak iki klinik kalp ksenotransplantasyonu vakası için genişletilmiş erişim kullanımını onayladı. Bu klinik vakalar kalp ksenotransplantasyonunun fizibilitesini göstermiş olsa da, anormal kardiyak hipertrofi ve antikor aracılı rejeksiyon 2,3,4,5 dahil olmak üzere çözülmemiş birkaç zorluk ortaya çıkmıştır. Bu nedenle, iyi laboratuvar uygulamaları koşulları altında büyük hayvan modellerinde daha fazla klinik öncesi çalışma, ek veriler sağlamak ve gelecekteki insan klinik deneylerinin güvenliğini sağlamak için yeni immünosupresif rejimler geliştirmek için gereklidir.

Ortotopik kalp ksenogreftlerinin uzun süreli sağkalımı sadece rejeksiyon ile değil, aynı zamanda primer greft disfonksiyonu ile de sınırlıdır. Primer disfonksiyonun genel insidansının farklı araştırma ekipleri arasında yaklaşık %40 ila %60 arasında değiştiği bildirilmiştir ^4,6,7. Domuz donör kalplerinin iskemik hasara karşı artan duyarlılığı nedeniyle, bazı gruplar primer greft disfonksiyonu insidansını azaltmak için hipotermik perfüzyon cihazları geliştirmiştir. Bununla birlikte, postoperatif kardiyak hipertrofinin kontrol edilmesi zor olmaya devam etmektedir. Büyüme hormonu reseptörü (GHR) nakavt donör domuzlarda bile, GHR'nin yokluğu nedeniyle kardiyak fonksiyon tehlikeye girebilir^ve böylece uzun vadeli greft canlılığı sınırlanabilir ^2,3. Bu bağlamda, heterotopik kalp ksenotransplantasyonu çeşitli avantajlar sunar: aşırı ön ve son yükü önler, cerrahi prosedürü basitleştirir ve toplam iskemik süreyi azaltır ^8,9. Bu model, ksenojenik reddin neden olduğu greft hasarını daha iyi yansıtır ve ortotopik transplantasyondan farklı olarak, heterotopik kalp ksenotransplantasyonu, uzun süreli greft sağkalımı, in vivo biyopsiler için tekrarlanan laparotomiler ve immün aktivasyon ve dinamik immün hücre fonksiyonunun uzun süreli gözlemlenmesini sağlar. Ksenojenik immün reddetme mekanizmalarını araştırmak ve yeni immünsüpresif stratejilerin etkinliğini ve güvenliğini değerlendirmek için değerli bir model görevi görür^10,11.

Bununla birlikte, çoğu abdominal heterotopik kalp ksenotransplantasyon modeli, alıcı olarak babunları kullanmıştır, ancak babunların deney hayvanları olarak tedarik edilmesi birçok ülkede zor olmaya devam etmektedir. Buna karşılık, makaklar en yaygın kullanılan insan olmayan primattır ve insanlarla yüksek filogenetik homolojiye sahiptir¹², bu da onları ksenotransplantasyon araştırmaları için pratik bir alternatif haline getirir. Bununla birlikte, babunlarla karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha küçük vücut boyutları, farklı anatomik boyutlarına uyum sağlamak için özel cerrahi protokol uyarlamaları gerektirir.

Bu çalışma, GTKO domuzundan makak heterotopik kalp ksenotransplantasyonuna adım adım bir protokol sunmaktadır. α-Gal nakavt domuzların (GTKO) kullanımı öncelikle, aksi takdirde kalp ksenotransplantasyonundan birkaç dakika sonra greft yetmezliğine yol açacak olan hiperakut rejeksiyonu önlemeyi amaçlamaktadır. Aşağıdaki gibi yapılandırılmıştır: (1) donör domuzlar ve alıcı makaklar arasındaki eşleştirme ilkeleri; (2) heterotopik kalp ksenotransplantasyonu için cerrahi prosedürün optimizasyonu; ve (3) perioperatif yönetim. Bu çalışma, araştırma ekipleri arasında karşılaştırılabilirliği kolaylaştırmak ve kalp ksenotransplantasyon çalışmalarının tekrarlanabilirliğini ve translasyonel uygunluğunu artırmak için bu nakil tekniklerini yaymayı amaçlamaktadır.

