Periton veya karın boşluğunu kaplayan zar, bir fibrovasküler bağ dokusu tabakası üzerinde desteklenen peritoneal mezotelyal hücreleri oluşturur. Metastaz yapan yumurtalık kanseri hücreleri bu peritoneal astara yapışır ve kanserli büyümelere çoğalır.
Yumurtalık kanseri metastazını modellemek için, insan fibroblastlarını konik bir tüpte alarak başlayın ve bunları hücre dışı bir matris proteini olan kollajen ile karıştırın. Süspansiyonu bir kültür kabına yerleştirin. Fibroblastları gömmek ve peritonun bağ dokusunu taklit etmek için kollajen matris katılaşmasını kolaylaştırmak için inkübe edin.
Daha sonra, fibroblast-kollajen tabakası üzerine bir mezotelyal hücre süspansiyonu ekleyin. Mezotelyal hücrelerin yapışmasına ve fibroblast-kollajen tabakasının yüzeyinde bir tek tabaka oluşturmasına izin vermek için plakayı inkübe edin. Bu 3D organotipik kültür şimdi bir in vivo peritoneal astarın bileşimini ve mimarisini taklit ediyor.
Son olarak, bu organotipik kültürü yumurtalık kanseri hücreleri ile tohumlayın ve istenen süre boyunca inkübe edin. Yumurtalık kanseri hücreleri, in vivo metastatik koşulları taklit ederek mezotelyal tabakayı değiştiren, kanser hücresi yapışmasını ve istilasını artıran belirli sinyal moleküllerini serbest bırakır.