Fare beynindeki insan nöral progenitör hücrelerinin nakli

Anestezi uygulanmış bir fareyi stereotaksik bir çerçeveye sabitleyin.

Kornea kurumasını önlemek için göz merhemi sürün.

Saç derisini tıraş edin ve cildi dezenfekte edin.

Kafatasını stabilize etmek için kulak çubuklarını takın.

Ardından, kafatasını ortaya çıkarmak için orta hat kesisi yapın.

Hedef koordinatta kafatasından bir delik açın.

Görselleştirme için genetik olarak değiştirilmiş insan nöral progenitör hücreleri veya lusiferaz ve bir floresan proteini eksprese eden NPC'ler içeren bir şırınga yükleyin.

Şırıngayı hedef bölgeyle hizalayın ve iğneyi istenen derinliğe indirin.

Hücre sızıntısını önlemek için iğnenin etrafına doku yapıştırıcısı sürün.

Düzgün dağılımı sağlamak için hücreleri yavaşça enjekte edin.

Hücre süspansiyonunun geri akışını önlemek için iğneyi kısa bir süre yerinde tutun.

Son olarak iğneyi yavaşça çekin ve kesiyi kapatın.

Nakledilen NPC'lere sahip fare modeli artık görselleştirme için hazır.

Hayvanı indüksiyon odasından stereotaksik çerçeveye taşıyın ve bir yüz maskesi kullanarak anesteziyi koruyun.

Gözlerin kurumasını önlemek için oftalmik kayganlaştırıcı uygulayın. Fare kafa derisini elektrikli bir tıraş bıçağıyla tıraş edin ve pamuklu çubuklar kullanarak cildi yüzde 5 betadin solüsyonu ile dezenfekte edin. Fare kafasını sabitleyin ve kulak çubuklarını harici meatusa yerleştirin.

Cerrahi bir diş matkabı ile kafatasından iki ila üç milimetre çapında bir delik açın. Hazırlanan hücreleri tüpte tekrar süspanse edin ve iki mikrolitre hücre süspansiyonunu bir şırıngaya çekin. Şırıngayı hedef bölgenin üzerine yerleştirin ve iğneyi yavaşça dura yüzeyine hareket ettirin ve derinlik koordinatlarını hesaplayın.