Bu çalışma Fuwai Hastanesi Hayvan Etik Kurulu tarafından onaylanmıştır (FWAEC-JL-010-1/0-2020). Karın sıkışmasını en aza indirmek için >9 kg ağırlığında ve 10-15 yaşlarında erkek makaklar ve 5-6 kg ağırlığındaki (~60 günlük) erkek Bama minyatür domuzları kullanıldı. Donör kalbinin karın sıkıştırmasını önlemek ve nakil sonrası büyümeyi karşılamak için daha büyük gövdeli makaklara öncelik verildi. Kullanılan reaktifler ve ekipman Malzeme Tablosunda listelenmiştir.

1. Donör ve alıcı seçim kriterleri

1. Alıcı makak seçimi
   1. Önceden var olan antikor taraması: Önceden oluşturulmuş ksenojenik antikorların seviyesini değerlendirmek için akış sitometrisini kullanın ve düşük immünolojik riske sahip alıcıların seçilmesini sağlayın.
      NOT: Bu tahlilde, GTKO domuz aortlarından GTKO domuz endotel hücreleri, daha önce tarif edildiği gibi enzimatik sindirim yoluyla izole edilir¹³.
      1. GTKO domuz endotel hücrelerini alıcı plazma ile inkübe edin.
      2. Makak IgM ve IgG'ye karşı floresan etiketli ikincil antikorlar kullanarak makak IgM ve IgG'nin domuz hücrelerine bağlanmasını ölçün. Düşük önceden oluşturulmuş antikor seviyelerine sahip alıcıları seçin.
   2. Temel sağlık değerlendirmesi: Yeterli temel organ fonksiyonunu doğrulamak için serum biyokimyası, tam kan sayımı ve pıhtılaşma fonksiyon testleri yapın.
2. Donör domuz seçim kriterleri
   1. Ekokardiyografik tarama: Normal sol ve sağ ventrikül fonksiyonuna sahip, kalp kapakçıklarında yapısal veya fonksiyonel anormallik olmayan, ejeksiyon fraksiyonu %65'in üzerinde olan ve pulmoner hipertansiyon kanıtı olmayan donör domuzları seçin.
   2. Cinsiyet eşleştirme: Alıcıyla aynı cinsiyete sahip donör domuzları seçin.
   3. Kan grubu: Kan grubu O olan donör domuzları seçin.

