Streptozosin Tedavisi: Tip 1 Diabetes Mellitus'un Zebra Balığı Modeli

- Tip 1 diabetes mellitus, bağışıklık sisteminin pankreasta insülin yaparak beta hücrelerini yok ettiği bir insan hastalığıdır. Streptozosin, zebra balıklarında tip 1 diabetes mellitusa neden olabilir. İlk olarak, bir balığı balık suyunda 2-fenoksietanol çözeltisi içinde uyuşturun. Balığı alın ve ventral tarafı yukarı bakacak şekilde bir Petri kabına yerleştirin. Streptozosin dozunu, balığın ağırlığının gramı başına 0.35 miligrama dayanarak hesaplayın ve tuzlu su çözeltisinde seyreltin.

Streptozosini, zebra balığının ventral tarafındaki pelvik kuşağın altına intraperitoneal enjeksiyon ile uygulayın. Streptozosin, yapısal olarak, pankreas beta hücreleri üzerindeki GLUT2 reseptörünü bağlayan ve insülinin salgılanmasına yol açan bir ligand olan N-asetilglukozamine benzer. Böylece streptozosin, pankreas beta hücrelerinde bulunan ve onu hücrelerin içine taşıyan GLUT2 reseptörlerine bağlanır.

Beta hücrelerine girdikten sonra streptozosin, otoantijenlerin salınmasına yol açan bir bağışıklık tepkisini tetikler. Otoantijenler, bağışıklık sisteminin beta hücrelerini yabancı olarak tanımasına ve onları yok etmesine neden olarak insülin seviyelerinin düşmesine neden olur. Bağışıklık tepkisini korumak için üçüncü ve beşinci günlerde tekrarlanan streptozosin dozlarını uygulayın, ardından her yedi günde bir haftalık dozlar uygulayın.

Aşağıdaki örnekte, tip 1 diabetes mellitusun bir zebra balığı modelini oluşturacağız. Diabetes mellituslu zebra balığı oluşturmak için, normal balık suyu içeren bir geri kazanım tankı ve 1 ila 1.000 oranında 2-fenoksietanol seyreltmeli bir anestezik balık suyu tankı hazırlayın. Bir davlumbaz altında, 2 mililitre% 0.09 sodyum klorüre 6 miligram STZ ekleyerek% 0.3'lük bir streptozosin veya STZ çözeltisi hazırlayın ve çözeltiyi hemen buzun üzerine yerleştirin.

Ayrı bir tüpte, balıkları kontrol etmek için yeterli tuzlu su bulundurun. 27 ve 1/2 gauge iğne ile donatılmış yarım CC'lik bir şırıngayı STZ veya kontrol solüsyonları ile doldurun ve hava kabarcıklarının sıkışmadığından emin olun. Tek bir balığı anestezik suya koyarak ve yüzme hareketi durana kadar yaklaşık bir ila iki dakika bekleyerek anestezi uygulayın.

Anestezi uygulandıktan sonra, fazla suyu emmesi için balığı kısa bir süre bir kağıt havlu üzerine koyun. Daha sonra balığı bir tartı teknesine koyun ve tartın. Ardından, balığı sağlam bir yüzeye yerleştirin. Daha sonra iğneyi eğimi geçerek ventral peritonumun arka yüzüne yerleştirin ve balığın periton boşluğuna gram başına 0.35 miligram STZ veya eşdeğer bir kontrol çözeltisi enjekte edin.

Enjeksiyonu takiben, balığı geri kazanım suyu tankına yerleştirin ve normal yüzme aktivitesi için izleyin. Deney için yeterli miktarda balık enjekte ettikten sonra, onları normal yaşam tanklarına aktarın ve 22 ila 24 santigrat derece arasında bir sıcaklıkta tutun. Azaltılmış sıcaklık, hipergliseminin verimli indüksiyonu için kritik öneme sahiptir. Uzun süreli çok yüksek hiperglisemi durumunu indüklemek için, indüksiyon aşamasında sık sık enjeksiyonlar programını ve ardından burada gösterildiği gibi haftalık bakım enjeksiyonlarını takip edin.