2. Ameliyat öncesi hazırlık

1. Anestezi ve sedasyon
   1. Anestezi: Makakları ketamin (10 mg/kg) ve midazolam (1 mg/kg) ile indükleyin (kurumsal onaylı protokole göre). İndüksiyonu takiben izofluran (%2-%3) artı deksmedetomidin (1 μg/kg/saat) ve propofol (1-2 mg/kg/saat) ile anesteziye devam edin.
   2. Entübasyon: Donör domuzu 5.0 mm'lik bir endotrakeal tüp ile entübe edin. Alıcı makağı 5,5 mm'lik bir endotrakeal tüp ile entübe edin.
   3. Üreteral kateter yerleştirilmesi: Makağa 6-F çift lümenli bir idrar sondası yerleştirin; donör domuzda atlayın.
2. Cerrahi alanları hazırlayın ve dezenfekte edin
   1. Cilt hazırlığı: Göğüs, boyun, karın, sırt ve uzuvlardaki tüyleri kesin.
   2. Dezenfeksiyon: Toynaklar (domuzlar) veya eller ve ayaklar (maymunlar) dahil olmak üzere traş edilmiş alanları povidon-iyot ile fırçalayın.
3. Alıcıya santral venöz kateter yerleştirilmesi
   1. Konumlandırma: Sağ servikal bölgenin açığa çıkmasını optimize etmek için alıcı makağı omuz elevasyonlu kısmi sol lateral dekübit içine yerleştirin. Santral venöz erişim için tercih edilen bölge olarak doğru internal juguler veni seçin.
   2. Sterilizasyon ve örtme: Standart aseptik prosedürleri izleyerek cerrahi alanı povidon-iyot ile dezenfekte edin ve örtün.
   3. İnsizyon ve damar açığa çıkarma: Sternokleidomastoid kasın iç sınırına paralel olarak yaklaşık 1 cm medialinde 5 cm'lik bir kesi yapın. Fasyanın künt bir diseksiyonunu yapın ve kası yanal olarak geri çekin.
      1. Yüzeysel ve karotis kılıfının dışında bulunan dış şah damarını tanımlayın. İç juguler venin küçük iletişim dallarını dikkatlice bağlayın. İç şah damarını, vagus sinirini ve şah damarını ortaya çıkarmak için şah damarı kılıfını açın.
   4. Kateter yerleştirilmesi: Retrograd tünelleme tekniği kullanarak 8-F üç lümenli santral venöz kateter yerleştirin. Kateterin proksimal ucunu steril koşullar altında tünel açma iğnesine bağlayın ve tünelden boyun kesisine çekin.
      1. Kürek kemiğinin orta noktasındaki distal ucu dışsallaştırın. Ucunun superior vena kava ve sağ atriyumun birleştiği yere ulaşmasını sağlamak için kateteri uygun bir uzunlukta kesin.
   5. Kesi kapatma: Yarayı katmanlar halinde kapatın. Fasya ve deri altı dokuyu 3-0 emilebilir dikiş kullanarak kapatın ve cildi 1-0 ipek dikiş ile kapatın. Enfeksiyon riskini en aza indirmek için kateterin fasyal tabakanın altına tam olarak kapatılmasını ve güvenli bir şekilde sabitlenmesini sağlayın.
      1. Makaklarda postoperatif ilaç uygulaması ve hacim resüsitasyonu için kritik bir sıvı erişim yolu olarak santral venöz kateteri kullanın. Kateter bütünlüğünü korumak ve enfeksiyonu önlemek için günlük povidon-iyot antisepsi ve steril gazlı bez pansuman yapın.
      2. Güvenilir vasküler erişim sağlamak için santral venöz kateteri son kurban prosedürüne kadar yerinde tutun.

3. Alıcı ameliyatı (implantasyon öncesi aşama)

1. Orta hat karın kesisi
   1. Kesi seçimi: Yaklaşık 12-15 cm uzunluğunda orta hat karın kesisi yapın (Şekil 1A).
   2. Kesi detayları: Deri, yüzeysel fasya, linea alba, transversalis fasya ve subperitoneal fasya (ekstraperitoneal yağ dahil) boyunca sırayla kesin, ardından karın boşluğuna erişmek için parietal peritonu kesin. Eşzamanlı kesme ve hemostaz elde etmek için cilt insizyonu için #23 cerrahi bıçak ve daha derin doku diseksiyonu için elektrokoter kullanın.
2. Karın eksplorasyonu ve bağırsak yönetimi
   1. Adezyoliz: Bağırsaklar ve karın duvarı arasındaki yapışıklıkların varlığına odaklanarak yapışıklıkları değerlendirmek için karın boşluğunu keşfedin. Varsa, doku hasarını en aza indirmek ve postoperatif mekanik bağırsak tıkanıklığı riskini azaltmak için elektrokoter kullanarak yapışıklıkları dikkatlice inceleyin.
   2. Bağırsak koruması: İnce bağırsağı nazikçe dışarıya çıkarın ve abdominal aort ve inferior vena kavayı ortaya çıkarmak için koruma için steril nemli gazlı bez üzerine yerleştirin.
3. Abdominal aort ve inferior vena kavanın açığa çıkması
   1. Abdominal aort ve inferior vena kavayı mobilize edin: Abdominal aort ve inferior vena kavadan çevre dokuları dikkatlice inceleyerek vasküler yaralanma ve kanama riskini en aza indirin. Renal arterlerin orijinleri ile iliak arterlerin çatallanması arasındaki abdominal aort ve inferior vena kavayı mümkün olduğunca tam olarak ortaya çıkarın.
   2. Vasküler dalları ele alın: Diseksiyon sırasında inferior mezenterik arteri ve ona eşlik eden damarı koruyun. Tüm bel dallarını titizlikle koruyun.

4. Donör kalp alımı

1. Medyan sternotomi ve damar mobilizasyonu
   1. Medyan sternotomi: Torasik boşluğa erişmek için orta hat sternotomisi yapın (Şekil 1B). Bir Lebsche sternum bıçağı kullanarak donör sternumunu dikkatlice bölün.
   2. Damar mobilizasyonu: Göğüs boşluğunu açığa çıkardıktan sonra perikardın kesisini yapın ve çıkan aort ile ana pulmoner arteri ayırmak için titizlikle diseksiyon yapın.
2. Damar klempleme ve kardiyak soğutma
   1. Damar klempleme: Aort köküne 4-0 kese ipi sütürü yerleştirin, ardından kardiyopleji için tek kullanımlık antegrad kardiyopleji kanülü yerleştirin (Şekil 1C). Üst ve alt vena kavayı sırayla klempleyin, ardından çıkan aortu çapraz klempleyin.
      1. Aort çapraz klemplenmesinden hemen sonra, dekompresyon için pulmoner venleri ve inferior vena kavayı kesiye yapın ve kesilerin yeterli drenaj için yeterince büyük olduğundan emin olun.
   2. Kardiyak soğutma: Kalan kanı boşaltmak için perikardiyal boşluğu emdirin, ardından hipotermik bir ortam (0-4 °C) elde etmek için kalbi hemen steril buz gibi tuzlu suya batırın.
3. Kardiyopleji ve perfüzyon monitörizasyonu
   1. Kardiyopleji: Bir basınç torbası kullanarak perfüzyon basıncını 150 mmHg'de tutun. Donör kalbini 30 mL/kg vücut ağırlığı HTK solüsyonu ile perfüze edin (örneğin, 5 kg'lık bir domuz için 150 mL).
   2. Perfüzyon izleme: Uygun kardiyopleji iletim basıncını doğrulamak ve ventriküler distansiyonu önlemek için aort kökünü ve sol ventrikülü aynı anda palpe edin. Kardiyopleji infüzyonunu tamamladıktan sonra, palpasyon ve görsel muayene ile kalp durmasını doğrulayın. Herhangi bir miyokard fibrilasyonu olmadığından emin olun, ardından donör kalp eksizyonu ile devam edin.
4. Kardiyak rezeksiyon ve koruma
   1. Kardiyak rezeksiyon: Kardiyoplejiden sonra perikardiyal boşluğa ek buz uygulayın (Şekil 1D). Kalbi nazikçe yükseltin ve cerrahi makas kullanarak inferior vena kava ve pulmoner venleri sırayla kesin. Sağ superior pulmoner veni bölerken superior vena kava ve sağ atriyumun yaralanmasını önlemek için özel dikkat gösterin.
      1. Sol atriyumun arka duvarını ayırırken trakeayı koruyun. Diseksiyon sol atriyal çatı ve pulmoner arter seviyesine ulaştığında, kalbi geçici olarak perikardiyal boşluğa geri yerleştirin.
      2. Pulmoner gövdeyi ortaya çıkarmak için proksimal aort arkını ve superior vena kavayı ayırın ve kesin. Doku düzlemleri boyunca sol atriyal çatıya doğru diseksiyona devam edin, kalbin ve büyük damarlarının çıkarılmasına izin verin.
         NOT: Kanamayı önlemek için kardiyak rezeksiyondan sonra azygos ven kütüğünü güvenli bir şekilde bağlayın.
   2. Kardiyak koruma: Eksplante edilen kalbi korumak için derhal buz gibi tuzlu suya batırın. Ek olarak, UW çözeltisi üstün miyokardiyal koruma sağladığından, donör kalbini 30 mL / kg hacimde başka bir Wisconsin Üniversitesi (UW) çözeltisi ile perfüze edin (Şekil 1E).
5. İnsan donör kalp alımından temel farklar
   1. İnfüzyon basıncı ayarları: Basınç torbasındaki perfüzyon basıncını, miyokard perfüzyonu için optimal kabul edilen 150 mmHg'ye ayarlayın.
   2. Aort çapraz klemp pozisyonu: Domuzların aort arkından sadece iki ana dalı, sol ve sağ brakiyosefalik gövdeleri olduğundan, çapraz klempi bu dallar arasına yerleştirin. Donör aortunun daha uzun bir uzunluğunu korumak için çapraz klemplemeden önce sağ brakiyosefalik gövdeyi ipek dikişlerle bağlayın.
   3. Ventriküler dekompresyon stratejisi: Ventriküler aşırı distansiyonu en aza indirmek ve iskemik zamanı sınırlamak için rutin olarak sadece sol ventrikül basıncını açın. Sağ ventrikül şişmeye başlarsa, azygos veninin üzerindeki superior vena kavayı açın. Sol ventrikül şişerse, sağ pulmoner veni kesin ve kesiği sağ pulmoner hilusa doğru uzatın.

5. Donör kalp implantasyonu

1. Donör kalbi hazırlığı
   1. Donör kalp hazırlığı: Sol atriyumun donör superior vena kava, inferior vena kava ve pulmoner ven deliklerini 4-0 prolen sütür kullanarak güvenli bir şekilde kapatın.
   2. Sinoatriyal düğümün korunması: Donör superior vena kavayı ve sağ atriyal apendiksin yakınında bulunan sinoatriyal düğümü koruyun.
2. Pulmoner arterin inferior vena kavaya uçtan uca anastomozu
   1. Heparinizasyon: Trombüs oluşumunu önlemek için donör kalp anastomozundan önce alıcı makağa intravenöz olarak 5.000 ünite heparin sodyum uygulayın.
   2. Pulmoner arter anastomozu: Alıcı inferior vena kava üzerine bir DeBakey atravmatik tanjansiyel klemp yerleştirin. Postoperatif darlığı en aza indirmek için donör pulmoner arterden biraz daha büyük uzunlamasına bir kesi oluşturun.
      1. Çift kollu 5-0 prolen sütür kullanarak, alıcı damarın içinden (lümen tarafı) dışarıya doğru bir iğne sokarak anastomoza saat 12 pozisyonunda başlayın. Diğer iğneyi donör pulmoner arter tarafından, lümenden dışarıya doğru saat 12 pozisyonunda geçirerek sokun.
      2. İlk düğümü dış kap duvarına bağlayın. Dışarıdan donör pulmoner arterin lümenine geçerek iğne yönünü tersine çevirin. Dikiş gerginliğini korumak için bir sinir kancası kullanarak saat yönünde saat yönünde saat yönünde sürekli dikiş atmaya devam edin.
      3. Karşı tarafı ortaya çıkarmak için kalbi döndürün, diğer iğneye geçin ve karşı duvarı saat 12'den 6'ya kadar alıcı damarda dıştan içe ve donör damarda içten dışa iğne giriş paterni ile dikin ve uçtan uca anastomozu tamamlayın.
   3. Hava tahliyesi: Son düğümü sabitlemeden önce, tam hava tahliyesini sağlamak için anastomoz bölgesine salin enjekte edin. Atravmatik bir vasküler klemp kullanarak donör pulmoner arteri tıkamayın, ardından inferior vena kava vasküler klempi sırayla serbest bırakın (Şekil 1F).
3. Donör aortunun alıcı abdominal aorta uçtan uca anastomozu
   1. Aort anastomozu: Bir DeBakey atravmatik teğetsel klemp kullanarak alıcı abdominal aortu kısmen klempleyin. Postoperatif darlığı önlemek için donör aortun çapından biraz daha büyük uzunlamasına bir kesi yapın.
      1. Çift kollu 5-0 prolen sütür kullanarak, iğneyi alıcı aortun içinden (lümen tarafı) saat 12 pozisyonunda dışarı doğru sokarak anastomoza başlayın. Donör aorttan gelen diğer iğneyi saat 12 pozisyonunda yine içeriden dışarıya doğru sokun ve ilk dikişi dış damar duvarına bağlayın.
      2. Donör damar üzerinde dışarıdan içeriye doğru geçerek iğne yönünü tersine çevirin ve bir sinir kancası ile dikiş gerginliğini koruyarak saat yönünde sürekli olarak saat 6 pozisyonuna dikin. Karşı tarafı ortaya çıkarmak için kalbi çevirin, iğne yönünü buna göre ters çevirin (donör damarda dıştan içe, alıcı damarda içten dışa) ve saat 12'den 6'ya kadar sürekli olarak dikiş atarak uçtan uca anastomozu tamamlayın.
   2. Hava tahliyesi: Son düğümü atmadan önce, havayı çıkarmak için anastomoza salin enjekte edin. Dolaşımı eski haline getirmek için abdominal aort vasküler klempini sırayla serbest bırakın (Şekil 1G).
4. Reperfüzyon ve defibrilasyon
   1. Ventriküler fibrilasyonun önlenmesi: Ventriküler fibrilasyonu önlemek için reperfüzyondan önce intravenöz olarak 3 mg/kg lidokain uygulayın. Donör kalbini 2 dakika içinde spontan kasılmalar açısından gözlemleyin.
   2. Defibrilasyon: Ventriküler fibrilasyon meydana gelirse, kürekleri her iki ventriküler yüzeyle (sol ve sağ) doğrudan temas ettirerek doğrudan defibrilasyon uygulayın ve iki fazlı 5 Joule şok verin. Donör kalbin toplam iskemik süresi yaklaşık 57.5 dakika ± 6.1 dakika idi (Tablo 1).
5. Drenaj yerleşimi
   1. Negatif basınçlı drenaj: Ameliyat sonrası sıvı birikimini önlemek ve aktif kanamayı izlemek için karın boşluğuna negatif basınçlı bir drenaj tüpü yerleştirin.
   2. Dren çıkarma endikasyonu: Postoperatif drenaj hacmini izleyin ve 24 saatlik çıkış 25 mL'nin altına düştüğünde abdominal dreni çıkarın.
6. Karın kapanması
   1. Karın kapatma ve ultrason muayenesi: Karın duvarını 3-0 emilebilir dikişle fasya ve cilt altı dokuya yaklaştıracak şekilde katmanlar halinde kapatın ve cildi 1-0 ipek dikişle kapatın. Kardiyak aktiviteyi değerlendirmek için postoperatif abdominal ultrason yapın (Şekil 1H).

6. Ameliyat sonrası yönetim ve greft izleme

1. İzleme ve genel bakım yönergeleri
   1. Davranışsal ve semptom izleme: Video gözetimi kullanarak ameliyat sonrası ilk iki hafta boyunca alıcının durumunu sürekli olarak izleyin. Davranış, iştah, karın şişkinliği, nefes darlığı, ödem ve normal dışkılama ve idrara çıkma ile ilgili günlük değerlendirmeler yapın.
      1. Vücut ağırlığını, genel fiziksel durumu, cerrahi kesi iyileşmesini, potansiyel santral venöz kateter enfeksiyonunu, mukozal görünümü ve karın içi sıvı birikimini izleyin.
   2. Ultrason değerlendirmesi: Heterotopik olarak nakledilen kalbin işlevini değerlendirmek ve anormallikler varsa çevredeki efüzyonu tespit etmek için ultrason kullanın. Şekil 2 , Deney M3'te gözlenen greft yetmezliğinin yanı sıra postoperatif gün (POD) 1'de diyastol ve sistol sırasında ksenogreftin ekokardiyografik görüntülerini sunmaktadır. Kırmızı çizgi, başarısız ksenograftta sol ventrikül duvarının belirgin hipertrofisini gösterir.

Şekil 1'de gösterilen prosedür adımlarına dayanarak, tekrarlanabilir bir domuzdan makak heterotopik kalp ksenotransplantasyon modeli başarıyla oluşturulmuştur. Cerrahi süreç, karın boşluğuna erişmek için alıcı makakta bir orta hat laparotomi ve kalp alımı için donör domuzda bir medyan sternotomiyi içeriyordu. Perikardiyotomiden sonra donör kalbi HTK solüsyonu kullanılarak tutuklandı ve topikal hipotermi altında UW solüsyonu ile daha fazla korundu. Vasküler anastomozlar, donör pulmoner arter ile alıcı inferior vena kava arasında ve donör aort ile alıcı abdominal aort arasında uç uca yapıldı. Postoperatif ekokardiyografik değerlendirme, donör kalbinin korunmuş sistolik ve diyastolik fonksiyonla kasılma aktivitesine devam ettiğini doğruladı, bu da greftin başarılı reperfüzyonunu ve canlılığını gösterdi. Bu sonuçlar, modelin teknik fizibilitesini ve insan olmayan primatlarda ksenogreftlerin uzun vadeli fonksiyonel izlenmesi potansiyelini göstermektedir.

Şekil 1: Domuzdan makağa heterotopik kalp nakli: cerrahi adımlar ve ameliyat sonrası ultrason. (A) Makağın karın boşluğuna katmanlı diseksiyon ile orta hat laparotomi ile girildi. (B) Domuz donörünün göğüs boşluğuna erişmek için medyan sternotomi ve ardından perikardiyotomi yapıldı. (C) Donör kalbinin aort köküne bir perfüzyon kanülü yerleştirildi. (D) HTK solüsyonu perfüzyonunun neden olduğu kalp durmasını takiben, donör kalbi tuzlu buz sulu kar ile topikal olarak soğutuldu. (E) Wisconsin Üniversitesi (UW) koruma solüsyonu ile müteakip perfüzyon gerçekleştirildi. (F) Domuz pulmoner arteri ile alıcının inferior vena kava arasında uçtan uca anastomoz oluşturuldu. (G) Domuz aortu ile alıcının abdominal aortu arasında uçtan uca anastomoz yapıldı. (H) Donör kalbin sistolik ve diyastolik fonksiyonunu değerlendirmek için postoperatif ekokardiyografi yapıldı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 2: M3'ün zaman serisi ekokardiyografik görüntüleri. (A) Postoperatif günde diyastol ve sistol sırasında ksenogreftin ekokardiyografik görüntüleri (POD) 1. (B) POD 3'te diyastol ve sistol sırasında ksenogreftin ekokardiyografik görüntüleri. (C) POD 10'da diyastol ve sistol sırasında ksenogreftin ekokardiyografik görüntüleri. (D) Diyastol sırasında ksenogreftin ekokardiyografik görüntüleri ve greft yetmezliğinde sistol. Kırmızı çizgi, diyastol sırasında sol ventrikül duvar kalınlığında önemli bir artış olduğunu gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Tablo 1: Donör kalbinin toplam iskemik zamanı.

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.